肾小管上皮及肾脏局部病理改变对肾结石形成的临床价值分析

目的 分析肾小管上皮及肾脏局部病理改变对肾结石形成的临床价值.方法 (1)取肾结石患者肾乳头活检标本(n=37),镜下观察其病理特点,并对比检测肾结石患者肾组织(n=37)及健康肾组织(n=21)骨桥蛋白、骨形成蛋白-2(BMP-2)、Ⅱ型胶原表达;(2)体外培养肾小管上皮细胞,以10mM草酸或1 0mM草酸+200 mg/L-水草酸钙(COM)结晶作用12h,行Western Blotting检测其EN 01及Cofilin-Ⅰ蛋白的表达.结果 (1)肾乳头标本中钙斑出现率83.8％(31/37)、局部钙盐沉积出现率94.6％(35/37);肾结石患者骨桥蛋白阳性表达,肾结石患者与健康人群肾组织BMP-2及Ⅱ型胶原均呈阴性.(2)10mM草酸作用12h后,肾小管上皮细胞EN 01表达明显上升、Cofilin-1表达明显下降(P＜0.05),10mM草酸联合COM结晶作用后,上述变化更为明显(P＜0 05).结论 肾脏局部钙盐沉积可能是肾结石形成的主要途径,且该途径与动脉钙化机制不同;草酸及COM结晶可能对肾小管上皮细胞产生毒性作用,影响其EN 01及Cofilin-1的表达,可能促进肾结石的形成.     

肾小管上皮及肾脏局部病理改变对肾结石形成的临床价值分析

目的:探讨肾小管上皮及肾脏局部病理改变在肾结石形成中的作用机制。方法:选取89例肾结石患者作为实验组,90例肾癌患者的肾标本作为对照组,检测两组肾小管上皮的骨桥蛋白、骨形成蛋白-2(BMP-2)和II型胶原的表达情况。结果 :实验组患者结石多以混合的形式存在;两组肾小管上皮及肾脏局部病理改变中均可见骨桥蛋白表达,实验组高于对照组,差异有统计学意义,骨桥蛋白主要在肾集合管和肾小管上皮细胞胞浆内表达;BMP-2、II型胶原在肾小管上皮及肾脏病理局部组织中均未见表达。结论:骨桥蛋白在肾结石患者的肾小管上皮细胞中表达,BMP-2、II型胶原未见表达,因此肾小管上皮及肾脏局部病理改变时骨桥蛋白可能促进肾结石的形成。     

基质Gla蛋白与骨形成蛋白2在草酸钙肾结石患者Randall钙斑中的表达

目的：对比基质Gla蛋白(matrix Gla protein,MGP)及骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)在 草酸钙结石肾乳头Randall钙化斑组织中的表达,探讨其在草酸钙肾结石形成过程中的相关机制。方法：收集中南大 学湘雅医院泌尿外科2015年4月至12月期间住院的30例草酸钙肾结石患者的肾乳头钙化斑组织标本作为实验组,10 例同期患肾肿瘤行根治性肾切除术患者的肾乳头组织标本作为对照组,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western印迹检测MGP和BMP-2在肾乳头组织中的表达,并采用免疫组织化学技术 观察MGP和BMP-2在肾乳头组织中的表达。结果：1)RT-PCR检测实验组和对照组MGP mRNA的表达量为0.760±0.804和 1.365±0.348,差异有统计学意义(P<0.05);实验组和对照组BMP-2 mRNA表达量分别为2.500±0.725和1.485±0.870,差异 有统计学意义(P<0.05)。2) Western印迹检测实验组和对照组的MGP蛋白表达量分别为0.130±0.424和0.202±0.704,差异 无统计学意义(P>0.05);实验组和对照组BMP-2蛋白表达量为0.885±0.220和0.682±0.272,差异有统计学意义(P<0.05)。 3)免疫组织化学结果显示实验组MGP的表达较对照组低,而实验组BMP-2表达较对照组高(均P<0.05)。结论：草酸钙 肾结石患者的肾乳头组织内BMP-2表达增多,MGP表达减少,草酸钙肾结石的形成可能是一种与MGP和BMP-2相关的 类成骨反应或异位钙化。     

维生素D，维生素K，雌二醇和睾酮对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的 :探讨骨桥蛋白的表达和调控与尿石症的关系。方法 :分别用维生素D、维生素K、雌二醇和睾酮处理正常大鼠和结石模型大鼠 ,连续用药 7d ,免疫组化和Northernblot技术检测大鼠肾骨桥蛋白及其mRNA的表达 ,偏光显微镜观察大鼠肾晶体沉积情况 ,并测定尿晶体成分的含量。结果 :维生素K、雌二醇和睾酮均可上调骨桥蛋白及其mRNA的表达 ,减少大鼠肾草酸钙晶体的沉积。维生素D增加尿钙的排泄量 ,促进晶体沉积。结论 :维生素K、雌二醇和睾酮可上调肾骨桥蛋白的表达 ,抑制结石的形成 ,维生素D过量则可促进结石形成     

泽泻活性成分对肾结石模型大鼠bikunin表达的影响

目的研究中药泽泻活性成分对结石模型大鼠肾结石形成和bikunin表达的影响,以探讨泽泻防治草酸钙尿石症的作用机理.方法分离提取泽泻的化学活性成分,制作大鼠肾草酸钙结石模型.将Wistar大鼠随机分成对照组、结石模型组、泽泻组,采用半定量逆转录聚合酶链反应检测大鼠肾组织bikunin mRNA的表达水平、镜下观察肾组织草酸钙晶体分布,同时检测大鼠血生化、肾钙含量、24h尿钙和尿草酸的分泌量.结果①泽泻组大鼠肾组织草酸钙晶体分布、血生化等指标均明显低于结石组.②泽泻组和成石组大鼠肾组织bikunin的相对表达水平分别为(0.528±0.170,0.713±0.250)、肾钙含量分别为[(4.70±0.08)mg/g,(9.49±0.45)mg/g]、24h尿钙分泌量分别为[(37.23±1.84)μmol,(61.49±2.06)μmol],各组间差异均有显著性意义(P＜0.05).结论泽泻活性成分能下调bikunin在结石大鼠肾组织的表达,减少肾组织草酸钙晶体的形成,从而抑制大鼠肾结石形成.     

枸橼酸钾对大鼠肾草酸钙结石骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨枸橼酸钾对大鼠肾草酸钙结石骨桥蛋白(osteopontn,OPN)表达的影响.方法 32只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、枸橼酸钾组、结石组(乙二醇和氯化氨)、结石+枸橼酸钾组,每组8只.采用乙二醇和氯化铵诱导大鼠肾草酸钙结石模型进行试验研究.连续给药4周后处死大鼠取肾组织,采用HE染色和免疫组化法检测各组肾结石形成及OPN表达情况.结果 结石+枸橼酸钾组大鼠肾结石形成比结石组明显减少(P<0.05);结石+枸橼酸钾组大鼠的OPN表达比结石组明显降低(P<0.05);枸橼酸钾组OPN表达与对照组相比无明显变化(P>0.05).结论 枸橼酸钾可能通过减少草酸钙结晶的形成而减轻对肾小管上皮细胞的损伤,降低肾OPN的表达.     

肾结石患者肾乳头组织中LINC01197及相关因子的表达研究

目的 探讨肾结石患者肾乳头组织中LINC01197、miR-516b-5p、SIRT3、FoxO1、Ac-FoxO1的表达特点及相关性。方法 选取2021年3月至2023年3月台州市第一人民医院收治的经皮肾镜碎石术治疗的30例草酸钙肾结石患者作为结石组,选取同期行根治性肾切除术（术后均由病理科诊断为透明细胞癌）的30例肾肿瘤患者作为对照组。结石组于术中直视下活检肾乳头及其周围间质组织,对照组收集远离肿瘤（2cm以上）的正常肾乳头组织样本,经病理学诊断后确诊为正常肾乳头组织。检测、比较两组肾乳头组织内LINC01197、miR-516b-5p、SIRT3、FoxO1、Ac-FoxO1表达水平,分析LINC01197、miR-516b-5p、SIRT3之间的相关性。结果 与对照组相比,结石组的肾乳头组织呈现LINC01197和SIRT3低表达、miR-516b-5p和Ac-FoxO1/FoxO1高表达,差异均有统计学意义（P<0.05）。Spearman相关性分析显示LINC01197与miR-516b-5p呈显著负相关（r=–0.751,P<0.05）,LINC01197与SIRT3呈显著正相关（r=0.813,P<0.05）,miR-516b-5p与SIRT3呈显著负相关（r=–0.528,P<0.05）。结论 LINC01197 在肾结石病理进展中具有潜在价值,其参与调节肾结石的发展可能跟miR-516b-5p、SIRT3、FoxO1 有关。     

维生素D，维生素K，雌二醇和睾酮对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的：探讨骨桥蛋白的表达和调控与尿石症的关系。方法：分别用维生素D、维生素K、雌二醇和睾酮处理正常大鼠和结石模型大鼠,连续用药7d,免疫组化和Northern blot技术检测大鼠肾骨桥蛋白及其mRNA的表达,偏光显微镜观察大鼠肾晶体沉积情况,并测定尿晶体成分的含量。结果：维生素K、雌二醇和睾酮均可上调骨桥蛋白及其mRNA的表达,减少大鼠肾草酸钙晶体的沉积。维生素D增加尿钙的排泄量,促进晶体沉积。结论：维生素K、雌二醇和睾酮可上调肾骨桥蛋白的表达,抑制结石的形成,维生素D过量则可促进结石形成。     

泽泻活性成分对结石模型大鼠肾结石形成和bikunin表达的影响

目的 研究中药泽泻活性成分对结石模型大鼠肾结石形成和bikunin表达的影响,以探讨泽泻防治草酸钙尿石症的作用机理。方法 分离提取泽泻的化学活性成分,制作大鼠肾草酸钙结石模型。将30只Wistar大鼠随机分成对照组、结石模型组、泽泻组,每组10只大鼠。采用半定量逆转录聚合酶链反应检测大鼠肾组织bikunin mRNA的表达水平、镜下观察肾组织草酸钙晶体分布,同时检测大鼠血生化、肾钙含量、24 h尿钙和尿草酸的分泌量。结果(1)泽泻组大鼠肾组织草酸钙晶体分布、血生化等指标均明显低于结石组。(2)泽泻组和成石组大鼠肾组织bikunin的相对表达水平分别为0.53±0.17,0.71±0.25、肾钙含量分别为4.70 mg/g±0.08 mg/g,9.49 mg/g±0.45 mg/g、24 h尿钙分泌量分别为37μmol±2μmol,62μmol±2μmol,各组间差异均有显著意义(P<0.05)。结论 泽泻活性成分能下调bikunin在结石大鼠肾组织的表达,减少肾组织草酸钙晶体的形成,从而抑制大鼠肾结石形成。     

乌梅提取液预防雄性大鼠草酸钙肾结石的实验研究

目的研究乌梅提取液对雄性大鼠草酸钙肾结石形成的影响。方法 40只SD健康雄性大鼠随机分为5组,每组8只：对照组（A）、诱石组（B）、干预组（C,D,E）。喂养2周检测大鼠24h尿草酸（OX）,钙（Ca2＋）浓度;血清尿素氮（BUN）,肌酐（Cr）,Ca2＋,P含量;肾组织超氧岐化酶（SOD）的活性,丙二醛（MDA）含量;观察大鼠肾组织病理学改变和草酸钙结晶沉积情况;免疫组化检测大鼠肾组织骨桥蛋白（OPN）的表达水平。结果干预组大鼠24h尿草酸（OX）、钙（Ca2＋）浓度,血清Cr较B组明显降低（P〈0.05）。肾组织SOD的活力,干预组较B组显著增高（P〈0.05）;MDA含量,干预组较B组明显降低（P〈0.05）。免疫组化OPN在各组肾组织中均有表达,A组中仅能检测到OPN的微弱表达,但在B组OPN表达则明显增强;干预组OPN表达强度低于B组。结论乌梅提取液对雄性大鼠草酸钙肾结石的形成有抑制作用。     

加味乌茹汤治疗尿石症的实验研究

目的 探讨加味乌茹汤（茜草根、乌贼骨、北芪、肉桂、金钱草、海金砂等组成）对乙二醇和活性维生索D，诱导SD大鼠草酸钙尿路结石形成的相关物质代谢的影响。方法在70只SD雄性大鼠中，对60只进行草酸钙尿路结石模型的建立。然后分组给予加味乌茹汤、排石颗粒、生理盐水。测定了大鼠24h尿量、尿PH、Cr、尿中钙、草酸、磷、镁排泄量及其在血中钙、草酸、磷、镁的浓度，并在解剖显微镜下观察肾、输尿管、膀胱结石形成情况。结果与模型组相比，加味乌茹汤组尿钙、尿草酸排泄量明显减少（P〈0.05），血钙浓度降低，镁、磷离子增加。结论加味乌茹汤具有抑制内源性高草酸尿和吸收性高钙尿症的作用，从而降低肾钙含量，减少肾小管内草酸钙结晶形成，达到预防及治疗尿石症的目的。     

夏枯草提取物对肾草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的研究夏枯草50％甲醇提取物对大鼠肾组织骨桥蛋白（osteopontin，OPN）表达的影响。方法采用乙二醇和氯化铵诱导建立大鼠肾草酸钙结石模型，将24只Wistar大鼠随机分成3组：对照组（A）、结石组（B）、夏枯草组（C）。C组则通过灌胃方式予一定剂量的夏枯草50％甲醇提取物。饲养4周后，检测各组大鼠肾组织病理学改变和草酸钙结晶沉积情况。采用原位杂交RT—PCR观察各组大鼠肾组织中OPN mRNA表达，免疫组织化学和Westem blot检测各组大鼠肾组织OPN蛋白的表达水平。结果A组肾小管正常，B组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在，管腔明显扩张；C组肾小管腔可见少许散在草酸钙结晶存在，管腔轻度扩张。原位杂交显示A组大鼠肾组织中仅肾脏髓质小部分亨利氏袢中检测到OPN mRNA的表达，与此相反在B组和C组大鼠肾组织中则明显检测到OPN mRNA的表达，只是C组中OPN mRNA的表达强度相对弱于成石对照组。RT-PCR检测结果与原位杂交一致。免疫组化显示A组中仅能检测到OPN蛋白的微弱表达，B组大鼠肾组织中OPN表达则明显增强，C组大鼠肾组织中OPN表达强度低于B组。Western blotting检测显示A组轻度表达OPN，而B组则显著表达，C组表达强度低于B组。结论夏枯草50％甲醇提取物能有效抑制大鼠肾组织OPN的表达，减少肾组织草酸钙结晶的沉积，从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

A Comparative Study on Several Models of Experimental Renal Calcium Oxalate Stones Formation in Rats

In order to compare the effects of several experimental renal calcium oxalate stones formation models in rats and to find a simple and convenient model with significant effect of calcium oxalate crystals deposition in the kidney, several rat models of renal calcium oxalate stones formation were induced by some crystal-inducing drugs (CID) including ethylene glycol (EG), ammonium chloride (AC), vitamin D3 [1α(OH)VitD3, alfacalcidol], calcium gluconate, ammonium oxalate, gen-tamicin sulfate, L-hydroxyproline. The rats were fed with drugs given singly or unitedly. At the end of experiment, 24-h urines were collected and the serum creatinine (Cr), blood urea nitrogen (BUN), the extents of calcium oxalate crystal deposition in the renal tissue, urinary calcium and oxalate ex-cretion were measured. The serum Cr levels in the stone-forming groups were significantly higher than those in the control group except for the group EG L-hydroxyproline, group calcium gluconate and group oxalate. Blood BUN concentration was significantly higher in rats fed with CID than that in control group except for group EG L-hydroxyproline and group ammonium oxalate plus calcium gluconate. In the group of rats administered with EG plus Vitamin D3, the deposition of calcium ox-alate crystal in the renal tissue and urinary calcium excretion were significantly greater than other model groups. The effect of the model induced by EG plus AC was similar to that in the group in-duced by EG plus Vitamin D3. EG plus Vitamin D3 or EG plus AC could stably and significantly in-duced the rat model of renal calcium oxalate stones formation.     

姜黄素抗草酸钙结晶致大鼠肾损伤的机制研究

目的 探讨姜黄素对大鼠肾草酸钙结晶肾损伤的影响及可能机制。 方法 40只C57BL/6大鼠随机分为5组:模型组(乙醛酸盐100 mg·kg^-1·d^-1)、不同剂量姜黄素(20,40,60 mg·kg^-1·d^-1)干预组和空白对照组。干预4周后检测各组大鼠的血、尿生化指标,肾脏结晶,大鼠肾脏丙二醛(MDA)含量和血红素加氧酶-1(HO-1)活性等指标; Western-blot检测各组大鼠肾组织中的核因子E2相关因子-2(NRF-2)和HO-1蛋白的表达含量。 结果 模型组大鼠的尿离子钙和尿草酸浓度分别为(3.37±0.13)和(2.50±0.05)mmol/L,相较于空白对照组大鼠[(2.27±0.17)和(2.04±0.05)mmol/L]显著升高(P<0.05); 模型组大鼠血清肌酐(SCr)水平、肾脏MDA含量、肾脏结晶及肾小管上皮细胞凋亡指数与空白对照组比较均显著升高(P<0.05)。随着姜黄素干预剂量的增加,大鼠的SCr和肾脏MDA含量呈下降趋势、肾脏结晶和肾小管上皮细胞凋亡指数有减轻趋势,与模型组比较,差别有统计学意义(P<0.05); 而肾脏HO-1活性程度、NRF-2蛋白和HO-1蛋白表达均呈升高趋势,与模型组比较,差别有统计学意义(P<0.05)。 结论 姜黄素可减轻大鼠草酸钙结晶引起的氧化应激肾损伤,减少草酸钙结晶形成,该作用可能与其上调NRF-2/HO-1蛋白表达有关。     

枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及其机制

目的 研究枸杞对大鼠肾草酸钙结石生成的干预效果及可能机制。方法 Wistar大鼠根据诱石方式（吸烟或饮用乙二醇或两者联合）、枸杞浸泡剂干预与否以及干预浓度（10%或25%）进行分组,设立空白对照组,每组10只。分组处理40 d后,收集24 h尿液并采集肾组织样本。检测尿液中钙、草酸及枸橼酸浓度;观察各组大鼠肾小管草酸钙结晶沉积情况并进行等级评分;检测肾组织脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量及总超氧化物歧化酶（T SOD）活性;TUNEL染色观察肾小管细胞凋亡并计算凋亡指数。结果 吸烟联合乙二醇诱石组尿钙浓度明显高于空白对照组（P<0.01）;单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数均高于空白对照组,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性均低于空白对照组。10%和25%枸杞浸泡剂干预可显著降低吸烟联合乙二醇诱石组大鼠尿钙浓度（P<0.01）;同时使单纯饮用乙二醇和吸烟联合乙二醇诱石组大鼠肾小管草酸钙结晶评分、肾组织MDA含量及肾小管上皮细胞凋亡指数下降,而尿液中枸橼酸浓度和肾组织T-SOD活性升高。枸杞浸泡剂两种浓度间未见明显量效关系。结论 枸杞能有效抑制吸烟和（或）乙二醇诱导的大鼠肾草酸钙结石的生成,其机制可能与降低肾组织内自由基水平,抑制肾小管上皮细胞凋亡,以及减少尿液中促石成分而增加抑石成分有关。     

Antilithic effects of extracts from <Emphasis Type="Italic">Urtica dentata</Emphasis> hand on calcium oxalate urinary stones in rats

This study examined the potential antilithic effects of a traditional Chinese medicine Urtica dentata Hand (UDH) in experimental rats and screened the optimal extract of UDH as a possible therapeutic a...     

富马酸二甲酯对肾草酸钙结石大鼠肾功能和氧化应激的影响及其机制研究

目的 基于p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路,探讨富马酸二甲酯对肾草酸钙结石大鼠肾功能及氧化应激的影响及其作用机制。方法 将30只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、富马酸二甲酯组,每组10只。其中模型组、富马酸二甲酯组大鼠腹腔注射0.25% L-羟脯氨酸2.5 kg/（kg·d）复制肾草酸钙结石大鼠模型。富马酸二甲酯组大鼠腹腔注射富马酸二甲酯25 mg/（kg·d）,连续28 d,对照组、模型组同时腹腔注射等量生理盐水。采用全自动生化分析仪检测大鼠尿蛋白、尿钙,以及血肌酐水平;HE染色检测大鼠肾组织草酸钙晶体形成情况;试剂盒检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）及活性氧簇（ROS）水平;Western bloting检测大鼠肾组织p38 MAPK通路蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,模型组和富马酸二甲酯组大鼠肾组织SOD活性降低,草酸钙晶体含量、尿蛋白、尿钙、血肌酐及肾组织MDA、ROS水平,p-JNK、p-p38蛋白相对表达量升高（P <0.05）;但富马酸二甲酯组大鼠SOD活性高于模型组（P <0.05）,肾组织草酸钙晶体含量、尿蛋白、尿钙、血肌酐,肾组织MDA、ROS水平,p-JNK、p-p38蛋白相对表达量低于模型组（P <0.05）。结论 富马酸二甲酯可能通过抑制p38 MAPK通路活化,抑制肾脏组织氧化应激反应,从而抑制肾草酸钙结石形成,进而保护肾功能。