应用错配PCR和限制性片段长度多态性分析技术检测HBV YMDD变异株

目的：建立简便易行的检测乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶基因（P基因）上YMDD变异株的方法，评价运用拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患对此变异的影响，方法：采用套式／错配聚合酶链反应（PCR）结合限制性片段长度多态性（RFLP）分析技术对108例治疗前HBV DNA（PCR）阳性正在拉米夫定治疗中的慢性乙型肝炎患者的HBV YMDD变异情况进行检测。结果：运用上述技术能有效区分HBV YMDD野生株和变异株，上述108例患者经拉米夫定治疗后，HBV DNA阴转者63例（58．3％），HBV YMDD野生株和变异株分别为23例（21．3％）和22例（20．4％），结论：建立的套式／错配PCR－RFLP分析技术可用于HBV YMDD变异株的临床监测，拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者可导致部分患者的HBV多聚酶基因上YMDD发生变异。     

乙型肝炎病毒多聚酶基因YMDD变异与临床治疗反应

目的：了解深圳地区慢性乙型肝炎患者在长期拉米夫定治疗中HBV多聚酶基因YMDD变异的情况及其对治疗反应的影响。方法：对100例拉米夫定治疗中28例出现血清病毒核酸（HBV DNA）阳性的患者,采用限制性片段长度多态性分析法（PCR－RFLP）检测YMDD变异,并观察其血清HBV DNA及丙氨酸转氨酶（ALT）水平。结果：100例中有17例YMDD变异阳性，其中以YVDD（M550V）变异为主,占64．7％（11／17），YIDD（M550I）变异为35．3％（6／17）。发生YMDD变异的患者均伴有HBV DNA及ALT水平反跳，1例住院患者停用拉米夫定后出现病情加重。结论：深圳地区慢性乙型肝炎患者在长期拉米夫定治疗中（疗程1年，100md/d）HBV多聚酶基因YMDD变异率为17．0％（17／100）。发生变异者较无变异者疗效降低，检测YMDD变异有助于监测疗效。     

拉米夫定治疗50例慢性乙型肝炎患者自身前后对照试验

目的：探讨拉米夫定对慢性乙型肝炎病人的临床疗效。免疫学状态（HBeAg血清转换）、HBV DNA水平及YMDD耐药株（YIDD／YVDD）的影响。方法；观察50例乙肝病人口服拉米夫定治疗前和治疗后12周，24周，36周，48周的肝功能（ALT）及免疫学指标的变化，并采用荧光定量PCR技术检测HBV DNA含量和YMDD耐药变异株。结果：治疗前50例病人中有3例抗－HBe阳性，47例HBeAg阳性。治疗后12－24周有9例（19％，9／47）HBeAg转阴，其中3例出现抗－HBe，有1例HBeAg和HBsAg先后消失，治疗前病人血清YMDD变异检测结果为YMDD4例，YVDD22例，YMDD＋YVDD11例，其他尚不明确，在治疗后36－48周时，14例（14／50，28％）出现反跳，HBV DNA升高超过两个数量级，其中只有3例伴ALT升高但未超过治疗前的基线值，并在36周时由YMDD变异为YIDD，结论：拉米夫定用药9－12个月后28％出现HBV DNA升高，但不伴严重的临床改变，治疗前野生型YMDD仅是少数，而YVDD占多数，个别IDD诉出现常伴ALT的和HBV DNA的升高。     

拉米夫定联合胸腺肽α_1治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎临床观察

目的：研究拉米夫定联合胸腺肽治疗HBeAg阴性的慢性乙型肝炎的临床疗效和安全性。方法：60例乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阴性的慢性乙型肝炎患者随机分成治疗组和对照组。治疗组30例患者同时使用胸腺肽α1和拉米夫定6个月,随后单用拉米夫定6个月;对照组30例,仅给予拉米夫定12个月。动态观查患者血清HBV DNA和肝功能变化及YMDD变异。结果：全部患者完成12个月治疗,治疗组ALT复常率、HBV DNA阴转率明显高于对照组,治疗组YMDD变异率明显低于对照组。结论：拉米夫定单独或联合胸腺肽α1,均具有抑制乙型肝炎病毒作用,联合用药有改善肝功,且有提高HBV DNA阴转率及减少YMDD变异率的趋势。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床观察及YMDD耐药变异株检测

目的:探讨拉米夫定在治疗慢性乙型肝炎患者的疗效以及监测拉米夫定临床治疗过程中耐药性的产生,更好地指导临床用药。方法:对117例用拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者,进行HBV-DNA含量、ALT、HBeAg检测以观察其疗效,同时对出现治疗后HBV-DNA反弹和ALT回升的患者,进行乙型肝炎病毒聚合酶基因(Pgene)酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸YMDD位点变异性测定。结果:拉米夫定治疗2个月、6个月、12个月、18个月后HBV-DNA阴转率分别为86.2%、90.6%、84.6%、82.1%,HBV-DNA含量下降明显。ALT复常率为10.3%、68.4%、82.9%、81.2%。HBeAg的阴转率相对较低为0.85%、3.4%、16.2%、36.8%。117慢性乙型肝炎患者拉米夫定治疗6个月后YMDD变异2例,12个月16例,到18个月累计共有19例YMDD变异阳性的患者,占16.2%,其中以YVDD变异为主,YVDD变异14例,占73.7%,而YIDD变异仅5例,为26.3%。发生YMDD变异的患者HBV-DNA含量以及ALT回弹,HBeAg发生阳转。结论:拉米夫定是一种乙型肝炎抗病毒治疗新药,具有很强的抑制HBV复制的作用,对慢性乙型肝炎有较好的临床疗效。但随拉米夫定长期服用可能出现耐药性,主要是由HBVP基因区YMDD的变异所引起的,产生YIDD、YVDD耐药突变株,对YMDD耐药变异株的监测,为抗病毒治疗提供分子生物学依据以及指导临床用药。     

214例慢性乙肝患者HBV YMDD变异检测及临床意义

目的：了解口服拉米夫定的慢性乙型肝炎患者HBV P区发生YMDD变异的情况,并探讨其相关影响因素。方法：应用实时荧光PCR法检测HBV YMDD变异株的方法,对214例用拉米夫定进行抗乙肝病毒治疗的慢性乙肝（CHB）患者血清进行HBV P区YMDD变异检测分析。结果：214例慢性乙肝患者YMDD变异率为32.7%,其中YIDD变异34例,YVDD变异30例,混合变异6例。YMDD未变异组治疗前谷丙转氨酶（ALT）水平显著高于变异组;而YMDD变异组治疗前HBV DNA含量显著高于未变异组;YMDD未变异组与变异组之间治疗前的患者性别、年龄和HBeAg状态等方面差异无统计学意义。结论：HBV YMDD变异可能与患者治疗前ALT水平和HBVDNA含量有一定关系,而与患者的性别、年龄和血清HBeAg状态无关。     

拉米夫定预防肝移植术后乙型肝炎病毒再感染的作用

目的：探讨拉米夫定在预防肝移植术后乙型肝炎病毒（HBV）再感染中的作用。方法：40例HBV相关疾病患者肝移植术后常规采用拉米夫定预防HBV再感染,同时监测乙型肝炎血清标记物,血清HBV－DNA,YMDD区变异,肝活检组织乙型肝炎标记物免疫组化,结果：肝移植术后拉米夫定单一预防用药6个月HBV再感染率为12．2％,12个月再感染率为23．5％,4例患者HBV－DNA转阳性,其中3例YMDD区产生变异,订前HBV DNA阳性的患者在肝移植术后HBV再感染率高,而患者术前HBeAg的状态与肝移植术后HBV再感染无明显相关。结论：拉米夫定可以有效地预防肝移植术后HBV再感染,在拉米夫定用药的基础上HBV再感染可以产生YMDD区变异,HBV相关疾病患者行肝移植时术前应使HBV,DNA转阴性。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎不同病毒基因型患者的疗效

目的探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）基因型与拉米夫定疗效的关系。方法选用200例HBV DNA、HbeAg阳性,血清丙氨酸氨基转氨酶（ALT）异常的慢性乙型病毒性肝炎患者,口服拉米夫定（100mg／d）24个月。采用荧光探针定量PCR（FQ—PCR）检测HBVDNA,分析乙肝病毒野生型YMDD及突变耐药型YIDD／YVDD,HBV基因分型。结果200例慢性乙肝患者C基因型占39％,B基因型占26％,D基因型占22％,B＋C混合基因型占10％,其他占3％,包括1例出现YIDD耐药株。口服拉米夫定12个月后,YMDD变异发生率为6％（12／200）;口服拉米夫定24个月后,YMDD变异发生率为15％（30／200）。结论本研究中乙肝患者HBV基因型以C型为主,其次为B型及D型：服用拉米夫定后大多数患者的DNA水平明显降低,拉米夫定治疗可加速病毒YMDD变异发生,且与服药时间呈正相关;YMDD突变与乙肝病毒的基因型无关。     

乙肝拉米夫定治疗前后YMDD变异与DNA载量的关系

目的探讨原发性肝癌患者拉米夫定治疗前后HBV YMDD变异与HBV DNA复制水平的相关性,为临床治疗提供依据。方法应用实时荧光聚合酶链反应（PCR）技术检测72例原发性肝癌患者未服用拉米夫定治疗前血清HBV DNA载量以及服用拉米夫定治疗12个月血清中YMDD突变情况。结果 72例原发性肝癌患者中,出现YMDD变异者35例（48.6%）,其中YIDD变异者28例,YVDD变异者4例,YIDD和YVDD混合变异者3例。治疗后YMDD突变组HBV DNA载量显著高于YMDD野生组,拉米夫定治疗后YIDD及YIDD＋YVDD杂合型的突变率明显增加,而对YVDD的突变率则有所降低。结论拉米夫定对原发性肝癌患者治疗前后HBV DNA复制水平无显著影响,而拉米夫定治疗后HBV DNA复制水平与YMDD突变具有相关性,可作为早期监测原发性肝癌HBV YMDD突变的观察指标之一。     

拉米夫定治疗中乙肝病毒聚合酶YMDD变异的早期预测因子研究

目的：建立HBV多聚酶YMDD变异的快速检测方法，并藉此进行临床流行病学研究，以了解应用拉米夫定治疗乙肝过程中YMDD变异的发生率及其早期预测因子。方法：收集91例应用拉米夫定治疗的慢性HBV感染者临床资料及系列血清。应用mpPCR-RFLP技术检测治疗过程中HBV DNA复现患者的YMDD变异情况，并采用SPSS软件进行统计学分析。结果：检出YMDD变异35例（38．5％），其累计发生率在治疗12和18个月时分别为20．48％、53．46％。拉米夫定治疗前诊断为肝硬变者YMDD变异出现较早（P=0.0279)，在慢性肝炎中HBeAg阳性者YMDD出现较早（P=0.0296)。Cox比例风险模型显示：肝硬变（P=0.0092)和HBeAg阳性（P=0.0778)与YMDD变异有关。结论：慢性肝炎中HBeAg阳性和肝炎肝硬变可作为拉米夫定治疗过程中YMDD变异的早期预测因子。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。