交泰丸交通心肾治疗失眠作用机理研究

目的：观察交泰丸及不同拆方对HPA轴调节因子及相关中枢神经递质的影响。方法：将交泰丸分为泻心组（单用黄连）、补肾组（单用肉桂）及交通心肾组（交泰丸）,观察各实验组对PCPA大鼠模型失眠状态、HPA轴调节因子C1LH、ATCH、COKT及下丘脑相关神经递质5-HT、NE的影响,采用高效液相一库伦阵列电化学检测及放免法检测。结果：PCPA失眠模型大鼠HPA轴呈亢奋状态,下丘脑5-HT含量显著降低,NE的含量有所升高。交泰丸可以通过抑制HPA轴,明显增加失眠大鼠下丘脑5-HT的含量,降低NE的含量。结论：交泰丸是通过调节HPA抽达到交通心肾治疗失眠的目的。     

交泰丸交通心肾治疗失眠作用机理研究

目的:观察交泰丸及不同拆方对HPA轴调节因子及相关中枢神经递质的影响。方法:将交泰丸分为泻心组(单用黄连)、补肾组(单用肉桂)及交通心肾组(交泰丸),观察各实验组对PCPA大鼠模型失眠状态、HPA轴调节因子CRH、ATCH、CORT及下丘脑相关神经递质5-HT、NE的影响,采用高效液相-库伦阵列电化学检测及放免法检测。结果:PCPA失眠模型大鼠HPA轴呈亢奋状态,下丘脑5-HT含量显著降低,NE的含量有所升高。交泰丸可以通过抑制HPA轴,明显增加失眠大鼠下丘脑5-HT的含量,降低NE的含量。结论:交泰丸是通过调节HPA轴达到交通心肾治疗失眠的目的。     

睡眠剥夺对大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的影响

目的观察睡眠剥夺对大鼠脑组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLU)含量的影响。方法用小平台水环境法对大鼠进行连续96 h快速动眼相睡眠剥夺,以正常饲养组及大平台组为对照,高效液相色谱法测定睡眠剥夺后大鼠额叶皮质、脑干、下丘脑等脑区GABA、GLU含量的变化。结果睡眠剥夺后大鼠各脑区脑组织GABA含量、GABA/GLU值均较对照组明显增高(P<0.01),而GLU含量在脑干、下丘脑两脑区亦较对照组明显增高(P<0.05)。结论睡眠剥夺可伴有大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量及比例的变化。     

交泰丸对睡眠剥夺小鼠视交叉上核生物钟基因Clock及Bmal 1表达的影响

目的观察交泰丸对睡眠剥夺小鼠视交叉上核(SCN)中生物钟基因Clock和Bmal 1表达的影响,探讨交泰丸改善睡眠的可能机制。方法将小鼠随机分为空白组、模型组、百乐眠组和交泰丸组。除空白组外,其他各组腹腔注射氯苯丙氨酸(PCPA)以制备睡眠剥夺模型。用自主活动测试仪记录小鼠自主活动时间,ELISA检测血清中5-HT、Glu、DA、GABA的表达水平,Real time-PCR和免疫组化检测SCN中Clock和Bmal 1的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠活动时间显著增加(0.01);与模型组比较,百乐眠组和交泰丸组小鼠活动时间有不同程度减少(0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清中GABA、5-HT含量降低(0.01),Glu含量升高(0.01);与模型组比较,百乐眠组和交泰丸组小鼠血清中GABA、5-HT含量升高(0.01,0.05),Glu含量降低(0.05);各组小鼠血清中DA含量变化不明显,差异没有统计学意义(0.05)。与空白组比较,模型组小鼠SCN中Clock、Bmal1的基因和蛋白表达水平升高(0.01);与模型组比较,百乐眠组和交泰丸组小鼠SCN中Clock、Bmal1的基因和蛋白表达下降(0.01,0.05)。结论交泰丸具有改善睡眠的作用,其机制可能与交泰丸调节小鼠SCN中Clock和Bmal 1的表达有关。     

REM睡眠剥夺后大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量的变化

目的:观察睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对大鼠脑组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(GLU)含量的影响。方法:用小平台水环境法(flower pot technique)对大鼠进行连续96h快速动眼相(rapid eye movement,REM)睡眠剥夺,以正常饲养组及大平台组为对照,高效液相色谱法测定睡眠剥夺后大鼠额叶皮质、脑干、下丘脑等脑区GABA、GLU含量的变化。结果:睡眠剥夺后大鼠各脑区脑组织GABA含量。GABA/GLU值均较对照组明显增高(P<0.01),而GLU含量在脑干、下丘脑两脑区亦较对照组明显增高(P<0.05)。结论:睡眠剥夺导致大鼠脑组织氨基酸类神经递质含量及比例的改变,是睡眠剥夺过程的神经生物学机制之一。     

宁心安神方调控失眠大鼠Glu/GABA-Gln代谢环路失衡的机制研究

目的研究宁心安神方对失眠的治疗作用及对失眠大鼠谷氨酸(Glu)/γ-氨基丁酸(GABA)-谷氨酰胺(Gln)代谢环路的调控机制。方法采用改良多平台水环境睡眠剥夺法建立失眠模型。将大鼠随机分为正常对照组,模型组,地西泮组,宁心安神方低、中、高剂量组。观察大鼠一般情况,利用戊巴比妥钠睡眠协同实验观察大鼠的睡眠潜伏时间和睡眠持续时间,进行模型评价及宁心安神方治疗失眠的疗效评价。高效液相色谱法检测脑干、下丘脑内神经递质Glu、GABA的含量。利用Western blot法对脑干、下丘脑内谷氨酸脱羧酶(GAD)、星形胶质细胞谷氨酰胺合成酶(GS)的表达水平进行测定。结果宁心安神方中、高剂量可以明显缩短失眠大鼠睡眠潜伏时间、延长睡眠持续时间,提高脑干、下丘脑GABA水平,降低Glu/GABA的比值;宁心安神方各剂量均可明显升高脑干GAD表达和下丘脑中GS的表达。结论宁心安神方的镇静催眠作用可能是通过调控Glu/GABA-Gln代谢环路,影响Glu、GABA的合成和分解,进而改善Glu/GABA的兴奋/抑制代谢失衡而实现的。     

酸枣仁总皂苷对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织Glu及GABA含量的影响

目的 观察酸枣仁总皂苷对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响.方法 用D-半乳糖致衰老、环磷酰胺及氢化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠,制作老年阴血亏虚型失眠证候大鼠复合模型,采用高效液相色谱法检测环境对照组、证候模型组和酸枣仁总皂苷大、小剂量组大鼠大脑皮层及下丘脑Glu及GABA含量的变化.结果 与环境对照组比较,证候模型组睡眠剥夺48h后,大鼠大脑皮层及下丘脑Glu及GABA含量均明显升高,且Glu/GABA比例增高,经酸枣仁总皂苷干预后Glu和GABA均明显下降(P<0.01,P<0.05),且趋于正常范围.结论 酸枣仁总皂苷能减少老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑内兴奋性氨基酸毒性作用,减轻Glu、GABA参与的迟发性神经元损害.     

安神方对失眠大鼠中枢氨基酸类神经递质的影响

目的 研究安神方颗粒对失眠造模大鼠中枢神经递质的影响.方法 60只Wistar大鼠随机方法分为中药高、中、低剂量组和生理盐水组4组;采用限制运动方法制备大鼠焦虑抑郁失眠模型,同时给予药物干预.15 d后,处死并冰台上分离大鼠海马及下丘脑,冷冻离心后分离上清液,高效液相色谱法测定谷氨酸(GLU),γ-氨基丁酸(GABA)含量.结果 海马及下丘脑GLU含量下降(P<0.05,P<0.01),GABA含量升高(P<0.05,P<0.01);且海马部神经递质含量变化与药物浓度成正相关性.结论 中药安神方颗粒可以通过调节中枢神经递质,如谷氨酸(GLU)和γ-氨基丁酸(GABA),从而达到治疗失眠症目的 .     

唑吡坦对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠神经递质及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴相关激素的影响

目的探究唑吡坦对慢性睡眠剥夺老年失眠大鼠神经递质及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴（HPA）相关激素的影响。方法将60只32周龄SD大鼠随机分为环境对照组、模型组、唑吡坦低、中、高剂量组（0.52、1.05、2.10mg/kg）和阳性药组（艾司唑仑0.50mg/kg）。除环境对照组外,其余大鼠均建立慢性睡眠剥夺失眠模型,干预14d并记录大鼠体质量变化和睡眠状况,比较大鼠脑系数;旷场实验和Morris水迷宫实验测试大鼠行为学变化,ELISA法检测下丘脑神经递质[多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）]水平以及血清下HPA相关激素[肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT）]水平,Westernblot法检测大鼠下丘脑A型γ-氨基丁酸受体（GABAAR）、5-HT1A受体（5-HT1AR）蛋白表达水平。结果环境对照组大鼠体质量呈逐渐升高趋势,其余各组呈先降低后升高趋势,治疗后唑吡坦中、高剂量和阳性药组大鼠体质量均高于模型组（均P＜0.05）。与环境对照组比较,模型组大鼠脑系数降低（P＜0.05）,5min内运动距离和中央运动时间升高（P＜0.05）,90s内逃避潜伏期延长（P＜0.05）,原平台象限停留次数、停留时间减少（P＜0.05）,血清CRH、ACTH、CORT水平升高（P＜0.05）,下丘脑DA、NE水平升高（P＜0.05）,5-HT水平降低（P＜0.05）,GABAAR、5-HT1AR蛋白相对表达水平降低（P＜0.05）;与模型组比较,唑吡坦中、高剂量和阳性药组大鼠脑系数升高（均P＜0.05）,5min内运动距离和中央运动时间降低（P＜0.05）,90s内逃避潜伏期缩短（P＜0.05）,原平台象限停留次数、停留时间增加（P＜0.05）,血清CRH、ACTH、CORT水平降低（P＜0.05）,下丘脑DA、NE水平降低（P＜0.05）,5-HT水平升高（P＜0.05）,GABAAR、5-HT1AR蛋白相对表达水平升高（P＜0.05）。结论唑吡坦可提高老年慢性睡眠剥夺失眠大鼠学习和记忆能力,改善睡眠,与调节下丘脑神经递质紊乱和血清HPA相关激素水平相关。     

针刺五脏俞调五脏神针法对失眠大鼠脑内抑制性递质GABA及GABAA的含量影响

目的：研究针刺五脏俞调五脏神针法对失眠大鼠脑内抑制性递质GABA及GABAA含量的影响。方法：采用对氯苯丙氨酸（PCPA）腹腔注射的方法制备大鼠失眠动物模型,将大鼠随机分成4组：空白组、模型组、安定组、针刺组。采用酶联免疫法检测下丘脑内抑制性递质GABA和GABAA的含量。结果：该针法可明显增加PCPA所致失眠大鼠下丘脑内抑制性递质GABA及GABAA的含量。结论：针刺五脏俞调五脏神针法可以增加深慢波睡眠量,从而治疗失眠证。     

甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证

目的 甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异.方法 分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)对5～6月龄小型猪共感染,小型猪经复方氯胺酮0.1 mL/kg麻醉后进行滴鼻感染,感染后第5天安乐死动物,取动物肺组织作病毒测序分析.结果 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2)共感染后,A/California/7/2009病毒PB1基因993位G→A突变,PA基因1659位G→A突变,没有氨基酸的变异.A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后A/California/7/2009病毒PB2基因1711位T→C突变.碱基的突变未引起氨基酸的变异.结论 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后在猪的体内没有发生病毒重组、变异.     

胰腺细胞缩胆囊素和胆碱能受体对细胞内Ca~2 的调节

本文使用Fura-2做为细胞内钙离子荧光指示剂,在大白鼠胰腺分离细胞观察缩胆囊素和乙酰胆碱对细胞内钙离子的影响及其相互作用.结果表明1nmol/L缩胆囊素和lmmol/L乙酰胆碱分别使细胞内钙离子浓度从基础水平的122±8nmol/L增高至360±32nmol/L和380±20nmol/L,半最大有效浓度分别为0.45nmol/L及54μmol/L。不同剂量的缩胆囊素和乙酰胆碱彼此不同程度抑制对方的作用,后加入的试剂提高细胞内钙离子浓度的幅度与先加入的试剂所引起的增加幅度成反比,加入各自相应的受体拮抗剂可使细胞恢复对另一激素(蛙皮素)刺激的反应。说明了缩胆囊素受体和胆碱能受体的相互调节影响细胞内钙离子的活动.加入受体拮抗剂后,细胞恢复反应过程中的时间动力学改变可能与受体阻滞后钙离子通道关闭的程度和时间有关.     

甲型H1N1流感病毒感染小鼠的发病机制

目的 甲型H1N1 流感病毒A/California/7/2009感染BALB/c小鼠,研究甲型H1N1流感病毒病毒性肺炎发病机制.方法 4～6 周龄雌性BALB/c 小鼠60只,随机分为2组,实验组和对照组,每组30只.CA7 流感病毒滴鼻制备甲流病毒感染小鼠模型.攻毒后第5天解剖实验和对照组小鼠,取肺组织,测定肺组织中IL-2,IL-6,TNF-α含量.结果 结果实验组肺组织中IL-6,TNF-α,水平明显高于对照组,IL-2水平明显低于对照组,差异均有显著性(P<0.05).结论 IL-6、TNF-α、IL-2这3种细胞因子在感染甲流病毒后的显著性变化与病毒感染后的肺组织病理损伤有密切的关系.     

A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒感染力比较

目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒序列比较同源性在99%以上,本实验旨在比较两株病毒感染BALB/c小鼠研究感染力强弱。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/California/4/2009(CA4)两株病毒分别连续10倍稀释后,对4~6周龄雌性BALB/c小鼠经乙醚麻醉后进行滴鼻攻毒,每个稀释度接种10只实验小鼠,测定CA7 MLD50为101.24/0.05 mL,检测小鼠感染、致病的多项指标,观察期为14 d。结果相同TCID50的CA7和CA4病毒感染小鼠,CA4感染小鼠后14 d内死亡率为20%,而CA7感染小鼠后8 d内死亡率为100%。CA7 106TCID50感染的小鼠病理表现为重度弥漫性间质性肺炎,CA4 106TCID50感染的小鼠病理表现为中度-重度间质性肺炎。结论在相同条件下,CA7感染力明显强于CA4。     

可手术胃癌血清HER-2/neu ECD水平与临床特征及疗效的研究

目的：探讨可手术胃癌患者血清HER-2/neu胞外域部分(ECD)水平与临床特征及疗效的关系。方法：收集江苏省连云港市第二人民医院2010年01月至2010年12月,可手术胃癌患者46例进入研究,术前、术后收集血清,同时获取15例正常人、22例胃良性病变患者血清为对照组。另外收集7例血清HER-2/neu ECD阳性患...     

镉对大鼠胚胎损害作用的实验研究

目的 :探讨镉对大鼠胚胎的毒性效应及可能机制。方法 :雌雄性 SD大鼠按 2∶ 1同笼交配获取 38只孕鼠 ,随机分为 4组 (对照组 ,低镉组 ,中镉组 ,高镉组 )。分别在妊第7、1 0、1 3天经腹腔注射生理盐水和不同剂量的氯化镉 ( Cd Cl2 ) ,妊 2 1 d,剖宫取胎鼠 ,活杀取出胎鼠的肝、脑组织称重后测定 Cd、Zn、Ach、AKP、DNA含量。结果 :1高镉组未见存活胎鼠 ;2染镉组胎鼠肝中镉增加 ( P<0 .0 5 ) ,脑中锌有下降趋势 ;3染镉组胎鼠肝组织中的AKP活性 ,脑组织中的 Ach、DNA含量较对照组减低。结论 :1高剂量的镉可使孕鼠胚胎发育异常 ;2母鼠染镉可致胎鼠肝中 AKP酶活性降低及脑组织中 Ach、DNA含量减少 ,抗脂质过氧化能力减弱。     

服镁后血镁钙及24小时尿钙和钙/肌酐比值变化

研究服镁后，血镁钙及24h尿钙和钙／肌酐比值变化及与妊高征发生的关系。方法：采用前瞻性随机双盲的方法，对治疗组52例（治疗1组24例和治疗2组28例）孕妇自孕28周起，连续服用葡萄糖酸镁，每日3g。结果：治疗组血钙明显高于对照组；治疗2组的尿钙和钙／肌酐明显高于对照2组，且妊高征发生率3．57％，明显低于对照2组（30．77％）；治疗组和对照组尿钙与钙／肌酐比值分别呈正相关关系。结论：服镁后，调节体内钙平衡，使妊高征发生率降低。     

赐百龄胶囊质量标准的实验研究

赐百龄胶囊系选用螺旋藻为原料直接精制而成。本研究采用吸收光谱法鉴别蓝藻蛋白，可见６２０ｎｍ的特征吸收峰。采用三氯化锑试管反应鉴别β－胡萝卜素，显蓝绿色。采用ＴＬＣ鉴别氨基酸，可显７个斑点。采用ＴＬＣ鉴别多糖水解液，可显３个斑点，其中２个斑点与葡萄糖、半乳糖对应．采用氨基酸分析仪测定游离、水解氨基酸，含丰富的人体必需的氨基酸，总量高达５５％以上。采用凯氏定氮法测定总氮量，提示蛋白质总量高达６０％以上。采用柱层析－ＵＶ法测定β－胡萝卜素，含量为４４ｍｇ％。     

动脉粥样硬化相关性疾病血清胆红素与血脂检测结果分析

目的:探讨血清胆红素浓度与四种动脉粥样硬化( AS)性疾病的关系。方法:观察组分为四组,单纯性高血压组、冠心病组、糖尿病组、脑梗死组,对照组为同年龄段健康查体者,检测空腹血清总胆红素、直接胆红素、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇,计算间接胆红素,并对检测结果进行统计学分析。结果:与对照组比较,观察组中直接胆红素均有所下降,但差异无显著统计学意义( P>0 .0 5 ) ,总胆红素与间接胆红素除脑梗死组外,其他各组均明显降低( P<0 .0 5 ) ;除脑梗死组HDL - C与对照组无显著差异外,其他观察组血脂各指标与对照组比较均有显著统计学差异( P<0 .0 5 ) ,且糖尿病组三酰甘油及冠心病组低密度脂蛋白胆固醇与对照组比较有极显著统计学差异( P<0 .0 1 )。结论:高血压、冠心病、脑梗死、糖尿病等动脉粥样硬化相关性疾病血清胆红素浓度有不同程度降低,其中,间接胆红素降低更明显,提示可将胆红素水平作为AS患者体内氧化活性增加的一个临床监测指标     

黄体不健的生殖内分泌变化

黄体不健是不孕症的重要原因之一。本文对52例黄体不健者采用放射免疫法测定其早卵泡期血请FSH、LH、PRL、E_2和黄体中期血清PRL、E_2,P_0水平,并与正常对照组进行比较。结果表明:黄体不健组早卵泡期FSH、LH、E_2及黄体中期P_0水平较正常对照组低,而PRL水平则高于正常对照组,其差别均有显著或非常显著性意义(P<0.05或P<0.01)。由此说明,黄体不健与卵泡发育障碍有关。因而认为对黄体不健的治疗,如果采用补充黄体酮的方法仅是“治标”,而促进卵泡发育成熟才是“治本”。并认为中医药的周期疗法可能为此打开一条有效途径。