1，1''-二羟基-5，5''-联四唑二羟胺盐的急性毒性研究

选用30只大鼠和8只白兔分别进行1，1’-二羟基-5，5’-联四唑二羟胺盐（HATO）急性经口毒性、皮肤刺激和眼刺激试验。结果显示，经口染毒HATO 2 000 mg/kg会影响雄性大鼠的体重增长。白兔皮肤刺激未出现红斑、水肿；白兔眼刺激1 h后出现明显刺激症状，24 h后症状加重，随后逐渐减轻，至染毒后第7天，症状全部消失。提示HATO对大鼠经口LD50＞2 000 mg/kg，低毒；对白兔眼部有中度刺激作用，且具有可逆性。     

1，1-二氨基2，2-二硝基乙烯对哺乳动物细胞致突变性研究

在非代谢活化（-S9）和代谢活化（+S9）条件下，以1，1-二氨基-2，2-二硝基乙烯（FOX-7）处理小鼠淋巴瘤L5178Y细胞和中国仓鼠肺CHL细胞，进行体外哺乳动物细胞TK基因突变试验和染色体畸变试验。结果显示，分别以500、250、125 μg/ml浓度的FOX-7处理L5178Y细胞，各剂量组突变频率与溶剂对照组相比，差异有统计学意义（P<0.05），且具有剂量相关性；分别以300、200、100 μg/ml浓度FOX-7处理CHL细胞，各剂量组染色体畸变细胞率与溶剂对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。提示FOX-7可能对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因具有致突变性，对中国仓鼠肺CHL细胞染色体无致突变性。     

1,2,4-三唑-5-酮的遗传毒性研究

为探讨1,2,4-三唑-5-酮(TO)的遗传毒性,采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验(Ames试验),计算回复突变菌落数;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,计算小鼠股骨骨髓细胞微核率;中国仓鼠肺细胞(CHL)体外染色体畸变试验,观察染色体结构畸变类型并计算畸变率。结果显示,TO对TA97a、TA98、TA100、TA102和TA1535 5种鼠伤寒沙门菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞染色体无致畸作用,也无诱发骨髓嗜多染红细胞微核形成的作用,TO不具有潜在的遗传毒性。     

1,1’-二羟基-5,5’-联四唑二羟胺盐对大鼠的致畸性研究

选取150只SPF级SD大鼠,雌性100只、雄性50只进行致畸试验,雌、雄大鼠按1∶1比例合笼,试验分为阳性对照组(阿司匹林260 mg/kg)、溶剂对照组(4%淀粉溶液)和1,1’-二羟基-5,5’-联四唑二羟胺盐(HATO)3个染毒剂量(15.60、31.25、62.50 mg/kg)组。结果显示,与溶剂对照组比较,阳性对照组活胎数、吸收胎数、胎盘重量、子宫连窝重量、胎仔体重、身长和肛门生殖结节间距差异均有统计学意义(P0.01,P0.05),表明试验系统稳定可靠。低、中、高染毒剂量组的内脏畸形率分别为1.98%、0.78%、2.78%,骨骼畸形率分别为3.96%、3.91%、9.26%。     

3,4-双(4’-氨基呋咱基-3’)氧化呋咱对小鼠骨髓细胞微核和染色体的影响

为探讨3,4-双(4’-氨基呋咱基-3’)氧化呋咱(DATF)对小鼠骨髓细胞的遗传毒性,将健康SPF级昆明小鼠按体重随机分为5组,分别为0(阴性对照)、67.5、135、270 mg/kg DATF染毒组和阳性对照[40 mg/kg环磷酰胺(CP)]组,每组10只,雌雄各半。采用小鼠骨髓嗜多染细胞微核试验检测微核率和嗜多染红细胞与正染红细胞(PCE/NCE)的比值,采用骨髓细胞染色体畸变试验检测染色体畸变率。结果显示,各剂量DATF染毒组与阴性对照组小鼠体重和骨髓PCE微核率、PCE/NCE值和染色体畸变率间比较,差异均无统计学意义。提示在本实验剂量范围内,DATF对小鼠骨髓细胞无致突变和致畸变效应。     

1-亚硝基-3，5，7-三硝基-1，3，5，7-四氮杂环辛烷急性毒性研究

选用SD大鼠和白兔分别进行1-亚硝基-3，5，7-三硝基-1，3，5，7-四氮杂环辛烷（MNX）急性经口毒性、皮肤及眼刺激试验。结果发现，雄性和雌性大鼠MNX经口LD50分别为316 mg/kg、43 mg/kg；4只白兔皮肤刺激试验评分均为0，但3只染毒24 h后死亡；4只白兔眼刺激试验均出现轻微刺激症状，1只染毒48 h后恢复正常，其余3只死亡。提示MNX对雄性和雌性大鼠急性经口毒性等级分别为中等毒和高毒；对白兔皮肤无刺激性，对眼睛具有可逆性的轻度刺激。     

无患子皂苷遗传毒性的研究

目的：评价无患子皂苷的急性毒性和遗传毒性,为无患子皂苷的日常应用提供毒理学依据。方法通过急性经口毒性试验、哺乳动物红细胞微核试验、细菌回复突变试验和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验,检测无患子皂苷对原核生物和真核生物在基因水平和染色体水平的诱变性。结果无患子皂苷的雌雄小鼠急性经口毒性LD50均为4640 mg/kg,可见流涎和黏液便等中毒体征。小鼠骨髓细胞微核试验各剂量组与阴性对照组比较,差异均无统计学意义（ P〉0.05）;Ames试验在加或不加S9各剂量组及菌株条件下的回变菌落数均未超过自发回变菌落数（阴性对照）的2倍以上,未观察到剂量-效应关系;染色体畸变试验无患子皂苷对CHL的IC50为75μg/mL,各剂量组与阴性对照组比较,差异均无统计学意义（ P〉0.05）。在上述各试验中,阳性对照组与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（ P〈0.01）。结论在本实验条件下,无患子皂苷不具有遗传毒性。     

避蚊胺致突变作用研究

目的 研究避蚊胺的致突变作用。方法 Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、大鼠骨髓细胞染色体畸变试验。结果 避蚊胺各剂量组在加或不加体外代谢活化系统（S9）的条件下,各菌株的每剂量平均回变菌落数（R＋）／自发回变菌落数（Rc)的比值（MR）小于2。各剂量组微核率与阴性对照组比较差别均无统计学意义（P＞0．05）各剂量组骨髓细胞染色体畸变细胞率与阴性对照组比较差别均无统计学意义（P＞0．1－0．75）。结论 在本实验条件下,避蚊胺对鼠伤寒沙门氏杆菌TA97、TA98、TA100、TA102 4个菌株未呈现遗传毒性,对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和大鼠骨髓细胞染色体结构畸变率均无影响。     

四乙酰基二苄基六氮杂异伍兹烷的致突变性研究

采用鼠伤寒沙门杆菌回复突变试验(Ames)、体内哺乳动物骨髓细胞嗜多染红细胞微核试验及染色体畸变试验方法进行四乙酰基二苄基六氮杂异伍兹烷(TADB)致突变性研究。在Ames试验中,TADB在加与不加S9时各剂量组对鼠伤寒沙门氏菌TA97a、TA98、TA100、TA102试验菌株回变菌落数均未超过溶剂对照菌落数2倍,亦无剂量-反应关系;TADB均未引起小鼠骨髓细胞染色体畸变和嗜多染红细胞微核率增加。提示在本试验条件下TADB不具有致突变作用。     

生川乌提取物遗传毒性研究

[目的]选用目前新药遗传毒性评价中推荐使用的3种试验方法(小鼠骨髓微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、体外CHL细胞染色体畸变试验)研究生川乌的遗传毒性.[方法]小鼠骨髓微核试验设3个生川鸟提取物给药剂量组(26.0、13.0、6.5 g生药/kg)、阴性对照组和阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg).Ames试验选用两种方法:直接法和代谢活化法.试验菌株为鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535,生川乌提取物在试验中设6个剂量组(5.000、2.500、11250、0.625、0.313、0.156 mg生药/皿),同时设自发回复突变对照组、阳性对照组.体外CHL细胞染色体畸变试验也选用两种方法:直接法和代谢活化法.试验设5个生川乌提取物浓度组(5.000、2.500、1.250、0.625、0.313 mg生药/ml),阴性对照及阳性对照组.[结果]小鼠骨髓微核试验生川乌提取物各剂量组小鼠骨髓多染红细胞微核率与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).Ames试验生川乌提取物在加或不加肝微粒体酶(S9)时均未见引起TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535试验菌株基因突变,即Ames试验阴性,试验重复一次,所得结论相同.体外CHL细胞染色体畸变试验生川乌提取物在加或不加S9时均未引起CHL细胞的染色体畸变,试验结果为阴性,试验重复1次,所得结论相同.[结论]在本实验室条件下,生川乌提取物在小鼠骨髓微核试验、Ames试验及体外CHL细胞染色体畸变试验中均为阴性结果,故认为在本实验条件下,生川乌提取物无遗传毒性.     

苯并[a]芘的细胞毒性及诱导IL-1β和IL-8表达作用研究

目的 探讨不同浓度苯并[a]芘（BaP）对人肺癌（淋巴结转移）NCI-H292的细胞毒性及其对NCI-H292细胞炎性因子分泌的影响。方法 取对数期生长的NCI-H292细胞，分别以不同剂量BaP（0、4、8、16和32 μmol/L） 染毒24、48和72 h后，采用实时无标记细胞分析系统（RTCA）法检测细胞存活率，ELISA法检测细胞内白介素-1β（IL-1β）和白介素-8（IL-8）水平。本实验按照5×3析因设计。结果 与对照组相比，各剂量BaP染毒组在24、48和72 h时间点细胞存活率均显著降低（P<0.001），细胞存活率与染毒剂量之间呈高度负相关关系（r1=-0.986、-0.974和-0.993，P<0.01）；与同剂量组24 h时比较，各实验组在染毒48 h和72 h细胞存活率均显著升高（P<0.001）， 细胞存活率与染毒时间之间呈高度正相关关系（r2=0.958、0.996、0.994、0.999和1.000，P<0.01）。NCI-H292细胞内IL-1β水平在染毒剂量和染毒时间上有交互效应（P<0.001），在48 h和72 h时BaP高剂量（8~32 μmol/L）染毒组IL-1β水平均呈随着染毒剂量升高而降低（P<0.01），72 h时低剂量BaP染毒组IL-1β水平则呈随着染毒剂量升高而升高的剂量-效应关系（P<0.01）；同时，各实验组细胞IL-1β水平在24、48和72 h均呈随着染毒时间增加而上升的时间-效应关系（P<0.01）。NCI-H292细胞内IL-8水平在染毒剂量和染毒时间上有交互效应（P<0.01）： 在染毒72 h，BaP染毒剂量为0~16 μmol/L时IL-8水平呈随着染毒剂量升高而升高的剂量-效应关系（P<0.01）；4、8 μmol/L染毒组细胞IL-8水平在24、48和72 h呈随着染毒时间增加而上升的时间-效应关系（P<0.01）。结论 BaP染毒可引起NCI-H292细胞的存活率下降，且随着染毒剂量增加毒性作用增强；BaP可刺激NCI-H292细胞分泌IL-1β和IL-8，其可能在BaP致肺肿瘤炎症过程中发挥重要作用。     

盐附子遗传毒性研究

[目的]选用目前新药遗传毒性评价中推荐使用的3种试验方法(小鼠骨髓微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验、体外CHL细胞染色体畸变试验)研究盐附子的遗传毒性. [方法]小鼠骨髓微核试验设3个盐附子给药剂量组(15.45、7.73、3.86 g生药/kg)、阴性对照组和阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg).Ames试验选用两种方法:直接法和代谢活化法.试验菌株为鼠伤寒沙门氏组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535,盐附子在试验中设6个剂量组(5.000、2.500、1.250、0.625、0313、0.156 mg生药/皿),同时设自发回复突变对照组、阳性对照组.体外CHL细胞染色体畸变试验也选用两种方法:直接法和代谢活化法.盐附子不加S9时处理终浓度为5、2.5、1.25、0.625、0.313 mg生药/ml,加S9时处理终浓度为2.5、1.25、0.625、0.313、0.156 mg生药/ml. [结果]小鼠骨髓微核试验盐附子各剂量组小鼠骨髓多染红细胞微核率与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).Ames试验盐附子在加或不加肝微粒体酶(S9)时均未见引起TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535试验菌株基因突变,即Ames试验阴性,试验重复一次,所得结论相同.体外CHL细胞染色体畸变试验盐附子在加或不加S9时均未引起CHL细胞的染色体畸变,试验结果为阴性,试验重复一次,所得结果相同.[结论]在实验室条件下,盐附子在小鼠骨髓微核试验、Ames试验及体外CHL细胞染色体畸变试验中均为阴性结果,故认为盐附子无遗传毒性.     

小鼠急性经口暴露1，1-二氨基-2，2-二硝基乙烯的组织分布及代谢特征

为研究小鼠急性经口暴露1，1-二氨基-2，2-二硝基乙烯（FOX-7）的组织分布及代谢特征，将18只KM小鼠随机分为空白组和140、350 mg/kg FOX-7染毒组，单次经口灌胃染毒，采用生物发光成像技术分析发现，FOX-7于小鼠肾脏蓄积约4 h后经肾脏代谢，并较为清晰地展示出小鼠急性经口暴露FOX-7后的组织分布及代谢数据。     

玻璃酸钠中间体遗传毒性试验

目的研究玻璃酸钠中间体的遗传毒性。方法采用鼠伤寒沙门菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验)、微核试验、染色体畸变试验研究玻璃酸钠中间体的遗传毒性。结果 (1)Ames试验:在加与不加大鼠肝微粒体酶(S-9)条件下,玻璃酸钠中间体在0.8~500μg/皿剂量范围内,各菌株回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系。受试物未引起TA97、TA98、TA100和TA102试验菌株基因突变,Ames试验阴性。(2)微核试验:玻璃酸钠中间体各剂量组(67、134、268mg/kg)所诱发的微核率分别为1.7‰、1.7‰和1.9‰,与阴性对照组(1.7‰)比较差异无显著性,说明在该试验条件下,该样品无致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核作用,小鼠骨髓微核试验呈阴性。(3)中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验:在加与不加S-9两种条件下,并于24 h后收集细胞进行染色体畸变分析,发现玻璃酸钠中间体各剂量组的染色体畸变率与阴性对照组相比差异无显著性。结论本试验条件下,玻璃酸钠中间体Ames试验结果为阴性,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性,无细胞毒性作用,体外哺乳动物细胞染色体畸变试验结果为阴性。     

槲皮素在体外哺乳动物细胞中遗传毒性研究

目的研究槲皮素对体外哺乳动物的细胞遗传毒性。方法采用80、40、20、10、5 mg/L5个剂量组的槲皮素在有或无代谢活化条件下处理体外培养的中国地鼠肺成纤维细胞（CHL）3 h后更换新鲜培养液,恢复生长21 h后收获细胞制片,观察槲皮素对哺乳动物细胞染色体的影响。采用200、100、50、25和12.5 mg/L 5个剂量组的槲皮素在有或无代谢活化条件下处理中国仓鼠肺成纤维细胞（V79）3 h后,经过7 d的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT）突变基因表达和7 d突变基因选择后计数集落形成率并计突变频率,观察槲皮素对哺乳动物HGPRT基因位点的影响。结果在有或无代谢活化条件下槲皮素在浓度〉10 mg/L均能够诱导CHL细胞染色体断裂和交换等,染色体细胞畸变率显著增加（P〈0.01）;而在有或无代谢活化与溶剂对照组相比较槲皮素各剂量组均未发生基因突变频率显著增加（P〉0.05）。结论在体外试验条件下,槲皮素对哺乳动物细胞显示出明显致突变性,存在潜在的遗传毒性。     

重组葡激酶致突变作用研究

目的研究重组葡激酶的致突变作用.方法CHL细胞染色体畸变试验(±S9),剂量为4125、8250、16500AU/ml、Ames试验(±S9),剂量为16.5、165、1650、16500、165000AU/ml)和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验(肌肉注射剂量为83.5、167.0、334.0mg/kg).结果CHL细胞染色体畸变率均小于5%;各剂量组TA97、TA98、TA100、TA102各试验菌株MR＜2;各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均小于2.00‰.结论重组葡激酶在本试验条件下无致突变作用.     

1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯对小鼠精原细胞染色体畸变的影响

为评价1,1-二氨基-2,2-二硝基乙烯(FOX-7)对小鼠精原细胞染色体畸变的影响,以348.22 mg/kg、139.29mg/kg、69.64 mg/kg剂量染毒小鼠,同时设阴性对照组(4%淀粉溶液)和阳性对照组(40 mg/kg的环磷酰胺),制备小鼠睾丸精原细胞染色体标本,观察染色体畸变类型和畸变率。结果显示阳性对照组、高剂量染毒组小鼠睾丸精原细胞染色体畸变率显著高于对照组(P0.05),提示高剂量的FOX-7可能会引起小鼠精原细胞染色体畸变。     

10种市售染发剂的安全性评价

目的研究市售染发剂的使用安全性现状,探讨使用染发剂对健康的可能效应与不良影响。方法采用眼刺激试验、Ames试验、体外细胞染色体畸变试验等方法检测10种从市场抽检的染发剂对兔和体外测试系统的影响。结果10种染发剂所含的染料中间体均较低,对实验兔染毒30s后冲洗试验呈现眼刺激性或腐蚀性,但4s后冲洗试验均呈轻刺激性或微刺激性;在Ames试验中,10种染发剂对TA97、TA98、TA100、TA102鼠伤寒沙门菌菌株的各染毒剂量组均呈现阴性反应,各种染发剂无细胞毒性时的最高染毒剂量为2000μg/皿或1500μg/皿,最低染毒剂量为125μg/皿;在中国仓鼠CHL细胞株体外细胞染色体畸变试验中,各种染发剂无细胞毒性时的最高染毒剂量为2500μg/ml至156μg/ml,最低染毒剂量为78μg/ml到19.5μg/ml,染色体畸变细胞率最高为7.5%(+S9)及5%(-S9),与对照相比差异均无统计学意义。结论目前市售的染发剂具有一定眼刺激性,但无明显遗传毒性作用;其对基因突变与染色体畸变的作用力较文献报道的同类产品低,可能与现在染发剂中染料中间体的含量减少有关。     

ERK/AP-1信号通路在亚急性1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿中的作用

目的 探究细胞外信号调节激酶/激活蛋白-1（ERK/AP-1）信号通路在亚急性1，2-二氯乙烷（1，2-DCE）中毒性脑水肿形成中的作用。方法 选取40只健康雌性昆明种小鼠随机分为对照组及3个染毒组；染毒组小鼠于染毒柜中1.2 mg/L 1，2-DCE染毒3.5 h/d，分别染毒1 d、2 d和3 d。染毒结束次日取材，观察脑组织病理切片，测定血清白细胞介素-1β（IL-1β）含量；检测各组小鼠脑组织含水量，MMP-9、Occludin、ERK1/2、p-ERK1/2及AP-1的c-Fos、c-Jun亚基蛋白和mRNA表达水平。结果 染毒2 d和3 d组小鼠出现脑水肿病理改变；与对照组相比，染毒2 d和3 d组小鼠脑组织含水量、MMP-9蛋白和mRNA表达水平上调，Occludin蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；各组ERK1/2蛋白和mRNA表达水平无差别，染毒3 d组小鼠脑组织中p-ERK1/2蛋白、AP-1的c-Fos亚基蛋白和mRNA表达水平及血清IL-1β含量均显著高于对照组（P<0.05）；染毒组AP-1的c-Jun亚基蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05）。结论 1，2-DCE可通过诱导小鼠血液生成IL-1β，激活小鼠脑组织中ERK/AP-1信号通路上调MMP-9蛋白表达，破坏血脑屏障通透性，参与1，2-DCE中毒性脑水肿形成。     

新药轻灵一盐酸西部曲明的诱变性研究

目的：为确保国家二类新药‘轻灵-盐酸西部曲明’临床用药的安全性，对其作出可靠的毒理学评价。方法：采用Ames试验、体外染色体畸变分析试验和微核试验对其进行了体内外诱变性研究。Ames试验中，采用TA97、TA98、TA100、TA102四种菌株，平板掺入法，4个剂量进行了加与不加S9的试验；体外染色体畸变分析试验中，采用CHL细胞系，设4个剂量，进行加与不加S9的试验；在小鼠体内骨髓细胞微核试验中，采用80、27和9mg/kg剂量。结果：Ames试验加与不加S9的试验均末发现回变菌落数增加；体外染色体畸变分析试验各剂量组的染色体畸变率均末超过5％；小鼠体内骨髓细胞微核试验未发现骨髓细胞微核率增加。结论：在本试验条件下，末发现轻灵-盐酸西部曲明有诱变性。