湖州地区651例糖尿病患者幽门螺杆菌耐药情况调查分析

目的分析浙江省湖州地区糖尿病患者幽门螺杆菌感染及抗生素的耐药情况,为糖尿病幽门螺杆菌的根除提供理论依据。方法选择2014年1月~2015年12月浙江省湖州市中心医院及湖州市第一人民医院就医的行胃镜检查的糖尿病患者,收集1211例胃镜下胃黏膜标本进行幽门螺杆菌分离培养,并用平板掺入法对幽门螺杆菌进行药敏试验。结果 1211例胃黏膜标本中幽门螺杆菌分离培养阳性菌株651株,阳性率为53.76%。651株幽门螺杆菌对克拉霉素、左氧氟沙星、甲硝唑的耐药率分别为25.35%、35.33%和95.70%,其他抗生素未出现耐药,其中对克拉霉素和左氧氟沙星的双重耐药率为13.21%,对克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑的三重耐药率为11.37%。结论湖州地区糖尿病患者幽门螺杆菌对克拉霉素、左氧氟沙星和甲硝唑单独抗生素均有非常高的耐药率,鉴于此情况,在根除幽门螺杆菌之前如果能够行内镜下培养将有利于幽门螺杆菌的根除。     

社区与农村获得性幽门螺杆菌感染及耐药性分析

目的探讨社区与农村获得性幽门螺杆菌感染情况,并分析幽门螺杆菌对临床常用药物的耐药性。方法根据患者登记信息,将其分为社区组和农村组,其中社区组206例,农村组263例,分别进行13C-尿素呼气试验检测有无Hp感染;对感染者行胃镜检查,胃黏膜活检培养Hp菌株;用E试验法和琼脂稀释法检测其对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药性。结果社区组206例患者中有116例感染幽门螺杆菌,感染率为56.31%;农村组263例患者中有211例感染幽门螺杆菌,感染率为80.23%,两组感染率比较,差异具有显著性意义（P〈0.01）。社区组Hp菌株对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药率分别为76.3%、35.9%、11.2%,农村组对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药率分别为42.5%、22.3%、3.6%,两组对三种常见药物的耐药率比较,差异均具有显著性意义（P〈0.01）。结论幽门螺杆菌感染率农村高于城市社区,但是农村患者Hp对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林的耐药率明显低于城市社区患者。     

西安地区幽门螺杆菌临床分离株耐药性研究

目的分析西安地区幽门螺杆菌临床分离株对多种常用抗幽门螺杆菌抗生素的药敏和耐药情况。方法 :采用琼脂稀释法和E -test药敏试验检测幽门螺杆菌对甲硝唑、阿莫西林和克拉霉素的药敏和耐药性。结果 :MIC范围 :甲硝唑 0 .5 0～ >32 ;阿莫西林 0 .0 16～ 0 .19;克拉霉素 <0 .0 16～ 1.0 ;耐药情况 :5 8% (E -test法 )对甲硝唑耐受 ,阿莫西林和克拉霉素耐药率均为 0。结论 :西安地区幽门螺杆菌对阿莫西林和克拉霉素有较好的敏感性 ,无耐药现象 ;而甲硝唑耐药率较高 ,敏感性差     

玉溪地区幽门螺杆菌耐药状况分析

目的分析玉溪地区幽门螺杆菌耐药状况。方法对在2016年6月至2017年3月间在本院接受上消化道疾病诊治的患者,进行幽门螺杆菌检测培养及耐药菌株分析。结果该地区幽门螺杆菌感染率约50%,感染呈现在低学历、卫生条件相对差的村镇,与吸烟饮酒关系无特异性,感染后均有不同程度的胃黏膜慢性炎症表现。对耐药菌株进行分析的结果显示,除阿莫西林耐药率(1.69%)比较低以外,克拉霉素、四环素、左氧氟沙星、甲硝唑、利福平等药物的耐药率均高于40%,并且有多重耐药情况出现。结论该地区在根除幽门螺杆菌感染的治疗时,不宜使用耐药率较高的左氧氟沙星、甲硝唑、利福平等药物进行单独的药物治疗,而应该选择使用耐药率低的阿莫西林或呋喃唑酮,或可以在进行耐药菌株实验后选择阿莫西林或呋喃唑酮联合四环素、克拉霉素进行治疗。     

四联疗法治疗消化性溃疡合并幽门螺杆菌感染疗效分析

目的 探讨消化性溃疡合并幽门螺杆菌感染患者接受复方尿囊素联合雷贝拉唑、克拉霉素、阿莫西林四联疗法治疗的临床效果.方法 选取消化性溃疡合并幽门螺杆菌感染患者100例分为2组,试验组接受复方尿囊素联合雷贝拉唑、克拉霉素、阿莫西林四联疗法治疗,对照组则接受雷贝拉唑、克拉霉素、阿莫西林三联法治疗,对比2组的治疗结果 .结果2组疗效、幽门螺杆菌转阴率相比,差异均有统计学意义(P<0.05).试验组的药物耐受情况与对照组相比,差异无统计学意义(P<0.05).结论 消化性溃疡合并幽门螺杆菌感染患者接受复方尿囊素联合雷贝拉唑、克拉霉素、阿莫西林四联疗法治疗,安全性与有效性均较高.     

北京地区幽门螺杆菌对克拉霉素的耐药情况及其耐药机制

目的：（1）确定北京地区幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp)菌株对克拉霉素的耐药情况。（2）研究幽门螺杆菌对克拉霉素耐药与23SrRNA基因点突变的关系。方法：从北京地区89例有上胃肠症状的患者取得胃活检组织,微需氧培养得到Hp,E-检验方法测定克拉霉素的最低抑菌浓度（MIC）,CTAB／NaCl方法提取敏感菌和耐药菌的DNA,用限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）检测克拉霉素耐药菌株的点突变。结果：（1）北京地区Hp菌株对克拉霉素的耐药率是13．5％。（2）12个克拉霉素耐药的Hp菌株均存在23S rRNA基因的A2143G点突变,进行PCR－RFLP的24个敏感菌株均无23S rRNA的点突变。结论：北京地区克拉霉素耐药的Hp菌株较为常见,Hp对克拉霉素的耐药与23SrRNA基因的点突变有关。     

幽门螺杆菌耐药性分析

目的 分析幽门螺杆菌对6种临床使用抗生素的耐药率,为临床选用抗生素治疗幽门螺杆菌提供依据。方法 2006年3月～2007年2月期间共采集3304例患者胃镜检查后活检组织做幽门螺杆菌培养,采用Kiby—bauer法对幽门螺杆菌阳性分离菌株进行甲硝唑、阿莫仙、庆大霉素、左氧氟沙星、呋喃唑酮和克拉霉素6种抗生素药敏试验。结果 3304例临床标本中幽门螺杆菌培养阳性为1171例,占35．4％;药敏试验结果显示甲硝唑耐药率最高,达99．32％;左氧氟沙星耐药率最低,仅0．51％,在12个月时间内的两种抗生素耐药率无明显变化;阿莫仙、庆大霉素、呋喃唑酮和克拉霉素均存在不同程度的耐药．耐药率分别为61．06％、4．78％、21．35％和39．45％,且在12个月内的耐药趋势均有明显变化。结论随着根治幽门螺杆菌时抗生素的应用,幽门螺杆菌的抗生素耐药率逐年上升,甲硝唑的耐药率最高;药敏试验对临床幽门螺杆菌菌株的根治具有一定参考作用。     

克拉霉素和加替沙星联合应用对铜绿假单胞菌生物被膜的体外作用

目的研究克拉霉素和加替沙星联合应用对铜绿假单胞菌生物被膜(BF)的体外作用。方法采用改良的平板培养法建立BF体外模型,经不同浓度克拉霉素处理后,扫描电镜(SEM)观察,琼脂平板法测定不同浓度克拉霉素处理组加替沙星的最低生物膜清除浓度(MBEC)。结果扫描电镜形态学观察显示,1/4MIC、1/16 MIC克拉霉素处理组的BF中纤维素样物质及胶连现象明显减少,BF的网状结构被破坏;MBEC测定结果显示,与0 MIC克拉霉素处理组的加替沙星MBEC值(7.75+2.13)Lnμg/mL比较,1/4MIC克拉霉素处理组(5.00+2.39)Lnμg/mL、1/16 MIC克拉霉素处理组(5.75+2.16)Lnμg/mL均显著降低(P<0.01,P<0.05);而1/4MIC克拉霉素处理组与1/16 MIC克拉霉素处理组之间无显著性差异(P>0.05)。结论克拉霉素本身对铜绿假单胞菌不具有杀菌活性,但1/4MIC、1/16 MIC克拉霉素均能减少铜绿假单胞菌BF中的纤维素样物质,破坏生物膜的结构,而增加加替沙星的抗菌活性。     

600例幽门螺杆菌感染者的耐药性分析

目的:通过对600例幽门螺杆菌感染(Hp)者临床分离菌株的培养和药敏试验,分析幽门螺杆菌对常用抗生素的耐药性,为临床选用抗生素治疗Hp提供依据。方法:采用K-B法检测Hp临床分离菌株对阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、四环素、呋喃唑酮的耐药率,并分析性别和年龄对耐药率的影响。结果:幽门螺杆菌对阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、左氧氟沙星、四环素、呋喃唑酮的耐药率分别为4.0%、32.0%、10.0%、24.0%和6.0%、0%;甲硝唑在女性与男性中的耐药率存在差异(P0.05)。结论:幽门螺杆菌对呋喃唑酮、阿莫西林、四环素、克拉霉素的敏感性较高,对甲硝唑、左氧氟沙星的耐药性较高。     

上消化道疾病患者幽门螺杆菌的感染率及耐药性

目的 了解西安地区胃肠疾病患幽门螺杆菌的感染率及对常用抗菌素的敏感性，为幽门螺杆感染治疗的药物选择提供依据。方法 采用细菌培养的方法对259例胃肠疾病患胃粘膜活检标本进行了幽门螺杆分离鉴定，并用琼脂稀释和浓度梯度法对随机抽取的50株幽门螺杆菌进行了抗生素敏感性试验。结果 西安地区胃肠疾病患幽门螺杆菌的感染率为74%，其中胃癌的感染率为58%；胃溃疡的感染率为75%；十二脂肠溃疡的感染率为95%；其他胃肠疾病也有不同的感染率，幽门螺杆菌对阿莫西林和克拉霉素的敏感率均为100%，两种检测方法无差异。幽门螺杆菌对甲硝唑的耐药率较高，琼脂稀释法为38%，浓度梯度法为58%，存在一定的差异。结论 幽门螺杆菌是胃肠疾病发生的重要因素，在西安地区阿莫西林和克拉霉素是治疗幽门螺杆菌感染的首选药物，控制甲硝唑在治疗幽门螺杆菌感染中的使用。在进行幽门螺杆菌对甲硝唑的敏感试验时，应采取琼脂稀释和浓度梯度两种方法，以提高耐药菌的检出。     

新型抗菌肽KR-1的设计、筛选及抗菌活性评价

目的 构建高活性、低毒性的新型抗菌肽,对其抗变异链球菌及其他口腔致病菌的活性进行评价,探讨其在防治龋病中的潜在应用价值。方法 以天然抗菌肽Histatins5的类似物Dhvar4为模版合成新型抗菌肽KR-1、KR-2。通过所设计抗菌肽对变异链球菌的最小抑菌浓度（MIC）实验,兔血红细胞溶血试验以及CCK-8法,筛选出高活性、低毒性的目标抗菌肽;使用96孔板培养变异链球菌生物膜,分为实验组（用浓度梯度为0.6×、0.8×、1×、2×MICs的KR-1进行处理）与阳性对照组（用浓度梯度为0.6×、0.8×、1×、2×MICs的洗必泰进行处理）,通过结晶紫染色定量法观察生物膜量的改变;使用10×MIC浓度KR-1作用于变异链球菌生物膜后通过激光共聚焦显微镜观察结构的改变;通过KR-1作用口腔链球菌后杀菌所需的时间探讨目标抗菌肽对口腔链球菌的抗菌效率。结果 实验测得KR-1及KR-2的MIC分别为3.2 μmol/L和12.8 μmol/L,有效浓度下,兔血红细胞溶血率分别为0.35%和48.8%,24 h牙龈成纤维细胞存活率分别为72.96 %和21.94 %,将活性较高、生物相容性较好的KR-1作为目标抗菌肽;经结晶紫染色后测定KR-1的50%生物膜最小抑制浓度（MBIC50）低于1.92 μmol/L,且浓度为2.56 μmol/L时效果优于阳性对照组洗必泰（P=0.001）,共聚焦显微镜下观察可见经KR-1处理后生物膜结构疏松;KR-1在5 min内可杀灭约90%细菌。结论 KR-1抗菌肽具有较强的抗菌活性和较低的毒性,且有良好的抗变异链球菌生物膜作用。     

幽门螺杆菌耐药初探

目的:观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对克拉霉素、呋喃唑酮的耐药情况,初步了解克拉霉素耐药菌株为原发耐药还是继发耐药,初步探讨抗H.pylori感染失败的原因是由于原有菌株未消灭还是由于感染了新的菌株.方法:从消化性溃疡及糜烂性胃炎患者的胃黏膜中分离培养出H.pylori共21株,利用纸片法进行药物敏感试验,观察耐药情况.应用随机扩增多态性DNA分析方法,进行菌株指纹图谱分析,确定抗H.pylori治疗前后菌株的同一性.结果:(1)21株H.pylori中有8株对克拉霉素耐药,1株对呋喃唑酮耐药,耐药率分别为38.1%和4.8%.(2)3对治疗前后配对菌株中,1例为原发性耐药(持续感染),1例为继发性耐药,另有1例为新菌株感染.结论:H.pylori对克拉霉素耐药率比较高,而对呋喃唑酮高度敏感.抗H.pylori感染失败的原因与菌株对克拉霉素原发性及继发性耐药有关.     

NEW ANTIMICROBIAL SENSITIVITY TESTS OF BIOFILM OF STREPTOCOCCUS MUTANS IN ARTIFICIAL MOUTH MODEL

To develop a new antimicrobial sensitivity test model for oral products in vitro.Methods A biofllm artificial mouth model for antimicrobial sensitivity tests was established by modifying the LKB chromatography chamber. Using sodium fluoride and Tea polyphenol as antimicrobial agent and Streptococcus mutans as target, sensitivity tests were studied. Results The modeling biofilm assay resulted in a MIC of l. 28mg/ml for fluoride against S. mutans, which was 32 times the MlC for broth maco-dilution method. The differential resistance of bacteria bioflim to antimicrobial agent relative to planktonic cells was also demonstrated. Conclusion The biofilm artificial mouth model may be useful in oral products test.     

金银花、连翘对溶珊瑚弧菌及其生物膜活性的影响

目的研究金银花、连翘对溶珊瑚弧菌及其生物膜活性的影响。方法采用纸片扩散法测定抑菌圈,采用结晶紫法检测金银花、连翘对溶珊瑚弧菌生物膜的作用。结果金银花为低敏药物,连翘为不敏药物。生物膜抑制率与质量浓度有剂量依赖的正相关关系,31、62.5、125 mg/mL金银花和连翘供试药液与菌膜对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）;生物膜破坏试验发现,31、62.5、125 mg/mL金银花和连翘供试药液与菌膜对照组生物膜活菌百分比的差异有统计学意义（P〈0.05）。结论金银花有良好的抑菌、抑制细菌生物膜形成和破坏细菌生物膜活性;而连翘有良好的破坏溶珊瑚弧菌的生物膜活性和较好的抑制生物膜形成活性。     

肉桂醛对烟曲霉菌体外生物膜的影响

目的：探讨肉桂醛对烟曲霉菌生物膜（BF）的体外作用。方法体外建立烟曲霉菌BF ;采用2倍稀释法测定肉桂醛的最低抑菌浓度（MIC）;结晶紫法评价不同浓度的肉桂醛对烟曲霉菌BF的影响;扫描电镜观察BF的形态学变化。结果烟曲霉菌可在体外形成生物膜;肉桂醛对受试烟曲霉菌的 M IC为256μg／m L ;在1 M IC、1／2 M IC、1／4 M IC 时,生物膜量分别为0．81±0．11、1．13±0．18和1．59±0．11,与阳性对照组（2．18±0．15）相比,差异有统计学意义（ P＜0．05）;电镜下可见肉桂醛作用后生物膜结构变稀疏松散。结论肉桂醛对烟曲霉菌具有抗菌活性,亚抑菌浓度的肉桂醛对生物膜具有一定的破坏作用,其中浓度越高作用越强。     

序贯疗法治疗幽门螺杆菌感染患者疗效观察

目的:观察序贯疗法治疗幽门螺杆菌(Hp)感染患者的疗效。方法:经胃镜检查确诊的慢性胃炎或消化性溃疡且Hp阳性患者82例,随机分为治疗组和对照组。治疗组(42例)方案为前5d奥美拉唑+阿莫西林,后5d奥美拉唑+克拉霉素+替硝唑;对照组(40例)三联疗法为奥美拉唑+阿莫西林+克拉霉素,疗程7d。结果:治疗组Hp根除率92.86%,对照组Hp根除率75.00%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:以奥美拉唑、阿莫西林、克拉霉素、替硝唑组成的10d序贯疗法治疗Hp感染较7d三联疗法有更高的根除率,可提高临床疗效。     

两种中药复方体外对白假丝酵母菌生物膜形成的影响

目的：观察两种中药复方体外对白假丝酵母菌生物膜形成的影响。方法：采用结晶紫染色法和MTT法评价白假丝酵母菌生物膜的体外生长动力学,微量稀释法检测两种中药复方对白假丝酵母菌悬浮菌及其生物膜的抑制作用以及药物包被对白假丝酵母菌生物膜形成作用。结果：生物膜内白假丝酵母菌数量随培养时间延长而增加。两种中药复方对白假丝酵母菌悬浮菌的最低抑菌浓度50%（MIC50）分别为3.725、3.925mg/mL,对生物膜的SMIC50与SMIC80分别是3.725和7.725mg/mL,3.925和7.85mg/mL。两种中药复方包被浓度分别在3.322、2.269mg/mL以上时对其生物膜形成的抑制作用有显著性。结论：两种中药复方对体外白假丝酵母菌生物膜具有明显的抑制作用。     

大蒜提取物二烯丙基化三硫对人膀胱癌T24细胞侵袭转移的影响

目的:研究大蒜提取物二烯丙基化三硫(dially trisulfide,DATS)于体外对T24细胞侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法:应用MTT法检测DATS对T24细胞黏附纤连蛋白能力的影响,应用Transwell小室进行人工重组基膜侵袭实验检测DATS对T24细胞侵袭能力的影响,并应用划痕愈合试验检测DATS对T24细胞迁移能力的影响。采用蛋白质印迹方法检测DATS作用后T24细胞中MMP-9蛋白的表达。结果:黏附试验表明DATS作用24h后,能有效抑制T24细胞与细胞外基质的黏附,呈剂量依赖性。划痕试验显示DATS作用不同时间对T24细胞迁移力的影响呈剂量和时间依赖性。侵袭试验表明DATS作用于T24细胞24h后,随着药物浓度的升高,T24细胞的侵袭力逐渐降低。DATS可减少T24细胞中MMP-9蛋白的表达。结论:DATS能显著抑制T24细胞的黏附、迁移和侵袭能力。DATS的侵袭转移抑制能力可能与降低MMP-9的表达有关。     

二烯丙三硫抑制人前列腺癌细胞生长

【目的】 研究二烯丙三硫(DATS)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用及相关机制&#65377; 【方法】 MTT法测定DATS对PC-3细胞生长的影响;细胞形态学,流式细胞仪(FCM)等检测细胞凋亡;western blot&#65380;比色法分别检测凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和Bcl-xL/Bcl-xS的表达以及Caspase-3活性变化&#65377; 【结果】 DATS明显抑制PC-3细胞的生长,呈浓度和时间依赖性;DATS作用72 h的IC50为14 μmol/L;14 μmol/L DATS作用PC-3细胞不同时间后,细胞凋亡率增高;western blot显示凋亡抑制蛋白Bc1-2&#65380;Bcl-xL表达减少,比色法表明Caspase-3活性增高&#65377;【结论】 DATS诱导细胞凋亡是其抑制前列腺癌PC-3细胞生长的重要机制,该机制可能与Bc1-2&#65380;Bcl-xL和Caspase-3表达及活性变化有关&#65377;     

Penetration of erythromycin through Staphylococcus epidermidis biofilm

Background The catheter related infection caused by Staphylococcus epidermidis biofilm is increasing and difficult to treat by antimicrobial chemotherapy. The properties of biofilms that give rise to antibiotic resistance are only partially understood. This study aimed to elucidate the penetration of erythromycin through Staphylococcus epidermidis biofilm.

Methods The penetration ratio of erythromycin through Staphylococcus epidermidis biofilms of 1457, 1457-msrA, and wild isolate S68 was detected by biofilm penetration model at different time points according to the standard regression curve. The RNA/DNA ratio and the cell density within the biofilms were observed by confocal laser microscope and transmission electromicroscope, respectively.

Results The penetration ratios of erythromycin through the biofilms of 1457, 1457-msrA, and S68 after cultivation for 36 hours were 0.93, 0.55 and 0.4, respectively. The erythromycin penetration ratio through 1457 biofilm (0.58 after 8 hours) was higher than that through the other two (0.499 and 0.31 after 24 hours). Lower growth rate of the cells in biofilm was shown, with reduction of RNA/DNA proportion observed by confocal laser microscope through acridine orange stain. Compared with the control group observed by transmission electrmicroscope, the cell density of biofilm air face was lower than that of agar face, with more cell debris.

Conclusions Erythromycin could penetrate to the Staphylococcus epidermidis biofilm, but could not kill the cells thoroughly. The lower growth rate of the cells within biofilm could help decreasing the erythromycin susceptibility.