针灸对海洛因复吸大鼠脑组织多巴胺、5-羟色胺的影响

目的探讨针灸干预海洛因复吸的作用机制。方法采用间断性递增量肌肉注射海洛因的方法复制海洛因复吸大鼠模型,观察针灸对海洛因复吸大鼠条件性位置偏爱（conditional position preference,CPP）的行为学改变及脑组织多巴胺（dopamine,DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）含量变化的影响。结果针灸能防止海洛因复吸大鼠体质量的下降（P〈0.01）,显著延长海洛因复吸大鼠在暗箱的停留时间（P〈0.01）,显著降低海洛因复吸大鼠脑组织DA和5-HT含量（P〈0.01）。结论抑制脑组织DA、5-HT的释放,降低对海洛因用药行为有关环境的依赖行为,可能是针灸干预海洛因复吸的作用机制之一。     

Effect of acupuncture in intervening heroin-induced brain damage via regulating ubiquitin-proteasome pathway

Objective

To observe the effect of acupuncture in regulating ubiquitin-proteasome pathway (UPP), and discuss the action of acupuncture in intervening heroin-induced brain damage.

Methods

Thirty male Sprague-Dawley (SD) rats were divided into a control group, a model group and an acupuncture group by using the random number table. Rats in the model and acupuncture groups received intramuscular heroin injection for successive 8 d at a progressively increased dose. Afterwards, the injection was suspended for 5 d for withdrawal. The heroin relapse rat model was established by repeating the drug addiction and withdrawal process for 3 times. The control group followed the step of the model establishment, but was given intramuscular injection of normal saline at the stage of addiction and no intervention at the stage of withdrawal; the model group was given intramuscular heroin injection at a progressively increased dose at the addiction stage and no intervention at the withdrawal stage; the acupuncture group was dealt in the same way as the model group at the addiction stage, but received acupuncture at Baihui (GV 20) and Dazhui (GV 14) at the withdrawal stage, with the needles retained for 30 min each time, 1 session a day, for successive 5 d. On the 39th day, brain tissues were extracted from the hippocampus and ventral tegmental area (VTA) of the three groups of rats. The apoptosis of brain nerve cells was detected by using terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick and labeling (TUNEL). The mRNA and protein expressions of ubiquitin (Ub), ubiquitin protein ligase (E3) and 26S were examined by immunohistochemistry and quantitative real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR).

Results

Compared with the model group, rat’s hippocampus and VTA in the acupuncture group showed significantly fewer cells positively stained by TUNEL staining (P<0.01), and its mRNA and protein expressions of Ub, E3, 26S were significantly lower (P<0.01).

Conclusion

Reducing nerve cell apoptosis and regulating the mRNA and protein expressions of Ub, E3 and 26S in rat’s hippocampus and VTA are possibly one of the action mechanisms of acupuncture in intervening heroin-induced brain damage.

     

生物分配胶束色谱法预测中药制剂消炎利胆片膜通透性的研究

目的:基于生物分配胶束色谱法进行复杂中药制剂消炎利胆片的分离和膜通透性预测。方法:考察了生物分配胶束色谱的保留因子与药物膜通透性的相关性,以非离子型表面活性剂Brij 35作为流动相,模拟生物体内环境,得到各受试药物的保留因子Log k,与膜通透性参数(口服吸收率、Log Papp、Log BB)数据进行相关分析得出定量保留-膜通透性(QRPR)模型。结果:预测了消炎利胆片10个主要保留成分的透膜吸收情况。结论:生物分配胶束色谱可以用于中药复杂成分的分离,以及预测药物主成分的透膜吸收活性。     

针刺对中枢神经损伤保护修复作用的实验研究概况

近年来许多研究表明,针刺能明显提高缺血性脑卒中病人日常生活能力和认知能力,对痴呆患者的认知和社会行为能力障碍进行有效干预,能显著改善患者生活质量,明显减少癫痫患者发作频率,减轻发作症状,脑电图改变也明显好转.     

针刺对海洛因复吸大鼠脑神经元超微结构变化的影响

目的:观察针刺对海洛因复吸大鼠脑神经元超微结构变化的影响,探讨针刺对其的保护作用。方法:Wistar大鼠32只随机分为盐水对照组、海洛因成瘾组、海洛因成瘾+美沙酮组和海洛因成瘾+针刺组。递增量肌肉注射海洛因8 d,按染毒(成瘾)→脱毒的方法,反复3个阶段,建立海洛因复吸大鼠模型。海洛因成瘾+美沙酮组在脱毒期给予美沙酮灌胃治疗;海洛因成瘾+针刺组在脱毒期给予针刺治疗(针刺百会穴)。于实验d39取材并运用透射电镜观察脑VTA、NAc神经元超微结构。结果:电镜观察盐水对照组视野可见各成分清晰,粗面内质网、核糖体、细胞核、核膜等结构基本正常;海洛因成瘾组、海洛因成瘾+针刺组和海洛因成瘾+美沙酮组视野可见VTA、NAc神经元变性、肿胀凋亡等超微结构改变;海洛因成瘾+针刺组相对于海洛因成瘾组、海洛因成瘾+美沙酮组损伤程度有所减轻,粗面内质网、核糖体数目相对增多。结论:针刺对海洛因复吸大鼠脑组织的损伤具有一定的保护作用。     

针刺对海洛因复吸大鼠脑组织GRP78和CRT表达的影响〖

目的观察针刺百会、大椎穴对海洛因复吸大鼠脑组织糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)和钙网织蛋白(calreticulin,CRT)的影响,探讨针刺干预海洛因脑损伤的机制。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、依赖组、模型组、针刺组和药物组,每组8只。按重复3次"染毒→戒断"的方法复制海洛因复吸大鼠模型。于实验第46天取各组大鼠海马、中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)脑组织,分别运用荧光RT-PCR和Western blot法,观察各组大鼠海马和VTA区GRP78和CRT蛋白及其mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组和依赖组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠海马和VTA中CRT、GRP78蛋白及其mRNA表达水平显著增高(P<0.05);针刺组与药物组比较,仅海马CRT mRNA表达水平的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论针刺干预海洛因脑损伤的机制与其上调海马和VTA中CRT、GRP78的表达水平有关。     

GC-MS快速测定鱼腥草注射剂致过敏介质释放的方法研究

目的 建立犬血浆中组胺GC-MS定量测定方法.方法 12只比格犬随机分4组,给药组注射含高、中、低3种浓度吐温-80的鱼腥草注射剂和生理盐水组,30 min后取犬血浆,加入氯甲酸乙酯/三氯甲烷进行衍生化.组胺作为过敏标志物用气质联用法进行测定,DB-WAX色谱柱(30m×0.25 mm,0.25 μm);柱温从150℃开始,再以40℃/min的速度升至240℃.质谱条件采用SIM选择离子模式,选择m/z166为组胺的检测离子,选择m/z 192为内标9-methylanthracene的检测离子,内标以及组胺标的色谱保留时间分别为11和13.5 min.结果 组胺在2～ 32 mg/L范围内具有良好线性关系,r2=0.999,平均回收率为100.6％( RSD=1.86％),最低检测限为0.7 mg/L(S/N =3).结论 本实验方法操作简便、准确、回收率好,可快速检测中药注射剂引起的组胺过敏介质的释放,为临床、制药企业解决中药注射剂的安全性问题提供科学方法.     

案例教学法在《人体寄生虫学》课程教学中的应用与思考

为了克服传统教学法在《人体寄生虫学》课程教学中的不足,探讨案例教学法的应用价值,本文就《人体寄生虫学》课程案例的选择和设计、案例教学过程、案例教学的优点以及存在的问题进行了总结和探讨,以期激发学生的学习热情,培养学生的自主学习能力,达到更好的教学效果。     

针刺对海洛因复吸大鼠脑神经细胞凋亡的影响

目的观察针刺对海洛因复吸大鼠脑神经细胞凋亡的影响。方法采用剂量递增法复制海洛因成瘾大鼠模型,将40只Wistar大鼠平均分成正常组、模型组、针刺组、药物组,于实验第39天取4组大鼠海马、中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)脑组织,光镜下观察神经细胞坏死情况,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)检测脑神经细胞凋亡情况。结果光镜下可见模型组大鼠脑海马、VTA神经细胞丢失、变性较严重,核溶解消失,神经细胞变性坏死及间质水肿明显,并可见筛状软化灶。针刺组未见明显筛状软化灶,神经细胞变性坏死及间质水肿程度较模型组、药物组减轻。针刺组神经细胞间质水肿较轻,未见明显筛状软化灶,神经细胞水肿坏死变性较少量。与正常组比较,模型组大鼠脑海马、VTA中TUNEL染色阳性细胞数显著增多(P0.01);与模型组、药物组比较,针刺组大鼠脑海马、VTA中TUNEL染色阳性细胞数显著减少(P0.01)。结论海洛因成瘾可致大鼠脑神经细胞凋亡,针刺"百会"、"大椎"穴可抑制神经细胞凋亡。     

化学指纹图谱类别相似性计算方法研究

目的:针对现有整体相似度法难以评价类别相似程度的局限,建立一种可用于谱图相近中药材类别定量评价的相似度计算新方法.方法:先提取药材指纹特征,区分出药材类别,再计算同类药材指纹图谱相似度,以类内相似度的大小来表征同类样品间化学组成的差异情况.结果:该方法能准确分辨九节茶全草与地上部分,并合理地表征出同一药材样品间化学组成差异程度.结论:根据类内相似度的大小可识别中药材同类样品间的化学组成差异,弥补了现有色谱指纹图谱整体相似度计算方法的不足.