白介素-1受体拮抗剂对椎间盘基质代谢的影响

目的:探讨白介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)对双后肢大鼠椎间盘基质代谢的影响。方法:建立双后肢大鼠模型36只,随机分为实验组和对照组,每组18只,实验组从造模当天即予腹腔注射IL-1R(a50ng/kg),隔天重复注射至处死,对照组18只不予任何处理。于造模后1、3、6个月每组分别处死6只大鼠,完整取出L4/5椎间盘固定、切片,予SABC法进行免疫组化染色,并使用图像分析系统对纤维环中Ⅱ型胶原染色进行灰度值扫描,同理取出L5/6椎间盘,使用间苯三酚法测量蛋白多糖含量。结果:术后第1个月,实验组椎间盘髓核中Ⅱ型胶原灰度值及蛋白多糖含量分别为83.67±7.97和2.376±0.161,对照组分别为87.25±8.70和2.297±0.101,两组间无显著性差异(P>0.05);第3个月时实验组Ⅱ型胶原染色的灰度值及蛋白多糖含量分别为107.42±6.50和2.093±0.131,对照组分别为145.91±7.42和1.039±0.092,两组间比较有非常显著性差异(P<0.01);第6个月时实验组Ⅱ型胶原染色的灰度值及蛋白多糖含量分别为129.83±4.03和1.796±0.065,对照组分别为203.76±5.98和0.654±0.048,两组间比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论:IL-1Ra对双后肢大鼠椎间盘基质降解有明显的抑制作用。     

白介素-1受体拮抗剂对双后肢大鼠椎间盘细胞凋亡的影响

目的：探讨白介素-1受体拮抗剂（IL-1Ra）对双后肢大鼠椎间盘细胞凋亡的影响。方法：建立双后肢大鼠模型54只，随机分为试验组、空白对照组和阴性对照组，每组18只．试验组从造模当天即予腹腔注射IL-1Ra（50ng／kg体重），隔天1次重复注射至处死，空白对照组不予任何处理，阴性对照组隔天1次予腹腔注射等量生理盐水。于造模后1、3、6个月每组分别处死6只大鼠，完整取出L4／5椎间盘后进行固定、切片，使用末端脱氧核件酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL法）检测各组大鼠椎间盘细胞的凋亡情况，并使用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构。取L5/6椎间盘使用流式细胞仪检测各组大鼠椎间盘细胞的凋亡情况。结果：术后1个月试验组、空白对照组及阴性对照组椎间盘细胞的凋亡无显著性差异（P〉0．05）：术后3个月试验组与空白对照组及阴性对照组相比细胞凋亡明显减少，有显著性差异（P〈0．05）；术后6个月试验组与空白对照组及阴性对照组相比细胞凋亡率有非常显著性差异（P〈0．01）。结论：IL-1Ra对双后肢大鼠椎间盘细胞凋亡有明显的抑制作用。     

双后肢大鼠椎间盘退变动物模型的建立

目的　为椎间盘相关研究建立一种经济科学的椎间盘退变动物模型。方法　对 15 2只新生SD大鼠采用截除双前肢和特殊饲养的方法培育双后肢大鼠 ,以 10只正常同龄大鼠作为对照 ,18月龄时处死后通过光镜和电镜检查来观察两组大鼠L2～ 3 椎间盘的退变情况。结果　截除双前肢后 ,双后肢大鼠生长良好 ,术后 18个月存活 17只。光镜检查证实其椎间盘均发生了严重的髓核和纤维环退变。有 2例还出现了腰椎间盘突出。超微结构观察发现髓核中脊索细胞出现明显的退变和坏死 ,软骨样细胞中出现大量脂滴。基质中胶原纤维排列紊乱 ,出现大量板层样结构和团块。而正常大鼠的椎间盘仅发生轻度退变 ,胶原纤维排列整齐。结论　本造模方法简单经济、成功率高、重复性好 ,建立的双后肢大鼠模型符合人体椎间盘退变规律。     

青少年特发性脊柱侧凸患者椎间盘纤维环胶原的分布及其意义

目的:研究青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者侧凸区椎间盘不同部位纤维环Ⅰ型、Ⅱ型胶原的分布,探讨胶原分布异常在AIS发生发展中的作用。方法:顶椎为腰椎的AIS患者共27例(AIS组),同时选15例同年龄段先天性脊柱侧凸(CS)患者为对照(CS组)。在脊柱侧凸前路手术时取L1/2或L2/3椎间盘。AIS组取材节段为侧凸顶椎区,CS组则为侧凸的下终椎区。采用胃蛋白酶-乙酸(0.5mol/L)体系提取胶原组织,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法及抗原抗体Western印记法进行胶原的分类和定量测定。在GelWork图像分析系统中进行泳道的对比定量分析。分别计算AIS组凹侧、凸侧和CS组纤维环中Ⅰ型、Ⅱ型胶原含量,并进行统计学分析。结果:AIS组患者纤维环中Ⅰ型、Ⅱ型胶原的含量在凹侧明显低于凸侧,有显著性差异(P<0.05),而且凹、凸侧胶原含量的差异与侧凸Cobb角有明显的相关。AIS组Ⅰ型、Ⅱ型胶原的含量比CS组也有显著下降(P<0.01)。结论:AIS椎间盘纤维环存在胶原代谢异常,AIS凹侧纤维环Ⅰ型、Ⅱ型胶原明显低于凸侧,且随Cobb角的增大差值越明显,提示椎间盘胶原代谢异常可能和AIS的发生发展有密切的联系。     

前路融合对兔颈椎邻近节段椎间盘的影响

目的探讨前路融合内固定对兔颈椎邻近节段椎间盘的影响。方法60只新西兰白兔随机分4组,每组15只。1组为假手术对照组,余3组为实验组（分别为C34、C45、C56颈椎前路融合内固定组）。术后3、6、9个月每组取5只摄X线片,并取邻近上、下节段椎间盘做组织形态学检查,用免疫组化方法观察纤维环、髓核Ⅰ、Ⅱ型胶原的变化。结果随着时间的推移,实验组的X线片可见手术间隙融合,邻近节段椎体终板硬化;免疫组化结果：髓核中Ⅱ型胶原表达下降,纤维环中Ⅰ型胶原表达增加,随着时间的延长表现更为显著,Ⅰ型胶原有逐渐取代Ⅱ型胶原的趋势,胶原变化在C3-4、C4-5上、下邻近节段差异无统计学意义（P〉0.05）,而C56的下位邻近节段变化重于上位邻近节段,差异有统计学意义（P〈0.05）。实验组6个月与9个月分别与对照组6个月与9个月比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论颈椎前路融合内固定可引起兔颈椎邻近节段的退变,不同水平融合内固定对邻近节段椎间盘的影响不同。     

脱矿脱细胞骨基质环支架体外构建组织工程化椎间盘纤维环

目的:探计以脱矿脱细胞骨基质环为支架、纤维环细胞为种子细胞体外培养构建组织工程化椎间盘纤维环的可行性.方法:取兔椎间盘纤维环细胞培养,应用甲苯胺蓝染色和Ⅰ型、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色进行鉴定.用纤维蛋白凝胶接种技术将兔椎间盘纤维环细胞接种到经脱矿脱细胞制备的骨基质环支架材料上,体外培养3个月.每月取培养的细胞支架复合体进行大体形态、HE染色光镜检查和扫描电镜观察,并用生化方法榆测羟脯氨酸、氨基葡聚糖(GAG)、脱氧核糖核酸(DNA)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测Ⅰ、Ⅱ型胶原信使核糖核酸(mRNA)表达;免疫组化和蛋白质印迹方法检测Ⅰ、Ⅱ犁胶原蛋白表达.结果:培养的第1代细胞甲苯胺蓝染色呈异染性,Ⅰ型、Ⅱ型胶原免疫组化染色均可见阳性表达,表明培养的第1代细胞具有椎间盘纤维环细胞的表型特点.构建的复合体体外培养1、2、3个月时大体呈白色半透明样环状,有光泽,质韧,具有一定弹性,可扭曲;HE染色光镜下见支架孔洞被红染的组织填充,且空洞内的细胞密度逐渐增加;扫描电镜观察材料表面逐渐被组织填充;Ⅰ型、Ⅱ型胶原免疫组化染色均为阳性;培养2个月时复合体羟脯氨酸、GAG、DNA含量明显高于1个月时(P<0.01),3个月时与2个月时比较无显著性差异(P>0.05).各时间点复合体羟脯氨酸、GAG、DNA含量均低于正常纤维环(P<0.05或<0.01);培养1个月时复合体可检测到Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达.2个月时与1个月时比较有显著性差异(P<0.01),3个月时与2个月时比较无显著性差异(P>0.05).结论:以脱矿脱细胞骨基质环为支架、纤维环细胞为种子细胞构建的复合体在体外培养时,细胞能够保持表型特点、逐渐增殖和行使功能,此复合体可被鉴定为类纤维环组织,用其构建组织工程化椎间盘纤维环可行.     

实验性无创兔颈椎间盘退变模型的建立

目的 :观察长时间异常应力环境下兔颈椎间盘的组织形态、基质生化成分和生物力学性能变化 ,为防治颈椎病的研究提供动物模型和实验依据。方法 :选取 35只家兔 ,随机分为对照组 (2 0只 )、模型组 (15只 ) ,造模家兔颈椎处于低头屈曲 4 5°位异常应力环境下 5h/d。动物处死后 :①颈椎间盘光镜和电镜下观察组织形态学变化 ;②免疫组化和生化方法测定基质胶原和蛋白聚糖 (proteoglycan ,PG)含量和成分的变化 ;③功能节段生物力学性能测试。比较各组间可能存在的差异。结果 :①对照组颈椎间盘组织形态、基质胶原和PG含量和成分及生物力学性能无明显变化 ;②模型组颈椎间盘发生软骨细胞变性、坏死 ,髓核皱缩 ,纤维环胶原纤维变性、排列紊乱 ,软骨终板钙化、断裂 ,胶原纤维排列紊乱等组织形态学改变。髓核和软骨终板中PG总量、硫酸软骨素 (chondroitinsulphate,CS)含量和Ⅱ型胶原表达下降 ,纤维环中Ⅰ型胶原表达增加 ,椎间盘压缩、扭转生物力学性能下降 ,并随着异常应力作用时间的延长而表现更为显著。结论 :长时间处于异常应力环境下能使兔颈椎间盘组织形态、基质生化成分及生物力学性能均发生明显退行性改变 ,成功建立家兔颈椎间盘退变模型     

长期直立与大鼠腰椎骨质增生的关系

目的:通过诱导大鼠从爬行体位到直立体位,观察长期直立与腰椎骨质增生的关系并探讨其可能机制.方法:20只SD大鼠随机分为两组,对照组不进行处理,普通饲养笼喂养;模型组通过肩关节离断术和抬高饲养笼水槽的方法诱导大鼠直立,建立长期直立大鼠模型.所有动物术后9个月处死,其中L5椎体进行藏红染色、天狼星红染色、免疫组织化学法观察;余下腰椎边缘组织及椎间盘应用实时荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原(Coll)、X型胶原(Collo)、转化生长冈子β1(TGF-β1)及血管内皮生长因子(VEGF)基冈的表达.结果:藏红染色显示模型组椎体下缘椎间盘外缘非基质成分增加,类纤维细胞增多,发牛骨质增生;对照组改变不明显.天狼星红染色显示模型组骨质增生部位胶原排列出现断裂,Ⅰ型与Ⅲ型胶原明显增多;对照组胶原排列较致密,Ⅲ型胶原少见.免疫组化染色显示模型组骨质增生形成部位Collo,VEGF,TGF-β1表达均较对照组增强.RT-PCR显示模型组上述基因表达均较对照组上调(P＜0.05).结论:长期直立体位会导致大鼠腰椎边缘骨质增生,该骨质增生可能与纤维环外层纤维软骨细胞化生相关,并且与TGF-β1上调有关.     

应用微创技术建立恒河猴腰椎间盘早期退变模型

目的 应用CT定位,经皮穿刺纤维环诱导恒河猴腰椎间盘退变,建立灵长类动物腰椎间盘早期退变模型.方法 恒河猴13只,随机分为三组:(1)造模组:在CT定位下,用20G穿刺针从左侧后方入路经皮穿刺L1,2:(n=12),L2,3、L3,4、L4,5、L5,6(n=13)椎间盘的纤维环全层至椎间盘髓核正中,共64个椎间盘.(2)穿刺对照组:15G穿刺针穿刺1只猴的L1,2椎间盘.(3)正常对照组:L6,7,L7-S1,共26个椎间盘.造模前及造模后4、8、12周对各组椎间盘行MRI检查,并行HE、Masson、番红O、免疫组织化学染色组织学观察.结果 (1)MRI:20G穿刺针穿刺的造模组椎间盘造模前及造模后4、8、12周,椎间盘信号强度按Pfirmann分级均为Ⅰ级.15G穿刺针穿刺椎间盘4周时信号降低(Pfirrmann Ⅲ级),8周时为黑色椎间盘(Pfirmann Ⅳ级).正常对照组椎间盘为Pfirmann Ⅰ级.(2)组织学:造模组椎间盘造模后4周未见改变,8周时HE染色示髓核内细胞数减少,12周时较为明显.Masson染色4周未见改变,8周时各层纤维间出现裂隙,12周时裂隙增宽.番红O染色见8、12周髓核内蛋白聚糖进行性减少.免疫组织化学结果显示4周和8周时同正常椎间盘比较差异无统计学意义(P＞0.05),12周时,Ⅱ型胶原合成减少(P＜0.05).15G穿刺对照组在8周时HE染色见髓核内细胞减少明显,Masson染色见纤维环各层间裂隙明显,呈波浪状.番红O染色示髓核内蛋白聚糖数量明显减少.免疫组织化学染色示Ⅱ型胶原合成减少.正常对照组在各时间点未见到形态学改变.结论 20G穿刺针可以诱发椎间盘缓慢进展的轻度退变.MRI平均信号强度观察椎间盘轻度退变时,不是敏感的指标,需要依靠组织学证实.     

TNF-α抑制剂对破裂型腰椎间盘突出重吸收影响的实验研究

目的 研究TNF-α抑制剂(益赛普)对破裂型腰椎间盘突出重吸收的影响作用.方法 将42只雄性SD大鼠在适应性喂养2周后随机分为空白组和药物组.空白组分两种模型:随机分为模型组Ⅰ(椎间盘不刺破组)、模型组Ⅱ(椎间盘刺破组);药物组(TNF-α抑制剂组)给以益赛普注射.动物造模成功后给药4周后处死,所取得的大鼠椎间盘进行T...     

胸腰椎骨折椎弓根内固定断裂与植骨融合方式的相关性分析

[目的]探讨胸腰椎骨折椎弓根螺钉内固定系统内固定术后,椎弓根螺钉断裂与植骨融合方式之间的关系,以探讨胸腰椎骨折植骨融合的最佳方式。[方法]回顾性研究1995年5月~2005年12月本院脊柱外科收治的胸腰椎骨折病人197例,其中A组单纯内固定(不植骨)患者14例,B组“H”形椎板植骨21例,C组横突间植骨67例,D组椎间、椎内联合横突间植骨95例。[结果]术后随访6~32个月,内固定断裂12例,其中A组4例,B组3例,C组5例,D组0例,4组中D组内固定断裂率显著低于其他3组(P<0.05)。[结论]椎间、椎体内联合横突间植骨重建脊柱三柱的稳定性,符合人体生物力学原理,能有效降低内固定断裂的发生。     

Influence of the design of the prosthesis on the outcome after hemiarthroplasty of the shoulder in displaced fractures of the head of the humerus

We reviewed 39 patients with displaced three- and four-part fractures of the humerus. In 21 patients (group A) we had used an anatomical prosthesis for the humeral head and in 18 (group B) an implant designed for fractures. When followed up at a mean of 29.3 months after surgery the overall Constant score was 51.9 points; in group A it was 51.5 and in group B 52.4 points. The subjective satisfaction of the patients was assessed using a numerical rating scale and was similar in both groups. In group A complete healing of the tuberosities was found in 29% and 50% in group B. Partial integration was seen in 29% of group A and in only one patient in group B, while resorption was noted in 43% of group A and 44% of group B. The functional outcome was significantly better in patients with complete or partial healing of the tuberosities (p=0.022). The specific trauma prosthesis did not lead to better healing of the tuberosities. The difference in clinical outcome obtained by the two designs did not reach statistical significance.     

Radiographic assessment of the relative lengths of the bones of the fingers of the human hand

The study assessed whether a relationship existed between the lengths of the phalanges of the fingers of the hand. The centres of rotation of the joints in each finger were determined by dissection of cadaveric hands. Using these data, the distances between the joint centres was determined on anteroposterior hand X-rays taken for clinical purposes. The study has shown that, for all the fingers, there is a ratio of 1 for the distance between the metacarpophalangeal and proximal interphalangeal joint and the distance between the proximal interphalangeal joint and the finger tip. The ratio for the distances between the interphalangeal joints and the distal joint and the tip approximates to 1.3 for the index, middle and ring fingers and to 1.0 for the little finger. No evidence was found to support Littler's hypothesis that the interarticular distances of the finger follow the Fibonacci sequence.