熊果酸对肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的 体外观察熊果酸对肝星状细胞增殖与凋亡的影响,探讨熊果酸诱导肝星状细胞凋亡的可能作用机制. 方法 将不同浓度熊果酸作用于肝星状细胞HSC-T6及肝细胞L02,分别在药物作用24、48、72 h后用四甲基偶氮唑盐法检测熊果酸对HSC-T6及L02细胞增殖的影响;流式细胞仪检测熊果酸对HSC-T6凋亡的影响;光学显微镜观察熊果酸作用后细胞形态学变化情况;免疫细胞化学法检测HSC-T6中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况. 结果 各种浓度的熊果酸均可抑制HSC-T6细胞的增殖,且呈剂量-时间依赖性;当熊果酸浓度为25、50、75μmol/L时可促进L02细胞增殖,浓度＞75μmol/L则表现为抑制L02细胞增殖.在病理形态学方面,熊果酸作用HSC-T6细胞48 h后,光学显微镜下可见细胞缩小变圆、核浓缩等.25、50、75 μmol/L熊果酸作用HSC-T6细胞48 h后,流式细胞仪检测显示细胞凋亡率分别为10.30%±3.85%、21.87%±4.46%、31.33%±6.18%,比对照组(2.93%±1.60%)明显升高(P＜0.01).免疫细胞化学显示Bax及Caspase-3蛋白表达较对照组升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性,而Bcl-2蛋白表达水平与对照组无明显差异(P＞0.05).结论 在体外熊果酸可较明显地抑制HSC-T6细胞增殖,诱导其凋亡;对L02细胞的生长具有双向调节作用.熊果酸诱导HSC-T6细胞凋亡可能与降低Bcl-2/Bax比值、激活Caspase-3蛋白有关.     

谷氨酰胺对实验性结肠炎BABL/C小鼠肠黏膜的修复作用

目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对BALB/C小鼠实验性结肠炎的治疗作用及可能的机制。方法 将50只BALB/C小鼠分为正常对照组、模型对照组、5-ASA组、Gln组、Gln+5-ASA组。各实验性结肠炎组小鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸灌肠造模后,治疗组给予药物干预,观察疾病活动指数(disease activity index, DAI),取结肠组织行H-E染色病理组织学检查并积分,应用免疫组织化学技术检测小鼠结肠黏膜TNF-α、NF-κB、IL-10、IL-1β的表达。结果 模型组小鼠DAI评分明显升高、结肠黏膜呈明显的炎症变化,表现为急性炎症,如溃疡形成、单核细胞浸润等。结肠黏膜TNF-α、NF-κB、IL-1β的表达增多、IL-10表达减少;谷氨酰胺能减轻小鼠大肠黏膜炎症,在一定程度上起到治疗小鼠实验性结肠炎的目的,其疗效与5-ASA相当;其中谷氨酰胺联合5-ASA治疗效果最佳,与正常对照组比较差异无统计学意义。结论 谷氨酰胺可用于治疗BALB/C小鼠实验性结肠炎,其作用机制可能与促进肠黏膜细胞增殖、维护肠黏膜屏障、调节免疫功能、抑制NF-κB活化、降低TNF-α、IL-1β表达,升高IL-10的表达等有关,与5-ASA联用其治疗效果优于两者单独用药。     

内镜腹腔镜联合治疗肝硬化门静脉高压症食管胃底曲张静脉出血

目的：探讨内镜腹腔镜联合治疗肝硬化门静脉高压症食管胃底曲张静脉出血的可行性。 方法： 23例肝硬化门静脉高压症食管胃底曲张静脉出血患者行食管曲张静脉套扎或胃底曲张静脉组织胶注射后行手助腹腔镜脾切除11例,门奇静脉断流术12例。 结果：21例术后1年内无上消化道出血,2例因出血行再次套扎。1例于2年后患肝癌死亡,1例3年后上消化道出血死亡。 结论：内镜联合腹腔镜治疗肝硬化门静脉高压症曲张静脉出血创伤小,近期止血效果好,是一种切实可行的治疗门静脉高压症并食管胃底静脉曲张出血的方法。     

贲门失弛缓症可回收支架置入治疗22例分析

目的 探讨可回收食管支架在治疗贲门失驰缓症的临床价值。 方法 2007年1月～2010年3月,对22例贲门失弛缓症患者采用内镜直视下置入可回收支架并比较支架置入前、支架取出后3个月患者症状评分、食管最大宽度（MWE）、下食管括约肌静息压（LESP）,并对患者进行长期随访。 结果 ①症状评分（8.12±1.88）VS（1.67±0.51）,P <0.01。②食管最大宽度为（3.35±0.23）VS（1.78±0.34）,P <0.05。③LESP为（41.36±8.24）VS（11.86±2.76）,P <0.01。④术后并发症发生率：疼痛57.6%（15/26）,支架脱落及移位15.4%（4/26）,烧心等3.8%（1/26）。⑤随访3、6、12、24个月仅有0、0、1（3.8%）、2（7.6%）例患者复发。 结论 支架置入治疗贲门失弛缓症并发症少,近期及远期疗效满意,是一种简单可行、安全有效的治疗方法。     

三种评分方法预测肝硬化并食管静脉曲张破裂再出血风险的价值比较

Objective To compare the predictive value of the model for end-stage liver disease (MELD), MELD-Na and Child-Pugh (CP) for rebleeding in decompensated liver cirrhosis patients with esophageal varices within 3-month and 1-year. Methods A cohort of 365 decompensated liver cirrhotic patients with esophageal varices, who were admitted to hospital between Jan.2003 and Oct.2008, were retroseptively studied and followed up at least for one year. Patients were divided into hyponatremia group and normal group. MELD-Na, MELD and Child-Pugh scores were calculated for each patients on the first day of admission.Receiver operating characteristics curves (ROC) and the area under ROC (AUC) were used to determine the ability of three models for predicting rebleeding in 3-month and 1-year. Z-test was used to compare predictive ability of three models. Results At 3-month and 1 year of enrollment, AUC of MELD-Na was 0.825 and 0.842, respectively, whereas AUC of MELD was 0.779 and 0.802, respectively. MELD-Na and MELD were superior to Child-Pugh in rebleeding prediction (0.678 and 0.634, P＜0.05). But there was no significantly difference between MELD-Na and MELD in rebleeding prediction for 3-month and 1-year (P＞ 0.05). Conclusions MELD-Na and MELD are superior to Child-Pugh score in exactly predicting the rebleeding risk in decompensated liver cirrhosis patients with esophageal varices. MELD-Na compensates a deficiency of MELD.     

四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠肝组织和HSC-T6细胞NOX4基因及其蛋白表达的变化

目的 探讨四氯化碳(CCl₄)诱导的肝纤维化小鼠和肝星状细胞(HSC-T6)还原型辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶家族氧化酶4(NOX4)基因及其蛋白表达的变化。方法 采用腹腔注射四氯化碳(CCl₄)构建10只小鼠肝纤维化模型,采用qRT-PCR法和Western Blot法检测小鼠肝组织NOX4基因和蛋白表达水平。将肝星状细胞(HSC-T6)分为对照组、无意干预组和NOX4-siRNA干预组,后两组分别采用脂质体2000将无意义序列或NOX4-siRNA转染HSC-T6细胞,采用qRT-PCR法和Western Blot法检测HSC-T6细胞NOX4、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I 型胶原(Col1a I)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)、金属蛋白酶2(MMP-2)、转化生长因子 β1(TGF-β1)、Smad2和Smad3水平,采用DCFH-DA荧光探针法检测细胞活性氧(ROS)含量,采用MTT法检测细胞增殖,使用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。结果 模型小鼠肝组织出现明显的病理学损伤,有大量的胶原纤维沉积;模型组小鼠肝组织NOX4 mRNA水平显著高于对照组(P＜0.05);与对照组细胞比,NOX4-siRNA干预组细胞NOX4 mRNA及其蛋白、ROS、增殖活性、S期细胞比例、α-SMA、Col1a I、TIMP-1、MMP-2、TGF-β1、p-Smad2/Smad2、p-Smad3/Smad3表达水平显著降低,而G0/G1期细胞比例和细胞凋亡率显著升高(P＜0.05)。结论 肝纤维化组织NOX4呈高水平,下调NOX4可抑制肝星状细胞的增殖和活化,并促进其凋亡,可能是通过下调TGF-β/Smad信号通路实现的。     

谷胱甘肽-S-转移酶-π和端粒酶在食管癌及癌前病变组织中的表达

谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是一组有多种生理功能的同功酶，在保护细胞免受细胞毒性物质和致癌剂损害方面起重要作用。研究表明，端粒酶的激活与细胞永生化、癌变关系极为密切。我们采用免疫组化和TRAP-银染法检测GST-π和端粒酶在食管癌及癌前病变组织中的表达。     

维甲酸的免疫调节与炎症性肠病

维甲酸(retinoic acid,RA)是维生素A的衍生物,可以调节细胞的增殖、分化、成熟,是机体正常发育和各种生理活动必不可少的重要因子.RA是一种诱导分化剂,但同时也是一种免疫调节剂.一方面,可降低Th1细胞INF-γ的分泌,促进Th2细胞IL-4的分泌,平衡Th1/Th2的比率;另一方面,促进CD4+CD25+...     

NF-κB信号通路与炎症性肠病

炎症是多种细胞及细胞因子参与的机体防御性反应,但严重或长期的炎症则会造成机体损伤.炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组以慢性、周期性炎症为特征的胃肠道疾病,长期、反复的胃肠道炎症不仅影响患者生活质量,而且增加了肠道纤维化及癌变的风险,而核因子Kappa B(nuclear f...     

幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠模型的研究

随着对幽门螺杆菌 (Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ)疫苗、致病机理、药物筛选等方面研究的深入 ,人们越来越多地需用动物模型。我们用含有ｃａｇＡ和ｖａｇＡ基因阳性的Ｈｐ株ｓｙｄ ｎｅｙｓｔｒａｉｎ1 (ＳＳ1 )感染ＢＡＬＢ ｃ小鼠 ,作Ｈｐ慢性感染小鼠的动物模型 ,试验用空肠弯曲菌琼脂基础培养基培养 ,微需氧条件下 37℃培养 3～ 5ｄ。ＳＰＦ级ＢＡＬＢ ｃ小鼠 40只 ,雌性 ,7～ 8周龄 ,重 17～ 2 0克 ,分实验组、对照组。实验组动物模型灌喂Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ菌液 ,0 4ｍｌ 只 (每ｍｌ约含Ｈｐ 10 9条 ) ,连续 5次 ,10ｄ完成 ,对照组动物则不作相应…