诊断超声对不同龄大鼠睾丸组织P53和Bcl—2蛋白表达的影响

目的探讨诊断超声对不同龄大鼠睾丸组织生精细胞Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白表达的影响。方法３６只ＳＤ雄性大鼠根据生后不同天数随机分为６组：Ⅰ组（出生后３０ｄ组）、Ⅱ组（出生后３０ｄ对照组）、Ⅲ组（出生后４５ｄ组）、Ⅳ组（出生后４５ｄ对照组）、Ⅴ组（出生后６０ｄ组,即性成熟组）、Ⅵ组（出生６０ｄ对照组）。应用ＨＰ８５００彩色血流超声诊断仪对大鼠睾丸对大鼠组织进行３０ｍｉｎ的持续辐照,２４ｈ后外死动物取睾丸进     

急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL系统表达改变及其意义

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生、发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义。方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型;采用ＴＵＮＥＬ法、原位杂交、半定量逆转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍ ＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（＜ ２４ 小时）,大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加;肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬｍ ＲＮＡ和蛋白质表达明显上调,且与肺组织细胞凋亡的增加相一致。结论：肺组织细胞凋亡以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达明显上调可能参与大鼠ＡＬＩ的发病机制。     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织Fas/FasL系统表达的变化及其意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达及细胞凋亡的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。     

急性肺损伤大鼠肺组织细胞凋亡及Fas／FasL系统表达改变？…

目的：探讨细胞凋亡与急性肺损伤（ＡＬＩ）发生,发展的关系以及Ｆａｓ和／ＦａｓＬ系统表达改变的意义,方法：复制内毒素性大鼠ＡＬＩ模型;采用ＴＵＮＥＬ法,原位杂交,半定量转录聚合酶链反应（ＳｑＲＴ－ＰＣＲ）及免疫组化等技术观察大鼠ＡＬＩ发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统蛋白质和ｍＲＮＡ表达的改变。结果：内毒素性ＡＬＩ早期（〈２４小时）大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡明显增加,肺     

酸性成纤维细胞生长因子减轻急性肠道缺血－再灌注对肝脏的损伤

采用大鼠肠系膜上动脉夹闭致肠缺血模型，观察酸性成纤维细胞生长因子（ａＦＧＦ）对肠缺血－再注流诱发肝损伤的防治效应。２４只大鼠随机分成ａＦＧＦ治疗组与肝素ＰＢＳ对照治疗组，分别于肠系膜上动脉夹闭４５ｍｉｎ后放松血管夹即刻从颈外静脉注入ａＦＧＦ２．６μｇ或相同剂量的肝素ＰＢＳ。用血浆酶学与肝形态学指标评价治疗效果。结果表明，经ａＦＧＦ治疗大鼠伤后第１天血浆中ＳＧＰＴ与ｓＧＯＴ较对照组明显减少（ＳＧＰＴ分别为１０００．２±３６７Ａｎｍｏｌ·ｓ￣（－１）／Ｌ与２６４５．５±１０５６．９ｎｍｏｌ·ｓ￣（－１）／Ｌ；ＳＧＯＴ分别为４２８０．９±１２４７．７ｎｍｏｌ·ｓ￣（－１）／Ｌ与６１２３．４±２０１９．２ｍｍｏｌ·ｓ￣（－１）／Ｌ，Ｐ＜０．０５）。组织学检查发现，经ａＦＧＦ治疗后大鼠肝嗜酸细胞浸润、脂肪降解、肝细胞空泡变等较对照组明显减轻，而糖原含量增多。ａＦＧＦ对肠缺血致肝损伤显著的防治效应可能来自于它在体内诱导的促分裂效应与非促分裂激素样活性等方面。提示：采用ａＦＧＦ治疗，有可能为内脏损伤修复开辟一条新的途径。     

再生障碍性贫血患者Fas抗原的表达及血浆可溶性Fas,FasL？…

目的 探讨Ｆａｓ（ＣＤ９５）／ＦａｓＬ（ＣＤ９５Ｌ）系统在再生障碍性贫血（再障）中的表达及临床意义。方法 用酶联免疫夹心法检测３２例再障患血浆可溶性Ｆａｓ,ＦａｓＬ（ｓＦａｓ,ｓＦａｓＬ）,用流式细胞术检测骨髓ＣＤ３４＾＋细胞,ＣＤ３４＾－细胞和外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣｓ）Ｆａｓ抗原的表达。结果 再障患骨髓ＣＤ３４＾＋细胞Ｆａｓ表达率显高于正常对照,且重型再障组较慢性再障组显增高,重型     

致痫大鼠脑组织中Fas表达及神经生长因子的干预性作用

目的：观察癫痫发作后大鼠脑组织中Ｆａｓ的表达及细胞凋亡的情况及神经生长因子（ＮＧＦ）的干预性作用。方法：采用ＬｉＣＬ－Ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎ致痫的Ｗｉｓｔｅｒ大鼠模型,通过ＴＵＮＥＬ和免疫组化方法对各组Ｆａｓ的表达、细胞凋亡情况进行观察。结果：癫痫后１ｈＦａｓ表达开始增加,１２ｈ达高峰,持续１周,Ｆａｓ的高表达与细胞凋亡的分布一致。ＮＧＦ组Ｆａｓ表达和细胞凋亡情况均致痫组有显的减少（Ｐ〈０．０１）,结论：癫痫发作可引起Ｆａｓ表达和细胞凋亡增加,ＮＧＦ有抑制Ｆａｓ表达和细胞凋亡增加的作用。     

诊断超声对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的研究

目的 检测诊断超声不同时间照身后对大鼠睾丸组织细胞凋亡的影响。方法 应用ＨＰ８５００彩色多普勒诊断仪（探头频率７．５ＭＨｚ,超声输出功率６．８Ｗ,空间平均时间平均声强（Ｉｓａｔａ）３．４ｍＷ／ｃｍ＾２）固定特续照射大鼠睾丸组织,分为５分钟组、１０分钟组、２０分钟组,３０分钟组和空照组。照射后２４小时取睾丸,应用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（ＴＵＮＥＬ）技术检测上述各组凋亡细胞。结果 超声持续照射５     

超声辐照后胎鼠脑Fos蛋白的表达与细胞凋亡的关系

近年来诊断剂量彩色多普勒超声辐照后 ,生物体分子水平发生的变化已有报道 ,既有报道超声可诱导ｃ ｆｏｓ ,Ｆａｓ/ＦａｓＬ等凋亡相关基因的表达[1,2 ] ,又有报道超声可导致细胞凋亡增加[3 ,4] 。那么超声所诱导的上述变化之间是否有联系呢 ?本实验应用诊断剂量超声辐照孕中晚期宫内胎鼠 ,采用免疫组化及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记技术 ,检查胎鼠脑组织的变化 ,旨在探讨二者之间的联系。材料与方法一、实验动物1.实验动物分组 :健康成熟孕第 18ｄ的ＳＤ大鼠 2 0只 (第四军医大学动物中心提供 ) ,随机分为 2组 ,Ⅰ组为实验组 ,Ⅱ组为对照…     

结肠腺瘤与腺癌Fas,FasL蛋白的表达及意义

应用免疫组化法检测了３０例结肠腺癌与１０例结肠腺瘤病例的Ｆａｓ，ＦａｓＬ蛋白表达。结果显示：结肠癌与腺瘤Ｆａｓ的阳性表达率差异无显著性（Ｐ＞０．０５），但腺癌组ＦａｓＬ的阳性表达率显著高于腺瘤组。结肠癌组Ｆａｓ与ＦａｓＬ表达之间，两者同时表达阳性率２６．６７％；Ｆａｓ阴性、ＦａｓＬ阳性率为２０％。同时表达阴性率３０％。Ｆａｓ阳性、ＦａｓＬ阴性率为２３．３３％。结肠癌Ｆａｓ，ＦａｓＬ的阳性表达与其组织学分级、临床分期及淋巴结转移之间无相关关系。提示结肠癌细胞表达Ｆａｓ或（和）ＦａｓＬ是逃避机体免疫作用的肿瘤生物学特征，其机制复杂且多样化     

参附注射液对心肌细胞缺氧及缺氧/复氧时Fas/FasL表达的影响

目的 探讨参附注射液（SF）对培养的乳鼠心肌细胞缺氧及缺氧／复氧时凋亡相关基因Fas／FasL蛋白表达的影响。方法 按常规培养新生4d乳鼠心肌细胞，于培养24h后进行缺氧及缺氧／复氧实验。以免疫组织化学方法检测心肌细胞Fas／FasL蛋白表达的变化。结果 缺氧4．5h及10．5h后，心肌细胞Fas／FasL蛋白的阳性表达指数（positive expression index，PEI）均显著高于对照。10．5h组与4．5h组无明显差异。参附注射液组PEI明显低于缺氧组（P〈0．05）。缺氧30min后再给氧4h与10h，心肌细胞Fas／FasL蛋白的PEI显著高于对照，复氧10h组与4h组无明显差异，参附注射液组PEI低于无SF组（P〈0．05）。结论 缺氧及缺氧／复氧时均有凋亡相关基因Fas及其配体FasL蛋白表达的增强，参附注射液可通过下调Fas／FasL蛋白表达，减少凋亡从而减轻缺氧损伤及缺氧／复氧损伤。     

大鼠肾缺血/再灌注损伤不同时相Fas、FasL蛋白表达及意义

AIM: To study the relationship between the expression of Fas/FasL protein and apoptosis in rats after renal ischemia/repernision. METHODS: Establish the models of renal ischemia/reperfusion injury in rat and SABC im-munohistochemical methods were used to detect the changes of expression of Fas/FasL protein. Pathomorphological changes in renal ischemia/reperfusion injury were observed. RESULTS: The expression of Fas/FasL proteins was negative in the sham operated group. Fas/FasL proteins were increased in renal in ischemia/reperfusion group, and gradually upregulated with the duration of ischemia or reperfusion and peaked at 72 h of reperfusion. The expression of Fas/FasL proteins was atronger in 60 min ischemia group than 30 min ischemia group and they were mainly expressed in renal tubule. We observed local necrosis and inflammatory cells infiltration around infracted area in ischemia/repernision group by HE dyeing methods. And the necrosis area was mainly occurred around proximal convoluted tubule. CO     

诊断超声对人早孕绒毛bc1—2蛋白表达的研究

目的：检测诊断超声与人早孕绒毛bc1-2蛋白表达的关系。方法：对拟进行人工流产的24例早孕（45－60天）妇女随机分为4组;对照组为空白照射组,10min组,20min组和30min组,应用HP 8500彩色多普勒超声诊断仪,对孕囊进行不同时间的持续照射,照射后25h取材,用免疫组织化学技术检测上述各组绒毛滋养层细胞bc1-2蛋白表达情况。结果：超声照射后10min组绒毛滋养层细胞bc1-2蛋白表达率与对照组无差别（P＞0．05）,20min和30min组滋养层细胞表达率明显减少,显著低于对照组和10min组（P＜0．001）,结论：诊断超声持续照射早孕孕囊组织＞10min可引起绒毛滋养层细胞bc1-2蛋白表达率下降,可能与细胞凋亡增加有关。     

Role of endogenous nitric oxide in TNF-alpha and IL-1beta generation in hepatic ischemia-repefusion

In the present study, we examined the role of nitric oxide (NO) in early-response cytokine production by using a rat model of hepatic ischemia-reperfusion (HI/R). The left and median lobes of the liver were subjected to 30 min of ischemia, followed by 4 h of reperfusion. Group I and II rats were sham-operated controls that received saline (vehicle) or N(W)-nitro-L-arginine methylester (L-NAME) (10 mg/kg, iv); group III and IV rats were subjected to HI/R and received vehicle or L-NAME (10 mg/kg, iv, 10 min before reperfusion), respectively. Administration of L-NAME to rats subjected to I/R resulted in a fourfold decrease in plasma NO levels, accompanied by a marked increase of plasma alanine aminotransferase (ALT) activity relative to group III. These changes in group IV were associated with elevation of superoxide generation in ischemic liver lobes by 2.1-fold and circulating leukocyte number by 1.42-fold, compared with group III. Normalized for expression of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) messenger ribonucleic acid (mRNA), expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and interleukin-1beta (IL-1beta) mRNA in ischemic liver of group IV was augmented by 207% and 175% compared with Group III. The expression of (iNOS) mRNA was also increased (223%) relative to group III. Moreover, in group IV, plasma TNF-alpha levels at 4 h of reperfusion and IL-1beta levels at 90 min and 4 h of reperfusion were significantly increased compared with group III. No statistically significant changes were observed between groups I and II in plasma ALT activity, plasma NO levels, circulating leukocyte counts, superoxide generation in the ischemic lobes of liver, and plasma TNF-a and IL-1beta concentrations. The observed enhancement of I/R injury by L-NAME is consistent with the hypothesis that endogenous NO down-regulates TNF-alpha and IL1beta generation, thereby decreasing HI/R injury.     

罗格列酮对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及其基因表达的影响

目的:观察急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡率、凋亡调控基因Fas/FasL的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法:通过结扎雄性Wistar大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死模型,心肌梗死后24 h随机分为心肌梗死组(A组,n=18)和罗格列酮干预组(B组,n=18),另设假手术组(C组,n=18)。B组每日给以罗格列酮灌胃(4 mg/kg),持续6周。A、C组每日给以等量生理盐水灌胃。6周后检测心肌非梗死区中细胞凋亡率、细胞凋亡基因Fas mRNA和Fas/FasL蛋白的表达量。结果:给药6周后急性心肌梗死组A、B组心肌细胞中心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL及其蛋白表达与C组相比显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与A组相比,B组中心肌细胞凋亡指数,Fas/FasL基因及其蛋白表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠心肌梗死后心肌细胞中细胞凋亡率、Fas/FasL基因及蛋白表达显著增高;而罗格列酮可以降低大鼠心肌梗死后心肌细胞中Fas/FasL基因及蛋白表达,减少心肌细胞凋亡。     

慢性肾衰竭患者血清sFas、sFasL水平变化及其与颈总动脉病变的相关性研究

目的探讨尿毒症心血管疾病（CVD）患者血清可溶性Fas、FasL（sFas、sFasL）水平与相关因子和颈总动脉血管内膜-中层厚度（IMT）的相关性。方法选择第二军医大学长征医院肾内科尿毒症血液透析（HD）伴CVD患者组103例，慢性肾病（CKD）[15〈GFR〈50ml／（min·1．73m^2）]伴CVD未透析患者组30例，正常对照组30例入选。采用酶联免疫双抗体夹心法（ELISA）测定血清sFas、sFasL、C反应蛋白（CRP）、白蛋白浓度。免疫组化观察桡动脉血管内皮细胞的FaS、FasL表达；采用荧光逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）测定Fas、FasL mRNA的含量；彩色超声波测量颈总动脉血管内膜-中层厚度（IMT）。结果HD、CKD组血清中可溶性FasL显著高于正常对照组（P〈0．01），HD与CKD组水平差异无统计学意义，血清中可溶性Fas显著低于正常对照组（P〈0．01）。HD组血管壁Fas、FasL表达明显高于正常对照组。荧光RT-PCR Fas、FasL mRNA定量分析HD组较正常对照组高50．00％。63．49％（40／63）HD组患者IMT增厚。双变量线性相关分析发现，sFasL与CRP及IMT均呈明显的正相关r=0．58，r=0．64），P〈0．01：与白蛋白水平及肌酐清除率呈负相关（r=-0．53r=-0．62），P〈0．01；sFas则与之相反。结论血清sFasL水平及血管壁Fas、FasL高表达可能与动脉粥样硬化相关，其确切机制值得进一步研究。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-2与足月及早产新生大鼠高氧肺损伤的关系

目的 探讨高浓度氧对足月及早产新生大鼠肺发育的影响及高氧肺损伤与胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的关系.方法 将孕22 d自然出生(足月)及孕21 d行剖宫术提前娩出(早产)的新生大鼠在生后2 d随机分为足月空气组(I组)、足月高氧组(Ⅱ组)、早产空气组(Ⅲ组)、早产高氧组(Ⅳ组).Ⅱ、Ⅳ组持续暴露于氧含量为85%的氧箱中,I、Ⅲ组置于同室空气中.每日记录大鼠存活率,分别于出生后4、7、10、14和21 d活杀取肺组织标本,作病理学检查、辐射状肺泡计数(RAC).用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别测定IGFBP-2肺表达浓度及mRNA表达.结果 高氧组自出生7 d后大鼠存活率较空气组显著下降(P均0.05).空气组肺组织无炎症病变;高氧组出生7 d和14 d时呈肺泡炎改变,21 d时肺泡炎改变明显加重,且肺泡生成受阻滞,肺泡结构囊泡化;Ⅱ、Ⅳ组各时间点RAC值较相应I、Ⅲ组显著减少(P均<0.01).高氧Ⅱ、Ⅳ组出生4 d和14 d IGFBP-2表达强度均较对应的I、Ⅲ组增强(P均<0.01);IGFBP-2 mRNA表达变化与其肽浓度变化相似.结论 长期高氧暴露可引起足月和早产新生大鼠亚急性肺损伤和肺发育阻滞,IGFBP-2异常表达;这可能是高氧导致亚急性肺损伤及肺发育阻滞的重要机制之一.     

Detrimental effects of 60 kHz sonothrombolysis in rats with middle cerebral artery occlusion

Recent studies have raised concerns about the safety of low frequency ultrasound in transcranial therapeutic application in cerebral ischemia. This study was designed to evaluate safety aspects and potential deleterious effects of low frequency, 60 kHz ultrasound in treatment of experimental middle cerebral artery occlusion (MCAO) in rats. Forty-five male Wistar rats were submitted to either temporary (90 min; groups I and II) or permanent MCAO (groups III and IV) using the suture technique. All animals received recombinant tissue plasminogen activator (rt-PA) starting 90 min after the beginning of occlusion. Groups I and III were additionally treated with 60 kHz ultrasound (time average acoustic intensity 0.14 W/cm(2), duty cycle 50%). Outcome assessment consisted of magnetic resonance imaging (MRI) and clinical evaluation after 5 and 24 h, and histology (perfusion fixation after 24 h). Overall mortality was higher in animals treated with ultrasound (43% versus 29% in controls). Most animals died during the insonation period (25% in group I, 36% in group III, no animals in the corresponding control groups; p < 0.05). Histology revealed disseminated microscopic intracerebral bleeding and subarachnoid hemorrhage as one possible cause of death. After temporary occlusion, the hemispheric ischemic lesion volume was more than doubled in animals treated with ultrasound (20.3% +/- 14.1% versus 8.6% +/- 5.1% in controls; p < 0.05). No difference in lesion volume was seen after permanent MCAO. Neurological assessment showed impairment of hearing as an additional specific side effect in ultrasound treated animals (65%, no impairment in controls). Although the results are not directly transferable to the human setting, this study clearly demonstrates the potential limitations of low frequency therapeutic ultrasound and the importance of pre-clinical safety assessment.     

超声靶向微泡介导PEDF质粒转染小鼠肝癌的实验研究

目的探讨超声靶向微泡介导色素上皮源性因子(PEDF)质粒转染HepG2荷瘤裸鼠的治疗价值。方法建立裸鼠HepG2肝细胞肝癌模型,随机分为5组。Ⅰ组:对照组;Ⅱ:PEDF质粒组;Ⅲ组:PEDF质粒+微泡组;Ⅳ组:微泡+超声辐照组;Ⅴ组:PEDF质粒-微泡+超声辐照组。疗程结束后观察瘤结节的超声造影特征,计算抑瘤率,并检测瘤组织PEDF蛋白表达。应用SPSS软件分析各组间各参数的差异。结果疗程结束后,Ⅴ组瘤结节超声造影增强明显弱于Ⅰ组;Ⅳ组及Ⅴ组抑瘤率明显高于Ⅱ、Ⅲ组;Ⅴ组瘤组织PEDF蛋白表达高于其他各组。结论超声靶向微泡介导PEDF质粒有助于提高质粒转染率,抑制肿瘤血管生成及肿瘤生长,为肝细胞肝癌的治疗提供了一个新的途径。