不同剂量卵蛋白诱发BALB/c小鼠支气管哮喘模型的比较

目的探讨不同剂量卵蛋白(ovalbumin,OVA)对BALB/c小鼠支气管哮喘模型血清Ig E、IL-4、IFN-γ含量、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)数量及肺组织病理学的影响,初步确定较为合适的OVA造模剂量。方法 BALB/c小鼠随机分为正常组,模型1组(OVA 20μg),模型2组(OVA 50μg),模型3组(OVA 100μg),醋酸地塞米松组(OVA 100μg)。除正常组外,其余各组小鼠分别腹腔注射相应剂量OVA致敏,并以1%OVA雾化激发,建立支气管哮喘模型。ELISA法检测血清Ig E、IL-4、IFN-γ含量,瑞氏染色计算BALF中EOS数目,HE染色观察肺组织病理学变化。结果与正常组相比,各组小鼠血清Ig E、IL-4、IFN-γ及BALF中EOS均显著增加(P0.05),肺组织中均出现炎性细胞浸润、支气管上皮细胞变性、支气管平滑肌细胞增生等病理改变,在Ig E、IL-4、IFN-γ含量及肺组织病理变化方面以OVA 50μg组小鼠更为明显。结论三种剂量OVA均可成功诱发BALB/c小鼠出现哮喘,综合而言50μg OVA所诱发的哮喘模型更为明显,推荐作为BALB/c小鼠哮喘模型的适宜造模剂量。     

丙酸氟替卡松对哮喘小鼠气道重塑及TGF-β1表达的影响

目的:探讨丙酸氟替卡松对哮喘小鼠气道重塑的影响及其可能的作用机制.方法:将30只Balb/c小鼠随机分为哮喘组(A组),正常对照组(B组),丙酸氟替卡松治疗组(C组)3组,每组动物10只.A组小鼠于第1日及第15日以鸡卵白蛋白(OVA)致敏,从第1次致敏后第22日开始雾化吸入25g/L OVA激发并持续4 wk,建立哮喘气道重塑模型;B组用生理盐水以同样方法致敏并雾化吸入;C组于激发前30 min雾化吸入丙酸氟替卡松(0.17g/L),吸入时间每次10 min,其它程序与A组相同.制备小鼠肺组织病理切片,HE染色观察各组气道结构改变情况,采用医学图像分析软件测定支气管管壁厚度(WAt/Pbm),支气管平滑肌厚度(WAm/Pbm);肺组织石蜡切片行TGF-β1免疫组化染色后计算机图像分析测定其灰度值.结果:光镜下可见A组小支气管上皮细胞脱落、管壁炎症细胞浸润、杯状细胞增生、平滑肌增厚,而C组上述改变较A组明显减轻.与B组比较,A组支气管管壁厚度[(17.43±1.10)μm2/μm],平滑肌厚度[(6.58±1.16)μm2/μm]显著升高(P＜0.01);与A组比较,C组支气管管壁厚度[(14.06±1.20)μm2/μm],平滑肌厚度[(4.41±1.00)μm2/μm]显著降低(P＜0.01).与B组比较,A组TGF-β1的灰度值(66.18±1.53)显著降低(P＜0.01);与A组比较,C组丙酸氟替卡松干预后TGF-β1的灰度值(72.05±1.65)显著升高(P＜0.01).结论:吸入丙酸氟替卡松能有效防治哮喘小鼠气道重塑,可能的机制是丙酸氟替卡松通过下调TGF-β1的表达干预了气道重塑.     

硒对特应性皮炎小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的分析膳食硒对特应性皮炎小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响。方法 40只BALB/c小鼠随机分为致敏组和对照组,致敏组(G1、G2、G3)分别以缺硒(0.01μg/m L)、中量硒(0.25μg/m L)和高量硒(3.00μg/m L)饲料喂养,对照组(G4)以中量硒饲料喂养。8周后致敏组采用DNCB诱导特应性皮炎症状,G4组作为对照。致敏期间监测皮炎症状。致敏3周后,检测血浆总Ig E、全血细胞计数、脾脏CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平和组织硒含量,分析组间各指标差异和变量间关系。结果 G1、G2、G3组小鼠第6天皮炎症状评分、第8天抓挠计数、第21天血浆总Ig E和全血炎症细胞数均高于G4组,差异有统计学意义(P0.05)。G1、G2、G3、G4组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+CD25+T细胞百分比分别为(79.6±7.6)%、(59.0±27.5)%、(37.6±5.4)%、(85.26±9.2)%,差异有统计学意义(P=0.000);其中G3组降低最为明显,与G1、G2和G4组比较差异具有统计学意义(t=0.174,40.828,1.466,P0.01);相关回归分析发现,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平与皮肤组织硒含量呈直线负相关(r=-0.623,P=0.001)。结论膳食硒通过其免疫学效应影响特应性皮炎小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的增殖分化水平。     

消痰通腑方对肥胖氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸钠模型小鼠血清白介素-6和脂联素的影响

目的观察消痰通腑方对肥胖氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)模型小鼠成瘤率及血清白介素-6(IL-6)、脂联素(ADP)的影响。方法饲喂高脂饮食建立小鼠肥胖模型,设正常对照组、肥胖对照组、肥胖模型组及肥胖中药组,各6只。肥胖模型组及肥胖中药组第1天AOM 12.5 mg/kg腹腔注射,第2天开始饲喂含3.5%DSS饮水7 d,之后改为14 d正常饮水为1个循环,共循环3次。正常对照组及肥胖对照组腹腔注射等剂量生理盐水及正常饮水。模型建成后,肥胖中药组给予灌胃消痰通腑方0.4 m L/d,共4周,其余各组灌胃等剂量蒸馏水。实验结束后观察小鼠成瘤率及血清IL-6和ADP的变化。结果肥胖中药组成瘤率(50%)明显低于肥胖模型组(100%)(P<0.05)。肥胖中药组血清IL-6水平为(128.17±8.55)ng/L,明显低于肥胖模型组的(145.45±11.39)ng/L(P<0.05)。肥胖中药组ADP水平为(81.05±7.34)μg/L,明显高于肥胖模型组的(63.15±10.37)μg/L(P<0.05)。结论消痰通腑方可降低肥胖AOM/DSS模型小鼠的成瘤率及血清IL-6水平,升高ADP水平。     

苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌感染小鼠模型免疫功能的调节作用

目的分析苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)感染小鼠模型免疫功能的调节作用。方法选取30只健康雄性昆明种小鼠,采用随机数字表法分为正常组、对照组及苦参提取物组,每组10只。对照组及苦参提取物组小鼠通过尾静脉注入MDR-TB 3 m L,正常组尾静脉内注入等量0.9%Na Cl注射液。苦参提取物给予200 mg/kg苦参提取物灌胃,正常组和对照组给予等体积极0.9%Na Cl注射液灌胃。采用流式细胞仪测定血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清γ干扰素(IFN)、白细胞介素(IL)4、IL-10、IL-12等细胞因子水平及补体C3、补体C4、免疫球蛋白(Ig)G、Ig M、Ig A水平变化。结果苦参提取物组血清CD+3、CD+4、CD+4/CD+8水平高于对照组[(0.62±0.08)%比(0.53±0.06)%,(0.50±0.06)%比(0.40±0.05)%,(1.68±0.20)比(1.42±0.12),P<0.05],CD+8水平低于对照组[(0.20±0.04)%比(0.29±0.05)%,P<0.05];与正常组[(0.64±0.07)%、(0.56±0.08)%、(0.15±0.03)%、(1.73±0.18)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。苦参提取物组血清IFN-γ、IL-12高于对照组[(1.37±0.08)ng/L比(1.18±0.05)ng/L,(2.35±0.12)ng/L比(2.08±0.11)ng/L],血清IL-10、IL-4低于对照组[(12.01±0.25)ng/L比(12.47±0.26)ng/L,(6.02±0.23)ng/L比(6.31±0.27)ng/L,P<0.05];与正常组[(1.55±0.14)ng/L、(11.23±0.26)ng/L、(5.56±0.27)ng/L、(24.7±0.07)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。苦参提取物组血清C3、C4、Ig G、Ig M、Ig A高于对照组[(1.01±0.15)g/L比(0.67±0.09)g/L,(0.26±0.06)g/L比(0.19±0.03)g/L,(13.22±1.91)g/L比(7.92±0.94)g/L,(2.57±0.63)g/L比(1.84±0.37)g/L,(1.28±0.33)g/L比(0.52±0.11)g/L,P<0.05];与正常组[(1.27±0.20)g/L、(0.31±0.08)g/L、(15.82±1.75)ng/L、(2.91±0.65)g/L、(1.35±0.37)g/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论苦参提取物可以同时提升MDR-TB小鼠的细胞免疫及体液免疫水平,具有明显的抗MDR-TB作用,可以作为苦参提取物应用于临床MDR-TB感染患者治疗的依据。     

加味蒌石汤对肾阴虚型PCOS模型小鼠卵泡抑素及激活素的影响

目的观察加味蒌石汤对肾阴虚多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠卵泡抑素及激活素的影响。方法 ICR小鼠54只随机分为空白组,模型组,中药高、中、低剂量组,达英-35组六组,每组9只。采用"硫酸脱氢表雄酮(DHEA)联合甲状腺素及利血平"法制备肾阴虚型多囊卵巢综合征小鼠模型。除空白组、模型组外,其余各组予相应的药物灌胃40天,观察小鼠一般情况、体质量,酶联免疫吸附法测定小鼠血清性激素[血清睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)]、血清卵泡抑素(FS)、激活素(ACT)、环磷酸腺苷(cAMP)及环磷酸鸟苷(cGMP)。结果与空白组及各用药组比较,模型组小鼠出现不安定、多动、体毛稀疏、腹泻、消瘦等表现。实验前各组小鼠体质量差异无统计学意义(P0.05),实验后模型组小鼠体质量低于空白组[(25.96±0.88)g比(28.36±0.77)g,P0.05],中药高、中剂量组与达英-35组小鼠体质量均高于模型组和低剂量组[(28.25±0.55)g、(27.66±1.21)g、(28.08±0.50)g比(25.96±0.88)g、(26.71±0.74)g,P0.05];模型组血清T、LH、FS、cAMP/cGMP高于空白组[(146.30±4.04)nmol/L比(134.36±2.30)nmol/L,(1772.66±122.37)ng/L比(1409.02±47.88)ng/L,(45.07±5.63)ng/L比(34.59±2.52)ng/L,(1.85±0.37)比(1.28±0.15),P0.01],模型组ACT低于空白组[(6.12±0.63)ng/m L比(6.87±0.87)ng/m L,P0.05],中药高、中、低剂量组与达英-35组血清FS均低于模型组[(36.27±3.05)ng/L、(38.33±2.47)ng/L、(39.27±4.09)ng/L、(36.64±2.55)ng/L比(45.07±5.63)ng/L,P0.01],中药高、中、低剂量组与达英-35组ACT均高于模型组[(6.96±0.60)ng/m L、(6.90±0.81)ng/m L、(6.86±0.48)ng/m L、(7.14±0.73)ng/m L比(6.12±0.63)ng/m L,P0.01或P0.05],中药高、中、低剂量组与达英-35组cAMP/cGMP均低于模型组[(1.36±0.10)、(1.48±0.11)、(1.67±0.08)、(1.42±0.11)比(1.85±0.37),P0.01]。结论加味蒌石汤能有效调节肾阴虚PCOS模型小鼠性激素水平,改善肾阴虚状态,降低FS含量和cAMP/cGMP比值,提高ACT含量,促进卵泡发育。     

CPG寡核苷酸对卵清蛋白致敏幼鼠血清中Th1/Th2细胞因子及肥大细胞趋化蛋白1的影响

目的：利用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)建立幼鼠食物过敏模型,观察非甲基化胞嘧啶鸟嘌呤寡核苷酸(CPG oligodeo-xynucleotide,CPG-ODN)对OVA致敏的干预作用。方法选用2～3周龄BALB/c雌性幼鼠40只建立幼鼠食物过敏模型,分为对照组、不同剂量OVA致敏组(20μg、50μg和100μg组)及CPG-ODN干预组(50μg OVA + CPG-ODN),每组8只。观察过敏症状并评分;眼球取血,检测血清中OVA-IgE、肥大细胞趋化蛋白1(mast cell chemotactic protein 1,mMCP-1)及Th1/Th2相关细胞因子IFN-γ、IL-4的水平;空肠组织行病理学检测。结果除对照组外,致敏组小鼠均出现不同程度过敏症状,空肠表现为Ⅰ型变态反应病理特点,Th2细胞因子、OVA-IgE、mMCP-1水平升高,20μg、50μg致敏组Th1水平降低,50μg致敏组指标改变最显著;与致敏组相比,干预组小鼠过敏症状及病理改变明显减轻,Th2细胞因子、IgE及mMCP-1水平降低,Th1水平升高。结论用50μg OVA建立的BALB/c幼鼠食物过敏模型致敏效果最好,CPG-ODN通过改善Th1/Th2失衡状态,抑制幼鼠食物过敏反应。mMCP-1在过敏性疾病的发生、发展中起重要作用,有望成为食物过敏临床检测指标之一。     

支气管哮喘模型小鼠Th2反应亢进的研究

①目的　探讨哮喘小鼠是否存在Th1 /Th2免疫反应失衡。②方法　将BALBC 6周龄小鼠 30只分为对照组、卵白蛋白 (OVA)组 ,每组各 1 5只。OVA组第 1、1 4、2 1天给予用 1 .5mgAl(OH) 3乳化的OVA 1 0 μg腹腔注射致敏 ,对照组则在相应的时间给予 1 .5mgAl(OH) 3腹腔注射 ,两组均于第 2 6、2 7天雾化吸入OVA进行激发 ,第 2 8天处死小鼠行支气管肺泡灌洗 (BAL)同时摘取脾脏 ,用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液 (BALF)和脾脏单个核细胞培养上清液中白细胞介素 4(IL 4)、白细胞介素 5(IL 5)、干扰素γ(IFN γ)含量 ,并计数BALF细胞总数及分类。③结果　第 2 8天OVA组脾脏IL 4含量为 (52 .1 9± 8.96)ng/L ,对照组为 (1 3 .33± 1 1 .1 6)ng/L ,两组比较差异有显著意义 (t=3 .40 8,P <0 .0 5)。OVA组BALF中IL 4含量为 (98.89± 39.30 )ng/L ,对照组为 (35 .0 6±1 6 .84)ng/L ,两组比较差异有极显著性 (t=3 .674,P <0 .0 1 ) ;OVA组BALF中IL 5含量为 (91 .55± 7.54)ng/L ,对照组为 (35 .33± 0 .69)ng/L ,两组比较差异有显著性 (t=3 .50 1 ,P <0 .0 1 ) ;OVA组嗜酸性粒细胞数量为 (56 .0 3±7.2 3)× 1 0 6 /L ,对照组嗜酸性粒细胞数量为 (1 .0 4± 0 .2 3)× 1 0 6 /L ,两组比较差异有显著性 (t=3 .687,P <0 .0     

干扰素α对慢性粒细胞白血病血清疾病相关细胞因子水平的影响

目的探究干扰素α治疗慢性粒细胞白血病(CML)患者后相关细胞因子水平的改变情况。方法将2012年5月至2014年5月天门市第一人民医院收治的120例CML的患者按照随机数字法分为观察Ⅰ组和观察Ⅱ组,每组60例。患者均给予羟基脲治疗,每日20~60 mg/kg,每周2次,6周为1个疗程,观察Ⅱ组患者在羟基脲治疗的基础上加用重组人干扰素α注射液治疗,(3~5)×106U/(m2·d),6周为1个疗程。另随机选取60例正常健康人作为对照组。比较所有研究对象治疗前的血清前列腺素E2(PGE2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、碱性磷酸酶(ALp)以及白细胞介素6(IL-6)等细胞因子水平的差异以及治疗2周及6周后观察Ⅰ组和观察Ⅱ组上述细胞因子水平的改变情况。结果治疗前观察组Ⅰ患者血清中的PGE2、MMP-2、b FGF、ALP以及IL-6水平分别为(93±26)ng/L、(5.8±1.1)μg/L、(60±18)ng/L、(105±29)U/L、(20.4±6.1)ng/L,观察Ⅱ组分别为(96±25)ng/L、(5.7±1.2)μg/L、(60±17)ng/L、(106±26)U/L、(20.2±6.0)ng/L,均显著高于对照组[(51±12)ng/L、(2.7±0.5)μg/L、(33±8)ng/L、(61±13)U/L、(4.8±1.1)ng/L],差异有统计学意义(均P<0.01);而观察Ⅰ组和观察Ⅱ组患者治疗前上述细胞因子水平的比较差异无统计学意义(均P>0.05);观察Ⅱ组患者治疗后PGE2、MMP-2、b FGF、ALP以及IL-6均显著低于观察Ⅰ组[(52±16)ng/L比(62±20)ng/L,(2.4±0.5)μg/L比(3.9±0.6)μg/L,(33±7)ng/L比(42±9)ng/L,(62±13)U/L比(76±17)U/L,(5.0±1.2)ng/L比(8.7±2.4)ng/L],差异有统计学意义(均P<0.05),治疗后观察Ⅰ组、观察Ⅱ组患者上述细胞因子水平均较治疗前显著下降,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论干扰素α能有效降低CML患者血清疾病的相关细胞因子水平,调节CML患者的血清学表现及临床症状,值得在临床上推广应用。     

草分支杆菌疫苗治疗哮喘模型小鼠的实验研究

目的　研究草分支杆菌疫苗对哮喘模型小鼠的疗效及其作用机制。方法　将 18只BALB/c小鼠分为3组 ,每组各 6只 ,其中卵蛋白致敏哮喘组 (OVA组 )和草分支杆菌疫苗治疗组 (Utilin组 )皮下注射卵蛋白致敏制作哮喘模型 ,然后用卵蛋白激发 2次 ;阴性对照组 (NS组 )皮下注射生理盐水 (NS) ,然后NS激发 2次。Utilin组在激发前后分别给予草分支杆菌疫苗 0 .5 μg腹腔注射 3次 ,其他两组不作干预。 3组分别在第 2次激发后第 1、2、3、4周眼眶后静脉丛采血测OVA特异性免疫球蛋白IgE ,并于激发后第 4周处死小鼠测肺泡灌洗液 (BALF)中的细胞总数及嗜酸性粒细胞 (EOS)计数 ,肺组织病理切片观察形态学改变 ,并测定脾细胞培养上清液中OVA特异性IFN γ。结果　Utilin组BALF中细胞总数为 (2 9.5 1± 5 .81)× 10 4 /mL、EOS为 (2 .88± 0 .96 )× 10 4 /mL ,明显低于OVA组 [分别为 (4 0 .15± 6 .12 )× 10 4 /mL和 (6 .91± 1.92 )× 10 4 /mL],P <0 .0 5 ;Utilin组肺组织炎症反应较OVA组明显减轻 ;Utilin组脾细胞培养上清液中OVA特异性IFN γ的浓度为 (4 6 9± 86 )pg/mL ,明显高于OVA组 (193± 80 ) pg/mL ,P <0 .0 5 ;Utilin组激发后第 3周和第 4周OVA特异性IgE分别为 (0 .2 99± 0 .0 92 )(OD值 ) ,(0 .2 6 7± 0 .0     

氟替卡松联合孟鲁司特钠对儿童支气管哮喘肺功能及细胞因子的影响

目的探讨氟替卡松联合孟鲁司特钠对儿童支气管哮喘肺功能及细胞因子的影响。方法选择2013年7月至2015年7月在安康市中心医院治疗的120例哮喘患儿,采用随机数字表法将患儿分为联合治疗组和氟替卡松组,每组60例。氟替卡松组患儿给予氟替卡松气雾剂治疗(<4岁儿童每次50~100μg,每日2次;≥4岁儿童用量控制在500μg以下),联合治疗组在氟替卡松组治疗的基础上加用孟鲁司特钠治疗(口服,每次4 mg,每日1次)。两组患儿均治疗90 d。比较两组患儿的临床疗效以及治疗前后肺功能、哮喘症状评分、血清白细胞介素4(IL-4)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及免疫球蛋白E(Ig E)水平。结果联合治疗组的总有效率显著高于氟替卡松组[93.3%(56/60)比76.7%(46/60)](P<0.05)。治疗后,联合治疗组用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气量(FEV1)以及最大呼气流量占预计值百分比(PEF%)显著高于氟替卡松组[(2.9±0.4)L比(2.4±0.3)L,(2.9±0.6)L比(2.3±0.6)L,(89.9±10.3)%比(81.6±11.1)%](P<0.05);日间、夜间症状评分以及血清IL-4、IL-6,IL-8,TNF-α、Ig E水平显著低于氟替卡松组[(1.14±0.2)分比(2.04±0.4)分,(1.7±0.3)分比(2.8±0.5)分,(19.4±1.8)pg/L比(7.6±0.4)pg/L,(117.5±14.3)ng/L比(192.4±19.4)ng/L,(317.3±19.4)pg/L比(814.4±24.5)pg/L,(0.7±0.1)ng/L比(1.0±0.1)ng/L,(124.3±31.3)k U/L比(173.4±28.4)k U/L](P<0.05)。结论氟替卡松联合孟鲁司特钠治疗儿童支气管哮喘的疗效显著优于单用氟替卡松,其能改善患儿的肺功能,改善日间及夜间症状评分,降低机体IL-4、IL-6、IL-8、TNF-α和Ig E水平,抑制炎症反应程度。     

三生合欢饮抗抑郁作用及其对肠道菌群影响的实验研究

目的研究三生合欢饮抗抑郁作用及其对肠道菌群的影响。方法健康雄性昆明种小鼠60只,随机分为空白组、模型组、百忧解组及三生合欢饮高、中、低剂量组(15.04g/kg、7.52g/kg、3.76g/kg),每组10只。采用慢性应激和孤养的方法复制慢性应激抑郁小鼠模型。第21天测定小鼠体质量增加情况、糖水消耗、行为学以及脑内多巴胺递质含量等指标。第22天,采集各实验组小鼠粪便样品,采用ERIC-PCR技术获得反映肠道微生物群落结构特征的ERIC-PCR指纹图谱。结果与空白组比较,模型组小鼠在第14天后体质量增加显著降低[14天:(16.22±0.80)g比(20.34±1.06)g];21天:(20.04±1.62)g比(22.71±1.35)g;P0.01),与模型组相比,三生合欢饮高剂量组[14天:(17.93±0.94)g,21天:(22.58±2.15)g]、百忧解组[14天:(17.16±0.93)g,21天:(20.97±2.89)g]小鼠体质量增加明显高于模型组(P0.01);与空白组[14天:(3.94±0.80)m L,21天:(2.62±0.56)m L]比较,模型组小鼠糖水消耗[14天:(2.75±1.01)m L,21天:(2.05±0.76)m L]明显降低(P0.01,P0.05)。与模型组比较,第21天后三生合欢饮高﹑中﹑低剂量组小鼠糖水消耗量[(3.66±1.05)m L、(3.10±0.70)m L、(3.10±0.70)m L]显著增加(P0.01),百忧解组小鼠糖水消耗[(3.34±1.84)m L]亦明显增加(P0.01);与空白组[(248.67±43.64)次/s、(35.67±20.66)次/s]比较,模型组小鼠水平活动和垂直活动次数[(207.55±46.07)次/s]明显减少(P0.05),游泳不动时间[(77.44±64.79)次/s]明显增加(P0.05);与模型组比较,三生合欢饮低、中剂量组小鼠自主活动次数[(253.10±40.72)次/s、(251.90±45.39)次/s]显著增加(P0.01),低剂量组小鼠游泳不动时间[(44.70±40.48)次/s]明显减少(P0.05);与空白组[(1.21±0.34)μg/m L]比较,模型组多巴胺(DA)递质含量[(1.12±0.17)μg/m L]显著减少(P0.05);与模型组比较,三生合欢饮低剂量组DA含量[(1.31±0.25)μg/m L]明显提高(P0.05);EKIC-PCR指纹图谱显示,模型组与空白组在500bp以上条带位置、数量及丰度有较大差异,三生合欢饮中、低剂量组与空白组接近。结论三生合欢饮有较好的抗抑郁作用,并能调节抑郁模型小鼠肠道菌群。     

自拟清肺汤联合茶碱治疗支气管哮喘对肺功能保护及IgE、NO、ET水平影响

目的:观察研究自拟清肺汤联合茶碱治疗支气管哮喘对肺功能保护及Ig E、NO、ET水平影响。方法:选取2014年6月1日—2015年12月1日接收治疗的支气管哮喘患者150例,按照随机数表法分为观察组和对照组两组,观察组采用自拟清肺汤联合茶碱治疗,对照组仅采用茶碱治疗,观察比较两组患者临床疗效,肺功能1秒率(FEV1/FVC)、1秒用力呼气容积与预计值百分比(FEV1)、呼气峰值流速(PEF),哮喘控制测试量表(ACT)评分以及血清Ig E、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)的变化情况。结果:观察组患者总有效率(92.00%)显著高于对照组(80.00%),比较有统计学意义(P0.05),治疗前,两组患者肺功能情况比较差异较小,无统计学意义(P0.05),治疗后,两组患者肺功能FEV1、FEV1/FVC、PEF均有所上升,但是观察组FEV1(77.24±5.04)%显著高于对照组(66.73±4.34)%,观察组FEV1/FVC(70.63±7.34)%显著高于对照组(63.37±6.46)%,观察组PEF(72.12±4.43)m L/s显著高于对照组(67.23±3.98)m L/s,两组比较有统计学意义(P0.05),治疗前,两组患者ACT评分无较大差异(P0.05),治疗后,两组患者评分均有所上升,但观察组(25.12±1.57)分显著高于对照组(19.47±1.78)分,两组比较有统计学意义(P0.05),治疗前,两组患者的NO、ET水平差异较小(P0.05),治疗后,两组患者NO、ET水平均有降低,但观察组NO(69.36±5.79)μmol/L显著低于对照组(84.27±8.38)μmol/L,观察组ET(25.39±7.38)ng/L显著低于对照组(35.87±8.28)ng/L,两组比较有统计学意义(P0.05),治疗前,两组患者血清Ig E水平比较差异较小,无统计学意义(P0.05),治疗后,两组患者血清Ig E水平均有下降,但观察组Ig E(57.38±8.04)U/m L显著低于对照组(78.32±10.78)U/m L。结论:自拟清肺汤联合茶碱治疗支气管哮喘能够有效提高患者的临床疗效,显著提高患者ACT评分,降低患者Ig E、NO、ET水平,对肺功能保护有积极的作用。     

腹腔镜结直肠癌根治术的临床研究

目的研究腹腔镜结直肠癌根治术的临床价值。方法选择2012年5月至2015年3月乐山市市中区人民医院收治的结直肠癌患者80例为研究对象,采用随机数字表法分为腹腔镜组和开腹组,各40例。腹腔镜组进行腹腔镜下结直肠癌根治术,开腹组进行常规开腹结直肠癌根治术。比较两组患者的手术情况、炎症应激反应、胃肠功能、术后存活和复发情况。结果腹腔镜组患者手术时间、术中出血量、术后切口引流量、术后卧床时间等均明显低于对照组[(79±9)min比(121±16)min、(37±4)m L比(78±9)m L、(24±4)m L比(51±7)m L、(2.6±0.7)d比(4.1±0.6)d],差异有统计学意义(P<0.01)。腹腔镜组术后肿瘤坏死因子α、C反应蛋白、白细胞介素6、去甲肾上腺素、皮质醇均低于开腹组[(45±5)mg/L比(59±6)mg/L,(34.9±4.6)mg/L比(66.4±7.3)mg/L,(81±8)μg/L比(103±11)μg/L,(321±26)μg/L比(362±35)μg/L,(145±18)μg/L比(232±34)μg/L],差异有统计学意义(P<0.01)。腹腔镜组术后腹胀持续时间、肛门排气时间短于开腹组[(3.3±0.5)d比(4.9±0.7)d,(3.0±0.5)d比(4.1±0.5)d],胃动素、胃泌素高于开腹组[(225±28)ng/L比(168±21)ng/L,(118±12)ng/L比(88±10)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01)。术后3年,腹腔镜组病死率和复发率低于开腹组(P<0.05)。结论腹腔镜下结直肠癌根治术有助于减小手术创伤,缓解炎症与应激反应,保护胃肠功能,促进术后恢复,改善预后情况。     

cAMP直接激活的交换蛋白在哮喘小鼠气道重塑中的作用

目的:观察抑制环磷酸腺苷(cAMP)直接激活的交换蛋白(Epac)对慢性哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法:18只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组(PBS组)、哮喘组(OVA组)、Epac抑制剂组(ESI-09组),每组6只。3组小鼠均给予卵清蛋白(OVA)致敏,PBS组给予PBS激发,OVA组和ESI-09组给予OVA激发,其中ESI-09组于每次激发前30 min给予腹腔注射ESI-09(溶于DMSO)处理,PBS组和OVA组对应给予等浓度DMSO处理。末次激发24h后,取小鼠肺组织固定、切片行PAS、Masson三色染色及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学检测,以便分别对气道杯状细胞增生、胶原沉积及平滑肌细胞增生肥大等情况进行评估,结果以杯状细胞(PAS+)、胶原(Masson+)及平滑肌细胞(α-SMA+)着色面积/支气管基底膜周长(μm2/μm)表示。结果:OVA组和ESI-09组杯状细胞的增生均显著高于PBS组[3.05±0.12、11.45±1.28比0.00±0.00(PBS组未见PAS+区域),均P<0.01],且ESI-09组显著高于OVA组(P<0.05);Masson染色显示,胶原的沉积OVA组和ESI-09组均显著高于PBS组(3.40±0.35、5.28±0.58比1.10±0.11,均P<0.01),且ESI-09组显著高于OVA组(P<0.01);α-SMA免疫组化可见OVA组α-SMA的表达显著高于PBS组(3.90±0.23比2.48±0.39,P<0.05),且ESI-09组(5.55±0.59)又显著高于OVA组(P<0.05)。结论:抑制Epac明显加重了慢性哮喘小鼠模型气道重塑,因此cAMP-Epac信号通路可能对慢性哮喘小鼠气道重塑起保护作用。     

干扰素联合炎唬宁治疗对手足口病患儿血清细胞因子及免疫球蛋白水平的影响

目的探讨干扰素联合炎唬宁治疗对手足口病患儿血清细胞因子及免疫球蛋白水平的影响。方法选择2014年2月至2015年3月涉县医院儿科接诊的90例手足口病患儿进行研究。按照随机数字表法均分为对照组和观察组,各45例。对照组采用单纯干扰素治疗(按照8万U/kg用量选用α-2b干扰素,进行肌内注射,每日1次),观察组采用干扰素联合炎琥宁治疗(按照10 mg/kg的用量加入到浓度为5%葡萄糖液中静脉注射,每日1次)。治疗5 d后比较两组患儿血清细胞因子水平[肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10]、免疫球蛋白水平(Ig M、Ig G、Ig A)的变化情况及其治疗效果。结果治疗后,两组患儿的血清细胞因子均有所降低,观察组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10均低于对照组[(35±8)ng/L比(40±9)ng/L,(12±5)ng/L比(16±5)ng/L,(15±3)ng/L比(17±3)ng/L,(25±7)ng/L比(29±8)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05);观察组Ig M、Ig G、Ig A均显著高于对照组[(1.4±0.3)g/L比(1.2±0.3)g/L,(9.4±0.4)g/L比(9.2±0.4)g/L,(1.4±0.3)g/L比(1.2±0.3)g/L],差异有统计学意义(P<0.05);观察组的总有效率显著高于对照组[95.6%(43/45)比73.3%(33/45)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰素联合炎唬宁治疗手足口病患儿的抗炎效果良好,可显著提高疗效,值得临床推广。     

IL-27对哮喘小鼠血清IgE的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白（OVA）激发哮喘小鼠血清IgE的影响。方法 24 只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1 μg IL-27（溶于 50 μl PBS中）滴鼻给药,ELISA法测定小鼠血清IL-4和 IFN-γ 浓度,荧光酶标法测定小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度;计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞数量。结果 IL-27 组小鼠血清IL-4浓度为（45.6±10.1）μg/L,明显低于哮喘组的（79.3±14.8）μg/L（P 〈 0.05）;IL-27 组小鼠血清IFN-γ浓度为（63.8±11.5）μg/L,明显高于哮喘组的（25.7±8.2）μg/L（P 〈 0.05）;IL-27组小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度分别为（2.77±0.51）KU/L、（0.48±0.09）KU/L,均明显低于哮喘组的（5.88±0.86）KU/L、（1.89±0.15）KU/L（P均〈0.05）;IL-27组小鼠 BALF中嗜酸粒细胞数量为（2.21±0.33）×107/L,明显低于哮喘组的（12.82 ± 2.17）×107/L（P 〈 0.01）。结论 IL-27可能通过促进IFN-γ合成、抑制IL-4合成,降低哮喘小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度,降低BALF中嗜酸粒细胞数量。     

小鼠SEB/OVA变应性鼻炎模型的实验研究

目的 建立变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠模型,研究金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)和卵清蛋白(OVA)在建立AR模型中的作用. 方法 将40只6～8周Balb/c小鼠随机分为4组:OVA组、SEB组、OVA+SEB组、生理盐水组,并建立小鼠AR模型.采用析因设计分析各组小鼠临床症状评分、血清IgE和IL-4的水平,并对鼻黏膜行组织形态学观察. 结果 OVA组、SEB组、OVA+SEB组及生理盐水组小鼠的症状评分分别为:0.90 ±0.99、0.70±0.82、6.80±1.03、0.60±0.70,OVA、SEB交互效应P<0.01,有统计学意义,且OVA+SEB组鼻黏膜出现明显的AR形态学改变.血清IgE、水平分别为25.41 ±3.87ng/ml、20.11 ±2.23ng/ml、122.72±5.68ng/ml、18.67 ±2.00ng/ml;IL-4的水平分别为27.37 ±1.52pg/ml、24.05 ±2.13pg/ml、63.73 ±3.81pg/ml、23.50 ±2.62pg/ml,二者OVA、SEB交互效应均有统计学意义. 结论 只有SEB和OVA协同作用后可致小鼠AR,即SEB可以提高机体对OVA的易感性,发挥免疫佐剂的作用.     

不同浓度卵蛋白变应原对小鼠哮喘模型建立的影响

目的研究不同浓度卵蛋白(ovalbumin,OVA)变应原对小鼠的哮喘造模影响。方法96只6～8周龄SPF级雌性BALB/c小鼠随机分为8组,分别为PBS组(对照组)、10 μg组(A组)、20 μg组(B组)、50 μg组(C组)、100 μg组(D组)、200 μg组(E组)、500 μg组(F组)、1000 μg组(G组)。A～G组分别用含1%明矾的PBS配制相应浓度的OVA于第0、7和第14天对小鼠进行腹腔注射。于第21～27天连续7 d用含1%的OVA的PBS溶液雾化吸入激发各组小鼠。正常对照组使用PBS溶液致敏和激发。最后一次雾化吸入激发后24 h内,计数各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BLAF)中嗜酸性粒细胞的含量,ELISA法检测IL-4、IL-5的分泌量及其血清IgG2a、IgE抗体的水平;肺组织病理切片观察各组小鼠哮喘模型的效果,评价最优哮喘造模的OVA浓度。结果A～G组小鼠肺泡灌洗液中IL-4、IL-5含量均高于正常对照组(P<0.01),细胞因子水平随着OVA浓度的增高而逐渐下降;A～G组小鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数均高于正常对照组(P<0.01),从低浓度组至高浓度组嗜酸性粒细胞数从高向低变化;A～G组小鼠血清中总抗体IgE的水平均显著高于正常对照组(P<0.01),且随着OVA浓度的增高IgE水平逐渐下降。血清中IgG2a的水平则随OVA给药浓度的增高而逐渐增高;低浓度OVA致敏组小鼠肺组织标本可观察到明显的炎症浸润性病理表现,而高浓度组肺部组织病理变化不明显。结论低浓度的OVA连续致敏小鼠造成过敏性哮喘病理改变较为明显,随着OVA浓度的增高,造模效果逐渐降低,而高浓度的OVA则会导致模型小鼠发生免疫耐受。     

消乳块胶囊对乳腺肿瘤模型大鼠血浆IGF-1水平的影响

目的观察消乳块胶囊对乳腺肿瘤模型大鼠血浆胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法 64只50日龄SD健康雌性未孕大鼠随机分为模型组、治疗组各25只和对照组14只。模型组和治疗组大鼠均先经2次9,10-二甲基苯蒽(DMBA,15mg溶于1.5m L芝麻油,间隔1周)灌胃造模,同时治疗组大鼠以消乳块胶囊0.4g/(kg·d)灌胃,持续给药,在第11周和14周分批处死大鼠,取乳腺组织及肿瘤组织作常规病理检查,酶联免疫吸附法测定血浆IGF-1水平。结果与病理表现正常大鼠相比,乳腺癌变及增生大鼠血浆IGF-1水平升高明显[(138.65±8.54)ng/m L、(212.32±10.38)ng/m L比(97.70±5.16)ng/m L,P0.01],癌变大鼠增高更为明显,与增生大鼠相比,差异有统计学意义[(212.32±10.38)ng/m L比(138.65±8.54)ng/m L,P0.05]。模型组、治疗组11、14周时血浆IGF-1较对照组明显增高[11周:(196.99±7.85)ng/m L、(142.33±8.62)ng/m L比(101.46±7.07)ng/m L,P0.01;14周:(229.40±13.37)ng/m L、(138.75±8.82)ng/m L比(90.26±2.50)ng/m L,P0.01],治疗组11、14周血浆IGF-1水平较模型组有明显下降[11周:(142.23±8.62)ng/m L比(196.99±7.85)ng/m L,P0.01;14周:(138.75±8.82)ng/m L比(229.40±13.37)ng/m L,P0.01]。结论消乳块胶囊对DMBA诱导的大鼠乳腺恶性肿瘤具有部分预防作用,其机制可能是通过降低血浆IGF-1水平来实现。