核因子-κB在急性胰腺炎中的激活及NBD多肽的干预作用

目的:探讨核因子-κB(nuclear factor-kappaB.NF-KB),及活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)在大鼠SAP发病过程中的作用:并观察NF-κB必需调节蛋白结合域(NF-κB essential modifier binding domain,NBD)多肽对大鼠SAP的干预作用.方法:逆行胰胆管内注射50 g/L牛磺胆酸钠(1mL/kg)制备大鼠SAP模型.大鼠64R,随机分成4组:假手术组,SAP组,TAT-NBD(WT)多肽组和TAT-NBD(MT)多肽组.术后6,12 h处死大鼠,观察胰腺组织病理、血清淀粉酶和胰腺组织NF-κB P65蛋白的变化.检测胰腺组织MDA含量及T-SOD活力.结果:与假手术组比较,SAP模型组6,12 h大鼠NF-κB P65蛋白表达显著升高(49.3±2.2vs 4.3±1.4,65.8±1.8 vs 5.0±1.3,均P<0.05);MDA生成增加(212.7±12.5 vs 87.7±7.5,296.8±13.3 vs 96.2±8.3,均P<0.05),T-SOD活力下降(88±10 vs 183±10,65±7 vs 194±10,均P<0.05);与SAP模型组比较,TAT-NBD(WT)多肽预处理6,12 h后,NF-κB P65蛋白表达(25.9±2.3,38.9±2.6)显著降低(P<0.05),MDA生成(102.5±10.4,164.5±12.2)降低(P<0.05);T-SOD活力(153±11,168±12)增加(P<0.05),胰腺病理学评分下降(5.04±0.41 vs 8.71±0.45,5.45±0.34 vs 10.31±1.23,均P<0.05),淀粉酶无明显变化.TAT-NBD(MT)多肽组上述指标均无明显变化.结论:SAP时大鼠胰腺组织的NF-κB过度激活,活性氧簇生成增加;NBD多肽预处理可以抑制NF-κB过度活化,减少活性氧簇生成,减轻胰腺局部炎症损伤.     

氧化苦参碱对实验性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子和核因子-κB p65表达的影响

目的: 观察氧化苦参碱注射液对大鼠实验性结肠炎的治疗效果, 探讨其作用机制. 方法: 将40只SD大鼠随机分为4组: 正常对照组、模型组、美沙拉嗪组和氧化苦参碱(OMT)组, 每组10只. 正常对照组未行造模, 其余3组大鼠均采用TNBS造模. 模型组给予生理盐水肌注, 美沙拉嗪组给予美沙拉嗪混悬液灌胃, 氧化苦参碱组给予氧化苦参碱注射液肌注. 治疗15 d后观察大鼠的腹泻、便血症状和结肠病理组织学改变, 用ELISA法检测结肠黏膜组织IL-2、IL-10的变化, 并用免疫组化技术检测大鼠结肠黏膜核因子(NF)-kappaB p65的 表达. 结果: OMT组大鼠腹泻、黏液脓血便症状得到较快控制, 大鼠黏膜组织损伤显著改善. 与模型组比较, OMT组IL-2减少(102.93±21.10 ng/L vs 231.48±40.78 ng/L, P<0.05), IL-10增多(50.13±1.40 ng/L vs 18.64±0.65 ng/L, P<0.05), NF-kappaB p65显著降低(16.02%±7.27% vs 43.05%±13.80%, P<0.01). 与正常组相比, 模型组结肠黏膜IL-2升高, IL-10减少, NF-kappaB p65表达增多, 差异均有显著性意义(102.93±21.10 ng/L vs 30.44±12.03 ng/L, 50.13±1.40 ng/L vs 58.92±3.70 ng/L, 16.02%±7.27% vs 9.57%±4.31%, 均P<0.01). OMT组与美沙拉嗪组比较, IL-2、IL-10和NF-kappaB p65的表达无显著性差异. 结论: 氧化苦参碱注射液治疗大鼠实验性结肠炎有明显效果, 其作用机制可能是通过减少IL-2的生成、促进IL-10分泌和抑制NF-kappaB p65的激活发挥治疗作用.     

参附注射液对大鼠肝缺血再灌注NF-kappaB和PGI2/TXA2的影响

目的: 探讨参附注射液对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及其机制. 方法: 24只Wistar大鼠随机分为IR组和SF组. SF组腹腔注射参附注射液, 10 mL/kg. IR组大鼠给予相同剂量的生理盐水. 两组均采用Pringle's法阻断肝门缺血15 min再灌注1 h、3 h, 测定血浆血栓素B2(thromboxane B2, TXB2)、6-酮-前列腺素F1alpha(6-keto-PGF1alpha)、肝组织NF-kappaB p65表达和肝组织匀浆GSH含量, 及观察肝组织形态学改变. 结果: 再灌注3 h SF组血浆TXB2低于IR组(118.7±19.1 vs 386.3±282.7, P>0.05), 6-keto-PGF1alpha高于IR组(1081.7±282.7 vs 960.0±209.9, P>0.05), 二者比值TXB2/6-keto-PGF1alpha低于IR组(0.11±0.03 vs 0.39±0.24, P<0.05); 再灌注1 h SF组NF-kappaB p65表达低于IR组(59.33%±11.06% vs 75.83%±11.46%, P<0.05); 而GSH稍高于IR组(47.59±19.07 vs 37.32±4.71, P>0.05). SF组肝实质细胞和线粒体损伤明显减轻. 结论: 参附注射液对肝缺血再灌注损伤有保护作用, 其机制与降低TXA2/PGI2比值, 抑制NF-kappaB活化有关.     

NF-κB p65反义寡核苷酸对TNBS结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子和NF-κB表达的影响

目的: 探讨NF-kappaB p65反义寡核苷酸对实验性结肠炎BALB/c小鼠肠黏膜NF-kappaB表达的抑制作用和对黏膜肿瘤坏死因子(TNF-alpha)、白细胞介素(IL-10、IL-1beta)表达的影响, 研究其对肠道炎症的治疗作用. 方法: 将50只BALB/c小鼠均分为模型对照组(UC组)、NF-kappaB p65反义寡核苷酸组(ASODN组)、错义寡核苷酸组(MSODN组)和正义寡核苷酸组(SODN组), 采用2, 4, 6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠造模. 造模后24 h后对各组进行相应灌肠治疗, 灌肠后第7天处死小鼠, 行光镜下观察肠黏膜炎症并评分, 免疫组化检测各组小鼠肠黏膜中TNF-alpha、IL-1beta、IL-10和NF-kappaB表达. 结果: ASODN组小鼠在结肠炎症评分较UC组、MSODN组和SODN组明显改善(均P<0.05). ASODN组小鼠TNF-alpha、IL-1beta、NF-kappaB表达较UC组、MSODN组和SODN组明显减少(82.68±14.30 vs 168.48±11.89, 166.49±11.63, 176.49±12.33, P<0.05; 42.42±5.77 vs 168.48±11.89, 120.43±28.21, 131.43±30.601, P<0.01; 62.66±11.32 vs 158.38±12.49, 161.09±12.73, 168.64±11.83, P<0.01), 而IL-10表达则显著增多(146.68±6.02 vs 62.50±11.57, 58.44±10.92, 54.24±10.64, P<0.01). 结论: NF-kappaB p65反义寡核苷酸可抑制NF-kappaB的活化, 降低TNF-alpha、IL-1beta表达, 升高IL-10的表达, 减轻小鼠结肠炎症, 可用于治疗实验性结肠炎.     

乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织NF-kappaB p65的影响

目的: 比较乌梅丸与西药柳氮磺胺吡啶SASP组对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织NF-kappaB p65疗效的大小, 并分析其作用机制. 方法: 应用2, 4-二硝基氯苯(DNCB)免疫加醋酸局部灌肠法建立UC大鼠模型, 将56只健康SD大鼠(雌雄各半), 按雌雄随机分4组, 分别为乌梅丸组、SASP组、模型组和正常组, 分别观察治疗后大鼠结肠黏膜组织匀浆NF-kappaB p65的变化. 结果: 在正常结肠组织中NF-kappaB p65无或仅有弱阳性表达, 模型组结肠黏膜组织NF-kappaB p65阳性细胞表达率明显高于正常组(45.67%±4.25% vs 10.45%±5.20%, P<0.05), 乌梅丸(26.32%±9.65%)和SASP(31.23%±5.18%)组阳性细胞率则明显低于模型组, 乌梅丸组阳性细胞率较SASP组更低. 结论: NF-kappaB与UC发病关系密切, 乌梅丸可能通过抑制NF-kappaB p65活性调节免疫功能达到治疗的目的.     

银杏叶萃取物对大鼠纤维化肝脏NF-_κB的影响

目的:研究EGb对大鼠纤维化肝脏NF-κB的影响,探讨EGb抗肝纤维化作用的主要机制.方法:以CCl4诱导大鼠肝纤维化模型.70只大鼠随机分成5组,正常组10只;模型组15只;EGb组分成三小组,每组15只,CCl4处理同模型组,另分别给予EGb溶液0.5g/kg,1g/kg,2g/kg灌胃,每天1次.8wk末处死大鼠,检测NF-κBP65,α-SMA,SOD,MDA,GSH-Px,HA,Hyp并作病理组织学检测.结果:EGb组肝组织SOD,GSH-Px活性明显高于模型组(SOD:18.5±4.8,20.9±3.7,25.3±4.7vs14.3±3.2;GSH-Px:48.2±8.1,50.1±6.8,51.3±5.4vs42.1±3.9;P<0.05或P<0.01),而MDA,Hyp含量显著低于模型组(MDA:2.34±0.29,2.19±0.45,2.01±0.17vs2.96±0.21;Hyp:397.2±28.6,370.2±25.6,358.4±17.4vs499.8±23.5;P<0.05或P<0.01),血清ALT,AST,HA显著低于模型组(ALT:2877.2±408.4,1391.9±655.1,1527.0±263.4vs4419.2±720.1;AST:3257.3±260.1,2358.8±643.5,2065.4±595.1vs3847.4±691.8;HA:130.9±17.0,78.2±11.3,80.3±10.2vs160.2±38.7;P<0.05或P<0.01),NF-κBP65和α-SMA的表达显著弱于模型组(NF-κBP65:0.173±0.045,0.139±0.034,0.126±0.028vs0.212±0.037;α-SMA:0.183±0.040,0.174±0.036,0.141±0.031vs0.227±0.045;P<0.05或P<0.01).HE染色显示EGb组肝纤维化程度较模型组明显减轻.结论:EGb通过抑制氧化应激而减弱对NF-κB的诱导从而阻止HSC的活化.这可能是EGb抗肝纤维化的重要机制之一.     

茶多酚对酒精性肝病大鼠TNF-alpha及肝细胞的影响

目的: 探讨茶多酚对酒精性肝病大鼠TNF-alpha表达及肝细胞病变的影响. 方法: 29只大鼠随机分为: 对照组、模型组、茶多酚干预组. 白酒ig建模, 茶多酚干预. 常规切片及特染评价肝组织病变, 检测血清AST、ALT、MDA含量, ELISA法检测血清TNF-alpha、RT-PCR检测肝组织TNF-alpha mRNA表达. 结果: 与模型组相比, 茶多酚干预组大鼠肝组织学评分(3.00±1.59 vs 4.50±1.31, P<0.05), 血清AST、MDA绝对值(87.33±61.00 vs 226.40±81.34, 2.75±0.72 vs 7.34±3.06, P<0.05), 肝组织TNF-alpha mRNA表达与TNF-alpha血清含量均降低(0.55±0.05 vs 0.73±0.07, 4.45±0.83 vs 14.33±1.87; P<0.05). 结论: 茶多酚保护肝细胞线粒体, 减轻脂质过氧化, 减少TNF-alpha的合成释放.     

肥大细胞膜稳定剂对实验性重症急性胰腺炎的治疗作用研究

目的　探讨肥大细胞 (m ast cell,MC)在重症急性胰腺炎 (SAP)时的致病作用 ,了解肥大细胞膜稳定剂对 SAP的治疗作用。方法　将 15只健康雄性 SD大鼠随机分为 3组 :假手术组、SAP组及 MC膜稳定剂处理组。 MC膜稳定剂处理组应用 MC膜稳定剂色甘酸钠 ,以 5 0 m g/ kg的用量于制模前 30 min注入大鼠腹腔进行预处理。使用胆管注射 5 %牛磺胆酸钠法诱发 SAP,观察各组大鼠血清淀粉酶、胰腺及肺组织病理变化、组织髓过氧化物酶 (MPO)活性以及肺干湿重比的变化情况。结果　 SAP组的淀粉酶水平为 2 5 0 0 .0 ± 2 2 7.7U/ L,胰腺髓过氧化物酶活性为 0 .4 1± 0 .0 1U/ g湿重 ,肺干湿重比为4 .5 8± 0 .2 9,胰腺病变评分为 6 .4 ± 0 .5 ,均较假手术组明显增高 (P<0 .0 5 )。而使用 MC膜稳定剂预处理后造模 ,其淀粉酶水平降为 1894 .4 0 ± 12 4 .37U/ L,胰腺髓过氧化物酶活性为 0 .38± 0 .15 U/ g湿重 ,肺干湿重比为 4 .35 ± 0 .13,胰腺病变评分为 3.4 ± 0 .5 ,均较 SAP组明显减轻 (P<0 .0 5 )。结论　肥大细胞可能在 SAP发病过程中起着重要的作用 ,MC膜稳定剂对 SAP可能有治疗作用。     

依达拉奉对大鼠重症急性胰腺炎的保护作用

目的:探讨依达拉奉对L-精氨酸诱导的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的治疗作用及机制.方法:将60只大鼠随机分为三组( n = 20). 采用大鼠腹腔内分次注射大剂量L-精氨酸(2.5g/k g×2, 间隔1 h)的方法制备SAP大鼠模型, 治疗组大鼠腹腔内注射依达拉奉注射液3 mg/kg, bid×3 d. 72 h后比较三组大鼠胰腺组织病理变化、腹水性状及量、血清淀粉酶(AMY)、TNF-α、IL-6水平和胰腺组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及预后.结果:72 h后, 与对照组相比, SAP组出现典型的SAP病理形态改变, 腹水量较多(5.16±1.52vs 0.50±0.10, P<0.01), 且大鼠血清AMY、TNF-α、I L-6及胰腺组织M DA均显著升高(8967.5±298.4 vs 720.1±119.7; 103.98±10.56 vs 41.59±3.79; 548.57±10.45 vs 198.34±2.10; 35.6±3.8 vs 7.9±2.2, 均P<0.01), 胰腺组织抗氧化物质GSH、SOD明显降低(7.2±0.6 vs 17.1±2.1; 7300±1800 vs 28400±2700,均P<0.01); 与SAP组相比, 治疗组胰腺组织病理损害减轻, 腹水量减少(4.05±1.22 vs 5.16±1.52, P<0.05), 且组织病理评分较低( P<0.05),血清AMY、TNF-α、IL-6及胰腺组织MDA明显降低(7809.5±158.3 vs 8967.5±298.4; 79.80±14.23 vs 103.98±10.56; 467±6.64 vs 548.57±10.45; 29.1±2.6 vs 35.6±3.8, 均P<0.05), 胰腺组织GSH、SOD升高(8.7±1.3 vs 7.2±0.6;114 000±27 000 vs 7300±1800, 均P<0.05).结论:依达拉奉能清除氧自由基、提高胰腺组织抗氧化物质SOD和GSH含量, 降低促炎细胞因子水平, 可减轻胰腺组织的病理损害,并且有可能降低死亡率.     

siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用

目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-kappaB亚单位p65的表达, 观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响. 方法: 将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中, 通过RT-PCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平. Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达, Annexin V/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡, 显微镜下观察p65 siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响. 结果: EC9706和Eca109细胞转染p65siRNA 24、48和72 h后, p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调, 在72 h的阻断效率最为明显, 与0 h相比, 差异有显著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05, 0.1±0.01 vs 0.38±0.04, 均P<0.05), 转染72 h后, p65和Bcl-2蛋白表达水平下调. EC9706和Eca109转染p65siRNA后, 细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%, 8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%, 均P<0.05); p65 siRNA转染72 h后, EC9706和Eca109细胞增殖较慢; 当p65 siRNA与5-FU联合作用, 细胞增殖明显受到抑制. 结论: p65 siRNA可阻断NF-kappaB信号通路, 下调NF-kappaB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达, 表明活化的NF-kappaB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.     

reg I基因表达与肠黏膜损害在急性坏死性胰腺炎中的相关性

目的: 研究regⅠ在急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)大鼠肠组织中的表达, 探讨该基因的表达与ANP肠黏膜损害的关系. 方法: Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术对照组(n = 40)和ANP组(n = 80). 对照组开腹后只翻动胰腺, ANP组大鼠胰胆管恒速逆行注射30 g/L牛磺胆酸钠, 制成ANP大鼠模型. 观察胰腺和小肠的病理改变及小肠黏膜通透性的改变, 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺、小肠组织中regⅠ mRNA的表达水平, 并研究所观察指标与regⅠ 基因表达的相关性. 结果: ANP组大鼠术后12, 24和36 h肠黏膜组织病理学评分明显高于对照组(1.8±0.89 vs 0.2±0.42, 3.3±1.17 vs 0.3±0.48, 4.2±0.95 vs 0.3±0.48, 均P<0.01); ANP组大鼠[99mTc]-DTPA排泄率术后12, 24和36 h较对照组均明显增加(34.70%±4.03% vs 4.62%±1.17%, 54.63%±6.94% vs 6.14%±1.42%, 66.83%±7.56% vs 7.48%±0.92%, 均P<0.01); 与对照组相比, ANP组大鼠小肠组织中reg Ⅰ的mRNA水平过度表达, reg Ⅰ的表达水平分别与肠黏膜病理学评分和肠黏膜通透性指数正相关(r = 0.6728, 0.7092, 均P<0.01). 结论: ANP时大鼠小肠组织中regⅠ mRNA的表达水平明显上调且与ANP所致肠黏膜损害的严重程度相关.     

地塞米松对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡及金属硫蛋白表达的影响

目的观察地塞米松预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分成地塞米松组(16只)和对照组(16只),分别给予地塞米松(0.8mg/kg)和蒸馏水腹腔注射。预处理24h后,构建体外心脏缺血再灌注动物模型,动态观测缺血前期及再灌注期左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、冠状动脉流出量(CF);测定冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)的漏出率;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Westernblot法检测金属硫蛋白(MT)、Bcl-2及Bcl-xl蛋白的表达;免疫组织化学法测定半胱天冬酶-3(caspase-3)的水平。结果与对照组比较,地塞米松组大鼠再灌注期LVDP、±dp/dtmax及CF得到改善(P<0.05);CK-MB的漏出率明显降低[(8.69±4.16)U/gvs(18.15±5.59)U/g,P<0.01];心肌细胞凋亡指数(10.18±1.99)%vs(14.66±2.97)%和caspase-3水平明显减少[(18.66±5.15)%vs(27.93±6.23)%,P<0.01],Bcl-xl(4.74±0.66)vs(1.69±0.73)和MT的表达明显增加[(3.09±1.07)vs(1.03±0.02),P<0.05],Bcl-2无明显变化(P>0.05)。结论地塞米松预处理对大鼠缺血再灌注的心肌具有保护作用,上调MT表达及抑制细胞凋亡可能是其机制之一。     

L-精氨酸对低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨L-精氨酸(L-Arg)对低氧性肺动脉高压大鼠不同节段肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响。方法 将Wistar大鼠(n=19)随机分为对照组(n=7)、低氧组(n=6)及低氧 L-Arg组(n=6)。经右心导管法测定各组大鼠肺动脉压力和右室(RV)/左室 室间隔(LV S)比值,以分光光度法间接测定血浆一氧化氮(NO)含量,通过TUNEL法检测各组大鼠不同节段的肺动脉平滑肌细胞凋亡数目,并计算肺动脉平滑肌细胞凋亡数目与肺动脉平滑肌细胞数目比值。结果 低氧组大鼠肺动脉平均压(PAMP)显著高于对照组[(2.71±0.29)kPa vs(2.05±0.14)kPa,P<0.01],低氧 L-Arg组大鼠的PAMP显著低于低氧组[(2.23±0.18)kPa vs(2.71±0.29)kPa,P<0.05];低氧组大鼠RV/(LV S)比值显著高于对照组[(0.42±0.03)kPa vs(0.30±0.05)kPa,P<0.01],低氧 L-Arg组大鼠RV/(LV S)比值显著低于低氧组[(0.36±0.02)kPa vs(0.42±0.03)kPa,P<0.01];低氧组大鼠血浆NO含量明显低于对照组[(3.54±0.47)μmol/L vs(4.79±0.17)μmol/L,P<0.05],低氧 L-Arg组大鼠血浆NO含量显著高于低氧组[(5.21±0.26)μmol/L vs(3.54±0.47)μmol/L,P<0.01];低氧组大鼠与终末细支气管伴行的肺动脉和与呼吸细支气管伴行的肺动脉平滑肌细胞凋亡数目与平滑肌细胞数目比值明显低于对照组[(0.051±0.016     

高血压大鼠心脏钙调蛋白磷酸酶与核因子κBp65的表达

目的探讨钙调蛋白磷酸酶(caicineurin)、核因子κBp65(NFκBp65)在高血压心血管重构信号转导通路的作用。方法建立腹主动脉缩窄高血压大鼠模型,以尾动脉测压法观察大鼠血压变化,用免疫组织化学和形态计量学方法,观察calcineurin、NFκBp65在心脏原位蛋白表达和心脏重量及其系数的变化。结果与假手术组比较,高血压大鼠血压明显升高[(144.70±4.85)vs(110.00±4.00)mmHg,P<0.01;(151.40±14.86)vs(114.36±5.5)mmHg,P<0.01]、心脏重量及其系数显著增加[(1.87±0.07)vs(1.51±0.13)g,P<0.01,(0.43±0.02)vs(0.33±0.01)g/100g,P<0.01]、心脏重构,钙调蛋白磷酸酶与NFκBp65在心脏过表达,而且阳性表达面积和阳性表达面积百分比增大[(107380.36±9268.64)vs.(14537.64±12169.42)μm2,P<0.01;(54797.00±17483.46)vs(3501.43±2919.18)μm2,P<0.01]。结论calcineurin与NFκBp65过表达参与了腹主动脉缩窄性高血压心血管重构的发生。     

白藜芦醇对心肌微血管内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察白藜芦醇对缺血再灌注损伤心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMECs)的保护作用。方法培养大鼠CMECs,模拟缺血再灌注损伤,随机分为对照组、缺血再灌注组及白藜芦醇组,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞活性;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测CMECs凋亡率;酶联免疫吸附法检测半胱天冬酶3(caspase-3)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与对照组比较,缺血再灌注组和白藜芦醇组吸光度值明显降低(P<0.01);CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量、SOD活性明显升高,差异有统计学意义(P<0.05.P<0.01);与缺血再灌注组比较,白藜芦醇组吸光度值、SOD活性明显升高[(0.47±0.06)vs(0.14±0.04),(28.9±2.9)μU/L vs(22.4+2.2)μU/L,P<0.01];CMECs凋亡率、caspase-3相对活性、MDA含量明显降低.差异有统计学意义[(15.6±0.4)%vs(38.6±0.6)%,(152.1±13.3)vs(307.2±25.3),(9.2±0.7)μmol/L vs(13.5±1.2)μmol/L,P<0.01]。结论白藜芦醇可减轻CMECs的缺血再灌注损伤,这种保护作用可能是通过抗氧化和抗调亡来实现。     

脂质过氧化损伤对高脂血症大鼠重症急性胰腺炎的作用及机制

目的:观察高脂血症对大鼠急性胰腺炎病情的影响,探讨脂质过氧化损伤在伴高脂血症重症急性胰腺炎(SAP)中的作用及其机制.方法:SD大鼠脂肪乳剂灌胃2 wk建立高脂血症模型,逆行胰胆管注射3.5%牛磺胆酸钠诱发SAP模型.将大鼠50只随机分为4组:正常组(n=10);高脂血症对照组(HL组,n=10);SAP组(n=15);伴高脂血症SAP(HAP,n=15).检测血清淀粉酶(AMS)、甘油三酯(TG)及胆固醇(CH)水平,并检测血清及胰腺组织的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、一氧化氮(NO),观察胰腺组织病理改变.结果:HAP组胰腺组织病理改变较SAP组严重:HAP组血清及胰腺组织MDA、XOD水平显著高于SAP组(血清:30.76±2.67 nmol/mLvs 23.14±3.42 nmol/mL,55.72±10.49 U/L vs 45.78±8.98 U/L,均P<0.01:胰腺组织:4.33±0.48 nmol/mgprot vs 2.87±0.45 nmol/mgprot,5.57±0.63 U/gprot vs 4.33±0.79 U/gprot,均P<0.01):其血清及胰腺组织SOD、NO水平显著低于SAP组(血清:85.46±13.56 U/mLvs 97.16±13.77 U/mL,31.72±10.50μmol/Lvs 52.97±6.01μmol/L,均P<0.05;胰腺组织:22.65±3.85 U/mgprot vs 27.88±4.43 U/mgprot,均P<0.01;1.09±0.21 μmol/gprot vs 1.48±0.40μmol/gprot,均P<0.05).结论:高脂血症可加SAP的胰腺病理改变;脂质过氧化损伤可能在高脂血症加重SAP的机制中发挥重要作用.     

腺苷对急性心肌梗死病人PCI术后心肌再灌注损伤的临床观察

目的观察腺苷对急性心肌梗死(AM I)患者行PC I后再灌注损伤心肌的保护作用。方法AM I患者分为腺苷组和生理盐水组,行PC I时一组冠脉内推注腺苷,一组推注生理盐水,并测定血浆SOD、MDA、CK-MB峰值。结果腺苷组MDA较生理盐水组低(5.01±0.80 vs 6.97±0.86,P<0.05),腺苷组SOD较生理盐水组高(80.70±3.23 vs 61.63±3.49,P<0.05),腺苷组CK-MB峰值较生理盐水组明显降低(123.6±84.3 vs186.1±92.2,P<0.05)。结论AM I患者行急诊PC I术时冠脉内应用腺苷能减轻心肌再灌注损伤。     

老年稳定性心绞痛患者窦性心率震荡的临床意义

目的探讨老年稳定性心绞痛(SAP)患者窦性心率震荡(HRT)现象的临床意义。方法选择接受24 h动态心电图检查的老年患者137例为SAP组,另选冠状动脉造影正常的老年患者155例为对照组。分析其动态心电图,测量HRT的起始值(TO)和震荡斜率(TS)。比较各组TO与TS的差异。结果对照组TO较SAP组明显降低(0.78±1.60vs 1.25±1.87,P<0.05),TS明显升高(5.44±4.12vs 1.51±0.69,P<0.01)。与对照组比较,SAP组TO、TS及TO+TS异常率明显升高(P<0.05,P<0.01)。对照组TS与年龄呈正相关(r=0.35,P<0.01);SAP组TS与LVEF呈负相关(r=-0.29,P<0.01)。结论老年SAP患者冠状动脉有严重狭窄者应积极行完全血运重建,HRT可作为SAP患者的风险预测因素,为其治疗策略和预后提供有意义的临床依据。     

Effect of resveratrol on microcirculation disorder and lung injury following severe acute pancreatitis in rats

AIM: To investigate the mechanism of resveratrol underlying the microcirculation disorder and lung injury following severe acute pancreatitis (SAP). METHODS: Twenty-four rats were divided into 3 groups (SAP, sham and resveratrol groups) randomly. SAP model was established by injecting 4% sodium taurocholate l mL/kg through puncturing pancreatic ducts. Sham (control) group (8 rats) was established by turning over the duodenum. Resveratrol was given at 0.1 mg/kg b.m. intraperitoneally. Rats were sacrificed 9 h after SAP was induced. Blood samples were obtained for hemorrheological examination. Lung tissues were used for pathological observation, and examination of microvascular permeability, dry/wet ratio and myeloperoxidase (MPO) activity. Gene expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) was detected by RT-PCR. RESULTS: Compared with SAP group, resveratrol relieved the edema and infiltration of leukocytes in the lungs. Resveratrol improved markers of hemorrheology: high VTB (5.77±1.18 mPas vs9.49±1.34 mPas), low VTB (16.12±3.20 mPas vs30.91±7.28 mPas), PV (4.69±1.68 mPas vs 8.00±1.34 mPas), BSR (1.25±0.42 mm/h vs50.03±0.03 mm/h), VPC (54.67±3.08% vs 62.17±3.39%), fibrinogen (203.2?7.8 g/ L vs 51.3±19.1 g/L), original hemolysis (0.45±0.02 vs 0.49±0.02), and complete hemolysis (0.41±0.02 vs 0.43±0.02) (P<0.05). Resveratrol decreased the OD ratio of ICAM-1 gene (0.800±0.03 vs 1.188±0.10), dry/wet ratio (0.74±0.02 vs 0.77±0.03), microvascular permeability (0.079±0.006 vs 0.112±0.004) and MPO activity (4.42±0.32 vs 5.03±0.51) significantly (P<0.05). CONCLUSION: Resveratrol can improve the microcirculation disorder of the lung by decreasing leukocyte-endothelial interaction, reducing blood viscosity, improving the decrease of blood flow, and stabilizing erythrocytes in SAP rats. It may be a potential candidate to treat SAP and its severe complications (ALI).     

PTD-NBD多肽对大鼠胰腺腺泡细胞炎性反应的抑制作用

目的: 探讨透细胞性PTD-NBD多肽对脂多糖诱导的炎性效应的干预与作用机制.方法: 以脂多糖刺激大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,构建急性胰腺炎的体外模型. 不同浓度免疫缺陷性病毒PTD多肽蛋白转导功能区与野生型NBD多肽融合成PTD-NBD多肽, 对AR42J细胞进行预处理, 突变型PTD-NBD(MT)多肽、PTD、NBD为对照. RT-PCR法观察ICAM-1及IL-1β mRNA的表达;定量酶联免疫吸附法检测培养液上清中IL-1β蛋白浓度的改变.结果: 透细胞性PTD-NBD多肽可以抑制脂多糖诱导的AR42J炎症细胞因子ICAM-1和IL-1β mRNA及蛋白的表达, 且呈剂量依赖方式.PTD-NBD(WT)多肽与单纯NBD多肽、突变型PTD-NBD(MT)多肽及PTD组比较(相对灰度值: 0.449±0.088 vs 1.132±0.069, 1.158±0.095, 1.206±0.078), 能够抑制ICAM-1 mRNA表达. 上述4组的IL-1β mRNA相对灰度值分别为0.526±0.077, 0.993±0.065, 1.143±0.086和1.128±0.117, IL-1β蛋白表达分别为278.82±61.80 ng/L、898.08±74.65 ng/L、945.25±42.49 ng/L和947.86±38.66 ng/L, 结果显示后3组不能抑制IL-1β mRNA及其蛋白的表达.结论: PTD-NBD(WT)多肽可以呈剂量依赖方式抑制LPS诱导的AR42J促炎细胞因子IL-1β和ICAM-1的表达, 其可直接影响胰腺腺泡细胞炎性反应.