低分子右旋糖酐铁和蔗糖铁对慢性肾衰竭大鼠氧化应激的影响

目的 评价小剂量反复多次低分子右旋糖酐铁和蔗糖铁静脉用药后对慢性肾衰竭大鼠氧化应激的影响。 方法 以5/6肾大部切除术建立慢性肾衰竭大鼠模型。右肾切除术后第4周,将实验大鼠分为4组：低分子右旋糖酐铁（糖酐铁）组、蔗糖铁组、对照组、假手术组。观察6周,检测各组大鼠体内氧化应激、铁代谢等指标。 结果 糖酐铁组和蔗糖铁组大鼠血红蛋白明显高于对照组（P < 0.05）,而两铁剂组间差异无统计学意义。对照组大鼠的血清铁、血清铁蛋白、转铁蛋白饱和度显著低于假手术组（P < 0.05）;两铁剂组大鼠上述指标均显著高于对照组（P < 0.05）,而两铁剂组间差异无统计学意义。糖酐铁组和蔗糖铁组血浆晚期氧化蛋白产物（AOPP）显著高于对照组[（127.84±21.19） μmol/L、（134.21±29.38） μmol/L比 （81.83±19.93） μmol/L,P < 0.05],而两铁剂组间差异无统计学意义。两铁剂组大鼠血浆丙二醛（MDA）高于对照组,而蔗糖铁组高于糖酐铁组[（6.06±0.73） nmol/L比（4.99±0.80） nmol/L, P < 0.05]。糖酐铁组、蔗糖铁组和对照组大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（TAOC）差异无统计学意义。模型组大鼠血浆谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平显著低于假手术组（P < 0.05）,而蔗糖铁组显著低于糖酐铁组和对照组[（2123.11±74.78） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1比（2352.84±163.90） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1、（2310.23±125.99） nmol&#8226;ml-1&#8226;min-1,P < 0.05]。 结论 静脉补铁可部分纠正5/6肾大部切除肾衰竭大鼠的贫血,改善铁代谢指标。反复静脉小剂量补铁对慢性肾衰竭大鼠氧化应激状态有不良影响,而低分子右旋糖酐铁的不良影响低于蔗糖铁。     

PPARγ激动剂对腹膜透析相关性急性腹膜炎大鼠PPARγ、Toll样受体4表达及STAT1信号活化的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂罗格列酮和15脱氧前列腺素J2（15d-PGJ2）对脂多糖（LPS）诱导大鼠腹膜透析相关性急性腹膜炎模型腹膜组织PPARγ、Toll样受体4（TLR4）表达、STAT1活化及腹腔局部炎性反应的影响。 方法 24只雄性SD大鼠随机分成4组，每组6只。对照组：腹腔注入4.25%葡萄糖乳酸盐腹膜透析液（简称腹透液，90 ml/kg）；LPS组：LPS 1 mg/kg腹腔注入4 h后，再注入腹透液；罗格列酮+ LPS组（罗格列酮组）：罗格列酮20 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1灌胃预处理3 d，注入LPS及腹透液；15d-PGJ2 + LPS组（15d-PGJ2组）：15d-PGJ2 0.3 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1腹腔注入预处理3 d，注入LPS及腹透液。注入腹透液4 h后处死大鼠，留取腹水、壁层及脏层腹膜组织。ELISA法检测腹水中IL-6浓度。常规行腹膜组织Masson染色和腹水白细胞计数。RT-PCR检测腹膜组织PPARγ、TLR4 mRNA的表达；Western印迹法检测腹膜组织PPARγ、TLR4、磷酸化（p）-STAT1、STAT1蛋白的表达。 结果 LPS组大鼠腹水IL-6浓度[268.53（201.87～335.19） ng/L]高于对照组[147.62（130.60～164.64） ng/L）]（P < 0.01）；罗格列酮组大鼠腹水IL-6浓度[110.20（77.60～142.80） ng/L]低于LPS组（P < 0.05）。与对照组比较，LPS组大鼠腹膜组织明显水肿，腹膜组织PPARγ、TLR4 mRNA及蛋白表达均显著增强（P < 0.05）。与LPS组相比，罗格列酮组大鼠腹膜组织水肿明显减轻，PPARγ、TLR4 mRNA表达显著增高（P < 0.05），但其蛋白表达显著减弱（P < 0.05）。15d-PGJ2组大鼠腹膜组织水肿明显减轻，PPARγ mRNA及其蛋白表达均显著减弱（均P < 0.05），TLR4 mRNA表达显著增强（P < 0.01），但其蛋白表达减弱（P < 0.05）。各组间腹水白细胞计数差异无统计学意义。罗格列酮、15d-PGJ2均明显上调LPS诱导的p-STAT1表达（P < 0.01）。 结论 罗格列酮和15d-PGJ2可负性调节LPS诱导的大鼠急性腹膜炎性反应，并对LPS信号通路中相关功能蛋白起一定的调控作用。     

尿毒清对阿霉素肾病大鼠肾纤维化的保护作用

目的 研究尿毒清对阿霉素肾病大鼠肾纤维化的保护作用及其可能机制。 方法 雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、尿毒清组、贝那普利组,每组12只。采用左侧肾脏切除加尾静脉重复注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型。术后1周尿毒清组给予尿毒清3 g&#8226;kg-1&#8226;d-1灌胃,贝那普利组予贝那普利4 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1灌胃。用药4、8周后观察各组大鼠24 h尿蛋白量、血生化及光镜、电镜下肾脏病理变化,应用免疫组化方法测定肾组织骨调素（OPN）、纤连蛋白（FN）、胶原蛋白Ⅳ（COLⅣ）的表达。 结果 模型组大鼠24 h尿蛋白量、BUN、Scr、胆固醇（Cho）、三酰甘油（TG）水平及系膜肾小球系膜基质比（M/G）均显著高于正常对照组（P < 0.01）;血白蛋白（Alb）水平显著低于正常对照组（P < 0.01）;肾组织OPN、FN、COLIV的表达亦显著高于正常对照组（P < 0.01）。尿毒清组24 h尿蛋白量、BUN、Scr、Cho、TG水平及M/G均显著低于模型组（P < 0.01）;肾组织OPN、FN、COLIV表达亦显著低于模型组（P < 0.01）。 结论 尿毒清可减少蛋白尿的排泄,纠正脂代谢紊乱,改善肾功能,加强FN、COLIV的降解,抑制肾小球细胞外基质的过度积聚,从而减轻肾脏病理损害,发挥其肾脏保护作用。     

肾脏局部醛固酮对糖尿病肾病大鼠肾小管间质转分化的作用

目的 探讨醛固酮对糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管间质转分化的影响。 方法 采用Wistar大鼠腹腔注射链脲菌素（STZ,60 mg/kg）制备糖尿病模型,4周后尿蛋白>30 mg/d为DN模型成功（n=16）,随机分为DN组（n=8）和螺内酯组（SP组,n=8）,以另8只正常大鼠作为对照组（N组）。SP组给予螺内酯40 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1,N组、DN组每日以等量清水灌胃。8周后处死大鼠,收集尿、血浆、肾组织检测24 h尿蛋白定量、血肌酐和肾脏病理变化;用放射免疫法检测血浆、肾组织醛固酮浓度;用免疫组化、Western印迹方法检测E钙黏蛋白（E-cadherin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）蛋白的表达;用RT-PCR的方法检测E-cadherin、α-SMA mRNA的表达。 结果 与对照组比较,DN组尿蛋白排泄量、血肌酐均显著增加（均 P < 0.01）,肾组织E-cadherin蛋白和mRNA表达显著下调（均P < 0.01）,α-SMA蛋白和mRNA表达均显著上调（均P < 0.01）。DN组大鼠肾组织醛固酮显著升高[（24.71±5.30） ng/g比（16.38±2.85） ng/g,P < 0.01],与尿蛋白排泄量、血肌酐、α-SMA蛋白表达呈正相关（r = 0.737、0.574、0.688,均P < 0.05）,与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r = －0.659,P < 0.01）。各组间血清醛固酮含量差异无统计学意义。与DN组比较,SP组大鼠尿蛋白排泄和血肌酐显著下降（均P < 0.01）,E-cadherin蛋白和mRNA表达上调（均P < 0.05）,而α-SMA蛋白和mRNA表达显著下调(均P < 0.01)。 结论 DN大鼠肾组织局部醛固酮参与了糖尿病肾病肾间质转分化,螺内酯可以阻断醛固酮与其受体结合,抑制肾小管间质转分化,从而起到肾脏保护作用。     

罗格列酮改善老年大鼠肾脏抗氧化能力

目的 探讨罗格列酮对衰老大鼠肾脏抗氧化能力的影响。 方法 24月龄SD雄性大鼠30只,按数字随机法分成3组,每组10只：对照组（CON组）为自由摄食;罗格列酮组（RGTZ组）为自由摄食,并以罗格列酮4 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1灌胃;限制饮食组（CR组）能量摄入为CON组的60%。干预12周后断头处死所有动物,对比各组大鼠干预前后的体质量变化;观察干预后各组大鼠的肾质量及心质量与体质量之比;Western印迹分析肾组织内过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）蛋白表达;检测肾组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力及丙二醛（MDA）的含量;肾组织冰冻切片行β半乳糖苷酶（β-Gal）染色。 结果 干预后CR组大鼠体质量明显下降（P ＜ 0.05）,而CON组及RGTZ组无显著变化。各组大鼠干预前后肾质量与体质量比、心质量与体质量比均无显著变化。PPARγ蛋白表达在RGTZ组与CR组显著上调（P ＜ 0.01,P ＜ 0.05）。CR组及RGTZ组肾组织SOD、GSH-PX酶活力均显著高于CONT组（P ＜ 0.01）,MDA的含量均显著低于CON组（P ＜ 0.01,P ＜ 0.05）。RGTZ组、CR组β-Gal染色阳性面积明显低于CON组（P ＜ 0.05,P ＜ 0.01）。 结论 罗格列酮能够减轻衰老大鼠肾组织的氧化损伤、增强其抗氧化能力,从而起到延缓大鼠肾脏衰老的作用。     

塞来昔布延缓Han:SPRD大鼠肾衰竭进展的实验研究

目的 通过观察塞来昔布（CXB）对常染色体显性多囊肾病（ADPKD）动物模型Han:SPRD大鼠的作用,从而研究CXB延缓肾衰竭进展的机制。 方法 选取3周龄杂合（cy/+）Han:SPRD大鼠共57只,随机分成3组（每组19只）进行实验。按照CXB在饲料中的含量分为对照组（0 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1）、小剂量组（3 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1）和大剂量组（10 mg&#8226;kg－1&#8226;d－1）。在大鼠4、6、8、10、12和16周龄时测定血清BUN、Scr。ELISA法检测16周龄大鼠血浆6-酮前列腺素F1α（6-keto-PGF-1α）和血栓烷B2（TXB2）的含量。实时荧光定量PCR法检测大鼠肾组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）的mRNA水平。免疫荧光共聚焦显微镜检测TNF-α和环氧化酶2（COX-2）的蛋白表达。Western印迹检测16周龄大鼠TNF-α的蛋白表达量。 结果 对照组BUN、Scr持续升高,分别于6、8周龄时即大于正常范围;至16周龄时,ＢＵＮ为（26.56±9.19） mmol/L,Ｓｃｒ为（95.08±67.54） μmol/L;CXB小剂量组和大剂量组均能减缓BUN、Scr上升速度,减小其上升幅度。16周龄大鼠CXB小剂量组血浆中6-keto-PGF-1α和TXB2[（1831.68±233.31） ng/L和（156.62±9.29） ng/L]和大剂量组两者的含量[（1148.57±105.80） ng/L和(157.87±10.16） ng/L]均显著低于对照组[（2792.26±830.48） ng/L和（248.88±93.72） ng/L]（均P < 0.05）。实时荧光定量PCR结果示,16周龄大鼠肾组织小剂量组和大剂量组TNF-α　mRNA水平均显著低于对照组（均P < 0.05）。免疫荧光共聚焦显微镜显示,对照组TNF-α和COX-2在小管间质区高表达,小剂量组和大剂量组荧光强度显著减弱。与对照组比较,CXB小剂量组和大剂量组大鼠肾组织蛋白表达量显著减少,差异有统计学意义（均P < 0.05）。 结论 CXB可能通过抑制COX-2的活性,阻止膜磷脂释放花生四烯酸代谢产物6-keto-PGF-1α和TXB2,减少炎性因子TNF-α的含量,正反馈避免诱导COX-2的高表达,发挥抗炎作用来延缓肾衰竭的进展。     

夹竹桃麻素对高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激损伤的保护作用

目的 观察NADPH氧化酶特异抑制剂夹竹桃麻素（apocynin）对高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激（OS）损伤的保护作用。 方法 自由饮用含有0.8%乙二醇的水4周建立高草酸尿症SD大鼠模型。大鼠按随机数字表法分为4个组：空白组、高草酸尿症组、apocynin干预组、apocynin对照组。后两组给予apocynin（0.2 g&#8226;kg-1&#8226;d-1）灌胃,对照组给予正常饮水。4周后检测大鼠肾脏OS 指标（尿H2O2和8-异前列腺素）,以及Ccr及肾脏/体质量比值。免疫组化观察NADPH氧化酶亚基p47phox在肾脏中的表达位置。RT-PCR和免疫印迹法分别检测肾组织NADPH氧化酶亚基p47phox、gp91phox、Nox-1 mRNA以及p47phox蛋白的表达水平。 结果 p47phox在各组肾脏中均有广泛的表达,包括肾皮质区、内髓区、外髓区等。与空白组比较,高草酸尿症组大鼠尿H2O2和8-异前列腺素水平显著升高,Ccr降低,肾脏/体质量比值增高（均P < 0.05）;肾脏p47phox、gp91phox和Nox-1 的mRNA表达均显著增加（均P ＜ 0.05）, p47phox蛋白表达也增多（P ＜ 0.01）。apocynin干预治疗可抑制肾脏p47phox、Nox-1 mRNA及p47phox蛋白的表达,但gp91phox mRNA表达未明显减少,而大鼠尿H2O2和8-异前列腺素水平下降,Ccr增加,肾脏/体质量比值减少,但仍高于对照组水平。 结论 NADPH氧化酶是高草酸尿症诱导大鼠肾脏OS损伤过程中活性氧形成的来源之一。使用apocynin抑制NADPH氧化酶活性可部分减轻肾脏的OS损伤程度,保护肾功能。     

阿利吉仑对2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用

目的 观察肾素抑制剂阿利吉仑对2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤的保护作用。 方法 8周龄db/db和db/m小鼠行单侧肾切除,16周进入实验,分为4组：db/m小鼠对照组（db/m组）、db/db糖尿病小鼠对照组（db/db组）、db/db糖尿病小鼠阿利吉仑3 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1治疗组（db/db+A3组）和db/db糖尿病小鼠阿利吉仑25 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1治疗组(db/db+A25组)。阿利吉仑溶于磷酸盐缓冲液（PBS,350 mg/L）皮下泵入（0.25 μl/h）给药,疗程４周。治疗前后检测体质量、血糖、糖化血红蛋白、尿蛋白量、血压水平;PAS染色观察肾脏组织学变化;ELISA法检测肾皮质转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活抑制因子1（PAI-1）含量;间接免疫荧光检测肾小球Ⅳ型胶原（ColⅣ）和纤连蛋白（FN）表达;实时定量PCR检测TGF-β1、PAI-1、ColⅣ、FN和肾素mRNA表达;放射免疫法检测肾皮质肾素活性和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平。 结果 与db/m组小鼠比较,db/db组小鼠有大量蛋白尿,肾小球细胞外基质沉积增加,TGF-β1、PAI-1、ColⅣ和FN蛋白及mRNA表达增加,同时肾皮质肾素mRNA、肾素活性和AngⅡ水平增高（均P < 0.05）。阿利吉仑25 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1治疗在没有影响血压情况下,显著减少db/db小鼠24 h尿蛋白量,减少肾小球细胞外基质沉积,减少TGF-β1、PAI-1、ColⅣ、FN蛋白和mRNA表达,同时降低肾皮质肾素活性和AngⅡ水平（均P < 0.05）。 结论 阿利吉仑对2型糖尿病db/db小鼠肾脏损伤有保护作用。     

肝细胞生长因子负性调控细胞转分化在肾间质纤维化中的作用

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用及其可能机制&#65377;方法 大鼠随机分为UUO组&#65380;HGF治疗组和假手术组&#65377;用实时荧光定量RT-PCR&#65380;Western杂交和免疫组化检测术后大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)和骨形成蛋白7(BMP7)表达量&#65377;免疫组化检测大鼠肾组织TGF-β1&#65380;FN及α-SMA表达&#65377;结果 与假手术组相比,UUO组及HGF治疗组CTGF mRNA&#65380;TGF-β1&#65380;α-SMA&#65380;FN&#65380;CTGF蛋白表达均增高,且UUO组明显高于治疗组;UUO组及HGF治疗组BMP7 mRNA和蛋白表达均减少,且UUO组显著低于治疗组&#65377;结论 HGF能减轻肾间质纤维化,负性调控肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,调节CTGF及BMP7表达可能是其作用途径&#65377;     

塞来昔布对Han：SPRD大鼠肾细胞外基质重塑的影响

目的 研究塞来昔布（CXB）对Han：SPRD大鼠肾细胞外基质（ECM）重塑的影响,探讨其抑制多囊肾肾间质纤维化的作用机制。 方法 选取杂合（cy/+）交配后第4代雄性、3周龄、体质量（68.5±16.6） g的Han：SPRD大鼠共57只,随机分成对照组（CXB：0 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1）、CXB小剂量组（CBX：3 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1）、CXB大剂量组（CBX：10 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1）,每组19只。另选19只SD大鼠作为正常对照。饲料中加入CXB喂食13周后,处死动物。倒置显微镜下分析肾组织纤维化指数;实时荧光定量PCR检测肾组织胶原Ⅳ（COLⅣ）、基质金属蛋白酶（MMP）2、金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP）和转化生长因子（TGF）β1 mRNA的表达;免疫荧光共聚焦扫描法检测COLⅣ、MMP-2、TIMP-2、TGF-β1与PCNA共染的蛋白丰度;蛋白免疫印迹法检测TGF-β1的表达。 结果 与对照组相比,小剂量组和大剂量组均能显著减少肾囊肿指数（42.90±6.56和47.10±7.28比64.80±62.71,均P < 0.05）、纤维化指数（11.20±2.63和10.10±3.30比16.30±4.16,均P < 0.05）和间质炎性细胞的浸润（2.60±0.26和2.80±0.31比3.70±0.33,均P < 0.05）。小剂量组和大剂量组COLⅣ、TIMP-2和TGF-β1 mRNA的表达量显著低于对照组（均P < 0.05 ）,而MMP-2 mRNA的表达量显著高于对照组（均P < 0.05）。小剂量组和大剂量组COLⅣ荧光强度较对照组显著减弱,差异有统计学意义（20.30±5.11比61.40±4.51,P < 0.01;27.50±6.73比61.40±4.51,P < 0.05）。小剂量组和大剂量组MMP-2/TIMP-2比值较对照组增高,差异有统计学意义（4.88±1.52 和3.63±1.67比0.35±0.13,均P < 0.05）。小剂量组和大剂量组TGF-β1蛋白表达比对照组均显著减少。 结论 塞来昔布可能通过下调TGF-β1、增加MMP-2/TIMP-2比值、促进胶原Ⅳ的降解来抑制肾小管间质的纤维化。     

L-精氨酸在人肝癌裸鼠肝脏移植瘤生长中的作用

目的 探讨L-精氨酸(L-arg)在人肝癌裸鼠肝脏移植瘤生长中的作用.方法 建立人肝癌裸鼠肝脏移植瘤模型,使用L-arg进行干预治疗,采用免疫组化方法 和图像分析技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤细胞的凋亡情况.结果 (1)小剂量L-arg(0.5 g·kg~(-1)·d~(-1))组、大剂量L-arg(1g·kg~(-1)·d~(-1))组和对照组移植瘤重量分别为(985±76)mg、(328±35)mg、(586±56)mg;大剂量L-arg组移植瘤重量较对照组显著减少(P＜0.05);小剂量L-arg组移植瘤重量较对照组显著增加(P＜0.05).(2)大剂量L-arg组移植瘤PCNA的表达较对照组显著下调(P＜0.05),小剂量L-arg组和对照组比较无明显差异(P＞0.05).(3)大剂量L-arg组NO水平较对照组和小剂量组显著升高(P＜0.05),小剂量L-arg较对照组显著升高(P＜0.05).(4)大剂量L-arg组移植瘤凋亡指数(AI)明显高于对照组(P＜0.05);小剂量L-arg对移植瘤AI无明显影响(P＞0.05).结论 L-精氨酸对肝癌具有双重作用.小剂量L-精氨酸可促进肝癌生长;大剂量L-精氨酸抑制肝癌的生长.     

CYP3A5基因型对肾移植受者术后早期血他克莫司浓度的影响

目的 探讨不同CYP3A5基因型对肾移植受者术后早期他克莫司(Tac)初始剂量的选择及其对血Tac目标浓度的影响.方法以新接受亲属活体肾移植的受者为研究对象,患者均应用Tac、霉酚酸酯(MMF)和泼尼松(Pred)预防排斥反应.研究分为2个阶段,第一阶段为同定剂量组(n=28),无论其CYP3A5分型如何,Tac的初始剂量均为1 mg·kg~(-1)·d~(-1);第二阶段为调整剂量组(n=40),CYP3A5表达者(仅包括*1/*3型,*1/*1型予以剔除)的Tac初始剂量为0.15mg·kg~(-1)·d~(-1),CYP3A5非表达者(*3/*3型)的初始剂量为0.08 mg·kg~(-1)·d~(-1).于术后3、5、7和14 d采集受者血样,检测血Tac浓度,有效的血Tac浓度以剂量校正的浓度比值(C/D)表示.结果固定剂量组28例受者中,CYP3A5*1/*3型15例,*3/*3型13例;调整剂量组40例受者中,CYP=3A5*l/*3型16例、*3/*3型24例.两组中,CYP3A5 *1/*3型受者术后3、5、7和14 d的血Tac浓度均低于*3/*3型受者,差异均有统计学意义(P<0.01).术后第3天,固定剂量组*1/*3型受者和*3/*3型受者达到目标血药浓度者分别占46.7%(7/15)和46.2%(6/13),调整剂量组*1/*3型受者和*3/*3型受者达到目标血药浓度者分别占81.2%(13/16)和75.0%(18/24),调整剂量组达到开标血药浓度者的百分率显著高于同定剂量组(P相似文献   

小剂量环孢素A联合小剂量泼尼松治疗特发性膜性肾病的初步观察

目的 非随机前瞻性观察小剂量环孢素A（CsA）联合小剂量泼尼松在我国特发性膜性肾病治疗中的疗效及不良反应,比较其与环磷酰胺（CTX）联合足量泼尼松的异同。 方法 31例经肾活检病理证实为特发性膜性肾病（Ⅰ~Ⅲ期）的肾功能正常的大量蛋白尿患者纳入本研究。CTX组20例,100 mg/d, 累积量约8 g;口服泼尼松0.6~1.0 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1,2～3个月后逐渐减量。CsA 组19例（包括CTX组中治疗无效或复发的8例）,起始量1.0~1.5 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1,2～3个月无效者,逐渐加量,最大剂量≤2.5 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1;口服泼尼松0.15~0.50 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1,3月个后逐渐减量。观察两组治疗前后的尿蛋白、血白蛋白和血肌酐等疗效指标及不良反应。 结果 CTX组随访（48±22）周,13例有效(65%,7例部分缓解,6例完全缓解),7例无效(35%)。CsA组随访（44±15）周,其中2例因不良反应而退出,余17例中,12例有效(70%,6例部分缓解,6例完全缓解),5例无效(30%)。两组缓解比例的差异无统计学意义。CTX组的不良反应有肝功能损伤等。CsA组的不良反应有血肌酐上升（3例）、高血压（12例）等,停药后或用药可控制。 结论 小剂量CsA联合小剂量泼尼松与CTX联合足量泼尼松治疗特发膜性肾病的缓解比例相近,对于CTX治疗无效或复发的患者,仍可能有效,虽然不良反应较多,但易于监测和控制。     

新型雌激素哌嗪雌酚酮对去卵巢小鼠骨代谢及骨生物力学的影响

目的研究哌嗪雌酚酮(piperazinyl estrone,PE)对去卵巢小鼠骨代谢及骨生物力学的影响,并探讨其作用机制。方法70只昆明种雌性小鼠,随机分为7组,Basal组,Ovx组,Ovx+PE 0.5mg.kg-1.d-1组,Ovx+PE 1.0 mg.kg-1.d-1,Ovx+PE 2.0 mg.kg-1.d-1,Ovx+E 0.71mg.kg-1.d-1灌胃给药共42 d,处死小鼠,采用骨形态计量学、骨生物力学测定哌嗪雌酚酮对去卵巢小鼠的骨量及力学指标的影响。结果去卵巢小鼠骨小梁面积明显减少63%,小鼠股骨结构力学和材料力学指标均呈现显著性降低,表现出骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松;而哌嗪雌酚酮各剂量组的骨量均有不同程度增加,小鼠股骨的力学参数有不同程度提高;雌酚酮通过明显抑制骨吸收,轻度抑制骨形成增加骨量。结论哌嗪雌酚酮中剂量组(1.0 mg.kg-1.d-1)轻度抑制骨转换增加去卵巢小鼠的骨量,改善去卵巢小鼠股骨的生物力学特性。     

开腹手术新生儿不同剂量舒芬太尼术后镇痛的效果

目的 评价不同剂量舒芬太尼用于开腹手术新生儿术后镇痛的效果.方法 选择拟在全麻下行开腹手术的足月新生儿60例,日龄7～28 d,ASA Ⅱ或Ⅲ级,体重2.4～4.2 kg,均于术毕拔除气管导管后连接舒芬太尼术后静脉镇痛泵,随机分为3组(n=20),镇痛泵配方:Ⅰ组舒芬太尼0.6 μg/kg(输注速率0.3 μg·kg~(-1)d~(-1)),Ⅱ组舒芬太尼1.2 μg/kg(输注速率0.6μg·kg~(-1)d~(-1)),Ⅲ组舒芬太尼2.4 μg/kg(输注速率1.2 μg·kg~(-1)d~(-1)),均溶于100 ml生理盐水中,于术后24 h时停用舒芬太尼.于术毕即刻、术后4、8、12、24 h时记录呼吸频率、HR、SpO_2、MAP及疼痛评分.于术毕即刻和术后24 h时抽取桡动脉血样行动脉血气分析,取外周静脉血样测定血浆白细胞介素6(IL-6)浓度.记录术后24 h内镇痛满意情况和不良反应发生情况.结果 与术毕即刻比较,Ⅰ组术后8～24 h时HR、MAP和疼痛评分升高,术后24 h时血浆IL-6浓度升高,Ⅲ组术后8 h时HR降低,术后24 h时动脉血氧分压、血浆IL-6浓度降低;与Ⅰ组比较,Ⅱ组和Ⅲ组术后8～24 h时HR、MAP及疼痛评分降低,术后24 h时血浆IL-6浓度降低,Ⅲ组术后24 h时动脉血氧分压降低(P<0.05);与Ⅱ组比较,Ⅲ组术后8 h时HR降低、术后24 h时血浆IL-6浓度降低(P<0.05).Ⅱ组和Ⅲ组镇痛满意率高于Ⅰ组(P<0.05).三组呼吸频率、恶心、呕吐和呼吸抑制发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 新生儿开腹手术后静脉输注舒芬太尼0.6 μg·kg~(-1)d~(-1)行术后镇痛效果好,有利于免疫功能的调节.     

Dietary salt regulates the phosphorylation of OSR1/SPAK kinases and the sodium chloride cotransporter through aldosterone

Pseudohypoaldosteronism type II (PHAII) is caused by mutations in the WNK1 and WNK4 genes (WNK with-no-lysine kinase). In a mouse model of this disease where a mutant of Wnk4 D561A was knocked in, increased phosphorylation of the sodium chloride cotransporter (NCC) was found and the transporter was concentrated on the apical membrane of the distal tubules. In addition, we recently found that other kinases, such as the oxidative stress response kinase-1/STE20/SPS1-related proline alanine-rich kinase (OSR1/SPAK), also showed increased phosphorylation in these mice. Here we determined whether this kinase cascade is regulated by dietary salt intake. We found that the phosphorylation states of NCC and OSR1/SPAK were increased by low-salt diets and decreased by high-salt diets; a regulation completely lost in the knock-in mice. Increased phosphorylation was reversed by spironolactone and this decreased phosphorylation was reversed by administration of exogenous aldosterone. These studies suggest that that the WNK-OSR1/SPAK-NCC cascade may be a novel effector system of aldosterone action in the kidney.     

Effect of spironolactone on K(+) homeostasis and ENaC expression in lymphocytes from chronic hemodialysis patients

BACKGROUND: Cardiac disease is the major cause of death in hemodialysis patients (HD). It is now clear that aldosterone has deleterious effects in the cardiovascular system. In the present study, we evaluated the effects of an aldosterone-antagonist, spironolactone, on the extrarenal regulation of potassium in HD patients. Furthermore, to validate the effectiveness of the spironolactone dose-design, we measured the expression of Na(+)-channel (ENaC alpha subunit) in peripheral blood mononuclear cells (PBMC), before and after a two-week course of spironolactone. METHODS: The study design included a two-week baseline period, followed by spironolactone treatment (50 mg three times weekly for 15 days), and by a two-week washout period and then a two-week placebo period. An oral K(+) load (0.3 mEq/K(+) kg body weight plus carbohydrates) was administered at the end of each period, and time-course of plasma potassium was evaluated. ENaC expression in PBMC was assessed before and after spironolactone. RESULTS: The maximal increase in plasma potassium after the K(+) carbohydrate load was: control 5.33 +/- 0.88 mEq K(+)/L; spironolactone 5.23 +/- 0.68 mEq K(+)/L; placebo 5.38 +/- 0.61 mEq K(+)/L (N= 9). No patients developed hyperkalemia during the spironolactone treatment period. ENaC expression was significantly higher in all six HD patients studied, compared to control subjects (P < 0.05). Treatment with spironolactone in HD patients reduced alpha subunit mRNA expression to values similar to those of normal subjects. CONCLUSION: Spironolactone may be considered for the treatment of selected chronic HD patients. The effect of the drug on a known target of aldosterone, the ENaC, demonstrates the effectiveness of the drug to block aldosterone effects in nonepithelial tissues.     

Dietary electrolyte-driven responses in the renal WNK kinase pathway in vivo

WNK1 and WNK4 are unusual serine/threonine kinases with atypical positioning of the catalytic active-site lysine (WNK: With-No-K[lysine]). Mutations in these WNK kinase genes can cause familial hyperkalemic hypertension (FHHt), an autosomal dominant, hypertensive, hyperkalemic disorder, implicating this novel WNK pathway in normal regulation of BP and electrolyte balance. Full-length (WNK1-L) and short (WNK1-S) kinase-deficient WNK1 isoforms previously have been identified. Importantly, WNK1-S is overwhelmingly predominant in kidney. Recent Xenopus oocyte studies implicate WNK4 in inhibition of both thiazide-sensitive co-transporter-mediated Na+ reabsorption and K+ secretion via renal outer medullary K+ channel and now suggest that WNK4 is inhibited by WNK1-L, itself inhibited by WNK1-S. This study examined WNK pathway gene expression in mouse kidney and its regulation in vivo. Expression of WNK1-S and WNK4 is strongest in distal tubule, dropping sharply in collecting duct and with WNK4 also expressed in thick ascending limb and the macula densa. These nephron segments that express WNK1-S and WNK4 mRNA have major influence on long-term NaCl reabsorption, BP, K+, and acid-base balance, processes that all are disrupted in FHHt. In vivo, this novel WNK pathway responds with significant upregulation of WNK1-S and WNK4 with high K+ intake and reduction in WNK1-S on chronic lowering of K+ or Na+ intake. A two-compartment distal nephron model explains these in vivo findings and the pathophysiology of FHHt well, with WNK and classic aldosterone pathways responding to drivers from K+ balance, extracellular volume, and aldosterone and cross-talk through distal Na+ delivery regulating electrolyte balance and BP.     

Endothelin-induced increased aldosterone activity mediates augmented distal nephron acidification as a result of dietary protein

The hypothesis that increased dietary protein augments distal nephron acidification through endothelin-mediated increased aldosterone activity was tested. Munich-Wistar rats were studied after 3 wk of diets with 50% high protein (HiPro) and 20% control (CON) casein-provided protein, the latter comparable to standard diet. HiPro versus CON rats had higher distal nephron H+ secretion by in vivo microperfusion as shown previously. Perfusion with inhibitors of Na+/H+ exchange (EIPA, 10(-5) M), H+-ATPase (bafilomycin, 10(-7) M), and H+-K+-ATPase (Sch 28080 [10(-5) M] and ouabain [10(-3) M]) support that higher Na+/H+ exchange and higher H+-ATPase but not higher H+-K+-ATPase activity mediated increased H+ secretion in HiPro rats. Oral bosentan, an endothelin A/B receptor antagonist, decreased distal nephron H+ secretion in HiPro rats as a result of reduced Na+/H+ exchange and H+-ATPase activity as shown previously by the authors' laboratory. HiPro versus CON rats had higher plasma aldosterone (60.9 +/- 5.9 versus 42.2 +/- 4.4 pg/ml; P < 0.024) and higher urine aldosterone excretion (21.9 +/- 3.9 versus 10.5 +/- 2.8 ng/d; P < 0.04) in the absence but not presence of bosentan, consistent with endothelin-mediated increased aldosterone secretion. HiPro rats that did versus did not ingest the aldosterone antagonist spironolactone had lower distal nephron H+ secretion (29.2 +/- 3.3 versus 42.1 +/- 3.8 pmol/mm per min; P < 0.05) as a result of lower H+-ATPase activity without differences in Na+/H+ exchange or H+-K+-ATPase activity. The data support that dietary protein provided as casein increases distal nephron acidification through endothelin-stimulated Na+/H+ exchange and endothelin-stimulated aldosterone secretion that increases H+-ATPase activity.     

西罗莫司预处理减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制

目的 探讨西罗莫司(SRL)预处理减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制.方法 将SD大鼠随机分为4组,每组12只.假手术对照组:开腹后仅用生理盐水纱布覆盖切口60min,关腹;假手术SRL组:手术方式同假手术对照组;实验对照组:开腹后夹闭肝门静脉左支、肝动脉左支及左肝管,60 min后开放血管;实验SRL组:手术方式同实验对照组.两SRL组大鼠术前2周开始给予SRL 2 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,术前6 h加用1次.而两对照组同期仅给予等体积无菌生理盐水灌胃.术后24 h分别采集各组大鼠的血液和肝组织,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,光镜下观察肝组织的病理学变化,采用流式细胞术检测肝组织中CD4~+ CD25~+ T淋巴细胞占单个核细胞的比例.采用实时聚合酶链反应检测肝组织中Foxp3 mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验检测血清巾转化生长因子-β(TGF-β)和白细胞介素10(IL-10)的含量.结果 假手术对照组和假手术SRL组血清ALT和AST均处于较低水平,而实验SRL组和实验对照组明显升高,且实验SRL组低于实验对照组(P<0.05).假手术对照组和假手术SRL组肝组织结构正常,实验对照组可见明显的片状坏死,实验SRL组肝小叶结构基本完整,未见明显细胞坏死.假手术对照组、假手术SRL组、实验对照组和实验SRL组CD4~+ CD25~+ T淋巴细胞占单个核细胞的比例分别为(6.12±1.87)%、(22.36±6.75)%、(4.53±1.02)%和(13.29±3.16)%.假手术SRL组Foxp3 mRNA的相对表达量以及血清中TGF-β和IL-10的含量明显高于假手术对照组(P<0.05),实验SRL组明显高于实验对照组(P<0.05).结论 SRL可以减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制可能与SRL诱导体内CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ 调节性T淋巴细胞的分化以及增加TGF-β和IL-10的分泌抑制炎症反应有关.