135例乙型肝炎病毒感染者基因分型及其临床分布

目的研究乙型肝炎病毒（HBV）感染者中HBV基因分型及其临床分布情况。方法应用基因型和亚型特异性引物聚合酶链反应（PCR）法，对鲁西地区135例HBV感染者血清进行HBV基因型及亚型分型。结果未分型11例，已分型124例。其中C型111例（C2基因亚型87例、非C1／C2亚型24例）；B型11例，其中Ba型8例、Bj型3例；B／C混合型2例均为BaC2亚型混和感染。在肝硬化和重度慢性乙型肝炎中C型所占比例较高，分别为100％、88％；无症状携带者中B型所占比例较高为8．51％；HBV基因型分型与性别无关。结论鲁西地区HBV感染者以C基因型为主，其中C2亚型占优势。     

广东地区原发性肝癌与乙型肝炎病毒基因型的相关性

目的研究广东地区原发性肝癌（HCC）与HBV基因型的相关性。方法2003至2005年慢性HBV感染相关肝脏疾病患者共298例，其中HCC73例，肝硬化（LC）53例，慢性乙型肝炎（CHB）91例，无症状HBV携带者（ASC）81例。采用PCR-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析及克隆测序方法对血清HBVDNA进行基因分型，比较各组患者HBV基因型的分布及临床特征。结果298例患者基因型分布为B型142例，占47．65％；C型156例，占52．35％。HBVC基因型在HCC患者分布明显高于其他对照组（X^2=45．20，P〈0．01）。HCC组中男性比例明显高于女性；HCC和LC组平均年龄显著高于其他组。结论广东地区HBV相关性肝病HBV基因型主要为C型和B型，HBVC基因型感染可能为HCC的高危因素之一。     

云南大理白族人群乙型肝炎病毒基因型和亚型的分布

目的调查云南大理地区白族人群乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）基因型和亚型分布情况。方法在大理地区选择100例白族慢性HBV感染者，采用基因型特异性引物分型法和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法测定HBV感染者血清HBV基因型和亚型，并用ELISA法测定HBV血清标志物。结果100例HBV感染者中，B型41例（41％），全部为Ba亚型，未发现Bj亚型；C型25例（25％），其中Cs亚型21例（84％），Ce亚型3例（12％），未分型1例（4％）；B＋C混合型34例（34％）。B型感染者与C型感染者比较血清HBeAg阳性率差异有统计学意义（P=0．024）。结论云南大理白族人群HBV感染的基因型主要为B型、B＋C混合型和c型，以Ba和cs亚型为主要流行株，B＋C混合型感染占很大比例。     

乙型肝炎病毒感染者病毒基因型和亚型分布及其临床意义

目的研究不同类型乙型肝炎病毒（HBV）感染者中HBV基因型和亚型分布情况及其临床意义。方法应用基因型和亚型特异性引物聚合酶链反应法（PCR），对北京、长春、汉川，深圳，清远和南京等6个城市445份HBV感染者血清进行基因型及亚型分型，其中急性肝炎7例，无症状携带者36例，慢性乙型肝炎352例，肝硬化28例，肝细胞癌22例。通过对PCR产物测序确定其基因型，以验证该法的准确性。结果445份血清中，239例（53．7％）为C型，其中13例（5．4％）为C1亚型，135例（56．5％）为C2亚型，91例（38．1％）为非C1／C2亚型；145例（32．6％）B型，其中100例（69．0％）为Ba亚型，25例（17．2％）为Bj亚型，20例（13．8％）为非Ba／Bj亚型；61例（13．7％）为B型与C型混合感染，其中6例（9．8％）为Ba与C1亚型混合感染，3例（4．9％）为Bj与C1亚型混合感染，15例（24．6％）为Ba与C2亚型混合感染，8例（13．1％）为Bj与C2型混合感染，11例（18．0％）为Ba与非C1／C2亚型混合感染，7例（11．5％）为Bj与非C1／C2亚型混合感染，2例（3．3％）为非Ba／Bj亚型与C1亚型混合感染，3例（4．9％）为非Ba／Bj亚型与C2亚型混合感染，6例（9．8％）为非Ba／BJ亚型与非C1／C2亚型混合感染。未检测到其他基因型及亚型。在不同类型乙型肝炎病毒感染者中，B型，C型、B与C型混合感染及亚型分布差异有统计学意义，在肝硬化和肝细胞癌患者中C型所占比例较高（分别为78．6％和86．4％），无症状携带者中B型所占比例较高（72．2％）。但不同性别患者中，HBV基因型和亚型分布无差异。在HBeAg阳性和阴性感染者中，HBV基因型和亚型分布差异也有统计学意义。结论该6个城市HBV感染者中，以B2和C2亚型占优势，C基因型可能与肝硬化和肝细胞癌的发生有关。     

慢性 HBV 感染者 HBV 基因型检测与抗病毒治疗的相关性

目的研究乙型肝炎病毒（HBV）基因型与抗病毒治疗前后患者血清HBVDNA载量、肝功能和HBeAg的相关性及其临床意义。方法采用巢式聚合酶链反应（PCR）杂交法对67例慢性乙型肝炎患者HBV进行基因分型,分别用快速自动验证法、荧光定量PCR法和ELISA法检测患者治疗前,治疗6、12个月后的血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、HBVDNA载量和HBV血清标志物。结果89例慢性乙型肝炎患者HBV基因型为B型48例,占66．7％,C型14例,占27．6％,B、C混合型3例,占3．4％,未分型2例,占2．3％;抗病毒治疗前,B基因型患者的ALT[（141．3±4．6）U/L]低于C基因型患者[（222．5±6．3）U/L],差异有统计学意义（P＜0．05）;B、C基因型患者HBVDNA载量分别为（6．3±1．0）和（6．6±1．1）log10拷贝/mL,差异无统计学意义;抗病毒治疗后,B、C基因型患者ALT和HBVDNA载量均比治疗前降低,且B基因型患者HBVDNA载量显著低于C基因型患者（P＜0．05）;B基因型患者的HBeAg阴转率（74．9％）和HBVDNA阴转率（41．7％）显著高于C基因型,分别为21．4％和28．6％（P＜0．05）。结论江苏地区HBV基因型以B型占显著优势,其次是C型,B基因型的临床表现轻于C基因型,对抗病毒治疗的应答更好,且较C基因型有更高的HBeAg阴转率。     

黄石地区慢性无症状乙型肝炎病毒携带者的基因型分布

目的：了解湖北黄石地区慢性无症状乙型肝炎病毒（HBV）携带者HBV基因型的分布，及其与病毒复制水平、HBeAg表达的相关性。方法：选择黄石地区168例慢性无症状HBV携带者作为研究对象，HBV基因型采用PCR微板核酸杂交．ELISA方法检测；血清HBVDNA复制水平采用荧光定量PCR检测；HBV—M采用ELISA法检测。结果：168例慢性无症状HBV携带者中HBVDNA阳性者为114例（阳性率为67．9％），其基因型分布为B、C、D型以及这3种基因型组成的混合型，而未发现A、E、F基因型。其中以B型、C型为主，所占比例为62．6％和36．8％，D型及混合型比例均为5．3％。C基因型患者中，HBV DNA呈现高水平复制（10^7～10^8 Copies／ml）的患者比例为26．2％（11／42），B基因型为13．3％（8／60）（P〈0．05）。C基因型患者血清抗-HBe阳性率（40．5％）显著高于B基因型（15．0％）（P〈0．01）。结论：黄石地区存在HBV的B、C、D基因型，以及由它们组成的混合基因型；B基因型为优势基因型；C基因型与HBV高复制水平，以及基因变异相关。     

中国广东地区乙型肝炎病毒基因亚型的分布

目的调查中国广东地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型,主要是基因亚型的分布情况.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法以及序列测定法,对广东地区417例慢性HBV感染者血清进行研究.结果广东地区流行的HBV基因型主要为B型和C型,其中B型为Ba亚型,未发现Bj亚型的存在.C亚型有C1和C2两个亚型,其中C1占63%,C2占37%.结论广东地区流行的HBV基因型以Ba和C1亚型为主,C2亚型较少,Bj亚型极为罕见.     

广东省东莞地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型分析

目的探讨东莞地区乙型肝炎患者HBV基因型的分布特点。方法采用PCR-微板核酸杂交-ELISA法检测HBVA—F基因型，采用荧光定量-聚合酶链反应法检测血清HBVDNA定量。结果在295例乙型肝炎患者中检出HBV基因型247例（83．7％），其中HBV基因C型占62．3％（154／247）、B型15．4％（38／247）、D型6．9％（17／247）、B／C混合型4．9％（12／247）、C／D混合型5．3％（13／247）、B／D混合型5．3％（13／247），48例未检出基因型；基因C型感染者之间无性别差异（x^2=0．043，P〉0．05）；各基因型患者血清HBVDNA水平无显著性相差，但与48例未检出基因型者比，后者HBVDNA水平明显降低（P〈0．01）。结论PCR-微板核酸杂交-ELISA法检测HBV基因型具有特异、敏感、简单和实用的特点，东莞地区乙型肝炎患者HBV基因型以C型为主，混合型比例相对较高，HBV复制强弱与病毒基因型无关。     

乙型肝炎病毒基因分型与疾病病情的关系

目的探讨乙型肝炎病毒基因分型与疾病病情的关系。方法采用PCR微板核酸杂交ELISA技术检测299例慢性乙型肝炎患者HBV基冈型,并分析其与HBVDNA定量和HBeAg阳性率的关系。结果本组患者HBV基因分型结果以c型143例最多,B型119例次之,其他类型少见;肝衰竭患者HBVC基因型（53．3％）显著高于B基因型（34．7％,P〈O．05）;C型患者HBVDNA定量（7．0±1．1lgcopies／m1）和HBeAg阳性率（68．5％）均明显高于B型（6．1±1．01gcopies／ml和45．4％,P〈0．05）。结论本组乙型肝炎病毒基冈分型以c型和B型居多,在肝衰竭患者HBVC型感染者多于B型。     

乙型肝炎病毒逆向点杂交基因分型法建立及应用

目的 利用逆向点杂交技术建立乙型肝炎病毒(HBV)基因分型新方法，通过对HBV DNA阳性血清抽样标本进行基因分型，了解佛山地区HBV基因型分布状态。方法 以HBV基因组的X区序列为主设计分型引物与探针，将活性氨基标记的探针依次固定在尼龙膜上，制成检测膜条。用标记生物素的引物进行HBV DNA扩增，将扩增产物与检测膜条杂交，以POD与TMB显色，判断基因分型结果，通过与基因测序结果比较确定新方法的有效性。从佛山地区HBVDNA阳性患者血清中随机抽取300份，用新建方法进行HBV基因分型检测。结果 新建HBV逆向点杂交基因分型方法可对拷贝数在10^3～10^9／ml之间的300份HBV DNA阳性抽检血清进行基因分型，发现B型147例，占49.0％；C型136例，占45．3％；D型1例，占0．3％；B、C混合型12例，占4．0％；C、D混合型4例，占1．3％；未发现A、E和F型。新方法基因分型结果与测序结果一致。结论 利用逆向点杂交技术可以准确有效和简便经济的进行HBV基因分型，适用于临床检测与流行病学研究；在佛山地区，人群中感染的HBV以B、C型为主。     

深圳地区乙型肝炎病毒DNA基因分型与临床的关系

目的检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA并进行基因分型。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA后，用不同的探针，利用微板杂交法将其分为6个亚型。结果150例HBV DNA阳性病人中，B型50例、C型36例．D型13例、F型3例和A型1例，没有发现E型。另有47例为混合型，其中以B、D型(18例)、C、D型(20例)为主，分别占混合型的38．30％与42．6％。受检病人中，B型感染者丙氨酸氨基转移酶水平明显增高；B型感染者比C型感染者抗HBe阳性率高，分别为64．0％和30．5％，而C型感染者比B型感染者乙型肝炎e抗原阳性率高，分别为47．2％和22．0％；年龄、性别与基因型关系不明显。结论深圳地区HBV基因亚型以B型为主，C型次之，其他较少。基因型与肝炎程度有一定关系。     

乙型肝炎病毒基因型与病毒复制的关系

检测慢性乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒(HBV)基因型和病毒载量(HBV-DNA定量),探讨它们之间的关系。用微板核酸杂交-ELISA方法对HBV进行基因分型,用PCR荧光定量检测血清HBV-DNA水平,共318例。检测到HBV B型111例(35％);C型128(40％);混合型(B+C,C+D,B+C+D)45例(14％);D型2例;F型2例;未分型30例(9.4％);没有发现A、E型。结果发现,C型和混合型HBV的血清DNA水平高于B型(1.14×107vs2.2×107vsl.60×106拷贝/ml,P<0.05);而混合型HBV的血清DNA水平与C型无差别(P=0.127)。研究提示,我国HBV以B,C两基因型为主,HBV基因型可能是影响HBV复制的重要因素之一。     

基因芯片技术检测西藏拉萨地区的乙型肝炎病毒基因型

目的:研究西藏拉萨地区乙型肝炎病毒基因型的分布与特点.方法:采集92份西藏拉萨地区乙型肝炎患者的血清,参照GenBank中HBV DNA序列设计寡核苷酸探针并制备HBV基因分型芯片,利用套式PCR扩增HBV S基因部分片段,结合基因芯片、DNA测序和BioEdit软件进行基因分型检测,并对其与乙肝标志物、DNA含量、性别和民族之间的关系进行分析.结果:在92例血清标本中,套式PCR检测73例HBV DNA阳性可进行基因分型检测.其中B型13例(17.8%),C型18例(24.7%),D型39例(53.4%)和B/D混合基因型3例(4.1%).统计学分析3种基因型分布在不同乙肝标志物阳性、不同DNA含量和不同性别之间无差异,但与民族存在统计学差异(x~2=7.179,P<0.05).B型以汉族为主(9/13),而C、D型以藏族为主(12/18、28/39).将基因芯片分型的B、C、D型和B/D混合型进行DNA序列分析,表明两种分型方法的结果完全一致.结论:PCR结合基因芯片技术可用于HBV基因分型.西藏拉萨地区HBV基因型包括B、C、D和B/D混合型,其中以D型为主.     

HBV基因型与HBeAg的表达关系及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者HBV基因型与HBeAg表达和病情轻重的关系。方法利用型特异性引物多重PCR方法检测HBV基因型,时间分辨荧光法检测HBV DNA。结果在120例慢性乙型肝炎病毒感染者中HBV基因型C型84例（70%）、B型31例（25.8%）,BC混合型5例（4.2%）,未发现A、D、E、F基因型;C型在慢性重型肝炎组最高（P〈0.05）;在C基因型中HBeAg（＋）患者较HBeAg（-）患者多见（P〈0.05）,在B基因型中,HBeAg（＋）和HBeAg（-）患者分布无明显差别。结论徐州地区HBV基因型以C型和B型多见,e抗原的表达率在C型中较高;基因型B型与C型相比,C型引起肝脏损伤重。     

YMDD mutations and genotypes of hepatitis B virus in northern China

The objective of this research was to determine the relationship between YMDD mutations and the genotypes of hepatitis B virus (HBV) during lamivudine treatment. HBV genotypes were determined by nested PCR with 6 pairs of HBV genotype-specific primers (A to F) in serum specimens from 142 hepatitis B patients receiving lamivudine antiviral therapy. YMDD mutations were detected by fluorescent hybridization bioprobe PCR and melting curve assay (FH-PCR-MC). Among 142 serum specimens, 13 samples were genotype B (9.2%), 125 samples were genotype C (88%), 4 samples were genotype D (2.8%), and 80 YMDD mutations were found. The YMDD mutation rates were 69.2 and 54.4% in genotype B and genotype C, respectively. There was no significant difference in the YMDD mutation rate between genotypes B and C. Nine genotype B sera with YMDD mutations were found, including 2 YIDD mutations and 7 YVDD (M + V) mutations. Sixty-eight genotype C sera with YMDD mutations were found, including 34 mutations I (M + I) and 17 mutations V (M + V). There was a significant difference in the YMDD mutation types between genotypes B and C. Our results suggested that the YMDD mutation rate was 56.3% in patients treated with lamivudine for 2-4 years. YIDD was the main mutation type. The YMDD mutation rate showed no significant difference between HBV types B and C (P > 0.05), while the YMDD mutation types showed a significant difference between HBV types B and C in Northern China (chi2 test = 4.6, P < 0.05).     

血清皮质醇水平与重型肝炎预后的相关性

目的探讨重型肝炎患者血清皮质醇水平与预后的关系,为临床判断预后及探讨治疗提供理论依据。方法对临床诊断的重型肝炎患者进行血清皮质醇、TNFα含量检测;比较重型肝炎、急性肝炎和慢性肝炎患者血清皮质醇水平的差异以及重型肝炎患者中死亡组和存活组的差异;检测血清皮质醇含量与TNFα含量的相关性。结果重型肝炎患者血清皮质醇水平明显低于急、慢性肝炎患者,尤以死亡组患者更为明显;血清皮质醇水平与TNFα含量呈显著负相关。结论重型肝炎患者存在肾上腺皮质功能不全,且与患者预后密切相关。     

Clinical characteristics and distribution of hepatitis B virus genotypes in Guangxi Zhuang population

AIM: To investigate the distribution of HBV genotypes and their YMDD mutations in Guangxi Zhuang population, China, and to study the relationship between HBV genotypes and clinical types of HB, ALT, HBV DNA, HBe system as well as the curative effect of Lamivudine (LAM) on hepatitis B. METHODS: A total of 156 cases were randomly chosen as study subjects from 317 patients with chronic hepatitis B (CHB). HBV genotypes were determined by PCR-microcosmic nucleic acid cross-ELISA. YMDD mutations were detected by microcosmic nucleic acid cross-nucleic acid quantitative determination. HBV DNA was detected by fluorescence ratio PCR analysis. LAM was given to 81 cases and its curative effect was observed by measuring ALT, HBV DNA load, HBeAg, and HBeAg/HBeAb conversion rate. RESULTS: HBV genotypes B, C, D, and non-classified genotypes were found in Guangxi Zhuang population, accounting for 25.6%, 47.4%, 58.3%, and 16.0%, respectively. Seventy-four cases were CD-, CB-, BD-mixed genotypes (47.7%). Forty-six (29.5%) cases had YMDD mutations. Genotype B was mostly found in mild and moderate CHB patients. Genotypes C, D and mixed genotype mostly occurred in severe CHB cases. Genotypes D and CD HBV-infected patients had higher ALT and HBV DNA than patients with other types of HBV infection. There was no significant difference among the genotypes in YMDD mutations, clinical types, ALT and HBV DNA level. Non-classified types geno had a significantly lower positive rate of HBeAg than other genotypes (X2=12.841,P<0.05). There was no significant difference in ALT recovery rate, HBV DNA load, HBeAg, and HBeAg/HBeAb conversion rate, 48 wk after LAM treatment between groups of genotypes D, CD, and non-classified type. CONCLUSION: Genotypes B, C, and D, non-classified and mixed genotype of HBV are identified in the Guangxi Zhuang population. Variations in genotypes are associated with clinical severity and serum ALT levels, but not with YMDD mutation or HBV DNA load. Therapeutic effects of LAM on clinical parameters are not influenced by differences in genotypes. Further studies are needed to gain an in-depth understanding of the relationship between HBV genotypes and serum HBeAb and HBeAg.