软肝胶囊对二甲基亚硝胺所致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的观察软肝胶囊对二甲基亚硝胺(DMN)所致大鼠慢性肝损伤模型的保护作用。方法模型组及各给药组腹腔注射DMN10mg/kg,正常对照组给予等容积生理盐水,每周2次,连续2d注射,持续4周,给药自造模之日开始,1次/d。结果给予软肝胶囊的0.7,1.4,2.8g/kg三个剂量组肝功能指标均有不同程度的改善,肝组织羟脯氨酸含量较模型组明显降低;2.8g/kg剂量组血清HA,LN的值较模型组显著降低;病理组织学检查结果表明,其肝脏病变程度均较模型组明显减轻。结论软肝胶囊对慢性肝损伤大鼠具有一定的保护作用。     

水芹总酚酸抗四氯化碳所致肝纤维化作用的实验研究

目的探讨水芹总酚酸对四氯化碳所致大鼠慢性肝纤维化模型的保肝和抗肝纤维化作用及其可能机制。方法采用四氯化碳复制慢性肝损伤动物模型（40%四氯化碳橄榄油溶液,皮下注射,首次剂量按0.5ml/100g,以后按0.3ml/100g体质量,3天1次,共42d）。自造模之日开始,灌胃给药,1次/d,连续42d。末次给药后禁食24h,取大鼠血和肝脏,检测血清肝功能（ALT、AST、ALB、ALP、TP、ChE、LDH）指标、肝纤维化指标（HA、LN、Ⅲ-C、Ⅳ-C）和肝组织中SOD活力与MDA含量及免疫组化法测α-SMA、TGF-β1、TIMP-1的表达量和光镜下观察肝脏组织学变化。结果模型组大鼠有明显肝损伤和慢性纤维化表现;各给药组肝功能和肝纤维化均有不同程度的改善,病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度均较模型组明显减轻。结论水芹总酚酸对慢性肝纤维化大鼠具有明显的保肝和抗纤维化作用,其机制可能与清除自由基和抗氧化作用以及抑制肝星状细胞的活化有关。     

复方硫磺软肝丸抗慢性肝纤维化作用研究

目的探讨复方硫磺软肝丸对改良方法所致大鼠慢性肝纤维化模型的保肝及抗纤维化作用。方法采用配方饲料加腹腔注射CCl4橄榄油溶液的改良方法复制大鼠慢性肝纤维化模型。造模结束后,灌胃给药,每天2次,连续给药1 个月。末次给药后禁食12 h,留取大鼠血清及肝组织,检测血清中转氨酶（ALT、AST）指标、血清肝纤维化（HA、LN、Col-Ⅳ）指 标的变化,观察肝组织病理切片的变化。结果模型组大鼠有明显的肝损伤及肝纤维化病变;各给药组肝功能和肝纤维化程 度均有不同程度的改善,病理组织学检查结果表明其肝脏病变程度较模型组明显减轻（P〈0.05）。结论复方硫磺软肝丸 对慢性肝纤维化大鼠有明显的保肝及抗肝纤维化作用。     

愈肝胶囊抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨愈肝胶囊对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用。方法 以四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型，观察愈肝胶囊对肝纤维化大鼠肝脏病理变化，对肝功能指标ALT、TBIL、ALB、GLO、PT；肝纤维化指标HA、LN、PCⅢ、CⅣ、Hyp及免疫学指标CIM、CD8、CIM／CD8的作用来说明愈肝胶囊对肝纤维化大鼠的影响。结果 愈肝胶囊明显减轻肝纤维化大鼠肝脏的病理改变，改善其肝功能；调节T淋巴细胞；下调肝纤维化4项指标及羟脯氨酸；使肝纤维化程度显著下降，与乙肝宁颗粒组相比有显著性差异（P〈0．05-0．01）。结论 愈肝胶囊有显著降低大鼠实验性肝纤维化反应，增强机体抗肝纤维化损伤能力的作用。     

中药八味抗纤方抗大鼠肝纤维化的实验研究

 目的 观察中药八味抗纤方对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠的治疗作用.方法 采用四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型,同时予不同剂量中药八味抗纤方灌胃,观察八味抗纤方对慢性肝损伤大鼠肝功能的影响, 采用Ishak肝病组织病变计分修正方案,结合HE染色、Masson染色和免疫组化染色研究八味抗纤方对大鼠肝组织病理改变的影响,以活化HSC特异性标记α-SMA标记显示活化肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),探讨八味抗纤方抗肝纤维化的可能的作用机制.结果 低剂量组和高剂量组大鼠血清AST均显著低于模型组;肝纤维化程度轻于模型组;α-SMA阳性细胞数少于模型组.结论 八味抗纤方能够抑制四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化,减轻纤维结缔组织增生,抑制HSC的活化.     

中药茵栀清肝汤对四氯化碳大鼠急性肝损伤的保护作用

 目的研究茵栀清肝汤对四氯化碳诱导急性肝损伤大鼠的保护作用.方法Wstar大鼠随机分为正常组、急性肝损伤模型组、中药治疗低、中、高剂量组,中药组分别予以茵栀清肝汤3g/kg、6g/kg、12g/kg每日一次灌胃,共7 d.末次灌胃后除正常组外,其余所有大鼠予以50%四氯化碳5 ml/kg灌胃1次,24h后处死全部大鼠,收集肝组织及血清标本.对肝组织进行HE染色病理检查;生化方法检测大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase,AST)、谷氨酸氨基转移酶(Alaninetransaminase,ALT)的活性;测定大鼠血清超氧化歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(Malondidehyde,MDA)的含量.结果中药茵栀清肝汤治疗组大鼠血清AST、ALT水平较模型组显著降低,显著改善肝组织病理.对急性肝损伤大鼠血清SOD,GSH-PX的活性有明显的升高作用并降低血清MDA的含量.茵栀清肝汤对急性肝损伤大鼠的保护作用呈剂量依赖模式,服用12g/kg剂量大鼠疗效最佳.结论茵栀清肝汤具有显著保护四氯化碳所致大鼠急性肝损伤的作用.     

肝脏原位注射新生大鼠肝细胞构建的工程化肝组织对大鼠肝纤维化的影响

目的观察原位注射新生大鼠肝细胞构建的工程化肝组织对实验性肝纤维化大鼠血清和肝组织学的影响,探讨其抗肝纤维化的作用。方法用四氯化碳制成实验性肝纤维化造模大鼠,肝脏原位多点注射工程化肝组织,3周后测定血清肝功能并行肝组织学检查。结果原位注射组大鼠肝功能较单纯假手术组大鼠有改善,且具有显著差异（P〈0．05）,HE染色提示纤维化明显改善。结论肝脏原位多点注射新生大鼠肝细胞的工程化肝组织能改善大鼠肝纤维化进程,有一定抗肝纤维化作用。     

桑黄对实验性肝纤维化大鼠血液动力学的影响

目的 研究桑黄对肝纤维化大鼠血液动力学的影响。方法 采用四氯化碳为主要刺激物，结合高脂低蛋白饲料及乙醇饮食，诱导大鼠肝纤维化模型，大鼠分正常对照组，模型组和桑黄治疗组，分别取血测定血液流变学指标。结果 桑黄能显降低肝纤维化大鼠的全血粘度，红细胞压积和红细胞刚性指数（P＜0．01，P＜0．05），血浆粘度和红细胞聚集指数也有一定程度的降低。结论 桑黄能改善血液动力学性能，提高肝区微循环，是其抗肝纤维化的作用机理之一。     

骨髓间质干细胞移植对肝纤维化模型大鼠治疗效果

目的探讨骨髓间质干细胞(MSCs)对肝纤维化模型大鼠肝功能及肝纤维化的改善情况。方法将39只健康雌性SD大鼠分为对照组(n=14)和肝纤维化模型组(n=25)。对照组给予普通食水喂养;肝纤维化模型组给予四氯化碳液体橄榄油混合液皮下注射及乙醇喂养,建立大鼠肝纤维化模型。建模成功后将存活的大鼠随机分为对照组、模型组和移植组(每组各9只)。取健康SD大鼠骨髓,利用全骨髓贴壁的方法原代培养骨髓MSCs,然后将MSCs通过大鼠尾静脉对肝纤维化模型大鼠进行移植。移植后4周,检测血清白蛋白、转氨酶、胆红素、Ⅳ型胶原;HE和Masson染色观察肝纤维化程度。结果 MSCs移植后4周,移植组和模型组大鼠肝的纤维组织增生较对照组大鼠重,差异有统计学意义(P<0.01);但移植组大鼠肝的纤维组织增生较模型组大鼠显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和移植组的肝功能较对照组差,差异有统计学意义(P<0.01);但与模型组比较,移植组大鼠血清白蛋白显著增高,胆红素、转氨酶、Ⅳ型胶原显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝纤维化模型大鼠骨髓MSCs移植4周后肝功能改善,肝纤维化程度显著减轻。     

苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察苦碟子注射液抗大鼠肝纤维化的作用。方法采用复合因素法复制肝纤维化大鼠模型,测定各组大鼠血清中LN、HA、PⅢNP的含量,光镜下观察各组大鼠肝组织病理切片。结果模型组大鼠血清中LN、HA、PⅢNP的含量均显著升高(P<0.01),丹参治疗组、苦碟子治疗组血清中LN、HA、PⅢNP的含量均显著降低(P<0.05或P<0.01);光镜下模型组肝组织病理切片胶原纤维增生程度积分最高,在用药治疗的各组中,丹参治疗组、苦碟子治疗组积分均有所恢复。结论苦碟子注射液有一定程度的抗肝纤维化作用。     

四氯化碳致肝纤维化动物模型实验条件的优化

目的优化四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）肝纤维化动物模型的造模方法。方法对肝纤维化模型从CCl4剂量、造模途径和动物种属等方面进行优化。造模剂量优化时采用昆明小鼠,腹腔注射CCl40.5、0.75、1.0ml/kg,2次/周,共8周,于第9周开始停止注射CCl4,观察至第12周;造模方式优化时采用ICR小鼠,CCl4腹腔注射或灌胃,2次/周,共12周;动物种属优化时,选择ICR小鼠和SD大鼠,CCl4灌胃,2次/周,共12周。行苏木精-伊红染色和马松三色染色观察动物的肝脏病理学改变。结果选用不同剂量的CCl4腹腔注射后,在第10周,0.5ml/kgCCl4造模仅在汇管区形成纤维化,0.75ml/kgCCl4则形成了纤维间隔,而1ml/kgCCl4造模可以形成早期肝硬化,提示适当的CCl4剂量为1ml/kg。灌胃和腹腔注射的方式均能导致明显的肝纤维化,其中灌胃方式死亡率在10%以下,而腹腔注射方式造模死亡率在80%以上,提示灌胃造模动物耐受性较好。应用CCl4后,大鼠和小鼠肝纤维化的各指标变化趋势一致,大鼠变化更为明显。结论 CCl4致肝纤维化模型的建立宜采用1ml/kgCCl4灌胃的方法,可根据实验目的选用不同种属的动物。     

福辛普利对大鼠肝纤维化的影响

目的 研究血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利抗大鼠肝纤维化的作用.方法 雄性清洁级SD大鼠40只,随机分成5组:阴性对照组(n=5),腹腔注射植物油,每日单蒸水灌胃;模型组(n=5),腹腔注射CCl4,每日单蒸水灌胃;阳性对照组(n=10),造模方法同模型组,每日用秋水仙碱0.2mg/kg灌胃;福辛普利小剂量组(n=10)...     

莪术油配伍椒目仁油对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

目的观察不同剂量莪术油配伍椒目仁油对小鼠移植性肿瘤S180的抑瘤作用,以及对人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480的体外抑瘤作用。方法 72只二级昆明小鼠采用肿瘤移植法建立小鼠荷瘤动物模型;椒莪软胶囊灌胃给药,剂量分别为0.3、0.6、1.2 ml/kg;氟尿嘧啶22.5 mg/kg作为阳性对照药腹腔注射给药;连续给药15 d,观察药物对肿瘤生长的抑制作用。对人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480进行传代培养后,制备不同剂量(椒莪软胶囊0.015 625、0.031 25、0.062 5、0.125、0.25、0.5、1、2、4 mg/ml)含药血清、氟尿嘧啶阳性药血清和肿瘤移植模型不用药对照血清,作用于人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480,四甲基偶氮唑蓝比色法观察血清对两种细胞的抑制作用。椒莪软胶囊0.0、6.25、12.5、25.0μg/ml给药15 h后,经流式细胞仪测定对人源性肝癌细胞株HepG2细胞凋亡的影响。结果①椒莪软胶囊0.3、0.6、1.2 ml/kg肿瘤抑制率分别为19.73%、32.22%和46.68%。随着给药剂量的增加,坏死的肿瘤细胞所占比例也相应增加,生长活跃的肿瘤细胞逐渐减少。②抑制作用随剂量升高而作用增强,对人源性肝癌细胞株HepG2体外最低药物物浓度为0.062 5 mg/ml,对大肠癌细胞株SW480体外最低药物浓度为0.125 mg/ml。③椒莪软胶囊可明显促进人源性肝癌细胞株HepG2的细胞凋亡。结论椒莪软胶囊对小鼠移植性肿瘤有明显的抑制作用,对人源性肝癌细胞株HepG2和大肠癌细胞株SW480有明显的抑制作用。椒莪软胶囊在临床具有广阔的应用前景。     

EVP-ABD-enhanced MRI to evaluate diffuse liver disease in a rat model

PURPOSE: To evaluate the feasibility of using manganese-based MR imaging contrast agent EVP-ABD to detect diffuse liver disease in an established rat hepatitis model. MATERIALS AND METHODS: Hepatitis was induced by administration of CCl(4) in corn oil vehicle to rats intraperitoneally. MR images were acquired on a 3T scanner using a volume coil approximately 36 hours after the administration of CCl(4). EVP-ABD was administered via a tail vein at a dose of 10 mumol/kg. Multi-TI turboflash images were acquired to evaluate liver R1 (=1/T1) values before and after the EVP-ABD administration. Eighteen rats received various doses of CCl(4) and completed pre- and postcontrast MRI scans and liver histologic evaluation. RESULTS: The liver R1 after the EVP-ABD administration and the change of the liver R1 before and after the administration, DeltaR1, show significant correlations with the CCl(4) dose. A significant correlation was also found between the histologic scores and the CCl(4) doses despite known variability in the relationship of CCl(4) dose to histology. A significant correlation was found between the histologic score and DeltaR1. CONCLUSION: Our results indicate that EVP-ABD-enhanced MRI can detect diffuse liver disease generated by CCl(4) based on the significant correlation between proton R1 in liver following EVP-ABD and the CCl(4) doses as well as the histologic scores.     

Evaluation of different models of experimentally induced liver cirrhosis for MRI research with correlation to histopathologic findings

RATIONALE AND OBJECTIVES: Three models of experimentally induced liver cirrhosis were evaluated for MRI research on chronic liver disease. The influence of different histopathologic changes in liver fibrosis and cirrhosis on relaxation times and signal intensities was studied in vitro and in vivo. METHODS: Liver fibrosis and cirrhosis in rats was induced by oral or subcutaneous administration of carbon tetrachloride (CCl4) or by thioacetamide (TAA) in drinking water. On histology, the degree of liver fibrosis and cirrhosis, fatty infiltration, iron accumulation, and inflammatory changes were measured semiquantitatively. The amount of connective tissue was quantitatively determined by morphometry. The results were correlated with T1 and T2 relaxation times and signal intensities of the liver studied in vitro by relaxometry and in vivo by MRI. RESULTS: In both groups with CCl4 administration, histology revealed different degrees of liver fibrosis and cirrhosis. Subcutaneous injection of CCl4 also resulted in increased fatty infiltration. On the contrary, TAA produced complete liver cirrhosis in all animals. Overall, there was a good correlation between the liver T2 relaxation time and the amount of connective tissue in liver fibrosis and cirrhosis. However, the degree of liver fibrosis and cirrhosis was also strongly correlated with the degree of inflammatory changes. In the group with CCl4 administration, there was a good correlation between the fatty infiltration and the T1 relaxation time, as well as with the liver signal intensity on the T1-weighted gradient echo sequence. An increased iron accumulation was also correlated with the degree of liver fibrosis/cirrhosis; however, there was no significant influence of the iron on relaxation times or signal intensities. CONCLUSIONS: The TAA model is easier to perform and more reliable in liver cirrhosis induction than the CCl4 models. Although there is a positive correlation between the T2 relaxation times and the degree of liver fibrosis/cirrhosis, this probably results from the associated inflammatory changes and is not caused by the increased amount of connective tissue.     

激光诱发自体荧光光谱技术诊断鼠肝纤维化

目的 探讨用激光诱发自体荧光光谱(LIAF)技术对肝纤维化进行诊断的意义。方法 用SD大鼠100只，白蛋白、乙醇、四氯化碳和蛋白加贺普丁诱导造成肝纤维化模型。应用激光诱发自体荧光光谱检测正常大鼠血清与肝纤维化大鼠的血清。结果 肝纤维化大鼠血清的荧光平均主峰值出现了红移。结论 应用激光诱发自体荧光光谱技术，对肝纤维化大鼠的血清进行光谱分析，可找到一些有价值的数据，以用于肝纤维化的     

T1rho值对四氯化碳模型大鼠肝纤维化演变过程及严重程度的评估价值

目的探讨肝脏旋转坐标系下的自旋晶格弛豫时间(T1rho)值在四氯化碳(CCl4)建模大鼠肝纤维化进展及转归过程中的变化及对肝纤维化分期的价值。方法选取80只Sprague-Dawley大鼠采用随机数字表法分为3组,分别为CCl4组49只、恢复组20只、对照组11只,将大鼠分别标记行MRI基线扫描。CCl4组及恢复组大鼠经颈背部皮下注射CCl4进行建模,CCl4组于注药后4、6、8、10、12周末分别进行黑血T1rho扫描;恢复组大鼠于注药后4、6周末进行黑血T1rho扫描,第6周末扫描结束后停止注药,停止注药后1、2、4、6周末分别进行扫描;对照组于相同时间点注射等量玉米油,并于注射后第4、6、8、10、12周末分别进行黑血T1rho扫描。测量所有大鼠肝脏T1rho值,观察各组大鼠肝脏T1rho值随时间的变化。采用独立样本t检验比较各组大鼠相邻时间点肝脏T1rho值的差异。将实验鼠分为无肝纤维化组(S0)、轻度肝纤维化组(S1、2)及中重度肝纤维化组(S3、4),采用Kruskal-Wallis H检验分析3组间T1rho值间的差异,用受试者操作特征(ROC)曲线评估T1rho值对不同程度肝纤维化的诊断效能,采用Spearman检验评估T1rho值与肝纤维化严重程度的相关性。结果59只大鼠完成了整个实验,其中CCl4组28只、恢复组20只、对照组11只。CCl4组大鼠肝脏T1rho值随着注药时间的延长逐渐增加,8周末达到最大值,随后8~12周逐渐下降,除4周末与6周末、10周末与12周末大鼠肝脏的T1rho值差异无统计学意义(P值分别为0.112、0.487),其他相邻两个时间点大鼠肝脏T1rho值差异均有统计学意义(P均<0.05);恢复组大鼠肝脏T1rho值随着注药时间的延长逐渐上升,停止CCl4注射后肝脏T1rho值逐渐下降,相邻两个时间点大鼠肝脏T1rho值差异均有统计学意义(P均<0.05);对照组大鼠相邻时间点肝脏T1rho值差异均无统计学意义(P均>0.05)。无肝纤维化组(S0)、轻度肝纤维化组(S1、2)及中重度肝纤维化组(S3、4)大鼠分别为15、23、21只,T1rho值分别为[36.3(34.4,41.4)]、(47.2±8.4)、(48.8±9.0)ms,大鼠肝脏T1rho值随着肝纤维化程度的加重而加重,二者呈低度正相关(r=0.402,P=0.001);上述3组大鼠肝脏T1rho值间差异有统计学意义(P<0.01)。肝脏T1rho值鉴别无肝纤维化(S0)与有肝纤维化(S1~4)的ROC下面积为0.825(95%可信区间0.720~0.931),鉴别无或轻度肝纤维化(S0~2)与中重度肝纤维化(S3、4)的ROC下面积为0.668(95%可信区间0.540~0.796)。结论T1rho值对评估CCl4建模大鼠肝纤维化进展及转归有一定意义,对鉴别是否存在肝纤维化诊断价值中等,对鉴别轻度肝纤维化与中重度肝纤维化诊断价值较低。