S191株麻疹疫苗对陕西省麻疹流行株的血清学效果研究

[目的]分析陕西省近年麻疹流行的疫苗免疫因素，研究现行麻疹疫苗对流行株的实际保护效果。[方法]用微量中和试验测定麻疹疫苗免疫血清和麻疹病人急性期血清对麻疹疫苗株和野毒株的中和抗体水平。[结果]健康儿童麻疹疫苗免疫血清和有免疫史的麻疹病人急性期血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度（GMT）分别为61．04、30．24，明显低于对S191株的GMT105．61、83．72），S191株中和抗体效价≤8的健康儿童疫苗免疫血清中，有16．7％野毒株中和抗体阴性。[结论]由于麻疹流行株的抗原变异导致现行麻疹疫苗的保护力可能有所下降。     

麻疹病毒抗原性变异及免疫保护效果研究

目的 了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况以及麻疹疫苗的免疫保护效果。方法 采用麻疹国际标准株Edmonston株、疫苗株沪19l与近几年浙江省分离的麻疹野毒株(浙98-5和浙00-4)分别制备免疫血清，与各毒株进行交叉中和试验，并分别对不同来源的人群血清测定中和抗体滴度。结果 麻疹野毒株浙98-5与疫苗株沪川和Edm株的抗原比分别为3．0和2．6，浙00-4与上述两毒株的抗原比分别为7．30和5．65，其抗原性存在着明显的差异。麻疹疫苗初免儿童和麻疹急性期病人血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度(GMT)分别为15．03和5．04，明显低于疫苗株沪19l，GMT分别为68．12和11．76。但健康人群血清对两毒株的中和抗体滴度无显性差异。结论 浙江省麻疹野毒株已出现较明显的抗原性变异，现行麻疹疫苗的免疫保护效果也受到一定影响。     

陕西省麻疹高接种率和高发病率的原因分析

目的探讨陕西省麻疹高接种率下高发病率的病原学和疫苗免疫相关因素。方法分析麻疹病例年龄及免疫史。从咽拭子中分离病毒，用酚-氯仿抽提法提取病毒RNA，逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）扩增N基因-COOH端的450个核苷酸（bp）片段，进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定疫苗免疫血清及麻疹病例急性期血清中和疫苗株和野毒株的抗体水平。结果麻疹病例中有麻疹疫苗免疫史的平均占38．97％；麻疹病例急性期血清：有免疫史的中和S191株GMT（56．18）明显高于H1野毒株GMT（26．90）；无免疫史的S191株GMT（25．40）与H1野毒株（27．86）相近。疫苗免疫血清：S191株抗体效价≤16血清中有19．15％为H1野毒株抗体阴性。结论陕西省近年出现的麻疹高接种率水平下的高发病率现象不排除麻疹流行株变异和疫苗对流行株H1基因组野毒株保护性不足两方面因素。     

陕西省麻疹病毒基因分型及疫苗免疫因素分析

目的确定引起陕西省麻疹流行的病原毒株,探讨相关的疫苗免疫因素。方法采集麻疹病人咽拭子标本分离病毒,用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）扩增N基因碳末端的核苷酸450个（bp）片段,对扩增产物进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定健康人群麻疹病人急性期血清中和麻疹疫苗株和野毒株的中和抗体水平。结果从82份咽拭子中分离出19株H1基因型麻疹病毒。麻疹疫苗免疫血清和有免疫史麻疹急性期病人血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度（GMT）分别为26.36和26.90,明显低于疫苗株,GMT分别为49.30和56.18。结论陕西省近年麻疹流行是由H1基因型麻疹野病毒引起,不排除疫苗对目前流行株保护性不足的因素。     

辽宁省麻疹病毒流行株血凝蛋白特性分析

目的 比较辽宁省麻疹病毒流行株（MVW）和目前使用的疫苗株血凝蛋白基因（H）核苷酸（nt)及氨基酸（aa)序列差别,研究其生物学和免疫学特性及其基因型区别。方法 MVW流行株和长-47疫苗株的H基因1-1800nt及1-600aa序列分析;麻疹病人及疫苗免疫后的血清与MVW株和长-47疫苗株做中和抗体测定。结果 表明MVW株基因型不同于其它国家以前报道的MVW株基因型及我省现有物长-47疫苗株,有18-28个aa差异;还表明MVW株具有重要生物学和免疫学活性的aa位点,除aa238-240位点有一个aa发生变异外,其余均与长-47疫苗株相同,另外麻疹病人恢复期血清和麻疹疫苗初次免疫儿童（初免）后1个月的血清抗长-47及MVW毒株的中和抗体几何平均滴度（GMT）差别无显著性,但是麻疹病人恢复期血清对这两毒株中和抗体滴度均明显高于初免儿童的中和抗体滴度。结论 辽宁省的MVW株与长-47疫苗株基因型不同,说明MVW株nt存在变异,但是具有生物学和免疫学活性的aa位点多数未发生改变,长-47疫苗株仍然能保护MVW的感染。     

河北省麻疹病毒中和抗体变化情况

目的了解河北省循环的麻疹野病毒抗原变异情况以评估疫苗接种成效;掌握麻疹疫苗的保护效果,为制定消除麻疹的策略和措施提供科学依据。方法采集40份疑似麻疹患者咽拭子标本进行麻疹病毒分离,通过荧光定量PCR鉴定麻疹病毒;用健康人血清和麻疹患者血清分别中和麻疹疫苗株和野毒株,分别计算中和抗体滴度,比较毒株在中和抗体滴度上是否存在差异。结果用40份麻疹患者血清,分别中和麻疹野毒株(Hebei11-03和Hebei11-04)和疫苗株(S191),中和抗体GMT值分别为1∶59.9、1∶59.7、1∶60.4,差异无统计学意义(P0.05);用40份健康人血清同步进行中和实验,抗体GMT值分别为1∶56.0、1∶56.4、1∶69.3,抗体滴度差异有统计学意义(P0.05)。结论目前使用的麻疹疫苗产生的免疫力对于流行的麻疹野毒株仍具有抵抗力。但使用麻疹疫苗产生的麻疹免疫力明显低于野毒株感染所产生的免疫力。     

西安市麻疹流行病原毒株和疫苗免疫因素研究

目的 确定引起西安市麻疹流行的病原毒株，探讨相关的疫苗免疫因素。方法 采集麻疹病人咽拭子标本分离病毒，用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增N基因碳末端的450个核苷酸（bp）片段，对扩增产物进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定麻疹病人急性期和恢复期血清中和麻疹疫苗株和野毒株的中和抗体水平。结果 采集咽拭子标本13份，分离出麻疹病毒8株，分离率61．54％；8株麻疹病毒均为H1基因型H1a亚型。结论 H1基因型H1a亚型是引起西安市本次麻疹流行的病原病毒。此次麻疹流行不排除疫苗保护性下降因素和麻疹疫苗免疫工作中存在无效接种而造成的免疫空白。     

麻疹病毒疫苗株沪191和宁波麻疹病毒流行株血清交叉中和试验结果分析

目的分析麻疹病毒疫苗株[上海(沪)191,Shanghai191;S191]的免疫保护性,为探讨有效预防控制麻疹的措施提供参考。方法用微量中和试验测定不同人群血清对麻疹病毒疫苗株(S191)和浙江省宁波市麻疹病毒流行株(Ningbo2008-06)的中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平。结果 S191株麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)初次免疫(初免)血清,有MV免疫史麻疹患者急性期血清,麻疹患者恢复期血清,应急接种MV前、后血清,对疫苗株的NA几何平均滴度(Geometric MeanTiter,GMT)分别为1∶35.23、1∶4.16、1∶231.74、1∶37.81、1∶61.03;对麻疹病毒流行株的NAGMT分别1∶19.04、1∶2.21、1∶596.62、1∶32.25和1∶67.54。初免血清及有免疫史麻疹患者急性期血清,对疫苗株的NAGMT分别是流行株的1.85倍(t=2.537,P<0.05)和1.88倍(t=-2.696,P<0.05);麻疹患者恢复期血清对流行株的NAGMT是疫苗株的2.57倍(t=-3.054,P<0.05);而应急接种后血清中和疫苗株和流行株的NAGMT差异无统计学意义。小月龄婴儿血清随着月龄增长对疫苗株和流行株的NAGMT均下降,6月龄和8月龄婴儿对流行株的NAGMT分别为1∶2.60和1∶1.24。结论 S191株MV能中和宁波麻疹病毒流行株,只是中和能力略有下降;应急接种能显著增加麻疹NA水平;母传麻疹抗体6月龄后几乎无保护作用;有必要对现行MV免疫策略进行调整。     

广东省翁源县一起麻疹暴发的血清学和分子生物学研究

目的 分析广东省翁源县一起麻疹暴发的原因。方法 收集2001年12月广东省翁源县暴发麻疹流行资料，并从中收集病例急性期血清和咽拭子各6份，进行血清学检测，病毒分离和中和实验；通过RT－PCR扩增麻疹N基因碳末端589个核苷酸，并进行测序和种系分析。结果 麻疹暴发流行累计发病22例，6份病例血清的麻疹IgM抗体阳性率83．3％，6份咽拭子仅分离出一株麻疹病毒（韶关株），该麻疹流行株不同于中国疫苗株（S－191），鉴定为H1基因型；和目前国外流行株相比在核苷酸水平变异最大可达12．4％，和目前国内H1流行株相比在核苷酸水平变异在1．1％－2．7％；中和实验表明麻疹疫苗免疫后血清能够中和该野病毒，但其中和的滴度比中和疫苗株低2至4倍。结论 麻疹基因变异不会引起新的流行，人群抗体水平低下是该次暴发的根本原因。     

云浮市首例麻疹野病毒的血清学和分子生物学研究

目的：实验室诊断麻疹疑似病例和进行病原学分析。方法：收集2005年3月广东省云浮市1例麻疹病例流行病学资料，并收集病例急性期血清和咽拭子各1份，进行血清学检测，病毒分离和中和实验；通过RT-PCR扩增麻疹N基因碳末端589个核苷酸。并进行测序和种系分析。结果：该麻疹疑似病例确诊为麻疹病例，并分离出1株麻疹病毒，该麻疹流行株不同于中国疫苗株（S-191），鉴定为H1基因型；和目前国外流行株相比在核苷酸水平变异最大可达12．8％。和目前广东省H1流行株相比在核苷酸水平变异在1．1％-3．7％；中和实验表明麻疹疫苗免疫后血清能够中和该野病毒，但其中和的滴度比中和疫苗株低2至4倍。结论：云浮市存在麻疹病毒野毒株，病毒基因发生变异，现在使用麻疹疫苗免疫对易感人群仍然具有保护作用。     

2006年广西资源县麻疹野病毒分离株的抗原性研究

目的研究资源县发热出疹暴发疫情的病原,进行病毒抗原性分析,更有效预防控制疾病。方法采集患者血清及咽拭子,检测血清抗体和分离病毒。进行病毒中和实验(NT),评价麻疹野病毒与沪191疫苗株的抗原性差异。结果用Vero/SLAM细胞分离到麻疹野病毒GuangXi/06/2。患者血清对GuangXi/06/2的IgG与NT检测结果的Spearman等级相关系数(rs)为0.850;疫苗株免疫血清对GuangXi/06/2的IgG与NT检测结果的rs为0.747;疫苗株免疫血清对沪191疫苗株的IgG与NT检测结果的rs为0.786;其余各组检测结果无相关性。患者血清对GuangXi/06/2和沪191的中和抗体GMT分别为1:9.7和1:199.0,有显著性差异(P<0.01);疫苗免疫血清对两毒株的中和抗体GMT分别为1:43.5和1:71.8,无显著性差异(P>0.05)。GuangXi/06/2对沪191疫苗株的抗原比为3.52。结论麻疹IgG滴度与NT检测有很好相关性,资源麻疹患者发病早期血清对GuangXi/06/2中和作用较弱,而麻疹疫苗免疫血清对GuangXi/06/2中和作用较强,GuangXi/06/2野病毒抗原性与沪191疫苗株存在较大差异。     

浙江省麻疹野毒株抗原性变异分析

目的 了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况。方法 采用麻疹病毒标准株Edmonston、疫苗株沪19l与近几年浙江省分离的麻疹野毒株(浙江／5／98和浙江/4/2000)分别制备免疫血清，与各毒株进行交叉中和试验。结果 麻疹野毒株浙江／5／98与疫苗株沪19l和Edm株的抗原比分别为3．0和2．6，浙江/4/2000与上述3毒株的抗原比分别为7．3和5．65，其抗原性存在着明显的差异。结论 浙江省麻疹野毒株已出现明显的抗原性变异。     

2005年浙江麻疹流行株与疫苗株基因组比较分析

目的 通过对麻疹暴发疫情中分离的麻疹流行株MVi/Zhejiang.CHN/7.05/4与麻疹疫苗株沪191全基因组比较,分析当代麻疹流行株与疫苗株的基因差异.方法 通过测定从2005年浙江省麻疹暴发疫情中分离到的麻疹流行株MW/Zbejiang.CHN/7.05/4的全基因组序列,采用MEGA 3.1软件对流行株与疫苗株的全基因组序列进行比对和分析,并结合流行病学资料对毒株的变异进行分析.结果 流行株与疫苗株相比全基因组共发生822个碱基突变(变异率为5.17%),含161个异义突变,其中有3个变异位点导致了病毒糖基化位点的变异;用毒株制备抗血清进行交叉中和试验,流行株与疫苗株抗原比相差5.66倍.结论 浙江省2005年麻疹暴发疫情分离的流行株MVi/Zhejiang.CHI/7.05/4和中国现行使用的麻疹疫苗株沪191在全基因组层面已存在一定的差异,疫苗对免疫人群的保护作用需做进一步追踪探讨.     

70对母婴麻疹野病毒中和抗体检测结果分析

[目的]了解母婴的麻疹野病毒中和抗体水平及其相关性。[方法]采用中和试验的方法直接检测孕妇及新生儿的麻疹野病毒中和抗体水平并进行相关分析。[结果]孕妇及新生儿的麻疹野病毒中和抗体阳性率分别为91．52％和88．57％,平均几何滴度（GMT）分别为61．32和58．17;配对母婴的麻疹野病毒中和抗体水平呈高度正相关（r=0．899,P〈O．01）。当母体的抗体滴度≥l：16时,其子代抗体的阳性率可达100．00％。[结论]母婴的麻疹抗体水平密切相关,提高母源麻疹抗体水平应是控制低月龄小儿麻疹发病的重要措施之一。     

麻疹减毒活疫苗沪191株主种子批毒种安全性和免疫原性观察

目的评价新制备的麻疹减毒活疫苗（Measles Attenuated Live Vaccine,MV）沪191株主种子批毒种原疫苗的安全性和免疫原性。方法根据入选和排除标准,选择8～10月龄无麻疹病史、MV接种史和疫苗接种禁忌证的健康儿童,接种用沪191株主种子批毒种制备的MV0.5ml,于接种后30min、6h、24h、48h、72h、7d、14d、21d、28d观察局部和全身反应;并采集免疫前和免疫后28d血清,采用红血球凝集抑制（Hemagglutination Inhibition,HI）试验检测麻疹病毒抗体阳转率和几何平均滴度（Geometric Mean Titer,GMT）。结果受种者未见严重不良反应,免疫后28d血清中麻疹病毒HI抗体阳转率为100%,麻疹病毒抗体GMT为1：50.66。结论新制备的MV沪191株主种子批毒种疫苗,在适龄儿童中具有良好的安全性和免疫原性。     

Recombinant measles AIK-C strain expressing current wild-type hemagglutinin protein

We constructed a recombinant measles virus cDNA, pIC-MVAIK-H/87-K, in which the hemagglutinin (H) gene of the AIK-C vaccine strain was replaced by the wild-type (MVi/Tokyo.JPN/87-K: genotype D3) H gene and the remaining genes were the same as the AIK-C vaccine strain. To investigate the feasibility of the recombinant vaccine strain expressing wild-type H protein instead of the AIK-C H protein, we constructed two recombinant measles cDNA, having Leu (small plaque-type) and Phe (large plaque-type) at position 278 of the F protein. Infectious chimeric virus strains, MVAIK-H/87-K/S (small plaque-type) and MVAIK-H/87-K/L (large plaque-type), were recovered, which were designed to induce small (S) and large (L) plaques in Vero cells. The MVAIK-H/87-K/S and MVAIK-H/87-K/L did not grow at 39-40 degrees C, similar to the original AIK-C strain, and retained the temperature sensitivity (ts) characteristics. They did not induce cytopathic effect (CPE) in Vero cells but produced CPE in B95a cells, similar to the current wild-type measles MVi/Tokyo.JPN/87-K. From the results of Western blotting, the mobility of the H protein of MVAIK-H/87-K/S and MVAIK-H/87-K/L was similar to that of MVi/Tokyo.JPN/87-K. Hyper-immune sera raised by MVAIK-H/87-K/S neutralized all types of current wild strains. Thus, the chimeric measles virus expressing the current wild H protein demonstrated wild-type H properties with ts characteristics of the vaccine strain, indicating that the construction strategy of recombinant measles virus can cope with the hyper-mutated measles virus.