西安市麻疹流行病原毒株和疫苗免疫因素研究

目的 确定引起西安市麻疹流行的病原毒株，探讨相关的疫苗免疫因素。方法 采集麻疹病人咽拭子标本分离病毒，用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）扩增N基因碳末端的450个核苷酸（bp）片段，对扩增产物进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定麻疹病人急性期和恢复期血清中和麻疹疫苗株和野毒株的中和抗体水平。结果 采集咽拭子标本13份，分离出麻疹病毒8株，分离率61．54％；8株麻疹病毒均为H1基因型H1a亚型。结论 H1基因型H1a亚型是引起西安市本次麻疹流行的病原病毒。此次麻疹流行不排除疫苗保护性下降因素和麻疹疫苗免疫工作中存在无效接种而造成的免疫空白。     

陕西省麻疹高接种率和高发病率的原因分析

目的探讨陕西省麻疹高接种率下高发病率的病原学和疫苗免疫相关因素。方法分析麻疹病例年龄及免疫史。从咽拭子中分离病毒，用酚-氯仿抽提法提取病毒RNA，逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）扩增N基因-COOH端的450个核苷酸（bp）片段，进行序列测定和基因分型。用微量中和试验测定疫苗免疫血清及麻疹病例急性期血清中和疫苗株和野毒株的抗体水平。结果麻疹病例中有麻疹疫苗免疫史的平均占38．97％；麻疹病例急性期血清：有免疫史的中和S191株GMT（56．18）明显高于H1野毒株GMT（26．90）；无免疫史的S191株GMT（25．40）与H1野毒株（27．86）相近。疫苗免疫血清：S191株抗体效价≤16血清中有19．15％为H1野毒株抗体阴性。结论陕西省近年出现的麻疹高接种率水平下的高发病率现象不排除麻疹流行株变异和疫苗对流行株H1基因组野毒株保护性不足两方面因素。     

聊城市麻疹疑似病例血清学检测和麻疹病毒的基因分型

[目的]确定麻疹疑似病例的诊断和麻疹病原毒株的基因分型,为麻疹的预防提供科学理论依据.[方法]采集麻疹疑似病人的血清和病人的咽拭子标本,检测麻疹抗体和分离麻疹病毒.用ELISA法检测麻疹抗体,用酚-氯仿抽提法提取病毒悬液中的RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增N碳末端的核苷酸450个(bp)片段.对扩增产物进行序列测定和基因分型. [结果]从110份麻疹疑似病例中检测出69份麻疹抗体阳性,同时从该69例病人的咽拭子中分离出19株H1基因型麻疹病毒,其中H1a亚型14株,H1b亚型5株. [结论]最近几年我市的麻疹流行是由H1基因型麻疹病毒引起,并且流行株出现了变化.     

陕西省麻疹野病毒的分离及基因分型

目的了解陕西省麻疹病毒流行株的基因型别,探讨控制麻疹策略。方法在2000~2003年采集陕西省麻疹爆发和散发病人的咽喉拭子标本56份,用EB病毒转化的狨猴淋巴母细胞(B95a)分离到麻疹病毒15株。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从7株麻疹病毒中扩增出核蛋白(N)基因羧基端450个核苷酸片段,进行核苷酸序列测定和基因分型。结果7株麻疹病毒均属H1基因型,其中H1a4株,H1b3株,H1a和H1b在450个核苷酸片段中的差异为2%~4%。结论H1a和H1b在陕西省隔年流行,流行优势株的变化可能受本土病毒变异和邻省输入病毒的双重影响。     

麻疹病毒抗原性变异及免疫保护效果研究

目的 了解浙江省麻疹野毒株的抗原性变异状况以及麻疹疫苗的免疫保护效果。方法 采用麻疹国际标准株Edmonston株、疫苗株沪19l与近几年浙江省分离的麻疹野毒株(浙98-5和浙00-4)分别制备免疫血清，与各毒株进行交叉中和试验，并分别对不同来源的人群血清测定中和抗体滴度。结果 麻疹野毒株浙98-5与疫苗株沪川和Edm株的抗原比分别为3．0和2．6，浙00-4与上述两毒株的抗原比分别为7．30和5．65，其抗原性存在着明显的差异。麻疹疫苗初免儿童和麻疹急性期病人血清对麻疹野毒株的中和抗体几何平均滴度(GMT)分别为15．03和5．04，明显低于疫苗株沪19l，GMT分别为68．12和11．76。但健康人群血清对两毒株的中和抗体滴度无显性差异。结论 浙江省麻疹野毒株已出现较明显的抗原性变异，现行麻疹疫苗的免疫保护效果也受到一定影响。     

麻疹病毒分离及现行疫苗免疫效果分析

目的 分离麻疹流行病毒,与现用麻疹减毒活疫苗(Measles Vaccine,Live;MV)株病毒进行基因比较和交叉中和试验,以分析现行MV的免疫保护性.方法 由江苏省疾病预防控制中心提供2005年麻疹局部流行时急性期病人的咽拭子标本,用Veto/Slam细胞分离病毒,同时提取分离病毒和疫苗病毒核糖核酸,用逆转录-聚合酶链反应扩增血凝素蛋白(H)和核蛋白(N)基因,并进行核苷酸测序分析;另用MV免疫者的血清和麻疹病人的恢复期血清与分离野毒株和疫苗株进行交叉中和试验.结果 一次成功分离到4株麻疹野病毒,对其中1株(JS/26-05)作基因测序,N基因进化树分析为H1基因型;与疫苗株病毒基因比较,H基因核苷酸同源性为94.8%,氨基酸同源性为95.1%;N基因核苷酸同源性为94.4%,氨基酸同源性为96.2%,但碳末端150个氨基酸的同源性为90.0%.疫苗免疫者产生的中和抗体水平低于自然感染者,两者的抗体几何平均滴度分别为:针对野毒株1:9.56和1:22.40,针对疫苗株1:40.05和1:65.41,相差2.9～4.2倍;疫苗免疫产生的抗体中和野毒株的能力平均低于疫苗株4.2倍.结论 2005年江苏省局部地区麻疹流行时分离的病毒为H1基因型,麻疹分离株与现用疫苗株在基因水平上的差异明显,现用MV的免疫保护作用有所减弱,可能已影响到MV的免疫持久性.     

辽宁省麻疹病毒流行株血凝蛋白特性分析

目的 比较辽宁省麻疹病毒流行株（MVW）和目前使用的疫苗株血凝蛋白基因（H）核苷酸（nt)及氨基酸（aa)序列差别,研究其生物学和免疫学特性及其基因型区别。方法 MVW流行株和长-47疫苗株的H基因1-1800nt及1-600aa序列分析;麻疹病人及疫苗免疫后的血清与MVW株和长-47疫苗株做中和抗体测定。结果 表明MVW株基因型不同于其它国家以前报道的MVW株基因型及我省现有物长-47疫苗株,有18-28个aa差异;还表明MVW株具有重要生物学和免疫学活性的aa位点,除aa238-240位点有一个aa发生变异外,其余均与长-47疫苗株相同,另外麻疹病人恢复期血清和麻疹疫苗初次免疫儿童（初免）后1个月的血清抗长-47及MVW毒株的中和抗体几何平均滴度（GMT）差别无显著性,但是麻疹病人恢复期血清对这两毒株中和抗体滴度均明显高于初免儿童的中和抗体滴度。结论 辽宁省的MVW株与长-47疫苗株基因型不同,说明MVW株nt存在变异,但是具有生物学和免疫学活性的aa位点多数未发生改变,长-47疫苗株仍然能保护MVW的感染。     

沪191麻疹病毒疫苗株的核蛋白基因分析

目的研究沪191(S191)麻疹病毒疫苗株的核蛋白(N)基因.方法将S191株主代病毒(HK33HAM39CEC20)在实验室连续传递11代,从原代鸡胚细胞(CEC)20代连续传至CEC31代.除观察每代病毒培养特性外,还选其中的21、22、25、26、29、30、31代病毒及S191强毒株(HK33HAM45)、Edmonston(Ed)强毒株(HK28HAM40MRC-55),以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对这些病毒标本的N基因编码区的全长以及羧基末端的450个核苷酸区域进行片段扩增.结果通过N基因的序列分析发现,S191疫苗株与强毒株在N基因上有10～13个核苷酸差异,差异率为0.63%～0.82%.S191株主代病毒在CEC上连续传递11代的过程中,有2个代次病毒的个别核苷酸出现有义突变,分别导致第22代病毒的278位氨基酸Glu→Lys,第26代病毒的341位氨基酸Val→Lys,但这一变化不存在重复性,随着继续传代又恢复到21代的序列水平.结论S191麻疹病毒疫苗株在CEC长期传代过程中,各代次之间的N基因高变区序列一致,包括N基因中与免疫功能有关的3个B细胞表位区域的序列在传代中也无改变,故不可能影响到疫苗的免疫效果.     

输入性新型麻疹病毒D9基因型密切接触者中和抗体水平检测

目的了解输入性新型麻疹病例密切接触者血清对D9基因型病毒的中和抗体水平,探讨正常健康人群对感染新型麻疹病毒的抵抗力。方法采集D9基因型输入病例接触者血清和选择2008年四川省健康人群血清,分别用D9基因型输入病毒和本土流行株H1基因型病毒进行中和抗体滴度测定。结果 D9基因型输入病例接触者和四川健康人群血清的中和抗体滴度较高,对D9基因型输入病毒的中和抗体的几何平均滴度（以下简称GMT）分别为44.02和54.57,对四川本土流行株H1基因型病毒中和抗体的GMT分别为39.12和41.36,抗体滴度均达到保护水平（≥16）。结论无论四川省本土流行株感染产生的抗体和疫苗免疫诱生的抗体对D9基因型输入病毒都有抵抗力。     

麻疹病毒疫苗株沪191和宁波麻疹病毒流行株血清交叉中和试验结果分析

目的分析麻疹病毒疫苗株[上海(沪)191,Shanghai191;S191]的免疫保护性,为探讨有效预防控制麻疹的措施提供参考。方法用微量中和试验测定不同人群血清对麻疹病毒疫苗株(S191)和浙江省宁波市麻疹病毒流行株(Ningbo2008-06)的中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平。结果 S191株麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)初次免疫(初免)血清,有MV免疫史麻疹患者急性期血清,麻疹患者恢复期血清,应急接种MV前、后血清,对疫苗株的NA几何平均滴度(Geometric MeanTiter,GMT)分别为1∶35.23、1∶4.16、1∶231.74、1∶37.81、1∶61.03;对麻疹病毒流行株的NAGMT分别1∶19.04、1∶2.21、1∶596.62、1∶32.25和1∶67.54。初免血清及有免疫史麻疹患者急性期血清,对疫苗株的NAGMT分别是流行株的1.85倍(t=2.537,P<0.05)和1.88倍(t=-2.696,P<0.05);麻疹患者恢复期血清对流行株的NAGMT是疫苗株的2.57倍(t=-3.054,P<0.05);而应急接种后血清中和疫苗株和流行株的NAGMT差异无统计学意义。小月龄婴儿血清随着月龄增长对疫苗株和流行株的NAGMT均下降,6月龄和8月龄婴儿对流行株的NAGMT分别为1∶2.60和1∶1.24。结论 S191株MV能中和宁波麻疹病毒流行株,只是中和能力略有下降;应急接种能显著增加麻疹NA水平;母传麻疹抗体6月龄后几乎无保护作用;有必要对现行MV免疫策略进行调整。     

我院临产孕妇麻疹病毒保护性抗体水平研究

目的研究临产孕妇血清麻疹病毒（Measles virus,MV）保护性抗体水平,为预测母传抗体对婴幼儿的保护作用提供科学依据。方法酶联免疫吸附试验定量检测临产孕妇血清MV Ig G抗体水平,对结果进行统计分析。结果研究时段内共有419名临产孕妇,MV Ig G范围为5.5~28208.5m IU/m L,几何均数为1405.2±2202.9 m IU/m L,MV Ig G阳性率为89.50%,但MV Ig G对胎儿达保护性水平（超过1000 m IU/ml）者仅占44.39%;非杭州籍孕妇MV Ig G抗体达到对胎儿保护性水平的率显著高于杭州籍孕妇（P〈0.05）。结论本研究中的临产孕妇体内MV Ig G抗体处低水平,对胎儿的保护率低,建议育龄妇女孕前常规进行麻疹疫苗接种。     

贵州省B3基因型麻疹病毒分子特征

目的 分析贵州省2014年首次发现B3基因型麻疹病毒分子特征。方法 采集咽拭子经实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real-time RT-PCR)筛查麻疹病毒核酸。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增麻疹病毒核酸筛查阳性咽拭子,对麻疹病毒N基因羧基末端634个核苷酸片段进行扩增,对扩增产物进行序列测定和分析,构建基因亲缘性关系树。结果 Guizhou14-06(MVs/Guizhou.CHN/11.14/01)在亲缘关系上与WHO B3基因型参考株MVi/Ibadan.NGA/0.97/1(AJ232203)同属一个分支,与MVi/Ibadan.NGA/0.97/1(AJ232203)的核苷酸和氨基酸差异分别为2.00%和2.67%;与中国目前的优势流行参考株MVi/Hunan.CHN/0.93/7(AF045212)的核苷酸和氨基酸差异分别为10.8%和12.0%;与其他WHO 22个基因型参考株的核苷酸和氨基酸差异分别为4.40%~11.0%和4.67%~12.0%。结论 B3基因型麻疹病毒是贵州省首次发现的新基因型麻疹病毒,丰富贵州省麻疹病毒分子流行病学基线数据,并有助于麻疹病毒的控制和消除工作。     

江苏省2009年健康人群麻疹抗体水平监测分析

目的：了解和掌握江苏省不同年龄组健康人群的麻疹免疫现状,对其抗体水平进行监测。方法：使用酶联免疫吸附试验检测正常人群麻疹IgG抗体并计算阳性率。结果：2009年共监测5 075份标本,阳性率93.69%,各年龄组差异有统计学意义（χ2=724.66,P〈0.01）。不同地区之间麻疹抗体阳性率有显著差异（χ2=151.97,P〈0.01）。结论：江苏省健康人群的麻疹抗体阳性率普遍较高,发生大范围暴发流行的可能性不大,但个别地区个别年龄组仍有阳性率偏低现象,应注意加强免疫。     

1999年辽宁省健康人群抗麻疹病毒和中和抗体测定结果与麻疹发病率关系的分析

目的：了解辽宁省正常人群不同年龄组抗麻疹病毒抗体免疫水平。方法：1999年采集全省6个市地14个区县不同年龄组693份血清,使用B95A细胞以微量细胞培养方法测定抗麻疹病毒中和抗体。结果：2－4岁,20－25岁组抗体阳性率为94％,其它年龄组均在96％以上,但是2－4岁GMT开始下降,6－8,9－11岁组最低,这两个年龄组发病率也最高,此结果与1999年麻疹发病率吻合,结论：提示儿童在2岁和5岁时应各进行1次麻疹疫苗接种,鉴于1999年13－15岁组麻疹发病率是0．6／10万的情况,建议如果条件允许,14岁以下年龄应每隔5－6年普遍再接种1次麻疹疫苗。     

江苏省麻疹实验室网络运转情况分析

目的评价江苏省麻疹实验室网络运转情况。方法对江苏省2003-2010年麻疹实验室网络监测结果进行统计分析。结果共检测疑似麻疹血清标本28 348份,IgM抗体阳性19 966份,阳性率70.43%;1 298份咽拭子分离到麻疹毒株294株,病毒分离率为22.65%;检测正常人群血清10 473份,抗体阳性率为93.45%;检测免疫后血清标本1 384份,麻疹疫苗免疫成功率97.83%。结论江苏省麻疹实验室网络运转良好,可为加速控制麻疹提供科学依据。     

用RT-PCR方法直接检测麻疹病毒血凝糖蛋白(H)基因

目的 应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）法直接从临床麻疹患者的咽拭子及尿液中检出570bp的特异性H基因目的条带。方法 采集临床确诊为麻疹商例的咽拭子、尿液提取RNA，用RT－PCR方法扩增麻疹病毒血凝糖蛋白的570bp核苷酸片段。结果 22例病人的20份咽拭子样品中，均检测到相应条带，20份尿液中有18份检测到相应条带；采用RT－PCR一次扩增的产物，检测灵敏度即达到0.001 TCID50。结论 麻疹病人唾液样本的RT－PCR阳性率高于尿液，该方法可用于麻疹的病原学的快速辅助诊断，特别是对出疹初期就诊的临床符合，但麻疹IgM阴性的病例可进行进一步确诊。