黄芪注射液对腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞水孔蛋白1表达的影响

【目的】观察黄芪注射液对腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞水孔蛋白1（AQP—1）表达的影响。【方法】选用雄性SD大鼠25只,分正常对照组（N=7）、模型组（N=9）和黄芪组（N=9）。除正常对照组外,其他两组分别腹腔注射含42．5马／L葡萄糖的腹透液和含42．5g／L葡萄糖的愎透液＋黄芪注射液（20mg／mL）,剂量为25mL／d,连续10d。于第11天观察大鼠透析超滤量（UF）与净超滤量（Net UF）、腹膜钠转运（D／P Na）、腹膜组织光镜病理形态及AQP-1免疫组化的表达．【结果】透析液留腹60min时黄芪组UF、Net UF与模型组比较显著增加（P〈0．05）。透析液留腹30min、60min时黄芪组D／P Na较模型组显著减低（P〈0．05）。黄芪组大鼠腹膜层增厚、间皮细胞脱落情况较模型组减轻,AQP—1在腹膜间皮细胞的表达较模型组显著增多（P〈0．05）【结论】黄芪注射液可减轻高浓度葡萄糖腹透液对间皮细胞的损伤,升高AQP—1在腹膜间皮细胞的表达,改善透析液留腹早期跨细胞水转运功能．从而提高腹膜对水的清除．增加透析超滤量。     

丹参注射液减轻腹透液致大鼠腹膜结构和功能损伤

目的：研究丹参注射液对腹透液（peritoneal dialysis solution,PDS）致大鼠腹膜组织结构和功能损伤的影响及与水通道蛋白1（aquaporin-1,AQP-1）和紧密连接相关蛋白1（zonula occluden-1,ZO-1）的关系。方法：56只SD大鼠分为正常对照组、1.5%PDS组、4.25%PDS组、1.5%PDS＋1%丹参组、4.25%PDS＋1%丹参组、1.5%PDS＋2%丹参组和4.25%PDS＋2%丹参组。腹膜透析液大鼠腹腔注射8周后,检测腹膜透析超滤量、腹膜对物质的清除率和腹透液漏出蛋白含量;光镜和电镜下观察腹膜结构变化;免疫印迹法检测腹膜AQP-1蛋白表达,免疫组织化学法检测腹膜间皮细胞ZO-1和AQP-1蛋白表达。结果：与正常对照组比较,1.5%PDS组和4.25%PDS组大鼠腹膜结构和功能发生改变,包括腹膜病理的改变明显,超滤量减少（P〈0.05）,对肌酐和葡萄糖清除能力下降（P〈0.01）,AQP-1蛋白表达增加（P〈0.05）;1.5%PDS＋2%丹参组和4.25%PDS＋2%丹参组大鼠腹膜结构和功能较单纯腹透液组改善,表现为病理改变缓解,腹膜超滤量以及肌酐和葡萄糖清除率提高。与1.5%PDS组比较,1.5%PDS＋2%丹参组腹膜AQP-1蛋白表达量减少（P〈0.05）。结论：丹参注射液可能通过下调AQP-1蛋白表达拮抗腹透液对腹膜组织结构和功能的损伤。     

不同含糖浓度腹膜透析液对腹膜间皮细胞紧密连接影响的动物实验

目的观察含不同葡萄糖体积分数的商用乳酸盐腹膜透析液对大鼠腹膜功能和腹膜间皮细胞紧密连接的影响。方法正常清洁级SD雄性大鼠36只,随机分为对照组(0.9%氯化钠溶液)、低糖组(葡萄糖体积分数为1.50%)和高糖组(葡萄糖体积分数为4.25%),腹腔内灌液后8周检测腹膜透析超滤量、腹膜对尿素氮、肌酐清除率和蛋白丢失量,苏木精-伊红(H～E)染色光学显微镜下观察腹膜结构,透射电子显微镜观察腹膜紧密连接的形态,采用免疫组织化学法观察大鼠腹膜间皮细胞封闭蛋白-1(ZO-1)表达的阳性细胞数。结果与对照组相比,低糖组、高糖组腹膜透析8周后腹膜透析液超滤量均减少(P值均<0.05);高糖组腹膜透析8周后的尿素氮清除率较对照组明显降低(P<0.05);3组间肌酐清除率的差异无统计学意义(P值均>0.05)。低糖组、高糖组腹膜透析8周后的腹膜引流液蛋白含量均较对照组明湿增加(P值均<0.05)。光学显微镜下,低糖组、高糖组大鼠腹膜组织出现不同程度的问皮细胞损伤、炎性细胞渗出,以高糖组更加明显。电子显微镜下,高糖组腹膜透析8周后紧密连接消失。腹膜透析4周后,3组间ZO-1阳性表达细胞数的差异无统计学意义(P值均>0.05);腹膜透析8周后,高糖组的ZO-1阳性表达细胞数为10.88±0.99,明显低于对照组的12.80±2.10(P<0.05),低糖组与高糖组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论用含葡萄糖的乳酸盐透析液尤其是高糖透析液进行长期的腹膜透析可对腹膜间皮细胞的形态和功能造成损伤,破坏细胞间的紧密连接,抑制ZO-1的表达,导致腹膜透析超滤量减少,尿素氮和肌酐清除率降低,蛋白丢失增加。     

黄芪注射液对高通透性腹膜透析大鼠透析效能及腹膜结构的影响

目的?探讨不同浓度黄芪注射液对高通透性腹膜透析大鼠透析效能及腹膜结构的影响。方法?40只SD雄性大鼠,分空白对照组（A组）、单纯腹透组（B组）、黄芪注射液低浓度组（C组）与黄芪注射液高浓度组（D组）。除A组外,余3组分别腹腔注射4.25%葡萄糖腹透液、低浓度黄芪腹透液、高浓度黄芪腹透液25mL/d,连续10d。于第11天进行腹膜功能试验,观察各组大鼠透析液留腹0、30、60 、90、120 min尿素氮D/P值（D/P urea）、肌酐D/P值（D/P Cr）、葡萄糖D/D₀值（D/D₀Glu）的变化,以及透析液留腹120min时尿素清除率（Curea）、肌酐清除率（CCr）、透析超滤量（UF）、净超滤量（NetUF）,并采集腹膜组织观察腹膜形态结构的改变。结果?①各透析组（B、C、D组）各时点D/P Cr高于A组、D/D₀Glu低于A组（P<0.05）,B组UF、NetUF 低于A组（P<0.05）;②C、D组D/P urea留腹60min后各时点均高于B组（P<0.05）,D组D/P Cr 留腹60、90min较B组高（P<0.05）、D/D₀ Glu留腹60min较B组低（P<0.05）;③D组与C组比较,D/P urea、D/P Cr（30、60、90min）与D/D₀Glu（30、60min）的变化更明显（P<0.05）;④D组Curea、CCr、UF、NetUF均高于 B组（P<0.05）;⑤C、D组腹膜增厚及间皮细胞脱落情况较B组改善。结论?4.25%葡萄糖腹透液可造成腹膜间皮层损伤,腹膜的通透性增高,超滤量减少,腹透液中加入黄芪可以保护腹膜间皮层,提高腹膜对尿素、肌酐的清除,提高透析效能,但不增加腹膜对葡萄糖的吸收,高浓度含黄芪腹透液尚能提高腹膜对水的清除,增加透析超滤量。      

异博定注射液对慢性腹膜透析大鼠腹膜透析功能及腹膜形态的影响

目的探讨不同剂量的异搏定对高糖透析液作用下，腹膜透析大鼠模型腹膜间皮细胞的形态和功能的影响及它们之间的关系。方法48只SD大鼠随机分为对照组和异博定低、中、高剂量组4组，腹膜透析30d后进行腹膜功能试验、CA125检测，同时对腹膜印片进行形态学分析。结果异博定中、高剂量组能明显升高透析大鼠透析液超滤量，与对照组相比较有统计学意义（P〈0．01），且异博定各组对透析大鼠CA125、腹膜间皮细胞的表面积、细胞密度等均无明显影响，相互间比较无统计学意义（P〉0．05）。结论透析液中加入中、高剂量的异搏定可增加腹膜透析鼠的超滤及溶质的清除，且长期使用不会导致对腹膜间皮细胞损伤，其作用机制可能与其减少腹膜间皮细胞肥大、保护腹膜间皮细胞、改善腹膜超滤功能有关。     

腹透液相关浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞周期蛋白的影响及葛根素的拮抗作用

目的研究腹透液相关浓度葡萄糖（1.5%、2.5%）对人腹膜间皮细胞周期和周期蛋白p21的影响及葛根素的拮抗作用。方法人腹膜间皮细胞在含糖（1.5%、2.5%）、含糖含葛根素（葛根素终浓度为100 mg/L）的无血清培养基中培养24 h后,用流式细胞仪分析细胞周期,Western blot测定p21蛋白的表达。结果经含糖1.5%和含糖2.5%培养基培养24 h后人腹膜间皮细胞大多出现肥大和停滞于细胞周期的G1期。高浓度葡萄糖刺激p21蛋白表达,含糖2.5%组和含糖1.5%组无显著性差异（P〉0.05）。含葛根素含糖组腹膜间皮细胞中处于G1期细胞数较相应浓度含糖组减少,p21表达减少（P〈0.05）。结论高糖可刺激人腹膜间皮细胞p21蛋白的表达,且可能与高糖作用下细胞肥大及G1期阻滞有关,葛根素可在一定程度上拮抗高糖对人腹膜间皮细胞周期和周期蛋白的影响。     

肾衰口服液对实验大鼠腹膜透析效能及腹膜超微结构的影响

通过模拟腹膜透析的动物实验，观察了肾衰口服液（ＳＳＯＬ）地腹膜透析效能及腹膜超微结构的影响。大鼠分正常对照组、单纯透析液组（Ａ）、含ＳＳＯＬ腹透组（Ｂ）。结果显示：（１）Ｂ组净超滤量、腹膜清除率与Ａ组比较均显著增加；Ｂ组透析液中蛋白质含量高于Ａ组，但差异无显著性意义。（２）Ｂ组腹膜间皮细胞及间皮细胞连接的损伤程度交Ａ组为轻，提示ＳＳＯＬ能有效提高腹膜透析效能，并能拮抗高渗渗透析液保护腹膜间皮层结构     

艾考糊精腹膜透析液对患者透析流出液中CA125水平的影响

目的前瞻性研究使用艾考糊精透析液后患者透析流出液中CA125水平的变化,探讨其对腹膜间皮细胞的影响。方法选取以2.5%葡萄糖透析液夜间留腹的持续性非卧床腹膜透析（CAPD）患者作为研究对象,随机分为艾考糊精组（选择7.5%艾考糊精透析液夜间留腹）和对照组（仍以2.5%葡萄糖透析液夜间留腹）,总治疗期为4周,每2周随访1次（用药后第14、28天）。观察和比较两组基线期和用药后第14、28天的夜间留腹净超滤量和腹膜肌酐清除率变化;测定两组基线期和用药后第28天的夜间留腹透析流出液中CA125水平,计算CA125呈现率。结果 54例CAPD患者入选,两组各27例。两组患者基线期各项指标比较差异均无统计学意义（P〉0.05）。艾考糊精组用药后第14、28天的净超滤量和腹膜肌酐清除率均较基线期明显提高,且显著高于相应时间点的对照组（P〈0.05）。艾考糊精组和对照组用药后第28天与基线期夜间留腹透析流出液CA125呈现率的差值分别为（1484.0±1571.6）U/h和（-222.1±1816.7）U/h,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论与2.5%葡萄糖透析液相比,7.5%艾考糊精透析液能显著提高患者透析流出液中CA125水平,提示腹膜间皮细胞生成数量增加。     

硒对高糖诱导的大鼠腹膜透析相关腹膜纤维化的影响

目的 探讨硒对高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转化（EMT）的影响。方法 将40只清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组（NC组）、高糖组（HG组）、低硒组（HG+L-Se组）、高硒组（HG+H-Se组），每组10只，分别腹腔注射无菌生理盐水、4.25%葡萄糖腹膜透析液、4.25%葡萄糖腹膜透析液和3 mg/kg亚硒酸钠、4.25%葡萄糖腹膜透析液和6 mg/kg亚硒酸钠。腹腔注射28 d后，量取腹腔流出液，计算超滤量。HE染色检测大鼠腹膜组织形态学改变，免疫组织化学染色检测大鼠腹膜组织EMT情况，分光光度法检测大鼠血清丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和总超氧化物岐化酶（T-SOD）活性。结果 与NC组比较，HG组大鼠腹膜超滤量明显减少，腹膜厚度明显增加（均P <0.05）;E-cadherin蛋白表达明显降低，vimentin蛋白表达明显增加（均P <0.05）；血清MDA含量明显增加，GSH含量、T-SOD活性明显降低（均P <0.05）。与HG组比较，HG+L-Se组和HG+H-Se组大鼠腹膜超滤量增加，腹膜厚度减少；E-cadherin蛋白表达增加，vi...     

氧化应激在腹膜纤维化大鼠模型腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的:研究氧化应激在腹膜纤维化大鼠腹膜间皮细胞转分化中的作用;观察抗氧化剂普罗布考的干预效应.方法:采用4.25%高糖腹透液以100 mL/kg 腹腔注射法复制腹膜纤维化大鼠模型,实验分为正常对照组、生理盐水对照组、腹膜纤维化模型组和普罗布考干预组.4周后行腹膜平衡试验,处死大鼠,准确测量超滤量,检测腹膜功能;取肠系膜...     

黄芪注射液对大鼠腹膜透析效能及腹膜超微结构的影响

目的通过动物实验观察黄芪注射液对大鼠腹膜透析效能及腹膜超微结构的影响，并初步探讨其作用机理。方法采用空白及实验对照设计，将30只雄性SD大鼠平均分为单纯腹透组（A）。黄芪注射液常规浓度组（B）及高浓度组（C），观察各组大鼠尿素氮清除率（CBUN）、肌酐清除率（CCr）、尿素氮D／P值、排液量及透出液蛋白质浓度及腹膜超微结构的变化。结果黄芪注慑液常规浓度组、黄芪注射液高浓度组的CBUN及CCr值、排液量均显著高于单纯腹透组（P〈0．05），B、c组问比较无显著性差异（P〉0．05）。黄芪注射液常规浓度组、高浓度组透出液蛋白质浓度和单纯腹透组相比差异无显著性（P〉0．05）。B、C两组腹膜间皮细胞及间皮细胞之间连接的损伤程度较A组为轻。结论黄芪注射液确能提高大鼠腹膜透析效能，提高小分子物质的清除率，对透出液中蛋白质浓度无明显影响，对大鼠的腹膜问质细胞的完整性有保护作用。     

鳖甲煎丸对腹膜透析相关腹膜纤维化的影响及机制探讨

目的探讨鳖甲煎丸对腹膜透析(PD)小鼠腹膜纤维化的抑制作用及可能机制。方法采用ICR小鼠4.25%腹透液2.0 mL每日腹腔注射一次,并于第3、5、7天联合脂多糖0.8 mg/kg腹腔注射造模;鳖甲煎丸1.2 g/kg每日灌胃一次,干预6周后,测腹透超滤量,HE染色和Masson染色观察壁层腹膜形态改变及腹膜厚度;Western blot检测脏层腹膜组织N-cadherin、ZO-1的蛋白表达水平,及pAkt、总Akt的蛋白表达水平。结果腹膜透析(PD)组、鳖甲煎丸(BJJW)组与对照(Control)组比较,超滤量均显著下降(P0.05);壁层腹膜均显著增厚(P0.01)。脏层腹膜ZO-1蛋白表达降低,N-cadherin蛋白表达升高,pAkt也明显升高(均P0.01)。BJJW组与PD组比较,超滤量明显改善(P0.05),壁层腹膜厚度降低(P0.01);脏层腹膜ZO-1蛋白表达增加,N-cadherin蛋白表达下降,pAkt也明显下降(均P0.01)。结论鳖甲煎丸抑制腹膜纤维化,PI3K/Akt信号调节腹膜间皮细胞上皮-间质细胞转分化(EMT)是其机制之一。     

Influence of Peritoneal Transport Characteristics on Nutritional Status and Clinical Outcome in Chinese Diabetic Nephropathy Patients on Peritoneal Dialysis

Background:

High peritoneal transport status was previously thought to be a poor prognostic factor in peritoneal dialysis (PD) patients. However, its effect on diabetic nephropathy PD patients is unclear in consideration of the adverse impact of diabetes itself. The purpose of this study was to investigate the influence of peritoneal transport characteristics on nutritional status and clinical outcome in diabetic nephropathy patients on PD.

Methods:

One hundred and two diabetic nephropathy patients on PD were enrolled in this observational cohort study. According to the initial peritoneal equilibration test result, patients were divided into two groups: Higher transport group (HT, including high and high average transport) and lower transport group (LT, including low and low-average transport). Demographic characteristics, biochemical data, dialysis adequacy, and nutritional status were evaluated. Clinical outcomes were compared. Risk factors for death-censored technique failure and mortality were analyzed.

Results:

Compared with LT group (n = 37), serum albumin was significantly lower and the incidence of malnutrition by subjective global assessment was significantly higher in HT group (n = 65) (P < 0.05). Kaplan–Meier analyses showed that death-censored technique failure and mortality were significantly increased in HT group compared with that in LT group. On multivariate Cox analyses, higher peritoneal transport status and lower residual renal function (RRF) were independent predictors of death-censored technique failure when adjusted for serum albumin and total weekly urea clearance (Kt/V). Independent predictors of mortality were advanced age, anemia, hypoalbuminemia, and lower RRF, but not higher peritoneal transport status.

Conclusions:

Higher peritoneal transport status has an adverse influence on nutrition for diabetic nephropathy patients on PD. Higher peritoneal transport status is a significant independent risk factor for death-censored technique failure, but not for mortality in diabetic nephropathy patients on PD.     

丹参黄芪对实验大鼠腹膜透析效能及腹膜超微结构的急性影响

目的：观察丹参,黄芪对腹膜透析效能及腹膜超微结构的影响。方法：通过模拟腹膜透析的动物实验,观察中药对腹膜透析效能的急性影响,并应用扫描电镜观察腹膜超微结构的变化,大鼠分单纯透析液组,丹参组,黄芪组和正常对照组,结果：丹参组,黄芪组净超 量较单纯透析液组显著增加（P＜0．05）,各组腹膜清除率,透析液中蛋白质含量比较,均无显著性差异（P＞0．05）,结论：丹参,黄芪能有效提高净超滤量,丹参,黄芪具有保护腹膜间皮层结构免遭损伤的作用。     

脂多糖对于大鼠腹膜透析效能和腹膜结构影响的实验研究

目的：研究尿毒症大鼠腹膜透析过程中脂多糖对于腹膜透析效能以及腹膜结构改变的影响。方法：将采用含腺嘌呤喂养制作尿毒症模型,随后采用自制腹透管行腹膜透析置管术制作腹膜透析模型,使用4. 25%腹膜透析液进行腹膜透析,将20只尿毒症腹膜透析模型SD大鼠随机分为2组： LPS组（分别在33、35、37天在腹腔内加入LPS, 75µg/d/只）、对照组,45天后行腹膜平衡试验,腹膜组织病理学检查,了解腹膜透析效能和结构的变化。结果：1. LPS组的D/P肌酐和超滤量与对照组比较显著降低（P<0.01）。2. 大鼠腹膜组织病理检查光镜下观察：LPS组可见腹膜间皮细胞肿胀、变形,部分皱缩,连续性不完整,间皮下基质大量积聚,伴有大量炎性细胞的浸润和毛细血管增生。对照组大鼠腹膜间皮细胞完整,细胞间连续性良好,间皮下基质无明显增多。结论：脂多糖能够导致腹膜透析时腹膜的受损和腹膜效能的下降。     

白藜芦醇苷对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障的 保护作用研究

目的:观察白藜芦醇苷（PD）对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障的保护作用及对紧密连接蛋白的影响。方法:CD-1 小鼠 （102 只）应用线栓法制作短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO）模型。随机将实验动物分成4 组:假手术组（28 只）、缺血再灌注 组（28只）、白藜芦醇苷低剂量组（30 mg/kg,18只）,白藜芦醇苷高剂量组（60 mg/kg,28只）。于缺血再灌注后24 h 进行行为学评 分、TTC 染色、干湿重测定、伊文思蓝染色,应用Western 印迹、免疫荧光检测内皮细胞标志物血小板内皮细胞黏附分子-1（CD- 31）、紧密连接蛋白闭锁小带蛋白-1（ZO-1）、咬合蛋白（Occludin）、闭合蛋白-5（Claudin-5）的表达情况。结果:（1）与缺血再灌注 组相比,白藜芦醇苷高剂量组改善了缺血再灌注小鼠行为学评分、减少了脑梗死体积[（33.76%± 13.27%）vs.（57.47%±9.53%）, P<0.05]、减轻了缺血再灌注小鼠脑水肿程度[（75.62%±7.95%）vs.（85.72%±6.20%）,P<0.05]、降低了伊文思蓝渗出量[（1.49±0.47） vs.（2.13±0.44）,P<0.05]。（2）Western印迹结果显示白藜芦醇苷上调了ZO-1、Occludin、Claudin-5（均P<0.05）的表达水平。（3）免 疫荧光结果显示:白藜芦醇苷组上调了CD-31 在皮层缺血半暗带区的表达,且可见微血管形态相较缺血再灌注组更加光滑、完 整,同时白藜芦醇苷减少了ZO-1、Claudin-5 的破坏。结论:白藜芦醇苷的干预对缺血再灌注损伤小鼠起到了保护血脑屏障的作 用,上调了紧密连接蛋白ZO-1、Occludin、Claudin-5 的表达水平。     

缓激肽对脑胶质瘤大鼠occludin和ZO-1 mRNA的调节和机制

目的 研究缓激肽(BK)时血肿瘤屏障紧密连接相关蛋白occludin和zonula occluden-1(ZO-J)mRNA表达的影响,以及转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)和磷酸化CREB(p-CREB)表达水平的变化,探讨CREB在缓激肽调节occludin和ZO-1转录中的作用.方法 雌性Wistar大鼠112只,随机分为7组,即假手术组、模型组、BK 5 min组、BK 10 min组、BK 15min组、BK 30 min组、BK 60 min组.每组16只.建立大鼠C6胶质瘤模型,颈动脉灌注BK,应用RT-PCR法检测肿瘤微血管上紧密连接相关蛋白ocdudin和ZO-1 mRNA表达水平的变化;应用Western blot法检测肿瘤微血管中CREB和p-CREB蛋白表达水平的变化.结果 与假手术组和模型组相比,BK显著降低了紧密连接相关蛋白occludin和ZO-1 mRNA的表达水平,BK作用15 min时降低最明显(P<0.01);同时发现BK作用后CREB的表达水平明显降低,BK作用15 min时降低最显著(P<0.01);p-CREB的表达水平显著升高,在BK作用15 min时达到峰值(P<0.01).结论 缓激肽可在转录水平上调节紧密连接相关蛋白occhdin和ZO-1的表达;激活CREB可能是缓激肽调节occludin和ZO-1转录的机制之一.