补肾活血方调节淋巴回流对小鼠骨关节炎的影响

目的:探讨补肾活血方对膝骨关节炎(KOA)小鼠淋巴回流的调节作用,探究其对关节退变的治疗效果。方法:采用补肾活血方治疗KOA小鼠12周,测量膝关节肿胀程度并检测小鼠下肢淋巴管回流功能,关节组织病理切片镜下观察关节退变程度。结果:KOA小鼠淋巴管清除率明显降低,OARSI评分显著升高,关节软骨呈典型退变;补肾活血方可促进KOA小鼠淋巴管回流功能恢复,降低其OARSI评分,其关节退变程度亦好转。结论:补肾活血方可能通过促进淋巴管回流缓解OA关节肿胀,延缓关节退变。     

补肾活血方对骨关节炎小鼠局部淋巴管结构与分布的影响

目的:探讨补肾活血方对骨关节炎小鼠局部淋巴管结构与分布的调节作用,并进一步探究其对关节退变的治疗效果。方法:清洁级雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为3组,每组10只,假手术组仅打开小鼠右膝内侧皮肤及关节囊而不损伤其他结构;其余小鼠则切断内侧副韧带及内侧半月板前部致骨关节炎模型;补肾活血方组于造模后第2天开始以补肾活血方浓缩煎剂按0.2 mL/只的剂量灌胃;假手术组及模型组给予同等剂量0.9%氯化钠溶液干预,每天1次,持续12周。分别于4周及12周处死小鼠取右膝关节, Safranin-O染色观察关节组织的形态和结构;双免疫荧光组织化学染色法及全切片扫描系统检测小鼠局部淋巴管结构与分布情况。结果:术后12周,模型组小鼠膝关节呈现软骨裂隙、关节游离体及关节软骨丢失等典型骨关节炎改变,OARSI评分显著升高(P0.01);其关节周围毛细淋巴管及总淋巴管增加(P0.01和P0.05)而成熟淋巴管减少(P0.05);术后12周,补肾活血方组小鼠成熟淋巴管及总淋巴管均显著增加(P0.01);其OARSI评分亦显著下降(与模型组比较,P0.05)。结论:补肾活血方可能通过促进淋巴管成熟,增加其回流功能从而延缓关节退变。     

关节镜清理术联合蠲痹汤治疗寒湿痹阻型膝骨性关节炎的疗效观察

正膝骨性关节炎(KOA)是一种以膝关节软骨退变为主的疾病,其病理特征常表现为关节软骨退变剥脱、滑膜组织异常增生、骨赘形成以及半月板的磨损。中医学认为本病属于"痹证"范畴。笔者采用膝关节镜清理联合蠲痹汤口服治疗临床上处于膝关节轻、中度退变的,中医辨证属于寒湿痹阻型的膝骨性关节炎患者,取得了较好疗效,现报道如下。     

蠲痹颗粒对兔膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的探讨蠲痹颗粒对兔膝骨关节炎软骨软骨细胞凋亡的影响,揭示其治疗骨关节炎(OA)的部分作用机制,为蠲痹颗粒方治疗OA提供理论依据。方法将42只新西兰兔采用改良Hulth法建立兔膝OA模型,造模后,随机分为假手术组、模型组、蠲痹颗粒组及阳性药(双醋瑞因)组。药物干预或灌生理盐水6周后,取出关节软骨,石蜡切片HE染色观察软骨组织镜下病理形态改变,免疫组化法检测软骨组织caspase-3表达水平,TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况。结果蠲痹颗粒组和阳性药对照组兔膝关节软骨组织caspase-3蛋白的表达、软骨细胞凋亡率明显低于模型组,比较有统计学意义(P0.05)。结论蠲痹颗粒能下调caspase-3蛋白表达,抑制膝关节软骨细胞凋亡,可能是蠲痹颗粒治疗骨关节炎的作用机制之一。     

黄芪甲苷对关节不稳诱导型小鼠膝骨关节炎的保护作用

目的:观察黄芪甲苷能否缓解膝骨关节炎的病理改变。方法:将小鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组和黄芪甲苷组,实验组通过关节不稳术造成小鼠膝骨关节炎模型,并分别给予生理盐水和黄芪甲苷腹腔注射8周。取左侧膝关节进行三维重建和组织学染色。结果:模型组小鼠膝关节半月板钙化明显增加,关节软骨变薄,II型胶原明显减少,破坏明显,边缘骨赘形成;黄芪甲苷组均有明显改善。结论:黄芪甲苷可以减轻关节不稳诱导的小鼠膝骨关节炎病理改变。     

丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨性关节炎软骨Ⅱ型胶原影响的实验研究

目的：观察丹紫康膝冲剂对大鼠膝骨关节炎软骨Ⅱ型胶原的影响。方法：选取健康Wistar大鼠80只,随机分为丹紫康膝组、西药组、模型组、空白对照组,每组20只。对丹紫康膝组、西药组、模型组大鼠运用改良Huhh造模法进行大鼠膝关节骨性关节炎造模,于造模6周后对各组大鼠进行药物干预。丹紫康膝组予丹紫康膝冲剂灌胃,西药组予硫酸氨基葡萄糖灌胃,模型组、空白对照组均予以等容积蒸馏水灌胃,每天早晚各1次,连续4周。肉眼观察大鼠膝关节形态并按软骨损伤分级法进行分级;光镜下切片观察软骨退变情况,并采用改良Mankin病理骨关节炎评分法评分;免疫组化检测软骨Ⅱ型胶原表达。结果：肉眼观察见空白对照组膝关节软骨表面光滑润泽,模型组造模后膝关节软骨可见局部溃疡性改变、关节边缘增生,西药组和丹紫康膝组可见造模后膝关节生成新生软骨;镜下观察见空白对照组正常,模型组重度退变,丹紫康膝组和西药组轻中度退变;膝关节软骨Ⅱ型胶原含量空白对照组较其余3组高（P〈0．05）,丹紫康膝组和西药组较模型组高（P〈0．05）,丹紫康膝组与西药组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：丹紫康膝冲剂能提高大鼠膝关节软骨Ⅱ型胶原含量,具有防治大鼠早中期膝骨性关节炎软骨退变的作用。     

除痹汤治疗膝骨关节炎临床报告

膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）是中老年人常见、多发的骨关节病。该病不仅关节软骨损害,还累及整个关节,包括软骨下骨、韧带、关节囊、滑膜和关节周围肌肉,最终发生关节软骨退变,纤维化、断裂、溃疡及整个关节面的损害[1]。其主要病理改变是关节软骨的进行性退变和继发性骨质增生[2]。最终导致膝关节肿痛、僵硬、功能障碍等临床表现。     

复方艾叶油乳膏剂对兔膝骨关节炎模型关节软骨病理改变及MMP 13表达的影响

膝关节骨性关节炎（Knee Osteoarithitis，KOA）是多种病因引起的关节退化、关节软骨破坏、膝关节周围软组织退变所致的慢性关节炎，其主要症状是膝关节疼痛、肿胀、畸形和功能障碍等，近年来随着人口老龄化趋势的发展，其发病率也明显上升。因此，我们通过建立兔膝骨关节炎动物模型，应用复方艾叶油乳膏剂外涂治疗，通过病理切片和免疫组化检测，观察其对关节软骨的保护作用。     

针刀干预对膝骨关节炎模型兔膝关节软骨应力变化的影响

目的：观察针刀对膝骨关节炎（KOA）兔膝关节软骨退变、膝关节整体应力、关节软骨应力变化以及肿瘤坏死因子-ɑ（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的影响,探讨其治疗KOA的作用机制。方法：将28只兔随机分为空白组、模型组、电针组、针刀组,每组7只。除空白组均进行6周兔左后肢制动,建立兔KOA模型,电针组、针刀组均干预3周。采用苏木精-伊红（HE）法光镜下观察兔软骨病理改变,并评价软骨退变程度;运用有限元技术模拟KOA模型兔膝关节屈曲60°进行检测,观察膝关节整体应力及关节软骨最大应力变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测滑液中TNF-α、IL-1β表达水平。结果：与空白组比较,模型组Mankin评分升高(P<0.05）,膝关节整体应力、关节软骨最大应力显著降低（P<0.01）,TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P<0.01）;干预后,与模型组比较,电针组、针刀组Mankin评分均显著降低(P<0.05),膝关节整体应力、关节软骨最大应力均升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β水平均明显降低(P<0.01）;与电针组比较,针刀组Mankin评分降低(P<0.05),膝关节整体应力和关节软骨最大应力较电针组升高（P<0.05）,TNF-α、IL-1β水平较电针组显著降低(P<0.01）。结论：针刀干预能够调节膝关节整体应力及关节软骨的最大应力,进而恢复膝关节应力环境、抑制炎症介质释放,从而改善关节软骨退变,达到治疗KOA的目的。     

骨痹舒片治疗膝关节骨性关节炎的临床观察

膝关节骨性关节炎（knee osteoarthritis,KOA）是一种以膝关节软骨的进行性退变、剥脱、消失及关节边缘骨赘形成和软骨下骨组织硬化为特征的慢性关节病,又称膝增生性关节炎、膝骨关节病等,是国际公认的四大老年病之一。2004年3月至2007年11月,笔者应用骨痹舒片治疗KOA患者272例,疗效满意,现总结报告如下。     

温针灸对膝骨性关节炎兔行为学及关节软骨肿瘤坏死因子-α、基质金属蛋白酶-3含量的影响

目的:观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔行为学及关节软骨中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)含量的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法 :将雄性日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、治疗组,每组10只。采用关节机械制动法造成KOA模型,造模后对各组兔进行Lequesne MG行为学评估。治疗组选用"内膝眼""犊鼻""血海""阳陵泉"进行温针灸干预,每次干预20min,每日1次,共干预4周。4周后再次进行行为学评估,HE染色后观察膝关节软骨病理形态变化,并采用放射免疫分析法测定各组兔膝关节软骨中TNF-α、MMP-3水平。结果:造模后模型组与治疗组行为学评分明显高于正常组,治疗前后行为学评分差值治疗组明显高于模型组(均P0.05);HE染色结果显示,模型组与正常组相比有明显炎性反应细胞聚集现象,治疗组炎性反应现象较模型组有显著改善;模型组膝关节软骨中TNF-α、MMP-3水平均明显高于正常组(均P0.05),治疗组膝关节软骨中TNF-α、MMP-3水平明显低于模型组(均P0.05)。结论:温针灸可有效治疗兔KOA并降低关节软骨中TNF-α、MMP-3水平,发挥抗炎作用可能是其起效的一个重要机制。     

鹿角壮骨胶囊对膝骨关节炎兔软骨iNOS和CollagenⅡ表达的影响

目的观察鹿角壮骨胶囊对兔膝骨关节炎模型关节软骨中iNOS和CollagenⅡ表达的影响。方法采用木瓜蛋白酶右侧膝关节腔内注射诱导建立兔膝骨关节炎模型,24只长耳大白兔随机分为正常组、模型组、给药组(鹿角壮骨胶囊0.3 g/kg),连续灌胃给药4周。通过甲苯胺蓝染色观察病理形态,按OOCHAS评分标准进行评分,免疫组化检测各组兔膝关节软骨iNOS和CollagenⅡ表达。结果与正常组比较,模型组OOCHAS分级和分期的R值、OOCHAS评分总分升高(P<0.05),膝关节软骨iNOS的表达升高(P<0.05),CollagenⅡ的表达降低(P<0.05);与模型组比较,给药组OOCHAS评分总分降低(P<0.05),iNOS的表达降低(P<0.05),而CollagenⅡ的表达升高(P<0.05)。结论鹿角壮骨胶囊可通过降低软骨中iNOS的表达,抑制CollagenⅡ的降解,从而起到保护膝关节软骨,延缓关节退变的治疗效果。     

内热针通过调控Bcl-2/Bax平衡改善大鼠膝骨关节炎损伤

目的:观察内热针治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠的疗效并探究其相关分子机制。方法:32只大鼠随机分为常组、模型组、电疗组和治疗组4组各8例。经过3周治疗后,采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察大鼠膝关节软骨组织病理变化,酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠滑膜液中白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-17(interleukin-17,IL-17)的分泌水平,RT-qPCR及Western blot分别检测软骨组织中B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2-Associated X(Bax)mRNA及蛋白表达水平,TUNEL染色观察各组大鼠膝骨关节中软骨细胞凋亡情况。结果:与模型组比较,内热针能显著改善膝骨关节炎大鼠软骨组织的病理学变化,下调滑膜液中炎症因子IL-1β、TNF-α和IL-17的表达水平(P<0.01);上调软骨组织中Bcl-2在mRNA及蛋白水平的表达(P<0.01),下调Bax在mRNA及蛋白水平的表达(P<0.01),且能显著抑制膝骨关节中软骨细胞的凋亡。结论:内热针能显著改善膝骨关节炎大鼠的病理学变化,缓解炎症反应,抑制膝骨关节中软骨细胞的凋亡,这可能与其对Bcl-2/Bax平衡的调控密切相关。     

膝痹宁对膝骨关节炎模型大鼠滑膜纤维化的影响

目的观察膝痹宁对膝骨关节炎(KOA)模型大鼠滑膜纤维化的影响。方法大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组;KOA组、膝痹宁组造模。分别在膝痹宁灌胃治疗的第1、14、28、42、56天测量各组大鼠的膝关节横径;第56天处死大鼠提取滑膜组织,解剖学观察滑膜组织形态;天狼星红染色评估滑膜组织胶原沉积情况;WB和PCR检测纤维化标记物生长转化因子-β(TGF-β)、Ⅰ型胶原α1链(COL1α1)、金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)的蛋白和基因表达。结果膝痹宁用药14天,28天时,膝关节横径变化并不显著,但膝痹宁用药42天,56天时,膝关节横径则较KOA模型明显减小,差异具有统计学意义(P<0.05);用药56天后对大鼠进行膝关节解剖学观察,KOA大鼠滑膜组织较正常大鼠有一定程度的增厚、充血、欠规则;而上述表现在膝痹宁大鼠有所减轻;天狼星红染色显示膝痹宁用药大鼠滑膜组织胶原沉积较少;纤维化标记指标物TGF-β、COL1α1、TIMP1的基因和蛋白表达在膝痹宁组均较KOA组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论膝痹宁对能有效减轻KOA滑膜纤维化,以“温经活血”立法的中药复方对组织纤维化具有良性干预效应。     

针刀“解结法”对膝骨关节炎兔软骨形态学及影像学的影响

目的:观察针刀"解结法"对膝骨关节炎(KOA)兔软骨形态学及影像学的影响,为临床针刀治疗KOA提供实验依据。方法:健康雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组,每组8只。采用改良Videman法左后肢伸直位石膏固定制动6周复制KOA模型。针刀组采用针刀"解结法"治疗,治疗点包括"鹤顶次""髌内下""髌外下""成腓间""委阳次""阴陵次",每7 d干预1次,共干预4次。干预结束后1周,用Lequesne膝关节级别评估法评价兔左膝关节Lequesne评分;用X线和MRI影像学观察兔左膝关节间隙、积液、软骨光滑度,并进行MOAKS评分;肉眼观察左膝关节软骨表面光滑度并进行软骨肉眼观评分;用HE染色及Mankin评分评价软骨病理改变。结果:与空白组比较,模型组左膝关节Lequesne评分明显增高(P<0.05),关节间隙变窄,关节腔内积液增多、软骨面欠光滑,MOAKS评分、软骨肉眼观评分、Mankin评分均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,针刀组Lequesne评分明显降低(P<0.05),关节间隙增宽(P<0.05),关节腔积液减少,软骨面变光滑,MOAKS评分、软骨肉眼观评分、Mankin评分均明显降低(P<0.05)。结论:基于经筋理论针刀"解结法"能有效提高KOA兔模型膝关节行为能力,并修复软骨病理形态,其作用机制可能与调整关节间隙、减少关节腔积液有关。     

艾灸对膝骨关节炎模型兔软骨病理学改变及行为学改变的影响

目的:观察艾灸"犊鼻""足三里"穴对膝骨关节炎(KOA)模型兔膝关节软骨病理学及行为学的影响,为艾灸的局部抗炎、镇痛作用提供依据.方法:将40只健康新西兰大耳白兔按随机数字表法分为对照组、模型组、艾灸组、抑制剂组,每组10只.模型组、艾灸组、抑制剂组兔采用注射木瓜蛋白酶法造模,造模成功后,艾灸组、抑制剂组实施干预治疗....     

近红外光谱吲哚菁绿成像系统在关节炎小鼠淋巴回流功能检测中的应用

目的：本文建立了近红外光谱吲哚菁绿（Indocyanine Green,ICG）成像技术平台,通过类风湿关节炎TNF-Tg小鼠模型和手术诱导骨性关节炎小鼠模型,验证了技术平台检测淋巴回流功能的成像质量与稳定性,为筛选中药复方与中药单体调控淋巴回流功能防治关节炎的动物体内研究提供技术平台。方法：采用TNF-tg小鼠和手术诱导骨性关节炎小鼠模型,采用近红外光谱ICG 成像系统检测类风湿关节炎小鼠模型的下肢淋巴回流功能,手术诱导骨性关节炎小鼠模型的膝关节淋巴回流功能。结果：淋巴回流功能检测显示,与Control组相比,TNF-Tg组的下肢淋巴回流清除率明显下降;Control组小鼠下肢淋巴管收缩脉冲值为1.12±0.27个/min,与之相比,TNF-Tg组检测不到明显的收缩脉冲值;与Sham组相比,OA组的膝关节淋巴回流清除率明显下降。结论：本文建立的近红外光谱-ICG成像系统可以为评价动物体内淋巴回流功能实验研究,筛选治疗关节炎有效的中药复方,小分子化合物提供良好的工作平台。     

短刺加电针法对膝骨关节炎兔膝关节软骨修复的影响

目的:观察短刺加电针法对膝骨关节炎兔软骨γ-谷氨酰基羧化酶(GGCX)、基质金属蛋白酶(MMP)13及血清非羧化基质GLA蛋白(ucMGP)的影响,探讨短刺加电针法对软骨组织的修复作用。方法:新西兰大白兔随机分为正常组10只和造模组30只,造模组动物采用Hulth-Telhag法手术复制膝关节炎模型,将造模成功的动物随机分为模型组、短刺组、普通针刺组,每组10只。短刺组取左侧"内膝眼""外膝眼""阴陵泉""足三里""梁丘",采用短刺法加用电针,普通针刺组常规针刺以上穴位加用电针,均每日治疗1次,每次20min,5d为一疗程,共4个疗程。采用蛋白免疫印迹法检测软骨细胞中GGCX、MMP 13的蛋白表达;免疫组化法检测GGCX的活性;酶联免疫吸附测定法检测血清ucMGP的含量。结果:与正常组相比,模型组膝关节软骨中MMP 13、血清ucMGP表达明显提高(P0.01,P0.05),而GGCX表达量下降(P0.01);与模型组相比,短刺组和普通针刺组MMP 13、ucMGP表达明显降低(P0.01,P0.05),而GGCX表达升高(P0.01);与普通针刺组相比,短刺组MMP 13、ucMGP表达明显降低(P0.01,P0.05),而GGCX表达升高(P0.01)。结论:普通电针法与短刺加电针法均可促进膝关节软骨细胞修复,且短刺法有一定的优势,其治疗作用可能与上调GGCX表达,促进MGP羧基化,抑制MMP 13表达有关。     

温针灸对膝骨关节炎兔膝关节软骨转化生长因子β1和胰岛素生长因子Ⅰ水平的影响

目的:观察温针灸对膝骨关节炎(KOA)家兔膝关节软骨转化生长因子β1(TGF-β1)和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法:30只日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、温针灸组,采用膝关节机械制动法制备KOA模型。温针灸组取患侧内外"膝眼""阳陵泉""血海",温针灸刺激干预4周,每天1次,每次30min。4周后,采用放射免疫分析法测定各组家兔膝关节软骨TGF-β1和IGF-Ⅰ水平,HE染色后光镜下观察膝关节软骨病理形态学变化。结果:模型组兔膝关节软骨细胞TGF-β1、IGF-Ⅰ明显高于正常组(均P0.05);温针灸组膝关节软骨TGF-β1、IGF-Ⅰ表达水平较模型组显著降低(均P0.05)。HE染色结果显示,温针灸组关节软骨中软骨细胞表面较模型组光整,无簇集。结论:温针灸能通过调节KOA膝关节软骨TGF-β1和IGF-Ⅰ的水平,促进关节软骨的修复,缓解并改善膝关节局部炎性症状,起到治疗KOA的作用。