HPLC法测定肿节风注射液中反丁烯二酸和异嗪皮啶的含量

肿节风为常用中药,为金粟兰科植物草珊瑚Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai的干燥全株。具有显著的抗菌、消炎、止痛及一定的肿瘤抑制作用,其主要化学成分为有机酸、倍半萜、黄酮及香豆素类化合物。肿节风注射液为肿节风药材经处理后制成的单味药注射剂,具有清热解毒、消肿散结的功效,用于热毒壅盛所致肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎、菌痢、脓肿,与肿节风片联合用于消化道癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤的治疗。现行肿节风药材质量标准的含量测定项采用HPLC法测定异嗪皮啶(isofraxidin)的含量,而肿节风注射液则是采用HPLC法测定反丁烯二二酸(furmaricacid)的含量,两者之间缺乏相关性,难以有效的控制药品的质量。据文献报道,反丁烯二酸具有抗菌、消炎的药理活性,而异嗪皮啶在体外活件实验中显示出一定的肿瘤细胞抑制作用。为有效控制肿节风注射液的产品质量,本实验建立HPLC法同时测定产品中异嗪皮啶和反丁烯二酸的含量。结果表明:该法可用于肿节风注射液的质量控制。     

均匀设计法优选肿节风的醇沉工艺

肿节风为金粟兰科植物草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai的干燥全株.具清热凉血,活血消斑,祛风通络等功效,临床上用于治疗肿瘤(晚期胰腺癌、消化系统恶性肿瘤和鼻部恶性肿瘤、白血病等)、细菌性痢疾、骨折及多种口腔疾病,取得良好的治疗效果[1].肿节风中主要含有酚类、鞣质、黄酮苷、香豆素和内酯[2]等成分,其中总黄酮和异嗪皮啶为其抗肿瘤有效成分,本文以肿节风中总黄酮保留率、异嗪皮啶保留率和浸膏率为评价指标,采用均匀设计法优选肿节风的醇沉工艺,为肿节风中抗肿瘤有效成分的提取分离工艺研究提供实验依据.     

中药肿节风不同部位中异嗪皮啶和总黄酮含量的动态分析

目的 探讨肿节风不同部位中异嗪皮啶和总黄酮含量的动态变化.方法 异嗪皮啶采用高效液相色谱法测定,总黄酮采用紫外分光光度法测定.结果 不同季节肿节风中总黄酮和异嗪皮啶含量有一定差异,10～12月份药材中含量相对较高,叶中总黄酮含量最高,茎、根、根须中含量接近;异嗪皮啶以根中含量较高,叶中含量较低.结论 采收肿节风药材在10～12月份为宜,分析肿节风药材时,样品中应包含一定比例的叶、茎、根须和根;增加对总黄酮的含量控制有重要的意义.     

HPLC测定消炎灵片中异嗪皮啶的含量

消炎灵片由肿节风、苦玄参、千里光、毛冬青、甘草精制而成,功能清热解毒,消肿止痛。临床用于上呼吸道炎、支气管炎、鼻炎、咽喉炎、扁桃体炎,细菌性痢疾及慢性胆囊炎[1],临床疗效较好。其质量标准中未制定含量测定指标,不能很好地控制其质量。而肿节风为方中主药,异嗪皮啶是其     

银屑灵与肿节风中异嗪皮啶的药代动力学比较

目的:建立检测大鼠血清中异嗪皮啶的方法,探讨中药复方银屑灵与单味药肿节风相比较对异嗪皮啶药代动力学参数的影响。方法:用银屑灵与肿节风的水煎剂ig给药,用HPCL检测给药后的血清样品中的异嗪皮啶含量,并用DAS(2.0)药代动力学软件对结果进行分析。结果:异嗪皮啶的线性范围为0.25～12 mg.L-1;检测限0.25 mg.L-1;提取回收率70.4%～71.9%(RSD 1.1%)。日内、日间精密度RSD小于8.9%。与肿节风组相比,银屑灵组异嗪皮啶药代动力学参数无显著性差异。结论:该方法专属性强、灵敏度高、准确性好;复方中的其他成分不影响异秦皮啶的体内过程。     

生骨康片的质量研究

目的:建立生骨康片质量标准。方法:通过TLC对丹参、延胡索、肿节风、牛膝进行鉴别研究。采用HPLC测定异嗪皮啶含量。结果:在TLC中检出丹参、延胡索、肿节风、牛膝。异嗪皮啶在0.08～0.40μg.mL-1呈良好的线性关系,r=0.9999,回收率97.4%。结论:所建立的方法简便可行,重复性好,可作为产品的质量控制方法。     

肿节风提取工艺研究与探讨

目的:对肿节风提取工业化生产展开深入研究,优化肿节风提取工艺。方法:采用单因素试验和正交试验相结合的方法,考察了肿节风药材部位、煎煮用水pH、浸泡温度及浸泡时间各因素对提取过程的影响;对肿节风醇沉工艺进行研究,采用单因素梯度试验,优选了醇沉温度和添加乙醇浓度。结果:肿节风根茎制备的水煎浓缩液异嗪皮啶含量远高于肿节风叶,而使用肿节风叶进行煎煮所得的水煎浓缩液得率高于肿节风根茎;肿节风煎煮过程最佳工艺为提取pH6.0、浸泡温度60℃、浸泡时间60 min;醇沉温度越高,肿节风醇沉过程得率越高,而醇沉后肿节风浸膏中异嗪皮啶总量与添加乙醇浓度呈抛物线分布,其中使用85%乙醇所得肿节风浸膏的异嗪皮啶总量最低。结论:该试验优化了肿节风提取工艺,可指导肿节风提取工业化大生产。     

肿节风HPLC指纹图谱研究

肿节风为金栗兰科植物草珊瑚SarcandraglabraThunb .的全草,又名九节茶、接骨木等,生于山坡林间阴湿处,分布于华东、中南以及西南各省区,习惯以全株入药,具有消炎、清热、解毒和疏筋活血等作用[1] 。其制剂化学成分的定性定量分析已有报道[2 ] 。《中国药典》2 0 0 0年版一部对肿节风的质量控制是采用HPLC测定其中异嗪皮啶的含量[3] 。众所周知,单一指标性成分的含量测定往往难以反映中药整体质量,而指纹图谱具有整体性特点,能     

肿节风药材采收部位与最佳采收期的研究

目的确定肿节风药材的采收部位与最佳采收期。方法分别将采得的不同季节肿节风药材分为根、茎、叶3部分,以60％乙醇为溶剂回流提取。采用高效液相色谱法测定不同季节肿节风药材各部位中反丁烯二酸和异嗪皮啶的含量;以紫外分光光度法测定其总黄酮的含量。结果肿节风药材叶中总黄酮含量最高,茎中反丁烯二酸含量最高,根中异嗪皮啶含量最高,综合考虑3种有效成分,以6月、8月含量最高。结论6月、8月份为肿节风药材的最佳采收期,以全株采收为宜。     

不同产地不同采收期肿节风药材主要活性成分含量比较

目的:比较不同产地不同采收期肿节风药材中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸含量。方法:采收相同产地下不同采收期和相同采收期下不同产地的肿节风,称重、阴干,并用HPLC法测定绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸含量。结果:不同产地、不同采收期的肿节风药材中主要活性成分总含量有显著差异,江西抚州和广西防城港产地8月份时最高,江西赣州产地11月份时最高,8月份次之。结论:三产地的肿节风药材在8月份采收为佳。     

九龙胃药胶囊质量标准研究

目的建立九龙胃药胶囊的质量标准.方法采用薄层色谱法鉴别九里香、肿节风、白芍;采用高效液相色谱法测定异嗪皮啶的含量.结果在薄层色谱中可检出九里香、肿节风、白芍;异嗪皮啶在0.0544～0.4896 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为98.76%,RSD=1.56%.结论所建立的方法可用于该制剂的质量控制.     

HPLC波长切换法同时测定消炎灵片中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA

目的建立同时测定消炎灵片(苦玄参、肿节风、千里光、毛冬青、甘草)中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA含有量的液相色谱法。方法采用高效液相色谱波长切换法同时测定消炎灵片中异秦皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA。色谱条件为Agilent ZORBAX SB C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱;以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;检测波长前25 min为330 nm,25 min后为264 nm。结果异嗪皮啶在0.018～0.163μg范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=6),平均加样回收率为99.8%,RSD为1.8%(n=6);迷迭香酸在0.027～0.244μg范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=6),平均加样回收率为99.6%,RSD为1.1%(n=6);苦玄参苷ⅠA在0.271～2.435μg范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=6),平均加样回收率为99.6%,RSD为1.4%(n=6)。结论本方法可同时测定消炎灵片中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA,具有快速、简便的特点。     

强力宁片质量标准研究

目的：建立强力宁片的质量控制标准。方法：对强力宁片中的刺五加、枸杞子进行薄层色谱鉴别;采用高效液相色谱法对异嗪皮啶进行含量测定。结果：薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;异嗪皮啶进样量在0.042 88～0.257 28 μg与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9,n=6）;平均加样回收率为97.77%,RSD=1.98%。结论：建立的TLC和HPLC专属性强、准确度高、重复性好,可用于强力宁片的质量控制。     

一测多评法同步测定肿节风药材中6种成分

目的:建立肿节风药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异嗪皮啶、迷迭香酸6个成分的一测多评法。方法:以异嗪皮啶为研究对象,建立肿节风药材中该成分与新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸的相对校正因子(分别为1.0621、1.0576、1.0603、1.8517、0.8840),利用相对校正因子计算6种成分的含量,实现一测多评;同时用外标法测定6种成分的绝对含量;以验证一测多评的准确性和科学性。结果:建立的校正因子重现性良好,肿节风药材中6种成分采用校正因子计算值与外标法实测值之间没有显著性差异。结论:该方法准确、操作简单、专属性和重现性良好,可实现只用异嗪皮啶一种对照品同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸的含量。     

肿节风有效部位胶囊的制备工艺及质量标准研究

目的：优化肿节风有效部位胶囊的制备工艺,建立肿节风有效部位胶囊的质量标准。方法：考察肿节风浸膏粉流动性、吸湿性和堆密度;运用薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法对制剂中有效部位总黄酮、异嗪皮啶进行定性和定量测定。结果：肿节风浸膏粉休止角为26．26。;72h吸湿百分率为9．68％;堆密度为0．73g／ml;薄层色谱斑点清晰集中;胶囊平均含水量为3．27％;装量差异为1．32％;40rain时总黄酮溶出度为82．14％,异嗪皮啶溶出度为99．92％;芦丁在0．02～0．07mg／ml浓度范围内,与吸光度呈良好的线性关系（r=0．9997）,平均回收率为101．19％;异嗪皮啶进样量在0．0001～0．0005μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0．9998）,平均回收率为100．64％;胶囊中总黄酮和异秦皮啶含量分别不低于160mg和4mg。结论：制备工艺科学合理,定性鉴别准确,质量标准易于操作,重复性好,能用于该制剂的质量控制标准。     

RP-HPLC法测定肿节风饮片中异嗪皮啶和迷迭香酸

目的 建立RP-HPLC法测定肿节风饮片中异嗪皮啶和迷迭香酸的方法 .方法 采用RP-HPLC法,迪马Diamonsil~(TM)(钻石)C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(23:77);检测波长:330nm;体积流量:1.0 mL/min;柱温25℃;进样量:10μL.结果 异嗪皮啶在0.015 9～0.796 2 μg线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.06%(RSD为1.52%);迷迭香酸在0.031 0～0.621 0 μg线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为99.99%(RSD为2.13%).结论 该定量分析方法 简便、准确、重复性好,在同一色谱条件下可同时测定肿节风饮片中异嗪皮啶和迷迭香酸.     

肿节风有效成分提取工艺研究

目的:建立肿节风中主要有效成分反丁烯二酸、异嗪皮啶和总黄酮的最佳提取工艺.方法:在初步筛选提取方法的基础上采用L9(34)正交实验对提取条件进行优化,确定肿节风中三类有效成分的最佳提取工艺.采用高效液相色谱法分析各提取条件对反丁烯二酸和异嗪皮啶的影响;采用紫外分光光度法分析各提取方法对总黄酮的影响.结果:30倍量60%乙醇回流提取3次(每次1 h)的提取方法为同时提取三类有效成分的最佳方法.结论:建立了肿节风中主要有效成分的最佳提取工艺,提取条件中乙醇浓度对三者提取率的影响均最大.     

刺五加片质量考察

用反相高效液相色谱法测定刺五加片中异嗪皮啶的含量,同时按中国药典收载的方法作性状、鉴别和浸出物测定。不同厂家的11批产品中有9批浸出物符合中国药典规定,2批不符合规定;6批可检出异嗪皮啶,其含量为0．22－1．37mg/片,另有5批未检出异嗪皮啶的色谱峰。浸出物含量与异嗪皮啶的含量无平行关系。说明中国药典用醇溶性浸出物作为质控指标方法较粗糙,难以全面评价本品的质量。建议增加主要有效成分的含量测定项目。     

肿节风高效薄层色谱鉴别

目的建立肿节风高效薄层色谱鉴别方法。方法采用硅胶G60高效薄层板,以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(4∶5∶1)为展开剂,在紫外灯(365 nm)下检视,并进行系统适应性考察。结果 13批样品均能检出异嗪皮啶、迷迭香酸对照品及肿节风对照药材的特征性斑点,而且其清晰、易于检测。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于肿节风的质量控制。     

UPLC测定不同粒度肿节风有效成分的含量

目的 建立超高效液相色谱（UPLC）法同时测定肿节风超微粉中异嗪皮啶和迷迭香酸的含量,并比较不同粒度肿节风有效成分溶出率差异。方 法 采用UPLC法,Eclipse Plus C18（2.1 mm × 50 mm,1.8 μm）,流动相为甲醇（A）-0.1 %磷酸（B）,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min-1,柱温为35 ℃,紫外检测波长 为342 nm。 结果 异嗪皮啶和迷迭香酸分别在9.97～59.84 μg·mL-1（r =0.99995）,10.90～60.14 μg·mL-1（r=0.99935）范围内线性关系良好,平均回收率（n=6）分 别为95.16 %（RSD=2.15 %）,100.31 %（RSD=2.29 %）。 结论 所建立的UPLC法操作简便快捷、经济、准确可靠、分离度好,可为肿节风药材有效成分分析和质量控制提供 新的方法。