活动性肝纤维化大鼠模型中注射钆塞酸二钠后的钆沉积及肝纤维化

摘要目的评估钆塞酸二钠对活动性肝纤维化大鼠模型中纤维化的影响。材料与方法本研究已获动物实验委员会批准。在12周内腹腔注射四氯化碳(CCl4)诱导出肝纤维化。在CCl4的最终剂量后开始连续5d给予10mmol/kg的钆塞酸二钠(临床剂量为0.25mmol/kg)。使用3组SD大鼠进行实验。第1组的6只大鼠用钆塞酸二钠处理,第2组的9只大鼠用CCl4处理,第3组的9只同时使用钆塞酸二钠和CCl4处理。     

采用MRT1ρ作为影像标记来监测肝损伤进展及复原:大鼠CCl4肝损伤的实验研究

摘要目的近来有研究显示胆道结扎大鼠的肝脏MRT1ρ值随着肝纤维化严重程度的增加而提高。建立大鼠肝脏四氯化碳(CCl4)肝损伤模型,此实验进一步研究T1ρ弛豫在肝纤维化评估中的优势。方法雄性SD大鼠腹膜内注射2mL/kgCCl4,每周2次,持续6周。然后停用CCl4让大鼠复原。对大鼠进行肝脏T1ρMR成像及常规T2WI。     

福辛普利对大鼠肝纤维化的影响

目的 研究血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利抗大鼠肝纤维化的作用.方法 雄性清洁级SD大鼠40只,随机分成5组:阴性对照组(n=5),腹腔注射植物油,每日单蒸水灌胃;模型组(n=5),腹腔注射CCl4,每日单蒸水灌胃;阳性对照组(n=10),造模方法同模型组,每日用秋水仙碱0.2mg/kg灌胃;福辛普利小剂量组(n=10)...     

CM-101:靶向Ⅰ型胶原蛋白测定肝纤维化的MR成像探针

目的评价新型靶向Ⅰ型胶原蛋白MR探针CM-101的生物分布、代谢和药代动力学,并进一步评估该探针在动物模型中帮助量化肝纤维化的能力。材料与方法用质谱法测量分析大鼠中CM-101的生物分布、药代动力学和稳定性。动物分为2组,胆管结扎(BDL)组和假手术组,所有动物术后19 d使用1.5 T临床MR成像设备进行扫描。实验组小鼠每周2次腹腔注射四氯化碳(CCl4)橄榄油混合物,对照组注射空白橄榄油,连续注射10周,并在CCl4注射前和最后一次注射后1周分别行7.0 T MR成像扫描,采集CM-101(10μmol/kg)注射前后的影像。注射CM-101后肝脏和肌肉组织之间的对比噪声比的变化(ΔCNR)用于量化肝纤维化。肝组织行天狼星红染色和羟脯氨酸含量分析。本实验研究获得动物保护研究机构小组委员会批准。结果 CM-101具有快速血浆清除率,主要经大鼠肾脏快速清除[半衰期:(6.8±2.4)min]。CM-101注射24 h后,体内组织钆含量低[(3.9%±0.6%)ID/g],第14天时钆含量降低为1/10[(0.33%±0.12%)ID/g],骨吸收量可忽略不计[在第1天和第14天分别显示为(0.07%±0.02%)ID/g和(0.010%±0.004%)ID/g]。与假手术组相比,BDL组ΔCNR显著升高(13.6±3.2∶5.2±1.0,P0.001),与基线水平比较,CCl4注射后ΔCNR也显著升高(18.3±6.5∶5.2±1.0,P0.001)。结论 CM-101具有快速血浆清除率和全身清除率,骨或组织中钆沉积量极少基本可忽略;BDL大鼠和CCl4诱导大鼠,利用CM-101能可靠地检测肝纤维化。     

芹龙颗粒抗急性肝损伤的实验研究

目的观察芹龙颗粒（QL）对小鼠急性肝损伤的防治作用。方法将60只小鼠随机分为联苯双酯阳性药物组,正常动物组,CCl4模型对照组和QL大、中、小（10、5、2.5.gkg^-1）3个剂量组。药物组动物先分别灌胃给药3d,第4d,按体重腹腔注射0.5%浓度CCl4橄榄油溶液（10ml.kg^-1）,复制急性肝损伤动物模型。24h后取血测定血清中ALT,AST含量;并取肝脏,称重,10%甲醛固定,HE染色,于光镜下观察肝脏组织学变化。结果模型组小鼠肝功能明显异常,肝组织变性、坏死严重;QL组能明显改善CCl4中毒小鼠肝功能,其降酶率（ALT）以大、中、小剂量分别为54.3%、49.1%、41.2%。肝组织学改变较轻,体重减少较模型组轻。结论QL对CCl4致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其改善肝功能具有良好的量效关系。     

复方硫磺软肝丸抗慢性肝纤维化作用研究

目的探讨复方硫磺软肝丸对改良方法所致大鼠慢性肝纤维化模型的保肝及抗纤维化作用。方法采用配方饲料加腹腔注射CCl4橄榄油溶液的改良方法复制大鼠慢性肝纤维化模型。造模结束后,灌胃给药,每天2次,连续给药1 个月。末次给药后禁食12 h,留取大鼠血清及肝组织,检测血清中转氨酶（ALT、AST）指标、血清肝纤维化（HA、LN、Col-Ⅳ）指 标的变化,观察肝组织病理切片的变化。结果模型组大鼠有明显的肝损伤及肝纤维化病变;各给药组肝功能和肝纤维化程 度均有不同程度的改善,病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度较模型组明显减轻（P〈0.05）。结论复方硫磺软肝丸 对慢性肝纤维化大鼠有明显的保肝及抗肝纤维化作用。     

PFD对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化治疗疗效和CTGF表达的影响

目的观察不同剂量PFD对二甲基亚硝胺（Dimethylnitrosamine DMN）诱导大鼠肝纤维化的治疗作用和CTGF表达的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法健康雄性Wistar大鼠105只随机分为正常组21只,给予生理盐水10 mg/kg体重腹腔内注射,每周前三天连续给药,1次/日,连续注射3周;造模组84只,给予1%DMN溶液10 mg/kg体重腹腔注射,每周前三天连续给药,1次/日,连续注射3周。两周末将造模组随机分为4组,每组21只,分别是：模型组、IFN-α治疗组、PFD 120 mg、PFD 240 mg治疗组。各组大鼠均于造模第3周第一天给予药物治疗,每周七天,1次/日,治疗共4周。各组给药剂量及方法如下：正常组、模型组予以0.5%CMCNa 6 m L/kg灌胃;PFD不同剂量组予以相应剂量PFD灌胃;IFN-α组予以IFN-α10万单位/只,皮下注射。治疗四周后处死所有大鼠,留取肝组织行Masson染色,免疫组织化学法测Ⅰ型胶原,CTGF表达。结果 （1）Masson染色SSS半定量评分,模型组与正常组比较显著升高（P〈0.05）。IFN-α组、PFD组SSS半定量评分较模型组显著降低（P〈0.05）。免疫组化法检测肝组织Ⅰ型胶原的表达,模型组与正常组比较显著升高（P〈0.05）,PFD组与模型组比较显著降低（P〈0.05）,IFN-α组与模型组比较无统计学差异（P〉0.05）,（2）免疫组化法检测肝组织CTGF的表达,模型组与正常组比较显著升高（P〈0.05）。PFD 120 mg、PFD 240 mg各组与模型组比较显著降低（P〈0.05）。结论 （1）PFD具有治疗DMN诱导的大鼠肝纤维化的作用,与α-IFN无明显差别。（2）PFD抗DMN诱导大鼠肝纤维化的作用机制可能与下调CTGF的表达,抑制促纤维化因子有关。     

软肝胶囊对四氯化碳所致慢性肝纤维化大鼠的肝保护作用

目的验证软肝胶囊对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝纤维化模型的肝保护作用及抗纤维化作用。方法模型组及各给药组首次皮下注射40%CC145ml/kg,以后每3d注射1次40%CCl43ml/kg,正常对照组给予等容积橄榄油,持续9周,给药自造模之日开始。结果四氯化碳所致慢性肝纤维化大鼠有明显肝损伤及慢性纤维化的表现,软肝胶囊三个剂量组肝功能指标均有不同程度的改善;1.4,2.8g/kg组肝组织胶原蛋白含量较模型组均明显降低;0.7g/kg组HA的值较模型组显著降低;病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度均较模型组明显减轻。结论软肝胶囊对慢性肝纤维化大鼠具有肝保护作用及抗肝纤维化作用。     

苦参素抗大鼠肝纤维化作用的实验研究

目的　研究苦参素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化肝组织Smad基因表达的影响。方法　 90只SD大鼠分为 3组 ,正常对照组 (C组 )、模型组 (M组 )和苦参素干预组 (T组 )。以CCl4皮下注射法诱导大鼠肝纤维化 ,干预组大鼠在造模的同时给予苦参素注射液腹腔注射 ,正常对照组给予液体石蜡皮下注射和生理盐水腹腔注射 ,8周实验结束时处死动物。酶联免疫吸附法检测血清TGFβ1水平 ,HE和Masson染色观察大鼠肝组织病理学变化和胶原沉积 ,免疫组化法检测Smad3基因表达情况。结果　苦参素干预组大鼠血清TGFβ1水平下降 (32 .6 5± 8.71)vs(96 .37± 16 .5 4 )mg/L ,P <0 .0 5 ) ,肝组织组织学积分 (1.9± 0 .3vs3.6± 0 .8,P <0 .0 5 )和胶原面积 ((94 .4 1± 37.2 6 )vs(6 90 .86± 188.71) μm2 ,P <0 .0 5 )明显减少 ;Smad3蛋白表达阳性率减少 ((2 .33± 1.6 4 )vs(9.5 6± 1.34) % ,P <0 .0 5 )。结论　苦参素干预性治疗能够有效地减少大鼠肝组织胶原沉积 ,使其血清TGFβ1水平下降 ,并抑制Smad3基因表达 ,干扰TGFβ介导的肝纤维化信号转导     

中药八味抗纤方抗大鼠肝纤维化的实验研究

 目的 观察中药八味抗纤方对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠的治疗作用.方法 采用四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,同时予不同剂量中药八味抗纤方灌胃,观察八味抗纤方对慢性肝损伤大鼠肝功能的影响, 采用Ishak肝病组织病变计分修正方案,结合HE染色、Masson染色和免疫组化染色研究八味抗纤方对大鼠肝组织病理改变的影响,以活化HSC特异性标记α-SMA标记显示活化肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),探讨八味抗纤方抗肝纤维化的可能的作用机制.结果 低剂量组和高剂量组大鼠血清AST均显著低于模型组;肝纤维化程度轻于模型组;α-SMA阳性细胞数少于模型组.结论 八味抗纤方能够抑制四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化,减轻纤维结缔组织增生,抑制HSC的活化.     

生血胶囊的毒理学研究

目的本研究观察小鼠和大鼠口服生血胶囊的急性毒性和长期毒性反应,为临床用药提供参考。方法取健康小鼠和大鼠各30只,灌胃给药,2次/d,每次剂量分别为24和16 g/kg,给药后观察14 d,记录动物死亡及不良反应症状,取健康SD大鼠160只,随机分为低、中、高(0.5、2.5、5.0 g/kg)3个剂量组和一个对照组。灌胃,2次/d,每次10 ml/kg,连续26周。用药13周、26周和停药4周后分别取样进行血液学、血液生化学、脏器重量及重量指数,病理组织学检查。结果生血胶囊对小鼠和大鼠的口服最大给药量分别大于24和16 g/kg,该剂量是临床成人拟推荐用药剂量(0.08 g/kg)的240和160倍;长期毒性实验中各组大鼠的一般状况、体质量、血液学指标、血液生化学指标及主要脏器系数与对照组比较未见显著差异和异常改变;肉眼观察服药组心、肝、脾、肺、肾等脏器外观形态、颜色均无异常改变,光镜检查也未见各脏器组织结构和细胞形态异常。结论在推荐临床剂量下服用生血胶囊是安全可靠的。     

天芪航力方提取物的毒理学研究

目的观察小鼠和大鼠灌胃后天芪航力方提取物的急性毒性和长期毒性反应,为临床试验研究提供参考。方法急性毒性实验采用CD-1（ICR）小鼠,灌胃给药,给药后观察14 d,记录动物死亡及不良反应症状;反复给药毒性实验采用SD大鼠,连续灌胃给药26周,给药13周、26周和停药4周后,分别取样进行血液学、血液生化学、病理形态学、病理组织学检查。结果天芪航力方提取物小鼠急性口服毒性的最大剂量大于120 g.kg-1,该剂量相当于临床拟用量的246倍;长期毒性实验低、中、高3个剂量组1.60、3.21、11.42 g.kg-1（相当于临床拟用剂量的10、20和71倍）,各组大鼠的一般状况、体质量、血液学指标、血生化指标及主要脏器系数与对照组比较未见显著差异和异常改变,肉眼观察用药组动物心、肝、脾、肺、肾等脏器外观形态、颜色均无异常改变,光镜观察也未见各脏器组织结构和细胞形态异常。结论高剂量的天芪航力方提取物对实验动物无明显毒性损害。     

EVP-ABD-enhanced MRI to evaluate diffuse liver disease in a rat model

PURPOSE: To evaluate the feasibility of using manganese-based MR imaging contrast agent EVP-ABD to detect diffuse liver disease in an established rat hepatitis model. MATERIALS AND METHODS: Hepatitis was induced by administration of CCl(4) in corn oil vehicle to rats intraperitoneally. MR images were acquired on a 3T scanner using a volume coil approximately 36 hours after the administration of CCl(4). EVP-ABD was administered via a tail vein at a dose of 10 mumol/kg. Multi-TI turboflash images were acquired to evaluate liver R1 (=1/T1) values before and after the EVP-ABD administration. Eighteen rats received various doses of CCl(4) and completed pre- and postcontrast MRI scans and liver histologic evaluation. RESULTS: The liver R1 after the EVP-ABD administration and the change of the liver R1 before and after the administration, DeltaR1, show significant correlations with the CCl(4) dose. A significant correlation was also found between the histologic scores and the CCl(4) doses despite known variability in the relationship of CCl(4) dose to histology. A significant correlation was found between the histologic score and DeltaR1. CONCLUSION: Our results indicate that EVP-ABD-enhanced MRI can detect diffuse liver disease generated by CCl(4) based on the significant correlation between proton R1 in liver following EVP-ABD and the CCl(4) doses as well as the histologic scores.     

中药茵栀清肝汤对四氯化碳大鼠急性肝损伤的保护作用

 目的研究茵栀清肝汤对四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠的保护作用.方法Wstar大鼠随机分为正常组、急性肝损伤模型组、中药治疗低、中、高剂量组,中药组分别予以茵栀清肝汤3g/kg、6g/kg、12g/kg每日一次灌胃,共7 d.末次灌胃后除正常组外,其余所有大鼠予以50%四氯化碳5 ml/kg灌胃1次,24h后处死全部大鼠,收集肝组织及血清标本.对肝组织进行HE染色病理检查;生化方法检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase,AST)、谷氨酸氨基转移酶(Alaninetransaminase,ALT)的活性;测定大鼠血清超氧化歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(Malondidehyde,MDA)的含量.结果中药茵栀清肝汤治疗组大鼠血清AST、ALT水平较模型组显著降低,显著改善肝组织病理.对急性肝损伤大鼠血清SOD,GSH-PX的活性有明显的升高作用并降低血清MDA的含量.茵栀清肝汤对急性肝损伤大鼠的保护作用呈剂量依赖模式,服用12g/kg剂量大鼠疗效最佳.结论茵栀清肝汤具有显著保护四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的作用.     

不同剂量二乙基亚硝胺对诱发大鼠肝硬化多步癌变模型的影响

目的 探讨不同剂量的二乙基亚硝胺(DENA)对诱发SD大鼠肝硬化多步癌变模型的影响.方法 采取简单随机抽样方法,将50只SD大鼠分为对照组5只及实验组45只,再将实验组大鼠采用同样的随机方法分为高、中、低剂量组,每组各15只.用DENA溶液分别按每周70、50和35 mg/kg的剂量对实验组大鼠灌胃10周,对照组大鼠灌注生理盐水.从第11周起,采用上述随机方法对照组每3周取1只,实验组每周取1只行MR检查,并对可疑结节取材,进行病理观察.计算各剂量组死亡率.采用Pearson Chi-square检验比较不同剂量组间癌前病变不典型增生结节(DN)所占比例的差异.结果 该模型的病变发展经历了从肝硬化再生结节(RN)至DN,最后到肝细胞癌(HCC)的过程.2只中剂量组、4只高剂量组大鼠因HCC破裂出血于第25周死亡.实验组中,低、中、高剂量组的DN所占比例分别为20.7％ (6/29)、30.6％ (19/62)、14.3％ (9/63),总体差异无统计学意义(x2 =4.901,P＞0.05),但中、高剂量组间差异有统计学意义(x2=4.811,P＜0.05).结合MR图像,中等剂量(50 mg/kg)是较合适的诱发剂量.结论 中等剂量的DENA溶液灌胃法较适用于诱发可用于影像观察HCC癌前病变的大鼠肝硬化多步癌变模型.     

肉桂挥发油对小鼠的半数致死量测定

目的研究肉桂挥发油对小鼠的半数致死量（LD50）。方法将肉桂油系列浓度提取物分别给予小鼠一次性灌胃,观察给药后7d内小鼠的毒性反应和死亡情况。以小鼠急性病死率为指标,求肉桂挥发油对小鼠的LD50及其95%的可信限。结果肉桂挥发油的LD50为5.0381g/kg（相当于236.5323g原生药/kg）。结论肉桂挥发油毒性较低,临床用药安全可靠。     

Experimental hepatic dysfunction: Evaluation by MRI with Gd-EOB-DTPA

To investigate the potential of gadolinium (Gd)-ethoxybenzyl (EOB)-diethylenetriamine-pentaacetic acid (DTPA) for evaluating liver function, chemically induced hepatitis animal models were studied. The rats in group 1 underwent intraperitoneal administration of 2.0 ml/kg and those in group 2 underwent intraperitoneal administration of .5 ml/kg of 50% (V/V) carbon tetrachloride (CCl₄) solution. The rats in group 3 served as controls. For rats of each group, the signal intensity of the liver was measured on T1-weighted spin-echo MR images acquired before and until 60 minutes after an intravenous injection of Gd-EOB-DTPA. The remaining rats in each group underwent indocyanine green test, serologic examination, or measurement of prothrombin time. Liver enhancement was compared with results of the other examinations. The degree of liver enhancement with Gd-EOB-DTPA was decreased and the washout of contrast was prolonged in the CCl₄-administered groups. In this animal model, both hepatic dysfunction and liver enhancement were dose-dependent. MRI with Gd-EOB-DTPA has the potential to evaluate hepatic function.     

血小板活化因子与大鼠肝脏病变的关系及银杏制剂的治疗作用

目的探讨血小板活化因子（PAF）与实验大鼠肝脏病变的关系及银杏制剂的治疗作用。方法将实验用Wistar大鼠60只,随机分成正常对照组（12只）、肝纤维化模型组（16只）、银杏制剂低剂量治疗组（16只）及银杏制剂高剂量治疗组（16只）4组。除正常对照组外,余3组应用CCl4皮下注射造模,2次/w,共12 w。正常对照组及模型组每日用生理盐水灌胃,而治疗组则每日用银杏制剂灌胃。12 w后,将全部大鼠处死,留取血清、肝组织,测定肝功能（ALT、ALB）、血清PAF及各种肝纤维化指标（HA、PⅢP、C-Ⅳ、LN）,同时行组织病理学检查,并行胶原纤维增生程度半定量分析。结果模型组与正常对照组比较,除白蛋白降低外,血清PAF、ALT及各种肝纤维化指标均升高;各治疗组与模型组间比较,除白蛋白升高外,余各项指标均下降,同时肝脏炎症及肝纤维化程度减轻,上述指标差异均有统计学意义。结论 PAF与肝脏损伤及肝脏纤维化的发生有明显关系,PAF拮抗剂——银杏制剂有明显抑制和逆转肝纤维化的作用。