L6细胞胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型

背景：在胰岛素抵抗的细胞模型中,以游离脂肪酸诱导3T3-L1脂肪细胞和高胰岛素诱导的HepG2肝癌细胞最为常见,对分布最为广泛靶组织骨骼肌的胰岛素抵抗模型报道较少。 目的：拟使用L6细胞株建立胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-06/2008-05在辽宁医学院生物化学与分子生物学教研室完成。 材料：L6细胞株由中国协和医科大学细胞中心提供。α-MEM培养基为美国Gibco公司产品。 方法：复苏后的L6细胞置于α-MEM培养基中诱导培养14 d,以考马斯亮蓝染色观察肌管出现来确定L6成肌细胞株分化完成。将分化后的细胞建立胰岛素抵抗模型,按1×106/孔接种于24孔板内,用含体积分数为0.02胎牛血清的α-MEM培养,以L6细胞贴满24孔板的板底为宜。换液后,向各孔内分别加入含体积分数为0.02牛血清白蛋白的α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h。设立2组,实验组的板孔内加入含1×10-7 mol/L胰岛素的HEPES缓冲液（136 mmol/L NaCl,4.7 mmol/L KCl,1.25 mmol/L MgSO4,1.2 mmol/L CaCl2,0.2%牛血清白蛋白,20 mmol/L HEPES,pH 7.4）孵育1 h;对照组的板孔内加入不含胰岛素的HEPES缓冲液孵育1 h。弃上清后用HBS缓冲液冲洗,每孔内分别加入含0.1 mol/L葡萄糖的HBS缓冲液100 μL,孵育10 min后取出置于冰板上快速回收上清。 主要观察指标：考马斯亮蓝染色观察L6细胞出现肌管结构情况,葡萄糖氧化酶法检测上清中葡萄糖浓度。 结果：诱导前L6细胞未见肌性结构出现,诱导分化后L6细胞内出现肌管结构。使用α-MEM无血清培养基饥饿培养1,3 h,两组上清中葡萄糖浓度基本相似（P > 0.05）;使用α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h后,实验组上清中葡萄糖浓度明显高于对照组（P < 0.05）。 结论：诱导分化成肌后的L6骨骼肌细胞经α-MEM无血清培养基饥饿培养5 h,在胰岛素浓度为1×10-7mol/L的刺激下可形成胰岛素抵抗的骨骼肌细胞模型。     

不同浓度5-氮胞苷体外诱导人脐带间充质干细胞向心肌样细胞的分化

背景：在体外将人脐带间充质干细胞诱导为心肌样细胞的5-氮胞苷合适浓度的研究较少,且无明确结论。 目的：对比不同浓度5-氮胞苷诱导人脐带间充质干细胞转化为心肌细胞的效果,以确定一种合适的诱导浓度。 方法：第2代人脐带间充质干细胞中分别加入浓度为2.5,5,10,20,40,80 μmol/L的5-氮胞苷,作用24 h后除去,继续培养4周。于诱导后第2周行免疫组化染色检测肌钙蛋白Ⅰ阳性细胞率。 结果与结论：5-氮胞苷诱导后7 d,细胞形态发生变化,细胞多紧密平行排列生长,细胞体积变大,梭形细胞比例下降,40,80 μmol/L组细胞形态变化明显。4周时,40,80 μmol/L组细胞的折光性减低,细胞活性减弱,继续出现死亡的细胞。诱导后2周,2.5 μmol/L组肌钙蛋白Ⅰ染色为阴性,10,20,40,80 μmol/L组细胞肌钙蛋白Ⅰ阳性率均明显高于5 μmol/L组(P < 0.05)。提示5-氮胞苷可诱导人脐带间充质干细胞向心肌样细胞转化,10 μmol/L是较佳的诱导浓度。     

黄芪甲苷通过锌离子抑制内质网应激发挥PC12细胞神经保护作用

目的探讨黄芪甲苷是否通过锌离子(Zn2+)调控线粒体相关内质网膜(MAMs)发挥神经保护作用, 并阐明可能的机制。方法常规培养PC12细胞并分为7组。对照组:细胞常规培养;2-DG组:用50 μmol/L 2-DG处理30 min;黄芪甲苷+2-DG组:用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min;黄芪甲苷组:用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min;TPEN+黄芪甲苷+2-DG组:用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min, 接着用50 μmol/L 2-DG处理30 min;TPEN组:10 μmol/L TPEN处理10 min;TPEN+2-DG组:用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min。通过Western blotting实验检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8、B细胞受体相关蛋白31(Bap31)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达, 采用Annexi...     

5-氮胞苷体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向心肌样细胞的分化

背景：骨髓基质干细胞具有扩增迅速、分化潜能广泛等特点,因此建立骨髓基质干细胞的体外定向诱导模型有利于组织工程学研究。 目的：探讨应用5-氮胞苷体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向心肌样细胞分化的可能性。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2005-06/2008-06在辽宁医学院附属第一医院中心实验室完成。 材料：SD大鼠20只,由辽宁医学院实验动物中心提供。5-氮胞苷为Sigma公司产品。 方法：大鼠麻醉后,分离股骨和胫骨,全骨髓法+贴壁法分离培养骨髓基质干细胞,待细胞生长融合至90%后传代扩增。取P3代骨髓基质干细胞,以2×104/孔密度接种于24孔培养板,分别加入5,10,15,20 μmol/L 5-氮胞苷诱导培养,同时设立不加诱导剂的空白对照,诱导24 h后更换为正常培养液继续培养至3周。 主要观察指标：细胞形态及生长曲线,诱导后细胞形态变化,诱导后细胞连接蛋白43和α-横纹肌肌动蛋白的表达。 结果：①培养的骨髓基质干细胞大多呈梭形,有时可见细胞融合,P3代细胞接种后第1,2天为静止生长期,从第3天开始进入对数生长期,第9天达高峰,以后进入平台期,第12天细胞数量开始减少。②5 μmol/L 5-氮胞苷诱导后,骨髓基质干细胞形态无明显变化;10 μmol/L 5-氮胞苷诱导后骨髓基质干细胞变长,宽大,并朝一个方向延伸,具有肌管形成细胞的形态特点;15 μmol/L 5-氮胞苷诱导后,24孔板周边区有少量细胞存活;20 μmol/L 5-氮胞苷诱导后细胞死亡。③经10 μmol/L 5-氮胞苷诱导3周后,骨髓基质干细胞胞浆内可见连接蛋白43和α-横纹肌肌动蛋白的表达;空白对照组均呈阴性表达。 结论：骨髓基质干细胞自身无法向心肌细胞方向转化,体外经5-氮胞苷诱导后具有向心肌细胞分化的潜能。5-氮胞苷浓度过低不能起到诱导分化作用,浓度过高则会造成细胞大量死亡,10 μmol/L为较适宜的诱导浓度。     

胶质瘤细胞GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响

目的 探讨胶质瘤细胞胶质细胞原性神经营养因子（GDNF）基因启动子Ⅰ区甲基化水平对其基因转录的影响。方法 体外培养胶质瘤U251细胞,加入不同浓度5-氮杂胞苷（浓度分别为1、5、10和20 μmol/L）干预,以加入PBS为对照。采用重亚硫酸盐测序法测定GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平,RT-PCR检测GDNF mRNA的表达。结果 与PBS组相比,1 μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF基因启动子Ⅰ区甲基化水平无显著影响（P>0.05）,5、10和20 μmol/L 5-氮杂胞苷均显著降低其甲基化水平（P<0.05）。与PBS组相比,1 μmol/L 5-氮杂胞苷对GDNF mRNA表达水平无显著影响（P>0.05）,5 μmol/L 5-氮杂胞苷显著增加其表达水平（P<0.05）,但随着浓度进一步增加（10、20 μmol/L）,其表达水平逐渐降低。结论 5-氮杂胞苷对GDNF基因具有去甲基化作用;GDNF启动子Ⅰ区去甲基化能够增加GDNF基因的转录水平。     

姜黄素通过IGF-1/Akt/FoxO3a通路保护鱼藤酮诱导PC12细胞的PD模型

目的探究姜黄素(Cur)对鱼藤酮(Ro)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及机制。方法建立鱼藤酮诱导的PC12细胞的帕金森病模型,利用姜黄素进行干预。实验分组为空白对照组,鱼藤酮模型组(终浓度:0.1μmol/L),姜黄素干预组(终浓度:0.5μmol/L、1.0μmol/L、5.0μmol/L、10μmol/L)。MTT比色法检测细胞活力,AO/EB荧光染色法观察细胞的凋亡情况,AnnexinⅤ-FITC/P双染检测细胞凋亡,Western-blot法检测细胞内IGF-1、Akt、FoxO3a的蛋白表达。结果 MTT结果显示:鱼藤酮组较对照组细胞活力明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),0.5μmol/L和1.0μmol/L姜黄素干预组可减轻0.1μmol/L鱼藤酮对PC12细胞增殖活力的影响,明显抑制了鱼藤酮对PC12细胞凋亡的诱导作用,与鱼藤酮组比较差异有统计学意义(P<0.01)Western-blot结果示:鱼藤酮组较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),0.5μmol/L和1.0μmol/L姜黄素干预组IGF-1、磷酸化的Akt(p-Akt)、磷酸化的FoxO3a(p-FoxO3a)表达与鱼藤酮组比明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。以上结果均显示5.0μmol/L和10μmol/L姜黄素干预组与鱼藤酮组比较差异无统计学意义(P>0.05);结论适宜浓度的姜黄素对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的PD模型具有保护作用,其保护作用呈浓度依赖性,其保护作用的机制可能与激活IGF-1/Akt/FoxO3a通路有关。     

EGCG对H2O2诱导BV2细胞氧化损伤保护作用机制的研究

目的探讨EGCG对H2O2诱导BV2细胞氧化损伤的保护作用机制。方法以200μmol/L H2O2制备BV2细胞氧化应激损伤模型,用CCK-8法检测不同浓度EGCG(0、1、5、10、20、40、80μmol/L)的保护作用,Ho-echst33258染色法检测细胞的凋亡,Western bloting法检测caspase-9蛋白的表达。结果 10及20μmol/L的EGCG组保护效果较明显;EGCG保护组的凋亡细胞显著少于无保护组;20μmol/L EGCG保护组的caspase-9蛋白表达较无保护组明显下调(P=0.03<0.05)。结论 10及20μmol/L浓度的EGCG对H2O2诱导的BV2细胞损伤模型有保护作用,其机制可能是通过减少caspase-9蛋白的表达,进而部分阻断caspase-9所介导的caspases级联反应,减少BV2细胞的凋亡。     

重组人胰岛素样生长因子1工程菌的高密度发酵

背景：胰岛素样生长因子1是人体内重要的细胞调控因子，已用于治疗糖尿病等多种疾病，工程菌发酵生产工艺研究是胰岛素样生长因子1实现产业化从而扩大临床应用的关键因素。 目的：探讨表达重组人胰岛素样生长因子1工程菌的高密度发酵与表达条件。 设计、时间及地点：酶基因工程实验，于2007-05/2008-05在浙江树人大学生物技术实验室完成。 材料：重组人胰岛素样生长因子1大肠杆菌表达菌株E. coli BL21(DE3)/pET22a-IGF-1由浙江树人大学生物技术实验室保存。高密度发酵补料培养基为：葡萄糖 300 g/L，蛋白胨 40 g/L，酵母粉 10 g/L，Na2HPO4 280 mmol/L，NaH2PO4•2H2O 120 mmol/L，MgSO4 10 mmol/L，氨苄青霉素100 mg/L。 方法：菌株活化后，进行摇瓶发酵试验，分别改变培养基种类、诱导剂异丙基硫代半乳糖苷浓度、诱导时间等参数，优化摇瓶发酵条件。依据摇瓶发酵优化条件，采用自控5 L发酵罐进行分批补料发酵试验。培养分分批培养和分批补料2个阶段。采用pH反馈流加的方式补料，在对数生长中后期开始诱导，加入异丙基硫代半乳糖苷至设计终浓度，培养4~6 h。 主要观察指标：重组人胰岛素样生长因子1工程菌的发酵与产物表达情况。菌体浓度与菌体干重测定，目的蛋白表达量的测定，发酵液葡萄糖浓度的测定。 结果：以2×YT＋5 g/L葡萄糖为发酵培养基，经0.8 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷诱导5 h，通过控制溶解氧以及pH反馈补料方式，实现工程菌高密度发酵与目的蛋白高效表达，每升发酵液收获干菌体50.1 g/L ，重组人胰岛素样生长因子1含量达 5.25 g/L。 结论：实验成功建立了重组人胰岛素样生长因子1工程菌优化的高密度发酵工艺，为重组人胰岛素样生长因子1的下游纯化和工业化生产奠定了基础。     

落新妇苷通过激活PI3K/AKT信号通路和抑制P38MAPK信号通路减轻H2O2诱导的PC12细胞损伤

目的 研究落新妇苷对H2O2诱导的氧化应激损伤的PC12细胞影响。方法 将PC12细胞分为5组:对照组、H_2O_2组及不同浓度(1μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)落新妇苷组。采用CCK8实验检测各组细胞的活力; Annexin V-FITC/PI细胞凋亡实验检测各组细胞凋亡率; Western blot检测PI3K、AKT、Caspase3和P38蛋白及其磷酸化激活蛋白的表达水平。结果 与H_2O_2组相比,落新妇苷组细胞的活力显著提高,细胞凋亡率明显降低,活化的凋亡相关蛋白Cleaved Caspase3表达水平降低,PI3K/AKT途径相关蛋白p-PI3K和p-AKT的表达水平升高,P38 MAPK途径重要蛋白p-P38的表达水平降低。结论 落新妇苷对H_2O_2诱导的氧化应激损伤的PC12细胞有明显保护作用;这种保护作用可能是通过激活PI3K/AKT信号通路及抑制P38MAPK信号通路实现的。     

一种稳定阿尔茨海默病细胞模型的建立方法

目的旨在应用不同浓度Aβ_(1-42)诱导新生SD大鼠海马神经元,建立稳定阿尔茨海默病细胞模型。方法分离并培养新生24 h内SD大鼠原代海马神经细胞;分别加入不同浓度Aβ_(1-42)诱导,诱导后采用MTT法观察细胞活力,选取理想Aβ_(1-42)诱导的海马神经细胞作为阿尔茨海默病细胞模型;通过免疫荧光技术(IF)鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)在海马神经元细胞的表达。结果 Aβ_(1-42)诱导后的海马神经细胞存活率下降,可导致海马神经元细胞胞体变形、收缩和细胞膜完整性破坏,胞间网络结构消失或断裂,细胞外基质乱不清,神经元大量凋亡;Aβ_(1-42)诱导后的海马神经细胞存活率下降与Aβ_(1-42)浓度成线性关系;加入不同浓度Aβ_(1-42)(0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L和50μmol/L)后实验各组细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(98.55±1.42)%、(90.37±3.25)%,(66.34±2.76)%、(53.23±3.41)%和(41.55±2.37)%,其中20μmol/L组与0μmol/L组相比P<0.05,30μmol/L、40μmol/L和50μmol/L组与对照组相比P<0.01。结论 Aβ_(1-42)可导致海马神经元大量凋亡;Aβ_(1-42)浓度为20μmol/L诱导的SD大鼠海马神经元可作为理想的阿尔茨海默病细胞模型。     

高糖对心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1的影响

背景：糖尿病心肌病的发病机制尚不清楚,神经调节蛋白1具有促进血管再生等作用,糖尿病心肌病的发病是否和心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1下降有关值得进一步研究。 目的：观察高糖对心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1的影响。 方法：取生长良好的第2代心肌微血管内皮细胞,高糖组加入10 mmol/L的葡萄糖,高糖+胰岛素组加入10 mmol/L的葡萄糖及10-5 U/L的胰岛素,对照组正常培养。培养24 h后收集细胞,RT-PCR及Western blot方法检测神经调节蛋白1 mRNA和蛋白的表达。 结果与结论：与对照组比较,高糖组心肌微血管内皮细胞神经调节蛋白1 mRNA和蛋白的表达明显下降(P < 0.05);与高糖组比较,高糖+胰岛素组心肌微血管内皮细胞神经调节蛋白1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P < 0.05),与对照组间差异无显著性意义(P > 0.05)。说明高糖可抑制心肌微血管内皮细胞表达神经调节蛋白1 mRNA和蛋白,而胰岛素可拮抗此作用。     

多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型的建立

背景：研究表明胰岛素抵抗在多囊卵巢综合征的发生与发展过程中起重要作用,建立理想的多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗动物模型是研究该疾病的基础。 目的：探讨建立较为理想的多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型的方法。 方法：将八九周龄SD雌性大鼠随机分为模型组和对照组。模型组给予胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素皮下注射,并以高脂饲料和50 g/L葡萄糖水喂养,对照组皮下注射生理盐水,常规饮食喂养。 结果与结论：造模6周后,模型组大鼠卵巢体积明显增大,且呈多囊性改变;血清睾酮、黄体生成素、空腹血糖和胰岛素水平高于对照组;骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4表达明显低于对照组,且其葡萄糖转运蛋白4阳性颗粒靠近骨骼肌细胞膜边缘者较少。可见胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素皮下注射,并饲以高脂饲料和50 g/L葡萄糖水是建立多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型较为理想的方法。     

细胞培养法评价镁合金能化型共聚酯涂层的生物相容性**☆

背景：与聚乳酸、聚羟基乙酸和乳酸-羟基乙酸共聚物等生物材料相比,3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯结构多元化,具有更好的生物相容性能、生物可降解性和热加工性能。 目的：采用细胞培养法评估含不同质量浓度阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯涂层的生物相容性。 方法：室温下使用乙酸乙酯配制含0(对照组),50,100,130,150 g/L阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯,观察成膜外观。通过MTT吸光度检测、荧光显微镜观察以及扫描电镜观察方法对比评估骨髓间充质干细胞在其表面的生长状态。 结果与结论：含50 g/L阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯成膜后外观均匀半透明,未见白色结晶析出物,含100,130,150 g/L阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯在成膜后均出现点状白色结晶物。MTT吸光度检测表明含50,100 g/L阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯均能较好地促进骨髓间充质干细胞生长;荧光显微镜及扫描电镜观察均见骨髓间充质干细胞能够在含50,100 g/L阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯表面黏附生长。说明含50 g/L阿魏酸的3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯最适合作为镁合金的涂层材料。     

葡萄糖浓度与大鼠胰腺导管干细胞的诱导分化

背景：葡萄糖是胰腺导管干细胞分化的重要因素之一,与分化后胰岛素分泌细胞数量及分泌能力相关。 目的：对比不同浓度葡萄糖诱导下,胰腺导管干细胞分化后细胞的胰岛素分泌能力。 方法：使用胶原酶Ⅴ及Ficoll-400分离及纯化Wistar大鼠胰腺上皮细胞,获取胰腺导管干细胞,将干细胞分为10组,体外培养、增殖及分化形成胰岛素分泌细胞。各组在含有不同浓度葡萄糖的培养基中进行分化。采用免疫荧光染色法鉴定胰腺导管干细胞,光化学发光法检测分化出的胰岛素分泌细胞的胰岛素分泌量。 结果与结论：葡萄糖浓度为20.6,25.6, 30.6 mmol/L组细胞的刺激指数高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。葡萄糖浓度为15.6,20.6,25.6 mmol/L组细胞胰岛素分泌量高于其他组(P < 0.05),但这3组两两比较差异无显著性意义(P > 0.05)。提示胰腺导管干细胞分化为胰岛素分泌细胞实验中,当分化时培养液所含葡萄糖浓度为20.6~25.6 mmol/L时,所得细胞胰岛素分泌能力最强。     

食源性肥胖大鼠2型糖尿病模型的建立

背景：高脂饮食加小剂量链脲佐菌素是目前国内最常用的2型糖尿病大鼠造模方式，但高脂饮食仅能诱导50%大鼠发生胰岛素抵抗，因此还需寻找更理想的2型糖尿病大鼠建模方法。 目的：选择食源性肥胖大鼠进行小剂量链脲佐菌素腹腔注射，建立更理想的2型糖尿病动物模型。 方法：将SD大鼠随机分成对照组和高脂饮食组。4周后，据大鼠体质量将高脂饮食组分为食源性肥胖组和食源性肥胖抵抗组。8周后，所有大鼠均给予小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)腹腔注射，将注射10 d后空腹血糖> 7.8 mmol/L且稳定2周以上者纳为2型糖尿病大鼠模型。检测各组大鼠的空腹血糖、血脂、胰岛素；评价各组大鼠的胰岛素抵抗程度；比较各组大鼠的2型糖尿病成模率。 结果与结论：与对照组及食源性肥胖抵抗组相比，食源性肥胖组大鼠出现明显的体质量增加、高血脂、高胰岛素血症及胰岛素抵抗(P < 0.01)。注射链脲佐菌素后食源性肥胖组2型糖尿病成模率高达100%，食源性肥胖抵抗组成模率仅为12.5%。由结果可知选择食源性肥胖组大鼠作为2型糖尿病造模对象，是2型糖尿病造模方法的成功改良。     

阿魏酸及其酯化产物与体外培养大鼠大脑皮质神经元的存活

背景：大量体外筛选中得到的中药脑神经保护活性成分,多因脂溶性低难以透过血脑屏障而限制了其临床应用。 目的：比较阿魏酸及其酯化产物阿魏酸甲酯、乙酯对原代培养的大鼠大脑皮质神经元体外存活的保护作用。 方法：出生1 d内的乳鼠采用酶消化法分离培养大脑皮质神经元。培养6 d后,分别进行阿魏酸、阿魏酸甲酯及乙酯干预,继续培养1 d。 结果与结论：形态学观察结果显示细胞生长良好,NSE染色检查表明培养6 d的存活细胞大部分均为神经元。MTT比色法测量结果显示,与空白对照组比较,阿魏酸仅在质量浓度为200 mg/L时有明显促进大脑皮质神经元存活的作用,而阿魏酸甲酯、乙酯在质量浓度为0.16~20 mg/L时均能明显促进神经元体外存活,且作用趋势、作用强度相近。表明阿魏酸的酯化产物阿魏酸甲酯和阿魏酸乙酯均能促进原代培养的大脑皮质神经元体外存活,显示出较好的脑神经元保护作用,且活性比阿魏酸更强。     

强化胰岛素治疗对重型颅脑损伤患者预后的影响

目的探讨胰岛素强化治疗对重型颅脑损伤预后的影响。方法回顾性分析2006～2008年间我院收治的重型颅脑损伤伴血糖升高患者62例,其中32例进行强化胰岛素治疗,使血糖控制在4．4～6．1mmol／L,传统胰岛素治疗组30例患者血糖控制在11．1～14．0mmol／L。观察3个月后患者的格拉斯哥预后评分（GOS）。结果比较两组的GOS,强化胰岛素治疗组的恢复良好率高于传统胰岛素治疗组,而病死率低于后者,两组之间有显著差异（P〈0．05）。结论强化胰岛素治疗能改善重型颅脑损伤患者预后。     

Olanzapine induces insulin resistance: results from a prospective study

BACKGROUND: The aim of this study was to compare glucose metabolism in patients with schizophrenia receiving olanzapine with that in control subjects. METHOD: We conducted a prospective, controlled, open study comparing body weight, fat mass, and indices of insulin resistance/ sensitivity in 10 olanzapine-treated patients with ICD-10 schizophrenia (olanzapine dose range, 7.5-20 mg/day) with those of a group of 10 mentally and physically healthy volunteers. Weight, fat mass, and indices of insulin resistance/sensitivity were assessed over individual 8-week observation periods from November 1997 to October 1999. RESULTS: Fasting serum glucose and fasting serum insulin increased significantly in the olanzapine-treated patients (p =.008 for glucose and p =.006 for insulin). The homeostasis model assessment (HOMA) index for beta cell function did not change significantly in the olanzapine-treated patients, whereas the HOMA index for insulin resistance did increase (p =.006). In the control group, these parameters were stable. A significant increase in body weight (p =.001) and body fat (p =.004) was seen in patients treated with olanzapine, while the control group showed no significant changes. CONCLUSION: This study indicates that the disturbances in glucose homeostasis during antipsychotic treatment with olanzapine are mainly due to insulin resistance. However, beta cell function remains unaltered in olanzapine-treated patients. We conclude that treatment with some second-generation antipsychotic drugs may lead to insulin resistance.     

非糖尿病缺血性卒中患者胰岛素抵抗患病情况及甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇比值对胰岛素抵抗的预测价值

目的 在非糖尿病缺血性卒中患者中观察胰岛素抵抗的患病情况及甘油三酯（triglycerides,TG）/高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein- cholesterol,HDL-C）比值和胰岛素抵抗的关系。方法 在2008年8月～2009年12月期间天坛医院神经内科连续入选符合研究标准的610名缺血性卒中患者。无糖尿病既往史患者,在卒中发病14±3d行口服糖耐量试验（oral glucose tolerance test,OGTT）。应用胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment-insulin resistance,HOMA-IR）评定胰岛素抵抗情况。测定胰岛素抵抗可能相关的危险因素,包括血压、体重指数（body mass index,BMI）、HDL-C、TG/HDL-C比值、超敏C反应蛋白（high-sensitivity C-reactive protein,hsC-RP）、纤维蛋白原和高同型半胱氨酸血症等。结果 在入选缺血性卒中患者中,480名患者既往无糖尿病史。375名符合条件患者完成OGTT检查和HOMA测定。123名患者诊断为正常糖耐量（normal glucose tolerance,NGT）,5名患者为单纯性空腹血糖受损（isolated-Impaired glucose regulation,I-IFG）,108名患者为单纯性糖耐量受损（isolated-Impaired glucose tolerance,I-IGT）,10名患者为复合性糖耐量受损（combined glucose intolerance,CGI）。胰岛素抵抗在NGT,I-IFG,I-IGT,CGI组中的患病率分别为8.1% 20.0%,17.6%和30.0%（χ2趋势检验,P <0.01）。多因素分析显示TG/HDL-C,hsC-RP和胰岛素抵抗独立相关。以TG/HDL-C的最低1/4组作参照,最高1/4组存在胰岛素抵抗的危险是参照的6.09倍[95%可信区间（95% confidence interval,95%CI）1.43～25.87,P <0.05];中间组存在胰岛素抵抗的危险是参照的4.11倍（95%CI 1.06～15.95,P <0.05）。以h s C-RP的最低1/4组作参照,最高1/4组存在胰岛素抵抗的危险是参照的1.19倍（95%CI 0.38～3.74,P＞0.05）;中间组存在胰岛素抵抗的危险是参照的3.98倍（95%CI 1.14～13.89,P <0.05）。结论 在非糖尿病缺血性卒中患者存在胰岛素抵抗和亚急性炎性现象。TG/HDL-C是胰岛素抵抗的预测指标。若能进一步证明治疗胰岛素抵抗能减少卒中和心血管疾病,则上述发现对诊断和治疗具有重要的意义。     

Metformin for prevention of weight gain and insulin resistance with olanzapine: a double-blind placebo-controlled trial.

OBJECTIVE: To assess whether metformin prevents body weight gain (BWG) and metabolic dysfunction in patients with schizophrenia who are treated with olanzapine. METHOD: Forty patients taking olanzapine (10 mg daily) were randomly allocated to a metformin (n = 20; 850 to 1700 mg daily) or placebo (n = 20) group in a 14-week double-blind study. Waist circumference (WC), BWG, body mass index (BMI) fasting glucose, insulin, and lipids were evaluated at baseline and at Weeks 7 and 14 of treatment. RESULTS: At Week 14, BWG (kg) was similar in the metformin group (5.5 kg) and the placebo group (6.3 kg), P = 0.4. There were no differences between the changes in BMI, WC, glucose, insulin, insulin resistance index (HOMA-IR), and plasma lipid levels observed in the treatment group and the placebo group; however, glucose levels decreased significantly after metformin administration (P = 0.02). The HOMA-IR decreased significantly in both groups, but 3 subjects from the placebo group developed fasting glucose levels greater than 5 mmol/L. After taking metformin, triglyceride levels increased, but the cholesterol profile improved significantly. CONCLUSIONS: Metformin did not prevent olanzapine-induced BWG. While some lipid parameters worsened during placebo, the HOMA-IR improved in both the placebo and the metformin groups. Carbohydrate metabolism impairment was not systematically observed during short-term olanzapine administration.