人肺癌组织跨膜型TNF-α较分泌型TNF-α增多

正肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是炎性反应和肿瘤重要的连接分子之一。TNF-α分为跨膜型TNF-α(transmembrane TNF-α,tm TNF-α)和分泌型TNF-α(soluble TNF-α,s TNF-α)。既往更多研究集中在s TNF-α,而tm TNF-α在肺癌中的作用未见报道。本研究旨在探讨tm TNF-α与肺     

肿瘤坏死因子与慢性充血性心力衰竭

越来越多的研究表明细胞因子是许多心血管疾病病理生理变化的重要介质，而其中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)与慢性充血性心力衰竭关系的研究更是当今心血管科学的一大热点。自从Levine等在1990年首次报道慢性充血性心力衰竭(CHF)患者循环中TNF-α水平升高以来，人们对TNF-α在心力衰竭中的     

妊娠期高血压疾病患者血清TNF-α水平及胎盘TNF-α mRNA表达变化的意义

目的研究妊娠期高血压疾病患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及胎盘TNF-αmRNA表达变化的意义。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)检测24例患者(9例妊娠期高血压,11例子痫前期;子痫4例)和27例健康孕妇血清中TNF-α水平;采用RT-PCR技术检测胎盘中TNF-α的mRNA的表达水平。结果病例组血清TNF-α水平35.03±9.39 pg/ml,明显高于健康孕妇血清TNF-α水平17.85±4.67pg/ml(P<0.001);正常组胎盘未发现有TNF-αmRNA的表达,病例组中妊娠期高血压患者TNF-α水平12.52±2.97;并且患者血血清TNF-α水平及胎盘TNF-αmR-NA表达随疾病严重程度呈现增高趋势。结论血清TNF-α水平及胎盘TNF-αmRNA增高与妊娠期高血压疾病的发病有关,TNF-α可能参与了疾病的病理生理过程。     

肿瘤坏死因子TNF-α双向调节骨稳态

TNF-α对调节骨稳态起着至关重要的作用。然而,TNF-α参与骨重建的途径和机制仍不清楚。人们曾认为TNF-α是成骨分化的抑制剂和破骨形成的激活剂,最近却有研究表明TNF-α也可以促进成骨形成,这与以前的结论相悖。TNF-α对骨稳态的双向调节作用可能与其浓度、处理时间以及细胞所处的分化状态有关。本文基于近年来的研究发现,针对TNF-α在骨稳态调节中所发挥的作用进行归纳总结。     

急性早幼粒细胞白血病TNF-α基因多态性和蛋白表达水平的相关研究

目的 探讨北方地区汉族人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因型别的多态性和TNF-α蛋白表达与急性早幼粒细胞白血病(APL)的相关性.方法 对21例APL患者采用酶联免疫分析法(ELISA)测定TNF-α含量,应用顺序特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法检测TNF-α基因型别的多态性变化,并与31名健康献血者对照.结果 APL组血中TNF-α蛋白含量(1.810±0.116)显著高于对照组(1.107±0.095),P＜0.05;APL组和正常对照组TNF-α(308A)等位基因频率分别是(9.524%)和(9.68%)组间差异无统计学意义(P＞0.05),提示该等位基因频率与APL不相关,血中TNF-α蛋白表达增高与APL相关.结论 中国北方地区汉族人TNF-α基因308位点基因多态性与APL的易感性、临床以及预后可能不起重要作用;而TNF-α蛋白表达与APL的易感性相关联.     

再生障碍性贫血TNF-α基因多态性和蛋白表达水平的相关研究

目的探讨北方地区汉族人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因型别的多态性和TNF-α蛋白表达与再生障碍性贫血(AA)的相关性。方法对36例AA患者采用酶联免疫分析法(ELISA)测定TNF-α含量,应用顺序特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法检测TNF-α基因型别的多态性变化,并与31名健康献血者对照。结果AA组血中TNF-α蛋白含量(1.960±0.103)显著高于对照组(1.17±0.075),P<0.01;AA组TNF-α(308A)等位基因频率(40.12%)显著高于对照组(9.68%),P<0.01,提示该等位基因频率和血中TNF-α蛋白表达增高与AA相关。结论中国北方地区汉族人TNF-α基因308位点的多易感态性和TNF-α蛋白表达与AA的易感性相关联,TNF-α(308A)等位基因可能是AA的易感基因之一。     

LPS对寻常型银屑病患者外周血单核细胞合成和分泌TNF-α的影响

TNF-α主要由单核/巨噬细胞合成和分泌,分为分泌型TNF-α(secretory tumor necrosis factor-α,sTNF-α)和膜相关型TNF-α,其中sTNF-α可与MC膜受体结合而成为膜结合型TNF-α.本文对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激前、后寻常型银屑病患者外周血单核细胞(Monocytes,MCs)合成和分泌各型的变化进行了检测,进一步探讨它们在寻常型银屑病发病机制中的作用.     

肿瘤坏死因子-α在病毒性心肌炎发病中的作用及意义

目的：研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在病毒性心肌炎(VMC)发病中的作用及临床意义。方法：在建立VMC动物模型的基础上，用ELISA法检测VMC小鼠血清TNF-α的变化，同时用TNF-α单克隆抗体(mAb)和重组TNF-α(rTNF-α)进行干预治疗，比较干预组和对照组小鼠死亡率和心肌病变。结果：VMC小鼠血清TNF-α水平明显升高，VMC心肌炎细胞浸润、坏死与TNF-α的水平有关。TNF-α干预组小鼠死亡率增加，心肌炎细胞浸润增加，心肌坏死加重；而TNF-α mAb干预组小鼠死亡率明显减低，TNF-α mAb能减轻VMC的炎细胞浸润和心肌坏死。结论：TNF-α参与了VMC的免疫反应和发病机制，这对VMC的治疗有重要的指导意义。     

益赛普介导TNF-α调控UUO小鼠肾组织C3在肾间质纤维化中的作用机制

目的探索TNF-α是否通过调控UUO小鼠肾小管上皮细胞补体3(complement 3,C3)水平介导肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)及相关机制,而TNF-α受体拮抗剂益赛普(etanercept)能否拮抗TNF-α作用减轻RIF。方法将野生型(wide type,WT)与C3基因敲除(C3 knock out,C3KO)小鼠分别设置假手术(Sham)组、单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)组;另外,给WT UUO鼠腹腔注射不同浓度etanercept。观察WT UUO鼠及C3KO UUO鼠肾组织中TNF-α、C3的表达及TNF-α与表达C3肾小管的相关性及RIF程度;观察etanercept处理WT UUO鼠后各组肾小管上皮细胞表达TNF-α受体(TNF-αreceptor,TNFR)、NF-κB p65、肾小管C3表达及RIF程度。结果 UUO鼠肾组织几乎所有肾小管上皮细胞均表达TNF-α受体(TNF-αreceptor,TNFR)及UUO后肾组织高表达TNF-α,部分肾小管上皮细胞表达C3,表达C3肾小管周围有强阳性表达TNF-α细胞浸润;C3KO UUO组RIF程度较WT UUO组减轻(P0.01);经etanercept处理WT UUO鼠,肾小管C3和肾组织NF-κB p65表达均明显下降(P0.01),RIF减轻(P0.01)。结论 UUO术后TNF-α、C3均参与RIF,TNF-α可能通过调控肾小管上皮细胞转录因子NF-κB p65的表达介导肾小管上皮细胞C3产生参与RIF,而etanercept可能拮抗TNF-α减轻RIF。     

核因子-κB对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响

目的: 探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的影响。方法: 体外培养ASMCs，以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β₁ mRNA表达，Western blotting检测NF-κB、TGF-β₁的表达，免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位，四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖，Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡。结果: （1）TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01)。（2）TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01),TNF-α＋PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01)；TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01)。（3）TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01)，TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01)。（4）TNF-α组ASMCs的TGF-β₁的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋PDTC组（P<0.01）。结论: NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β₁的表达和分泌。     

LDL诱导THP-1细胞炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β的顺序表达

目的探讨LDL诱导THP-1细胞内炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β表达及3种炎性因子的关系,为早期诊断动脉粥样硬化提供依据。方法采用实时荧光定量PCR检测LDL刺激的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达,TNF-α抑制剂刺激THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达及TNF-α抑制剂对LDL诱导的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA表达影响;采用流式细胞仪检测TNF-α抑制剂刺激的THP-1细胞凋亡情况。结果 LDL刺激THP-1细胞FOS m RNA的表达0.5 h达到高峰(P0.05),TNF-αm RNA的表达1 h开始上升并达到最高(P0.05),IL-1βm RNA的表达1 h开始上升(P0.05);TNF-α抑制剂不促进细胞凋亡,100μg/ml时凋亡率最低。TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 2 h表达下降(P0.05),TNF-αm RNA 1 h表达上升(P0.05),2 h表达下降(P0.05),IL-1βm RNA 1 h表达下降(P0.05);LDL诱导细胞1 h后加入TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 1 h表达下降(P0.05),TNF-αm RNA 0.5 h表达下降(P0.05),IL-1βm RNA 0.5 h表达下降(P0.05)。结论 LDL能够促进THP-1细胞内FOS、TNF-α、IL-1β的表达,且它们之间有一定的表达顺序,TNF-α能促进IL-1β的表达。     

黄芪对肾病综合征患者血清和尿肿瘤坏死因子水平的影响

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在肾病综合征(NS)发病中的作用,观察黄芪对肾病综合征TNF产生水平的影响。方法104例NS患者在接受强的松和环磷酰胺治疗的基础上随机分为黄芪组和对照组,黄芪组加用黄芪注射液静脉注射,以ELISA检测治疗前及4周后血清及尿TNF-α水平。结果NS患者血清和尿TNF-α水平显著增高(P<0.01),伴轻度肾功能损害患者血清TNF-α水平显著高于肾功能正常者(P<0.01)。4周后NS患者血清及尿TNF-α水平显著下降(P<0.01),黄芪组较对照组变化尤著(P<0.05)。黄芪组的白细胞减少发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论TNF-α参与了NS发病过程,黄芪可通过调节TNF-α产生减轻NS的免疫损害,同时可减少环磷酰胺的副作用。     

2型糖尿病患者血清IGF-1、TNF-α与视网膜病变的关系

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在2型糖尿病(DM)视网膜病变(DR)发病中的作用。方法:应用酶联免疫吸附方法(ELISA)对127例2型糖尿病患者及36例健康人血清中的IGF-1和TNF-α进行测定。结果:(1)DM组血清IGF-1的含量低于对照组(P<0.01),而TNF-α的含量高于对照组(P<0.01)。(2)BDR组的IGF-1、TNF-α的含量高于NDR组(P<0.05)。(3)PDR组的IGF-1、TNF-α的含量高于NDR组(P<0.01)。(4)DR的严重程度与IGF-1、TNF-α水平呈正相关(P<0.01)。结论;TNF-α的过度表达及IGF-1的降低在DM的发病机制中起重要作用,而糖尿病合并视网膜病变时,血中IGF-1和TNF-α水平升高,IGF-1和TNF-α可能参与了DR的发生和发展。     

PI3K对心梗大鼠TNF-α表达的影响

目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂LY-294002对心梗大鼠心肌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法 45只SD大鼠,随机分为假手术组、心肌梗死组和PI3K抑制剂组。分别用Western blot和RT-PCR方法检测各组大鼠梗死区及其周围心肌TNF-α蛋白和TNF-α mRNA表达变化。结果 心肌梗死组心肌梗死区及其周围心肌TNF-α蛋白、TNF-α mRNA表达水平显著高于假手术组(p<0.05),PI3K抑制剂组心肌梗死区及其周围心肌TNF-α蛋白、TNF-α mRNA表达水平则明显低于心肌梗死组(p<0.05)。结论 PI3K能够上调心肌梗死大鼠TNF-α的表达。     

TNF-α对大鼠离体心肌组织块单相动作电位的影响及机制研究

目的:检测TNF-α对离体心肌组织块单相动作电位时程(MAPD)及离子通道电流的影响,初步探讨心梗后TNF-α诱导电生理异质性致室性心律失常发生的可能机制。方法:在离体大鼠心脏灌流的条件下,分离心肌组织块,电生理实验技术记录在不同浓度TNF-α灌流条件下的MAPD。用酶解法分离大鼠的心室肌细胞,应用膜片钳全细胞技术记录不同浓度TNF-α对单个心室肌细胞Ito和IK1的影响。结果:与对照组相比较,离体心肌组织块心内膜和心外膜MAPD浓度依赖性地随着TNF-α浓度的增加而增大(P<0.05);相同浓度TNF-α对心内膜和心外膜MAPD有不同的影响,尤其显著延长了心内膜的MAPD。经依那西普(TNF-α受体螯合剂)预处理后,相同浓度TNF-α对心内膜和心外膜MAPD影响不同导致的差异显著降低(P<0.05)。将TNF-α作用于大鼠心室肌细胞,与对照组相比较,Ito和IK1电流密度随着TNF-α浓度的增加而降低(P<0.05)。结论:TNF-α对心内膜及心外膜单相动作电位的不同影响可能对急性心梗后室性心律失常的形成有诱导或促进作用,其机制可能与TNF-α浓度依赖性抑制Ito和IK1电流,引起动作电位复极化异常从而诱发折返性心律失常有关。     

PKC在人肾小球系膜细胞IP3R1表达中的作用

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)对人肾小球系膜细胞(HMCs) IP3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过率下降的发生机制提供理论依据.方法 用实时定量PCR和免疫印迹检测IP3R1 mRNA和蛋白表达的情况,并分别用蛋白激酶C(PKC)激动剂PMA、PKCα、PKCδ特异性抑制剂及HA-DN-PKCα质粒转染干预上述诱导实验检测IP3 R1的表达变化.此外,免疫印迹检测TNF-α对p-PKCα蛋白的表达影响.结果 TNF-α明显上调IP3 R1蛋白和mRNA表达.PMA、PKCα抑制剂Safingol和HA-DN-PKCα质粒瞬时转染预处理HMCs后,均能明显阻断TNF-α诱导IP3 R1蛋白的表达,而PKCδ抑制剂Rottlerin预处理后,对IP3 R1蛋白表达无明显影响.此外,TNF-α刺激HMCs,各不同时间组总PKCα蛋白表达无明显差异,而TNF-α刺激8 h p-PKCα蛋白表达明显增加.结论 TNF-α能上调人系膜细胞IP3 R1蛋白及mRNA的表达,TNF-α活化PKCα是TNF-α上调IP3 R1表达的重要上游信号.     

早期自然流产患者TNF-α异常表达

目的探讨自然流产患者母胎界面肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的异常表达.方法采用半定量免疫组化技术,检测30例早期自然流产患者(自然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)绒毛和蜕膜组织内TNF-α表达强度.结果自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组(P＜0.01).结论早期自然流产患者细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于正常妊娠组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产.     

肿瘤坏死因子-α激活大鼠心肌细胞核转录因子-κB活性

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠心肌细胞(H9C2)核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响.方法 体外培养大鼠心肌细胞(H9C2),以TNF-α刺激,凝胶迁移滞后实验(EMSA)检测NF-κB活性,Westen blot及Alamarblue法分别检测P65蛋白与细胞增殖.结果 TNF-α刺激后NF-κB活性明显增高,且TNF-α对细胞生长有抑制作用.结论 TNF-α对大鼠心肌细胞(H9C2)的调节作用,部分是通过激活NF-κB信号通路实现的.     

沙利度胺治疗多发性骨髓瘤前后血清TNF-α水平变化的观察

为观察沙利度胺治疗多发性骨髓瘤(MM)前后TNF-α水平。选择20例沙利度胺治疗的难治、复发性多发性骨髓瘤患者,所有病例均于治疗前留取血浆标本,治疗有效组在最大反应率时留取标本,治疗无效组在治疗结束后留取标本。采用酶联免疫吸附法测定血浆TNF-α水平。结果显示沙利度胺治疗有效组、无效组治疗前TNF-α水平无明显差异。沙利度胺治疗有效组,治疗前后血浆TNF-α水平分别是(55.2854±11.3558)pg/ml和(29.2842±11.5684)pg/ml,治疗前血浆TNF-α水平明显高于治疗后(P=0.0001);治疗无效组,治疗前后血浆TNF-α水平分别是(54.0688±6.4732)pg/ml和(54.4672±3.3512)pg/ml,无明显差异(P=0.87310)。结论:沙利度胺治疗有效组可明显减少MM患者TNF-α水平,进一步支持TNF-α在多发性骨髓瘤发生、发展中的作用,同时说明TNF-α水平可以作为判断疗效的指标。     

足月前胎膜早破患者肿瘤坏死因子α基因多态性及羊水中表达分析

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因启动子区-308位点单核苷多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)及其羊水中TNF-α水平与足月前胎膜早破(PPROM)发病的关系。方法收集100名PPROM患者、150名正常足月分娩患者外周血,提取基因组DNA,进而采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法检测TNF-α基因-308位点SNP的基因型。其中71例PPROM和50例正常足月分娩患者同时收集到羊水样本。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测羊水中TNF-α浓度;结果 1.研究结果显示:PPROM组与正常对照组比较:TNF-α-308位点TNF-α基因启动子区-308位点GG/GA+AA基因型分布及G/A等位基因频率均存在显著性差异,(均P0.05)。2.PPROM组羊水中TNF-α浓度为104.25±8.71明显高于正常对照组(70.18±9.03),两组TNF-α浓度有统计学差异(P=0.000)。3.A等位基因携带(即G/A+A/A基因型携带者)TNF-α浓度为105.42±7.76明显高于G/G基因型携带者(69.21±8.87),两者比较有显著性差异(P=0.000)。结论 1.羊水中TNF-α浓度明显升高是胎膜早破发病的重要机制中之一;2.TNF-α-308位点SNP与TNF-α的表达有关,携带-308A等位基因可使羊水中TNF-α高表达,是PPROM患病的易感基因。