河南山东部分地区家猫汉赛巴尔通体感染情况调查

目的 调查河南、山东部分地区家猫汉赛巴尔通体血清抗体及菌血症情况.方法 间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法调查314份家猫血清抗体情况,通过聚合酶链反应(PCR)和测序对血培养产物进行病原学鉴定.结果 用ELISA法共检测314份标本,总的抗体阳性率为29.6%,＜6月龄的幼猫阳性率较低(19.3%),＞2岁的老猫抗体阳性率最高(37.5%),雌性和雄性之间没有明显差别,血培养共培养出42份可疑阳性,PCR及序列分析证实为汉赛巴尔通体.结论 河南、山东部分地区家猫均存在汉赛巴尔通体感染情况,汉赛巴尔通体是家猫感染的主要菌种.     

新疆古尔图地区长尾黄鼠感染病原体情况调查

目的调查新疆维吾尔自治区（新疆）古尔图地区长尾黄鼠汉赛巴尔通体、伯氏疏螺旋体和嗜吞噬细胞无形体等病原体感染情况,分析该地区自然疫源性疾病流行风险,为制定防控措施提供科学依据。方法2017年5 — 9月采用一日弓形夹法捕捉查岗果勒、布兰布拉克、白石头等地长尾黄鼠86只,无菌采集鼠体肾脏,试剂盒法提取全基因组DNA;运用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测样本汉赛巴尔通体ssrA基因、伯氏疏螺旋体recA基因和嗜吞噬细胞无形体Msp2基因。结果共检测86只长尾黄鼠样本,其中汉赛巴尔通体阳性42份,阳性率为48.84%;伯氏疏螺旋体阳性6份,阳性率为6.98%;嗜吞噬细胞无形体阳性3份,阳性率为3.49%。 布兰布拉克地区的汉赛巴尔通体感染率高于查岗果勒和白石头地区,白石头地区的伯氏疏螺旋体和嗜吞噬无形体感染率高于其他两地。结论新疆古尔图地区长尾黄鼠存在汉赛巴尔通体、伯氏疏螺旋体和嗜吞噬细胞无形体感染。     

巴尔通体MALDI-TOF MS数据库的建立与鉴定方法的评价

目的建立巴尔通体的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)数据库和质谱鉴定方法,利用野生菌株进行验证、评价。方法应用MALDI-TOF MS采集巴尔通体ATCC标准菌株和国内流行菌株的质谱数据,每株菌采集24张的质谱图集,获得特定的蛋白指纹图谱,汇总成不同种巴尔通体的标准质谱图,建立巴尔通体MALDI-TOF MS标准数据库。比较乙醇-甲酸提取法和直接涂抹法对质谱鉴定结果的影响,并进行重复性实验评估方法的稳定性。进一步应用173株野生巴尔通体菌株评估该标准数据库和相应的质谱鉴定方法。结果应用汉赛巴尔通体、五日热巴尔通体和杆菌样巴尔通体等21种/亚种巴尔通体,共计200株多地区来源的地理菌株,建立了巴尔通体MALDI-TOF MS蛋白指纹图谱标准数据库。2种样品制备方法均可以达到正确鉴定标准,提取法质谱得分略高于直接涂抹法。应用8种、16株巴尔通体菌株进行的重复性验证,得分为(9.078±0.031)~(9.776±0.006)分,变异系数(CV)为0.06%~1.12%。14种、173株巴尔通体测试菌株的质谱鉴定得分为9.014~9.796分,平均(9.462±0.195)分,在种水平上能被正确识别。结论基于该研究自主建立的巴尔通体质谱数据库,MALDI-TOF MS技术能够快速、准确鉴定巴尔通体种类,该课题组所建立的巴尔通体质谱标准数据库具有重要应用价值,对临床上巴尔通体病的实验室检验与诊断具有重要意义。     

云南省德宏州居住区啮齿动物携带巴尔通体的调查研究

目的 调查云南省德宏傣族景颇族自治州（德宏州）居住区啮齿动物的巴尔通体感染和分布特点,为相关疾病防制提供参考依据。方法 采用笼夜法捕鼠,采集鼠类脾脏标本,用胰酶大豆琼脂培养基分离巴尔通体,用聚合酶链式反应法扩增巴尔通体gltA基因片段,并进行核苷酸序列测定和系统发育分析。结果 2011年在德宏州居住区共捕获啮齿动物5属9种340只和食虫动物2种18只,黄胸鼠为优势种（77.09%,276/358）。这些动物的脾脏标本中巴尔通体分离率为24.86%（89/358）,其中黄胸鼠分离率为28.99%（80/276）,其他阳性鼠种为黑缘齿鼠（5株）、社鼠（1株）、大绒鼠（1株）、小泡灰鼠（1株）和臭鼩鼱（1株）。共获得85株巴尔通体gltA基因核苷酸序列,进化分析表明,40株为特利波契巴尔通体（Bartonella tribocorum）,28株为伊丽莎白巴尔通体（B.elizabethae）,11株为昆州巴尔通体（B.queenslandensis）,3株为森林巴尔通体（B.silvatica）,3株未定种。黄胸鼠携带上述所有种类的巴尔通体。结论 德宏州啮齿动物中至少存在4种巴尔通体的流行,巴尔通体具有遗传多样性特点。以特利波契巴尔通体、伊丽莎白巴尔通体和昆州巴尔通体为主要流行菌株,黄胸鼠为当地居住区巴尔通体的主要宿主。今后应加强巴尔通体相关疾病的监测和防制工作。     

巴尔通体体外药敏试验方法研究

目的优化巴尔通体体外药敏试验方法,检测多种抗生素对巴尔通体的最低抑菌浓度(MICs),并分析耐药性。方法优化Etest法试验条件;将该方法与琼脂稀释法进行比较,评价该方法的可靠性。采用Etest法,检测了7株ATCC参考株对22种抗生素的MICs,数据分析使用SPSS 13.0软件。结果确定含5%羊血的胰酶大豆琼脂培养基为最佳培养基、2.0 MCF(麦氏浊度)度为最佳细菌接种浓度,7天为最佳孵育时间。测试的7株巴尔通体在体外对强力霉素等13种抗生素敏感(MIC0.016),对克林霉素等4种抗生素MIC偏高。结论 Etest法简便易行、定值准确、重复性好、结果可靠,可以用于巴尔通体体外药敏试验,并获得了巴尔通体的一些体外药敏数据,为将来制订巴尔通体药敏标准提供一定的依据。     

猫抓病四例诊治体会

猫抓病是由猫抓人或咬人引起的急性传染病,病原体是汉赛巴尔通体,80%与猫抓咬伤有关,狗、兔、猴抓咬伤也可引起该病的发生[1]。随着家养宠物及流浪猫的增多,猫抓病发病率也呈上升趋势。近年来我院外科门诊收治4例,现回顾临床资料如下。1病例资料【例1】男,12岁。因发现右侧颈部     

鼠传巴尔通体流行概况

巴尔通体病是由巴尔通体病原菌感染引起的一大类新发人兽共患传染病。巴尔通体广泛分布于哺乳动物中,特别是在啮齿动物中有较高的感染率,可导致全身多器官疾病,呈全球性分布,威胁人类健康。啮齿动物作为其最大宿主群在全球广泛分布,是致病菌株来源的潜在风险源。为了解全球鼠传巴尔通体的流行现状和特点,以鼠传巴尔通体在世界范围内的感染流行情况为基础,了解和分析全球鼠传巴尔通体的流行特征。     

巴尔通体对19种抗生素体外敏感性分析

目的 检测巴尔通体菌株对10类19种抗生素最低抑菌浓度（MICs）,分析药物敏感性及耐药性,为指导临床用药和耐药监测提供实验和数据参考。方法 采用E试验法,检测巴尔通体属11种、35株菌株对强力霉素、阿奇霉素、利福平等19种抗生素的MICs。将培养的巴尔通体菌制成McFarland（MCF）2.0浊度的菌悬液,均匀涂布于含5%去纤维羊血的胰酶大豆琼脂培养基上,置5% CO2的37℃培养箱培养。培养5~7 d后判读MICs。结果 35株巴尔通体菌在体外对强力霉素、阿奇霉素、红霉素、克拉仙霉素等13种抗生素敏感,MICs 0.016 mg/L;34株对利福平敏感,MICs 0.002 mg/L;对克林霉素、丁胺卡那霉素、万古霉素、多粘菌素和磺胺类5种抗生素不敏感,MICs较高。结论 绝大多数巴尔通体菌对强力霉素等14种抗生素敏感,但也对克林霉素等5种抗生素不敏感,在对巴尔通体病进行治疗时要注意选择敏感药物。     

2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体感染状况调查

目的调查2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体的自然感染情况。方法2017年3—7月在剑川县用笼捕法捕获鼠形动物，无菌采集其股动脉血并提取DNA，应用荧光定量PCR技术进行巴尔通体检测，对检测阳性的血液样本进行巴尔通体分离培养。结果从剑川县沙溪镇石龙村及金华镇西门社区共捕获鼠形动物372只；经荧光定量PCR检测，阳性208份，阳性率为55.91%；11种鼠形动物中有10种检出阳性，其中大绒鼠的阳性率为38.73%，齐氏姬鼠为72.49%，贝氏树鼩为7.14%，中华姬鼠为77.78%，赤腹松鼠、社鼠、褐家鼠为50.00%，大足鼠、巢鼠为100.00%；阳性样本经分离培养后获得19株巴尔通体。结论TaqMan探针荧光PCR技术是巴尔通体感染的快速诊断方法。 剑川县鼠形动物中感染较高的为巴尔通体，受感染的鼠种较多，其中以齐氏姬鼠与大绒鼠较高，人群与外环境的鼠类接触存在感染发病的风险。     

鼠形动物自然感染巴尔通体的研究进展

巴尔通体为革兰染色阴性杆菌，寄生于脊椎动物红细胞内，可引起巴尔通体病。随着交通、旅游业的发展和原生环境的开发，人类与鼠形动物的接触机会增多，可能导致巴尔通体病大范围传播，对人类健康造成潜在的威胁。本研究对巴尔通体的生物学特性、宿主动物、传播媒介以及流行现状等方面进行了综述。     

产气荚膜梭菌分子分型研究进展

产气荚膜梭菌是自然界常见的致病菌,广泛分布于人类和动物的胃肠道、食品和环境中,已被美国、欧盟部分国家及日本列为食源性疾病暴发的主要原因之一。 近年来产气荚膜梭菌感染在全球呈上升趋势。 目前该菌的分子流行病学方面研究较多,常用的分子分型方法包括脉冲场凝胶电泳、多位点序列分型、核心基因多位点序列分型、单核苷酸多态性分析、毒素分型等。 分子分型技术对研究产气荚膜梭菌的暴发溯源、流行情况、遗传演化规律与种群特征具有重要意义,同时分子分型方法的不断创新与改进能够提高产气荚膜梭菌感染检测与诊断的有效性、准确性。     

2018年浙江省余姚市一起伊桑吉沙门菌引起的食源性疾病暴发事件调查

目的研究2018年浙江省余姚市发生的一起因食用被伊桑吉沙门菌污染的烤鸭引起的食源性疾病暴发事件,了解病原的生物学特性、分子分型及药敏特征。方法使用国家标准对可疑食品样本进行致病菌检测,对收集的沙门菌进行系统生化和血清型鉴定,利用纸片扩散法进行药敏试验,采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和全基因组测序（WGS）方法进行分子分型分析,通过查阅患者就诊记录和回访进行流行病学、临床和实验室调查。结果经流行病学调查和实验室检测确认为一起因食用被伊桑吉沙门菌污染的烤鸭引起的食源性疾病暴发事件,共分离到3株伊桑吉沙门菌,均为单耐药株（耐复方新诺明）。 3株菌PFGE带型完全一致,均为ST216型,全基因组多位点序列分型（wgMLST）分析发现2株患者分离株存在1个差异等位基因,但均携带126种已知毒力基因和1个氨基糖苷类耐药基因aac（6）-Iaa。结论此次事件为一起因食用被ST216型伊桑吉沙门菌污染的烤鸭引起的食源性疾病暴发事件,为余姚市首次报道。     

上海市首次宠物龟暴露致幼儿感染波摩那沙门菌病例调查

目的对2019年6月18日上海市1例腹泻伴发热患儿及家庭宠物龟样品进行病原分析,追踪感染源。方法收集调查病例临床信息并基于知情同意开展家庭入户的流行病学调查（流调）,采集病例样品、宠物龟和养殖缸内水等流调样品进行病原检测,对不同来源的沙门菌分离株进行血清型、抗生素耐药和分子分型分析。结果病例粪便、宠物龟肛拭及龟壳表面涂抹拭子和养殖缸内水样中均分离到波摩那沙门菌,所有菌株的抗生素耐药谱（对四环素类抗生素耐药）和分子分型型别完全一致。 结合病例特征和流调结果判断家庭饲养的宠物龟是导致幼儿感染的传染源。结论本案例系上海市首次溯源居家幼儿暴露宠物龟致沙门菌感染的案例,提示沙门菌某些血清型与宠物龟存在优势定殖,低年龄幼儿是行为生态型传染病的高危易感人群,政府部门应协防商业养殖宠物龟的污染,提升病例溯源能力,普及健康教育。     

2019年浙江省台州市1例新生儿流行性脑脊髓膜炎病例病原学分析

目的对2019年1月浙江省台州市1例流行性脑脊髓膜炎（流脑）病例及密切接触者进行病原学特征分析,为流行病学调查提供分子溯源依据。方法对患者血液标本、脑脊液标本和10名密切接触者的咽拭子进行脑膜炎奈瑟菌分离,对分离菌进行生化、血清分群鉴定以及体外药敏试验,同时采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分型（MLST）进行分子分型分析。结果从患者血液标本和2名密切接触者咽拭子标本中分离到3株脑膜炎奈瑟菌,患者和1名密切接触者的菌株血清群均为B群,另1名密切接触者的菌株为不可分群。 药敏结果显示,3株菌株对头孢呋辛钠、头孢曲松、美洛培南等敏感,对米诺环素不敏感,对环丙沙星和复方新诺明耐药,对青霉素G和氯霉素中介。 PFGE分型显示,3株菌的相似度为100%,MLST均为ST-5664型,属于高致病性ST-4821克隆群。结论台州市人群中存在高致病性ST-4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌,并引起了感染病例,提示应当加强对本地区健康人群携带情况及菌株分子特征的监测,为流脑感染病原菌的溯源调查与控制提供实验室支持。     

深圳市一起B群流行性脑脊髓膜炎疫情的调查

目的 调查B群流行性脑脊髓膜炎（流脑）疫情的原因。 方法 于2018年2月22、27日对患者和密切接触者进行流行病学调查,并收集脑脊液、血液和咽拭子样品进行分离培养、PCR检测和二代测序。 结果 在患者血液及其母亲咽拭子中均分离出B群脑膜炎奈瑟菌,多位点序列分型均为ST-3200/CC4821,2株菌的16S rRNA及耐药基因、多肽编码基因的相似性为100%。 结论 该疫情是由健康携带B群脑膜炎奈瑟菌的母亲传播给患者而引起。      

A Bartonella vinsonii berkhoffii typing scheme based upon 16S-23S ITS and Pap31 sequences from dog, coyote, gray fox, and human isolates

Since the isolation of Bartonella vinsonii subspecies berkhoffii from a dog with endocarditis in 1993, this organism has emerged as an important pathogen in dogs and as an emerging pathogen in people. Current evidence indicates that coyotes, dogs and gray foxes potentially serve as reservoir hosts. Based upon sequence differences within the 16S-23S ITS region and Pap31 gene, we propose a classification scheme that divides B. vinsonii subsp. berkhoffii isolates into four distinct types. Two conserved sequences, of 37 and 18 bp, respectively, are differentially present within the ITS region of each of the four B. vinsonii subsp. berkhoffii types. To date, B. vinsonii berkhoffii types I, II, and III have been identified in the US, type III in Europe and type IV in Canada. Based upon the proposed genotyping scheme, the geographic distribution of B. vinsonii berkhoffii types needs to be more thoroughly delineated in future molecular epidemiological studies involving Bartonella infection in coyotes, dogs, gray foxes, human beings and potentially other animals or in arthropod vectors. Strain typing may help to better define the reservoir potential, carriership patterns, modes of transmission, and geographic distribution for each B. vinsonii berkhoffii type.     

In situ detection of Bartonella henselae cells

A new in situ hybridization technique was developed for identification of Bartonella henselae cells in cell suspension or in tissue sections. Use of highly specific probes labeled with either fluorescein or digoxigenin allows discrimination between B. henselae and closely related B. quintana cells. No cross-hybridization with other Bartonella or non-Bartonella species was observed. Besides its specificity it showed higher sensitivity as compared to PCR based detection methods. Moreover, its application allows direct observation of B. henselae in infected tissues.     

Discovery and analysis of Bartonella henselae antigens for use in clinical serologic assays

The antibody response to Bartonella henselae has been studied in a number of mammals; however, the human response needs to be further studied. After natural infection, humans have antibody reactivity to a large number of B. henselae proteins. We used a proteomic approach to identify antigenic proteins of B. henselae to determine their capacity to elicit a human antibody response. Comparing patient sera by Western blot analysis demonstrated significant amounts of reactivity to B. henselae. The immunofluorescence assay (IFA)-positive sera identified several protein spots of interest. However, a consistent reactivity to a single spot by all sera was not observed. Three of these spots demonstrated reactivity in 71%, 64%, and 64% of positive sera tested with negligible reactivity to the negative sera. These proteins were identified as GroES, BepA, and GroEL. Most IFA-positive sera demonstrated reactivity to GroES, GroEL, and BepA. The usefulness of these proteins for a clinical serologic assay is discussed.     

脐血HLA-AB分型方法探讨

目的　探讨脐血HLA AB分型方法。方法　分别采用血清学方法和PCR SSP基因定型方法对 1 0 2份脐血HLA A、B位点进行检测。结果　两方法对比分析结果显示血清学近 1 8.6 %不能得出满意结果 ,HLA A、B位点错定率分别为 6 .1 %和 1 0 .8% ,总错误率 1 6 .9%。结论　脐血HLA表达水平低 ,单个核细胞反应弱及部分交叉反应是造成血清学不能确定或错定的主要原因