1，1-二氨基2，2-二硝基乙烯对哺乳动物细胞致突变性研究

在非代谢活化（-S9）和代谢活化（+S9）条件下，以1，1-二氨基-2，2-二硝基乙烯（FOX-7）处理小鼠淋巴瘤L5178Y细胞和中国仓鼠肺CHL细胞，进行体外哺乳动物细胞TK基因突变试验和染色体畸变试验。结果显示，分别以500、250、125 μg/ml浓度的FOX-7处理L5178Y细胞，各剂量组突变频率与溶剂对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05），且具有剂量相关性；分别以300、200、100 μg/ml浓度FOX-7处理CHL细胞，各剂量组染色体畸变细胞率与溶剂对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。提示FOX-7可能对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因具有致突变性，对中国仓鼠肺CHL细胞染色体无致突变性。     

1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯急性染毒对小鼠初级精母细胞染色体畸变的影响

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对小鼠初级精母细胞染色体畸变的影响,将50只健康7-12周龄SPF级雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为溶剂对照(4%淀粉溶液)组和348.22、139.29、69.64mg/kg FOX-7染毒组,另设阳性对照(40mg/kg环磷酰胺)组,每组10只。每日固定时间采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为20ml/kg,连续5d。于首次染毒后第12天,观察染色体结构畸变率和单价体率。结果显示,与溶剂对照组比较,348.22mg/kg FOX-7染毒组小鼠初级精母细胞染色体结构畸变率较高,差异有统计学意义(P<0.05);而各剂量FOX-7染毒组小鼠初级精母细胞常染色体单价体和性染色体单件体率均无明显改变。提示FOX-7可能会引起小鼠初级精母细胞染色体发生结构畸形改变。     

1，1-二氨基-2，2-二硝基乙烯的急性毒性研究

选择60只SPF级SD大鼠和8只白色家兔,分别进行1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)急性经口毒性试验及皮肤和眼刺激试验。结果发现,FOX-7急性经口毒性试验最高剂量组大鼠在给药后出现运动失调、腹卧、腹泻、目光呆滞、行动迟缓等症状,并且11 d内全部死亡,该物质LD50为995.63 mg/kg;FOX-7对家兔的刺激作用表现为皮肤轻微水肿,眼结膜充血、水肿和分泌物增加。依据《化学品毒性鉴定技术规范》判定FOX-7属低毒性物质,对皮肤、眼睛有轻微刺激作用。     

1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯对大鼠睾丸标志酶活力的影响

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对大鼠睾丸标志酶活力的影响,将40只健康7～12周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为溶剂对照(4%淀粉溶液)组和49.8、99.6、199.1 mg/kg FOX-7染毒组,每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,连续14 d。检测大鼠睾丸组织中的睾丸标志酶γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)的活力。结果显示,与溶剂对照组比较,99.6、199.1 mg/kg FOX-7染毒组大鼠睾丸组织中LDH的活力降低,各剂量FOX-7染毒组大鼠睾丸组织中AKP的活力降低,差异均有统计学意义(P0.05);而各剂量组大鼠睾丸组织中ACP、γ-GT的活力均无明显改变。提示FOX-7可能对雄性大鼠具有一定的生殖毒性。     

1，1''-二羟基-5，5''-联四唑二羟胺盐的急性毒性研究

选用30只大鼠和8只白兔分别进行1，1’-二羟基-5，5’-联四唑二羟胺盐（HATO）急性经口毒性、皮肤刺激和眼刺激试验。结果显示，经口染毒HATO 2 000 mg/kg会影响雄性大鼠的体重增长。白兔皮肤刺激未出现红斑、水肿；白兔眼刺激1 h后出现明显刺激症状，24 h后症状加重，随后逐渐减轻，至染毒后第7天，症状全部消失。提示HATO对大鼠经口LD50＞2 000 mg/kg，低毒；对白兔眼部有中度刺激作用，且具有可逆性。     

1-亚硝基-3，5，7-三硝基-1，3，5，7-四氮杂环辛烷急性毒性研究

选用SD大鼠和白兔分别进行1-亚硝基-3，5，7-三硝基-1，3，5，7-四氮杂环辛烷（MNX）急性经口毒性、皮肤及眼刺激试验。结果发现，雄性和雌性大鼠MNX经口LD50分别为316 mg/kg、43 mg/kg；4只白兔皮肤刺激试验评分均为0，但3只染毒24 h后死亡；4只白兔眼刺激试验均出现轻微刺激症状，1只染毒48 h后恢复正常，其余3只死亡。提示MNX对雄性和雌性大鼠急性经口毒性等级分别为中等毒和高毒；对白兔皮肤无刺激性，对眼睛具有可逆性的轻度刺激。     

ERK/AP-1信号通路在亚急性1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿中的作用

目的 探究细胞外信号调节激酶/激活蛋白-1（ERK/AP-1）信号通路在亚急性1，2-二氯乙烷（1，2-DCE）中毒性脑水肿形成中的作用。方法 选取40只健康雌性昆明种小鼠随机分为对照组及3个染毒组；染毒组小鼠于染毒柜中1.2 mg/L 1，2-DCE染毒3.5 h/d，分别染毒1 d、2 d和3 d。染毒结束次日取材，观察脑组织病理切片，测定血清白细胞介素-1β（IL-1β）含量；检测各组小鼠脑组织含水量，MMP-9、Occludin、ERK1/2、p-ERK1/2及AP-1的c-Fos、c-Jun亚基蛋白和mRNA表达水平。结果 染毒2 d和3 d组小鼠出现脑水肿病理改变；与对照组相比，染毒2 d和3 d组小鼠脑组织含水量、MMP-9蛋白和mRNA表达水平上调，Occludin蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；各组ERK1/2蛋白和mRNA表达水平无差别，染毒3 d组小鼠脑组织中p-ERK1/2蛋白、AP-1的c-Fos亚基蛋白和mRNA表达水平及血清IL-1β含量均显著高于对照组（P<0.05）；染毒组AP-1的c-Jun亚基蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05）。结论 1，2-DCE可通过诱导小鼠血液生成IL-1β，激活小鼠脑组织中ERK/AP-1信号通路上调MMP-9蛋白表达，破坏血脑屏障通透性，参与1，2-DCE中毒性脑水肿形成。     

1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯对小鼠精子畸形的影响

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对小鼠精子畸形的影响,将小鼠随机分为6组,分别为阳性对照组、溶剂对照(4%淀粉溶液)组和34.82、69.64、139.29、348.22 mg/kg FOX-7染毒组及阳性对照(40 mg/kg环磷酰胺)组,每组12只。采用灌胃方式进行染毒,每日1次,连续染毒5 d。首次染毒35 d后,观察精子畸形情况。结果显示,与溶剂对照组比较,139.29、348.22 mg/kg FOX-7染毒组小鼠的精子畸形率均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着FOX-7染毒剂量的升高,小鼠的精子畸形率呈上升趋势。提示FOX-7可引起小鼠精子发生畸形。     

1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯对小鼠精原细胞染色体畸变的影响

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对小鼠精原细胞染色体畸变的影响,以348.22 mg/kg、139.29mg/kg、69.64 mg/kg剂量染毒小鼠,同时设阴性对照组(4%淀粉溶液)和阳性对照组(40 mg/kg的环磷酰胺),制备小鼠睾丸精原细胞染色体标本,观察染色体畸变类型和畸变率。结果显示阳性对照组、高剂量染毒组小鼠睾丸精原细胞染色体畸变率显著高于对照组(P0.05),提示高剂量的FOX-7可能会引起小鼠精原细胞染色体畸变。     

1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯对大鼠亚急性经口毒性研究

为研究1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)亚急性经口毒性作用,将40只健康成年SPF级SD大鼠随机分为按体重随机分为4组,分别为对照(4%淀粉溶液)组和35、70、140 mg/kg FOX-7染毒组,每组10只,雌雄各半。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,连续染毒28 d。观察动物的中毒表现,体重、食物利用率、尿常规、血常规、生化指标、主要脏器系数变化及病理学改变。结果显示,与对照组比较,70、140 mg/kg FOX-7染毒组大鼠体重增长及食物利用率均较低(P0.05),140 mg/kg FOX-7染毒组雄性大鼠尿中URO、FRO水平均较高(P0.01);70、140 mg/kg FOX-7染毒组雌性大鼠全血中RBC、HGB、PLT水平均较低(P0.01),血清TBIL、Cr、BUN均较高(P0.01);140 mg/kg FOX-7染毒组大鼠肝脏、脾脏的脏器系数均较高,140 mg/kg FOX-7染毒组雄性大鼠的睾丸系数较低。提示在本试验条件下,FOX-7对大鼠具有亚急性经口毒性作用,能抑制其生长发育,对肝脏、肾脏、脾脏、睾丸及血液有损伤作用。     

大鼠急性经口1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯的毒代动力学研究

建立大鼠血液中1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)的检测方法，将30只健康SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、200和500mg/kgFOX-7染毒组，每组10只。采用一次性经口灌胃方式染毒，染毒容量为ImL/lOOg。于染毒后第0.5、1、2、4、8、12、24h对大鼠进行眼眶后静脉丛采血，使用紫外可见分光光度计检测血中FOX-7浓度。使用PhoenixWinNonlin6.1软件进行血药浓度-时间数据分析与毒代参数计算。大鼠单次灌胃FOX-7200和500mg/kg后，药-时曲线下面积AUC(0-24)分别为(27.01±L94)^g/(h?L)和(29.26±3.31)^^(h-L),AUC(0-?>分别为(42.。1±2.18)阿/(h-L)和(4L51±3.66)Mg/(h?L)；达峰浓度Cmax分别为(1.82±0,12)Mg/ml和(2.33±0,20)阿/ml,达峰时间y.为2h；半衰期知2分别为(10.83±2,77)h和(8.66±3,01)h。本研究为FOX-7毒代动力学模型的完善提供了科学依据。     

CYP2E1在小鼠1,2-二氯乙烷中毒性肝损伤中的作用

目的探讨亚急性1,2-二氯乙烷(1,2-DCE)染毒对小鼠肝微粒体中CYP2E1表达的影响及其在1,2-DCE中毒性肝损伤中的作用。方法 (1)将32只昆明种雌性小鼠随机分为对照组及1,2-DCE低、中和高剂量染毒组,染毒剂量分别为0.225、0.45和0.9 g/m3。采用静式吸入方式对小鼠染毒10 d,末次染毒的次日,处死小鼠,迅速取血和肝组织。对肝组织进行病理学观察,并检测血中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝微粒体中CYP2E1蛋白表达和活性。(2)将60只昆明种雌性小鼠随机分为空白对照组、玉米油对照组、二烯丙基硫化物(DAS)对照组、单纯染毒组及低和高剂量DAS干预组(150和300 mg/kg)。将DAS溶于玉米油中,于1,2-DCE染毒前4 h通过灌胃给予DAS。1,2-DCE染毒时间及检测指标同上。结果 (1)中、高剂量染毒组小鼠肝组织出现不同程度病理性损伤;高剂量染毒组小鼠血清中ALT活性显著高于对照组(P0.05);中、高剂量染毒组小鼠肝微粒体中CYP2E1蛋白表达和活性与对照组相比均显著升高(P0.05)。(2)高剂量DAS干预组小鼠肝细胞病理损伤明显改善,其小鼠血清中ALT活性也显著低于单纯染毒组(P0.05);低、高剂量DAS干预组小鼠肝微粒体中CYP2E1蛋白表达和酶活性均显著低于单纯染毒组(P0.05)。结论 1,2-DCE染毒可明显诱导肝微粒体中CYP2E1蛋白的表达,并导致肝组织损伤,DAS通过抑制CYP2E1蛋白的表达可以减轻1,2-DCE引起的肝损伤。     

3,3-二甲基-2-氧代丁酸的急性毒性效应

摘要:目的 探讨3,3-二甲基-2-氧代丁酸的急性毒性效应。方法 采用急性经口、急性经皮、急性吸入、皮肤刺激/腐蚀、眼刺激/腐蚀、皮肤变态反应等。方法 对3,3-二甲基-2-氧代丁酸的急性毒性效应进行评价。结果 急性经口毒性试验4.640 g/kg BW和2.150 g/kg BW剂量组的雌、雄性动物全部死亡,LD50及95％可信区间为雄性动物1.260 g/kg BW（0.926～1.710）、雌性动物1.100 g/kg BW（0.661～1.830）,分级为低毒级、第4类;急性经皮毒性LD50＞2 000 mg/kg,分级为低毒级、第5类;急性吸入毒性LC50＞2 000 mg/m3,分级为低毒级、第5类;受试物组24 h和48 h的致敏率分别为15.0%和20.0%,致敏强度为Ⅱ级,具有轻度皮肤致敏性;染毒3 min后,24 h观察时家兔皮肤出现液体渗出、皮肤发白、脱落等症状,具有皮肤腐蚀性;眼染毒后前4 d的最高加权总积分均值为110,且d7的加权总积分均值大于80,具有极重度刺激性,分级为8级。结论 3,3-二甲基-2-氧代丁酸具有一定的毒性,尤其表现在皮肤腐蚀和极重度眼刺激性上。在使用过程中,应切实做好防范工作,保障健康安全。     

维生素Ｅ对1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿保护作用的研究

目的探讨维生素E (vitamin E,Vit E)对1,2-二氯乙烷(1,2-dichloroethane,1,2-DCE)中毒性脑水肿的保护作用。方法将雌性昆明种小鼠随机分为空白对照组、Vit E对照组、1,2-DCE单纯染毒组及Vit E低、中和高剂量干预组。连续给予药物灌胃4 d后,采取静式吸入方式染毒3. 5 h/d,持续3 d。结果与空白对照组相比,单纯染毒组小鼠脑组织呈现明显脑水肿病理改变,脑含水量、脑组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及细胞色素P450 2E1 (cytochrome P450 2E1,CYP2E1)蛋白和mRNA表达水平显著升高,脑组织中还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase assay kit,CAT)活性、Occludin蛋白和mRNA及Claudin 5蛋白表达水平显著降低。与单纯染毒组相比,各干预组小鼠的脑含水量、脑组织MDA含量、CYP2E1蛋白和mRNA表达水平显著降低,GSH含量、Occludin蛋白及mRNA水平显著升高;中和高剂量干预组的小鼠脑组织中SOD和CAT活性及Claudin 5蛋白表达水平亦显著升高(P0. 05)。结论单纯1,2-DCE染毒可引起小鼠脑水肿,诱导脑组织中CYP2E1的表达,诱发脑组织氧化损伤,破坏紧密连接蛋白,并抑制Occludin和Claudin 5的表达;而Vit E干预可显著抑制CYP2E1的表达,缓解CYP2E1介导的氧化损伤,有效预防1,2-DCE引起的中毒性脑水肿。     

p38 MAPK/AP-1信号通路在1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿形成中对iNOS表达的上调作用

目的探究p38 MAPK/AP-1信号通路在小鼠1?2-二氯乙烷(1?2-DCE)中毒性脑水肿形成过程中对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的作用及其对脑水肿的影响。方法选取40只雌性昆明种小鼠随机分为对照组、染毒组、低剂量以及高剂量p38抑制剂组。染毒小鼠于染毒柜中1.2 mg/L 1?2-二氯乙烷染毒3.5 h/d,连续染毒3 d,低、高剂量抑制剂组小鼠于染毒前1 h腹腔注射200μl 3.75、15 mg/kg的p38 MAPK抑制剂(SB202190)。染毒结束次日取材,测定各组小鼠脑含水量及HE病理观察脑水肿,Western Blot检测各组小鼠脑组织中磷酸化p38、激活蛋白1(AP-1)两个亚基c-fos、c-jun的磷酸化形式表达水平以及iNOS的蛋白表达,Real-Time RT-PCR检测iNOS mRNA表达水平。结果单纯染毒组的小鼠出现抱爪现象,SB202190干预能够明显改善1?2-DCE中毒小鼠的抱爪症状。染毒组小鼠脑组织含水量与对照组小鼠相比明显增加,SB202190干预能够有效缓解小鼠出现脑水肿。单纯染毒组小鼠脑组织中p-p38蛋白、磷酸化c-jun和c-fos表达水平明显上调,iNOS蛋白和mRNA表达水平也显著增加,而SB202190能够显著降低iNOS、磷酸化c-jun和c-fos的表达水平。结论小鼠脑组织iNOS mRNA和蛋白表达水平在1?2-DCE中毒性脑水肿形成过程中显著上调。p38 MAPK/AP-1信号通路参与iNOS表达增多的调控过程。     

1，1''-二羟基-5，5''-联四唑二羟胺盐的遗传毒性研究

采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验（Ames）、体内哺乳动物骨髓细胞微核及染色体畸变试验、体外哺乳动物细胞染色体畸变试验方法进行1，1’-二羟基-5，5’-联四唑二羟胺盐（HATO）的遗传毒性研究。HATO在加与不加S9混合液时，各剂量组对各试验菌株回变菌落数均未超过溶剂对照组的2倍，亦无剂量-反应关系；各剂量染毒组均未引起小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率增加和染色体畸变。HATO对中国仓鼠肺细胞（CHL）有一定的毒性作用，但各剂量染毒组均未致CHL细胞染色体畸变。提示在本试验条件下HATO不具有遗传毒性。     

3-氯-1，2-丙二醇毒性研究进展

氯代甘油醇（化学名3-氯-1，2-丙二醇）作为重要的化工原料和杀菌剂存在于生产和生活中，对人体健康具有潜在危害。近年来因其在食品中的污染问题而受到普遍关注。为全面了解3-氯-1，2-丙二醇的毒性，本文对其来源、代谢动力学、毒性和毒作用特征以及对肾脏、生殖、神经、血液、免疫系统的影响和遗传毒性等方面进行综述。     

2-（2H-1，2，3-苯并三氮唑-2-基）-4-甲基-6-（2-甲基丙烯-2-基）苯酚的生殖和发育毒性试验研究

目的对2-（2H-1,2,3-苯并三氮唑-2-基）-4-甲基-6-（2-甲基丙烯-2-基）苯酚（1）的生殖发育毒性进行研究,为进一步风险评价提供依据。方法采用《化学品测试方法》（国家环保总局）中生殖和发育毒性筛选试验方法对化学物1进行生殖发育毒性试验研究。SPF级健康昆明种小鼠120只（雌、雄各60只）,动物适应性饲养5 d后进行试验,按照0、146、292、584 mg/kg剂量经口灌胃染毒2周后,雄、雌（1：1）单笼交配,雌鼠阴栓阳性日为妊娠0 d,持续染毒至产后4 d;雄鼠交配后持续染毒2周。称量记录体重、进食量、身长、尾长、性别比,计算繁殖指数;称量生殖器官重量并进行病理组织学检查。结果584 mg/kg剂量组雄性小鼠第5、6周体重、第6周进食量均低于对照组;雌性小鼠子宫重量和子宫/体重比值均低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;仔鼠第0天体重、身长、尾长均低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。292 mg/kg剂量组雄性小鼠睾丸重量低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。雌性小鼠妊娠后第2周进食量低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。146 mg/kg剂量组雌性小鼠妊娠第2周进食量低于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论化学物1对昆明种小鼠生殖发育毒性的NOAEL雌雄均为146 mg/kg。     

1，2-二氯乙烷生物标志的研究

[目的]探讨1,2-二氯乙烷在尿中的代谢产物作为生物标志物,为预防1,2-二氯乙烷职业中毒提供依据。[方法]将SD大鼠分为染毒组和对照组,每组2只。用1,2-二氯乙烷对大鼠作灌胃染毒,然后收集尿样,经酸化、蒸发及甲酯化处理后用气相色谱-质谱（GC-MS）分析。[结果]在染毒大鼠的尿样中检出6种化合物：硫撑双乙酸二甲酯、2-甲硫基乙酸甲酯、磷酸三甲酯、2-甲氧基．2-戊烯二酸二甲酯、柠檬酸三甲酯和3,4-二甲氧基苯丙酸甲酯。其中硫撑双乙酸二甲酯和柠檬酸三甲酯的色谱信号较高,硫撵双乙酸已有文献报道是1,2．二氯乙烷代谢产物。[结论]硫撑双乙酸二甲酯作为接触1,2-二氯乙烷的生物标志物,值得进一步研究。柠檬酸三甲酯异常增高,可能与阻断三羧酸循环有关,有可能可作为1,2-二氯乙烷中毒的初步排查标志。     

CYP2E1在1,2-二氯乙烷致肝氧化损伤中的作用

分别将昆明种小鼠分成对照组、1,2-DCE染毒组和二烯丙基硫化物(DAS)干预组,检测肝组织中CYP2E1活性和蛋白表达、MDA和GSH含量及SOD活性。与对照组相比,1,2-DCE染毒组肝组织中CYP2E1活性和蛋白表达及MDA含量显著升高,GSH含量及SOD活性显著降低。与单纯染毒组相比,DAS干预组肝组织中CYP2E1活性和蛋白表达及MDA含量显著降低,GSH含量和SOD活性显著升高。说明1,2-DCE可诱导CYP2E1表达,导致肝组织出现氧化损伤。