基于Th17/Treg/Th1免疫失衡探讨长蛇灸干预强直性脊柱炎的疗效及机制研究

目的:探讨长蛇灸干预强直性脊柱炎(AS)的疗效及作用机制。方法:60例AS患者随机分为观察组和对照组,每组30例。观察组给予长蛇灸疗法,一组穴以督脉穴大椎至腰俞为主,另一组穴以两侧夹脊穴为主,两组交替使用,每日灸1次,连续治疗7 d为一疗程,疗程间间隔3 d,共治疗4个疗程;对照组给予西药常规治疗,即柳氮磺胺吡啶配合非甾体抗炎药,连续服药7 d为一疗程,治疗4个疗程。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血浆白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测辅助性17细胞(Th17)、调节性T细胞(Treg)、T辅助细胞1型(Th1)的特异性转录因子Fox P3、T-bet的m RNA表达水平;采用流式细胞术检测CD_4~+CD_(25)~+Fox P3细胞、CD_4~+Th1细胞、CD_4~+Th17细胞的比率及炎性反应指标C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的变化,并比较两组疗效。结果:治疗后观察组总有效率为93.3%(28/30),优于对照组的86.7%(26/30,P0.05);观察组治疗后CRP、ESR、IL-6、IL-17、IL-23、TNF-α水平及CD_4~+Th17细胞比率较治疗前显著下降(均P0.05),Fox P3、T-bet的m RNA表达及CD_4~+CD_(25)~+Treg、CD_4~+Th1细胞比率较治疗前显著增加(均P0.05),且变化程度均较对照组显著(均P0.05);对照组CRP、ESR、IL-6、IL-17、IL-23、TNF-α水平及CD_4~+Th17细胞比率有所下降,Fox P3、T-bet的mRNA表达及CD_4~+CD_(25)~+Treg、CD_4~+Th1细胞比率有所增加,但治疗前后差异无统计学意义(均P0.05)。结论:长蛇灸能有效改善AS患者临床症状,调节患者Th17/Treg/Th1免疫失衡,其作用的靶点可能是通过调节AS免疫紊乱及紊乱所致的炎性应答而发挥双向良性调节作用。     

熊果酸对胶原诱导性关节炎大鼠外周血Th17/Treg细胞比例失衡的影响

目的:研究熊果酸(UA)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血淋巴细胞辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例失衡的影响。方法:雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,复制CIA模型,造模成功后CIA大鼠随机分为CIA模型组、UA低剂量组、UA高剂量组、甲氨喋呤(MTX)组、UA+MTX组并予以对应处理。于初次免疫21 d时,收集各组大鼠的外周血淋巴细胞,进行细胞染色,流式细胞术检测外周血Th17/Treg细胞比例,并分离CD~+_4T细胞,RT-PCR法检测RORr、FoxP3、SOCS3mRNA的表达。结果:(1)与空白组相比,模型组CIA大鼠外周血Th17细胞明显增高,与模型组比较,治疗组(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)Th17细胞比例明显下调;有显著统计学差异(P0.01)。(2)与空白组相比,模型组大鼠的外周血Treg细胞明显下调;与模型组比较,治疗组(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)Treg细胞比例增高,有统计学差异(P0.05);(3)与空白组相比,模型组RORr升高,FoxP3、SOCS3降低;与模型组相比,各治疗组RORr均降低,FoxP3(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)表达升高,SOCS3mRNA(UA低剂量组、UA高剂量组、UA+MTX组)表达升高。结论:UA高剂量组、UA+MTX组能抑制CD~+_4T细胞向Th17细胞分化,降低Th17细胞比例,升高Treg细胞比例,维持Th17/Treg细胞平衡,这是UA缓解实验性CIA关节炎症的可能机制。     

益肾安宫方治疗复发性流产疗效及对患者外周血T细胞亚群和细胞因子表达水平的影响

目的:探讨益肾安宫方用于复发性流产(RSA)的疗效及其对外周血T细胞亚群比例和细胞因子表达水平的影响。方法:选取89例RSA非孕期患者为研究对象,按照随机数表法分为治疗组、对照组,其中对照组给予黄体酮治疗,治疗组给予黄体酮联合益肾安宫方治疗,两组均持续治疗3周。比较两组治疗后1年的妊娠结局、治疗前后外周血T细胞亚群的比例和细胞因子表达水平。结果:治疗组的妊娠成功率和活产率均明显大于对照组(均P0.05)。治疗前两组Th1、Th2、Th17和Treg细胞比例相比均无统计学差异(均P0.05)。经治疗,治疗组Th1和Th17细胞比例均明显低于对照组,Th2和Treg细胞比例均明显高于对照组(均P0.05)。治疗前两组IFN-γ、IL-4、IL-17和Treg水平相比均无统计学差异(均P0.05)。治疗后治疗组IFN-γ和IL-17水平均明显低于对照组,IL-4和TGF-β水平均明显高于对照组(均P0.05)。治疗前两组T-bet、GATA-3、STAT-3、FOXP3和RORγt mRNA表达水平相比均无明显差异(均P0.05)。治疗后治疗组T-bet、STAT-3和RORγt mRNA表达水平均明显低于对照组,GATA-3和FOXP3mRNA表达水平均明显高于对照组(均P0.05)。结论:益肾安宫方治疗RSA患者可以有效改善其妊娠结果,调节T细胞亚群分化失衡状态,并有效改善相应的细胞因子水平及转录因子的表达。     

五虎汤对病毒诱发幼年哮喘大鼠肺组织初始CD4~+T细胞转录因子表达的影响

目的:探讨五虎汤对病毒诱发幼年SD哮喘大鼠肺组织初始CD4+T细胞转录因子mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用RSV诱导,OVA致敏加激发制备大鼠哮喘模型。造模成功后,随机分成五虎汤高、中、低(4.752g/kg、2.376g/kg、1.188g/kg)剂量组,阳性对照组(地塞米松片,2.4mg/kg),哮喘模型组和空白对照组6组。治疗14d后,取肺组织,分别采用RT-PCR及免疫印迹法检测肺组织初始CD4+T细胞转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3 mRNA及其蛋白表达情况。结果:模型组T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白较正常对照组表达降低(P0.05),GATA-3、RORγt mRNA及蛋白较正常对照组表达升高(P0.05);与模型组比较,五虎汤干预后,高剂量组T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白表达显著升高(P0.01),GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达显著降低(P0.01);中剂量组T-bet、Foxp3 mRNA及蛋白表达升高(P0.05)、GATA-3、RORγt mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。结论:五虎汤通过抑制转录因子GATA-3、RORγt表达、促进转录因子T-bet、Foxp3表达,进一步调控Thl/Th2、Th17/Treg细胞平衡和免疫功能进而抑制哮喘气道炎症形成。     

长蛇灸对强直性脊柱炎的炎症因子水平及关节活动度的影响*

目的：探讨长蛇灸对强直性脊柱炎(AS)患者的炎症因子水平及关节活动度的影响。方法：60例强直性脊柱炎(AS)患者随机分成观察组和对照组,各30例,观察组在口服柳氮磺胺吡啶的基础上给予长蛇灸治疗(选取两组经穴：一组以脊柱督脉经穴大椎穴至腰俞穴为主,另一组以两侧华佗夹脊穴颈1至骶髂关节部为主),两组交替使用,每次灸3壮,3日1次,2次之间间隔1日,连续治疗8次(1月);对照组在口服柳氮磺胺吡啶的基础上给予塞来昔布胶囊(西乐葆)治疗,每日2次,每次100mg,连续口服治疗1月。采用ELISA法检测外周血白细胞介素-17( IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,流式细胞术检测C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)的变化,并比较两组疗效。结果：治疗后两组疗效比较,观察组总有效率为80.00%,优于对照组总有效率63.33%,差异具有统计学意义(P<0.05);组内比较：观察组IL-17、TNF-α、CRP、ESR炎症因子水平较治疗前明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),关节活动度较治疗前明显改善,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组IL-17、TNF-α、CRP较治疗前有所下降,差异无统计学意义(P>0.05),ESR较治疗前明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),关节活动度较治疗前有所改善,差异无统计学意义(P>0.05)。组间比较：与对照组比较,观察组能有效降低炎症因子水平、改善患者关节活动度,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：长蛇灸能有效降低AS细胞炎症因子水平,进而改善AS患者的慢性炎症状态,其作用的机制可能与长蛇灸具有抗炎作用有关;长蛇灸能有效改善AS关节功能活动度,防止关节畸形,降低致残率。     

复发性唇疱疹实热“上火”患者免疫功能变化

目的:探讨复发性唇疱疹实热"上火"患者Th17、Treg、CD8、CD19细胞含量及Th17、Treg相关细胞因子变化,从免疫学角度探讨复发性唇疱疹实热"上火"发病机制,为该病防治提供理论基础。方法:临床上收集复发性唇疱疹实热"上火"患者28例和非疱疹人46例(正常平和质26例、非复发性疱疹阴虚和非复发性疱疹实热型10例),采用流式细胞检测仪检测外周血Th17、Treg、CD8、CD19细胞含量;采用Elisa法检测血浆中IL-4、TGF-β、IL-2、IL-10、IL-17A和GM-CSF细胞因子含量。结果:与正常平和质人相比,RHL实热患者外周血淋巴细胞中Th17细胞、CD~+_4CD~+_(25)Treg细胞、Foxp3~+Treg细胞含量显著升高(P0.05);IL-2、IL-10和TGF-β含量显著升高(P0.05)。与非复发性疱疹阴虚人相比,RHL实热患者Th17细胞和记忆B细胞(CD~+_(19))含量显著升高(P0.05),非复发性疱疹实热患者血浆TGF-β显著上升(P0.05)。与非复发性疱疹实热型相比,检测指标无统计学差异。非复发性疱疹实热外周血B细胞(CD~+_(19))细胞含量显著高于非复发性疱疹阴虚人(P0.05)。结论:复发性唇疱疹实热"上火"患者可能与免疫功能紊乱密切相关。     

养阴方对HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠Th17、Treg细胞失衡的作用研究

目的考察在热休克蛋白(HSP)65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE~(-/-)小鼠分别饲喂普通和高脂饲料,并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养阴方对AS模型小鼠血脂、斑块、Th17细胞与Treg细胞比例(Th17/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术测定抗凝血中IL-17A~+CD4~+Th17及Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-17、IL-2、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-10水平;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定脾脏中Stat3、Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、Stat5a mRNA表达;Western blotting法测定脾脏中磷酸化STAT3(pSTAT3)、磷酸化STAT5(pSTAT5)、FOXP3和主动脉中pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P0.01),HDL显著升高(P0.05);主动脉斑块面积明显减小(P0.01);外周血IL-17A~+CD4~+Th17细胞显著减少(P0.05),Foxp3~+CD25~+CD4~+Treg显著增加(P0.05),Th17/Treg值大幅下降(P0.01);血清IL-6水平显著下降(P0.05),IL-2(P0.01)、TGF-β(P0.05)、IL-10(P0.05)水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P0.01),pSTAT5(P0.01)和FOXP3(P0.05)蛋白水平上升;主动脉Stat3 mRNA(P0.01)和pSTAT3蛋白(P0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE~(-/-)小鼠的高脂血症及AS,同时调节外周血中Th17/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Th17、Treg的效应可能与减弱的IL-6/pSTAT3和增强的IL-2/pSTAT5信号有关。     

人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足患者Treg/Th17/Th1细胞亚群的表达变化

目的:初步探讨人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病足Treg/Th17/Th1细胞亚群表达的变化。方法:选择2型糖尿病并糖尿病足患者5例,采用人脐带间质干细胞治疗。治疗前后检测外周血中CD4+CD25hiTreg/Th17及Th17/Th1细胞比例,并分析其与细胞因子(FoxP3,IL-17,INF-γ,C-RP,TNF-α,VEGF)的相关性。结果:采用人脐带间质干细胞治疗术后4周,CD4+CD25hiFoxP3+Treg/Th17细胞的比例均较治疗前明显升高(P<0.05),而Th17/Th1细胞比例无明显变化,血清中VEGF治疗后升高(P<0.05),C-RP和TNF-α水平较治疗前降低(P<0.01),术后12周,CD4+CD25hiFoxP3+Treg、Th17、Th1细胞百分比,血清中VEGF,C-RP和TNF-α水平与术前比无明显统计学差异(P>0.05)。结论:T2DM糖尿病足患者存在CD4+CD25hiFoxP3+Treg细胞数量的紊乱,人脐带间质干细胞治疗糖尿病足治疗后CD4+CD25hi-FoxP3+Treg细胞较治疗前显著升高。     

麻黄细辛附子汤干预Notch通路调控Treg细胞纠正Th2偏移的研究

目的 探究麻黄细辛附子汤对Th2偏移、Treg细胞功能及Notch信号通路的干预作用。方法 体外培养CD4+T细胞,流式细胞仪鉴定纯度,使用白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ抗体（Anti-IFN-γ）诱导建立Th2细胞分化模型,DAPT及麻黄细辛附子汤干预24 h后收集上清及细胞,ELISA检测白细胞介素-5(IL-5)、干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子β1(TGF-β1)含量,RT-PCR检测T细胞特异性转录因子（T-bet）、转录因子结合蛋白-3(GATA-3)、叉头翼状螺旋转录因子3(FOXP3)、Notch1 mRNA表达,Western blotting检测T-bet、GATA-3、FOXP3、Notch1蛋白表达。结果 1）较之空白组,模型组IL-5含量升高,IFN-γ、TGF-β1含量降低（P <0.01）;较之模型组,各给药组IL-5含量降低,IFN-γ、TGF-β1含量升高（P <0.01）。2）较之空白组,模型组Tbet、FOXP3 mRNA表达降低,GATA-3、Notch1 m RNA表达升高（P <0.01）;较之模型组,各给药组...     

南葶苈子中的指标成分槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部免疫功能调节机制研究

目的研究南葶苈子中的指标成分槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-β-D-龙胆双糖苷(QGG)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺部免疫功能调节机制,阐释南葶苈子止咳平喘功效的物质基础与科学内涵。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组及QGG高(QGGH)、中(QGGM)、低(QGGL)剂量(0.20、0.15、0.10 g/kg)组和阳性对照氨茶碱(0.09 g/kg)组,连续8周采用香烟熏暴露联合细菌感染的方法制备COPD稳定期大鼠模型。各给药组大鼠于烟熏5周后开始ig给药,连续28 d。采用荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测大鼠肺组织中Th17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和FOXP3 mRNA表达水平;流式细胞仪检测Th17/Treg细胞比例;TUNEL法观察QGG对大鼠肺组织细胞凋亡的影响;Western blotting法检测大鼠肺组织蛋白提取液中凋亡相关蛋白(cytoC、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2)及胞质转录因子-κBp65(NF-κBp65)和胞核NF-κBp65的表达。结果对照组大鼠体质量增长率随周龄增长而明显增加,模型组大鼠体质量在第1～8周增长率变化缓慢。与模型组比较,QGGH和氨茶碱组大鼠体质量增长率从第5周开始呈增长趋势,而QGGM、QGGL组大鼠体质量增长缓慢。q RT-PCR检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠肺组织中Treg和Th17细胞相关转录因子FOXP3和RORγt的表达水平显著增高(P0.05),FOXP3与RORγt比值显著升高。与模型组比较,QGGH组和阳性对照组大鼠FOXP3和RORγt的表达均显著降低(P0.05),且QGGH组效果优于氨茶碱组。流式细胞仪检测结果表明,与模型组比较,QGGH组大鼠外周血中CD4~+IL-17~+/CD4~+和CD4~+FOXP3+/CD4~+的表达均显著下调(P0.05);CD4~+IL-17~+/CD4~+FOXP3+显著降低(P0.05)。氨茶碱组大鼠外周血中Th17和Treg细胞相关的表达与QGGH组相近,但是CD4~+IL-17~+/CD4~+FOXP3+无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肺组织细胞凋亡显著增加。与模型组比较,QGGH组和氨茶碱组大鼠肺组织细胞凋亡显著减少(P0.05),QGGM、QGGL组改变不明显。与对照组比较,模型组大鼠肺组织Bax、cytoC、Caspase-9、Caspase-3、胞核NF-κBp65表达水平显著升高(P0.05),而Bcl-2、胞质NF-κBp65表达水平显著降低(P0.05)。与模型组比较,QGGH组和氨茶碱组大鼠肺组织Bax、cytoC、Caspase-9、Caspase-3、胞核NF-κBp65表达水平显著降低(P0.05),而Bcl-2、胞质NF-κBp65表达水平显著升高(P0.05)。结论 QGG可以显著改善COPD模型大鼠的生存状态、体质量,降低外周血CD4~+IL-17~+/FOXP3+CD4~+,调控Treg和Th17特征性转录因子FOXP3和RORγt的基因表达,平衡外周血中Th17与Treg比例,抑制肺组织细胞凋亡,修复损伤的组织,维持器官功能的完整性。     

温中补气方治疗胃癌疗效及对CD_3~+、CD_4~+、CD_4~+/CD_8~+变化的研究

目的分析温中补气方对胃癌患者的疗效及T淋巴细胞亚群(CD~+_3、CD~+_4、CD~+_4/CD~+_8)的变化研究。方法选取医院于2017年1月—2018年9月收治的100例胃癌患者的临床资料进行分析,分为两组。对照组采用常规治疗,观察组在常规治疗的基础上给予温中补气治疗,分析两组患者治疗后的临床疗效。结果两组患者治疗前中医证候评分组间比较,差异不具有统计学意义(P0.05)。观察组患者治疗后喜温喜按、胃脘冷痛、空腹痛甚、胃脘饱胀、浮肿、舌苔白滑、手足不温评分低于对照组(P0.05)。两组患者治疗前低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、内皮素-1(ET-1)、T淋巴细胞亚群、外周血髓源性抑制细胞(MDSCs)与调节性T细胞(Treg)占外周血单个核细胞比例水平组间比较,差异不具有统计学意义(P0.05)。观察组患者治疗后CD~+_3、CD~+_4、CD~+_4/CD~+_8水平高于对照组,HIF-1α、MCP-1、ET-1、MDSCs与Treg占外周血单个核细胞比例水平低于对照组(P0.05)。结论温中补气方治疗胃癌,可改善患者的中医证候,降低HIF-1α、MCP-1、ET-1水平,调节MDSCs与Treg占外周血单个核细胞比例。     

针灸联合自血疗法治疗慢性荨麻疹(血虚风燥型)效果及对UAS评分、外周血T淋巴细胞STAT3 mRNA表达水平的影响

目的:探讨针灸联合自血疗法对血虚风燥型慢性荨麻疹患者的治疗效果及荨麻疹活动性评分(UAS)、外周血T淋巴细胞信号转导与转录激活因子3(STAT3)mRNA表达水平的影响。方法:将94例血虚风燥型慢性荨麻疹患者随机分为对照组与观察组,每组47例,对照组采用自血疗法治疗,观察组加用针灸疗法,评估两组疗效及中医症状、体征积分的改善情况,采用UAS评分评定患者治疗前后荨麻疹风团数量及瘙痒程度的变化,并于治疗前后留取外周血,测定患者外周血T淋巴亚群(CD~+_3、CD~+_4、CD~+_8、CD~+_4/CD~+_8)及STAT3 mRNA表达水平的变化。结果:①治疗4周,两组瘙痒程度、皮损分布、风团大小、皮损红斑、皮损数量等中医症状及体征积分积分均降低(P0.05),观察组各积分均低于对照组(P0.05);②观察组总有效率高于对照组(P0.05);③治疗4周,两组UAS表各维度评分及总分均降低(P0.05),观察组UAS评分低于对照组(P0.05);④治疗4周,两组CD~+_4上升,CD~+_8降低,CD~+_4/CD~+_8上升及外周血T淋巴细胞STAT3 mRNA水平降低(P0.05),观察组CD~+_4、CD~+_4/CD~+_8、STAT3 mRNA水平低于对照组,CD~+_8水平高于对照组(P0.05)。结论:针灸联合自血疗法治疗血虚风燥型慢性荨麻疹可改善患者症状及体征,提高治疗效果,降低UAS评分,改善其免疫功能,下调外周血T淋巴细胞STAT3 mRNA表达水平。     

加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症气虚证临床研究

目的:观察加味归脾合剂治疗慢性免疫性血小板减少症(ITP)的疗效,探讨中药复方制剂对ITP患者Treg/Th17免疫紊乱调控的有效干预机制。方法:将符合标准的60例慢性ITP患者随机分为中药组和激素组各30例,中药组予加味归脾合剂治疗,激素组予泼尼松治疗,记录治疗前后ITP患者血清中细胞因子Treg细胞、Th17细胞以及Treg/Th17比值,Foxp3mRNA、RORγt mRNA、Foxp3/RORγt比值检测结果及外周血血小板计数。结果 :(1)血小板计数:中药组和激素组治疗后均有所上升,与治疗前比较差异有统计学意义(P0.01),组间比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)Treg/Th17:中药组与激素组治疗前与正常对照组比较,Treg细胞、Th17细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、RORγt mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值差异均有统计学意义(P0.05);治疗后中药组Treg细胞表达与Treg/Th17比值、Foxp3mRNA表达、Foxp3/Ro Rγt比值检测均高于激素组,组间比较差异有统计学意义(P0.05);Th17和RORγtmRNA表达,组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:加味归脾合剂可有效提升血小板计数及Treg细胞、Treg/Th17比值、Foxp3mRNA、Foxp3/Ro RγT比值,其上调Treg细胞及Foxp3mRNA表达,从而改善Treg/Th17免疫功能紊乱,健脾益气统血是治疗ITP气虚证的主要机制之一。     

穿山龙薯蓣对桥本甲状腺炎患者外周血单个核细胞Th17与Treg细胞及相关因子表达的影响

目的:通过观察穿山龙薯蓣对桥本甲状腺炎(HT)患者外周血单个核细胞Th17与Treg细胞及相关因子表达的影响,进而探讨穿山龙薯蓣治疗桥本甲状腺炎免疫学作用机制。方法:选取24例桥本甲状腺炎患者和健康对照16例,PBMC提取采用Ficoll梯度密度离心法,细胞被分成4组,观察4种不同浓度的穿山龙薯蓣(0、10、50、100ug/ml)对桥本甲状腺炎患者外周血单个核细胞Th17与Treg细胞比例,血清中Thl7的相关因子IL-17和Treg的相关因子TGF-B含量的影响。结果:HT组PBMC中Thl7细胞比例明显高于对照组(P0.05),Treg细胞比例明显低于对照组(P0.05);HT组患者血清IL-17含量较对照组显著升高(P0.05),TGF-B含量差异无统计学意义(P0.05)。穿山龙薯蓣各剂量组均明显降低了HT患者外周血单个核细胞Th17比例及血清IL-17含量(P0.05);明显升高了HT患者外周血单个核细胞Treg比例(P0.05)。结论:Th17、Treg细胞的变化可能在HT发病机制中发挥重要作用。穿山龙薯蓣能抑制HT患者外周血单个核细胞Th17细胞比例,上调Treg细胞比例,改善Thl7/Treg失衡状态,从而达到免疫调节功能,改善桥本甲状腺炎的免疫炎症反应。     

疏肝化郁解毒汤对子宫颈癌术后化疗的效果及对血清Th1/Th2水平的影响

目的评价疏肝化郁解毒汤对子宫颈癌术后化疗患者的治疗效果及对血清Th1/Th2水平的影响。方法选择2017年3月—2019年2月医院收治的子宫颈癌患者92例,依据随机对照法将患者分为治疗组和对照组,每组46例。对照组采用多西他赛加奥沙利铂,治疗组在化疗的同时,口服疏肝化郁解毒汤辅助治疗。4周为1个周期,共治疗3个周期。比较两组治疗前后中医症候积分、治疗疗效、治疗前后血清Th1/Th2相关因子水平、治疗前后细胞免疫指标T淋巴细胞亚群CD~+_3、CD~+_4、CD~+_8、CD~+_4/CD~+_8及NK细胞水平变化、治疗前后QOL评分和KPS评分。结果治疗组治疗后总有效率为78.26%(36/46),对照组治疗后总有效率为93.48%(43/46),治疗组治疗总有效率高于对照组(P0.05);治疗组治疗后阴道流血、心烦易怒、胸胁胀痛、口苦咽干和全身窜痛等中医症候积分低于对照组(P0.05);治疗组治疗后T淋巴细胞亚群CD~+_3、CD~+_4、CD~+_4/CD~+_8及NK细胞水平高于对照组,CD~+_8水平低于对照组(P0.05);治疗组治疗后QOL评分和KPS评分高于对照组(P0.05)。结论疏肝化郁解毒汤对子宫颈癌术后化疗患者的治疗效果确切,可有效的改善患者的临床症状,提高术后机体免疫力,调节患者血清Th1/Th2细胞相关因子,改善健康状况,提高治疗疗效,值得临床推广应用。     

益艾康对HIV/AIDS患者Th17/Treg免疫平衡的影响

目的：探讨益艾康对HIV/AIDS患者Th17/Treg免疫平衡的影响。方法：纳入HIV/AIDS患者60例为研究对象,其中HAART治疗组(西药组)30例,HAART联合益艾康治疗组(中西药组)30例,健康对照组23例。流式细胞术检测各组T淋巴细胞亚群及Th17、Treg细胞数量。结果：中西药组CD4⁺T数量相比西药组升高,CD8⁺T细胞数量降低(P>0.05);中西药组Th17细胞数量相比西药组升高(P<0.05),Treg细胞数量降低,Th17/Treg比值升高(P>0.05);相关性分析显示：CD4⁺T细胞数量、CD4⁺T/CD8⁺T比值与Th17、Th17/Treg比值表现为正相关(P<0.05),与Treg细胞水平未表现出相关性(P>0.05)。结论：益艾康通过上调Th17细胞的表达水平,提高Th17/Treg比例,改善了患者Th17/Treg免疫平衡。     

清温并用法对慢加急性肝衰竭肠源性内毒素血症大鼠结肠组织FoxP3,ROR-γt表达的影响

目的:研究清温并用法(即温阳解毒化瘀方)对慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠结肠组织叉头样转录因子3(FoxP3),维甲酸相关核孤儿受体-γt(ROR-γt)表达的影响,探索其对肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)的可能调节机制。方法:130只SD大鼠随机分为正常组10只,造模组120只。造模组以皮下注射牛血清白蛋白致敏法,腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)+脂多糖(LPS)建立ACLF大鼠模型。将成模的大鼠随机分为模型组,清法组(茵陈蒿汤6.68 g·kg^-1),温法组(茵陈术附汤7.09 g·kg^-1),清温并用法组(温阳解毒化瘀方19.53 g·kg^-1)。正常组及模型组予蒸馏水灌胃,其余各组予等容积相应中药灌胃,共1周。检测各项指标在1,12,24 h时间点的数值,流式细胞仪检测外周血调节性T淋巴细胞(Treg)/辅助性T淋巴细胞(Th)17细胞比值变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测结肠组织FoxP3,ROR-γt mRNA表达,原位杂交法、免疫组化法观察大鼠结肠组织FoxP3,ROR-γt mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠Treg/Th17细胞在上述时间点显著下降(P<0.01);与模型组比较,清法、温法组Treg/Th17细胞差异无统计学意义,清温并用法Treg/Th17细胞升高(P<0.05);与正常组比较,模型组大鼠FoxP3,ROR-γt mRNA在上述时间点表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,清法、温法组FoxP3,ROR-γt mRNA在上述时间点均有所降低(P<0.05),清温并用法组显著降低(P<0.01);清温并用法组FoxP3,ROR-γt mRNA较清法组、温法组有所下降(P<0.05)。结论:清温并用法治疗肝衰竭IETM的机制与可能与调节FoxP3,ROR-γt表达有关。     

蠲痹颗粒醇提物抑制Th17 细胞表达治疗类风湿关节炎作用机制研究

目的：研究蠲痹颗粒醇提物抑制致病性Th17细胞表达治疗类风湿关节炎(RA)的作用机理,阐述扶阳学派及吴生元教授运用扶阳理论治疗RA的分子机制。方法：构建牛Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎(CIA)模型,模型小鼠按随机数字表法分为CIA模型组(Model组)和蠲痹颗粒醇提物干预组(JBKL组)各10只。苏木精-伊红(HE)染色检测CIA小鼠关节炎病理损伤程度;流式细胞术检测Th17、Treg细胞表达水平;荧光定量PCR法检测Th17细胞相关基因的表达。结果：与Model组比较,JBKL组小鼠关节组织学评分降低(P<0.05)。与Model组比较,JBKL组Foxp3⁺CD4⁺T (调节性T细胞)表达水平上调(P<0.05)。与Model组比较,JBKL组小鼠脾淋巴细胞IL-17⁺CD4⁺比例降低(P<0.05),Treg/Th17比值增加(P<0.05)。JBKL组小鼠脾淋巴细胞IL-17A、IL-23p19、IL-21、IFN-γ的mRNA表达水平低于Model组,Th17...     

Th17细胞及Treg细胞在喉癌外周血中的表达

目的:检测喉鳞状细胞癌患者外周血Treg细胞和Thl7细胞比例,研究其变化与意义。方法:采用流式细胞技术检测10例健康对照者和42例喉鳞状细胞癌患者外周血Treg和Thl7细胞比例,并观察Th17/Treg在喉癌分期中的变化。结果:与健康对照组比较,喉癌患者外周血Treg细胞和Th17细胞比例明显升高(P0.05);发生淋巴结转移者较无淋巴结转移者的Treg和Th17细胞比例增高(P0.05);通过分析不同喉癌分期中Th17/Treg细胞的分布,结果发现Ⅲ+Ⅳ期组Th17细胞的比例和Ⅰ+Ⅱ期无明显差异,而Treg细胞在Ⅲ+Ⅳ期比Ⅰ+Ⅱ期明显增高(P0.05)。结论:喉癌外周血中Th17和Treg细胞数量增多,二者比例增高,并随着疾病的进展而增加,表明二者均参与了喉癌的发生发展过程。