变应性鼻炎豚鼠模型中Th2/Th17相关细胞因子检测

目的：分析变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）豚鼠模型鼻腔灌洗液白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）及鼻相关淋巴组织中白细胞介素-23（interleukin-23,IL-23）mRNA的表达水平,探讨该模型中是否存在Th2/Th17细胞因子失衡。方法：建立AR豚鼠模型,收集鼻腔灌洗液,采用ELISA法检测灌洗液中IL-17和IL-4,分离鼻相关淋巴组织,通过RT-PCR半定量检测IL-23 mRNA的表达水平,比较模型组和对照组间细胞因子水平差异。结果：AR模型组鼻腔灌洗液IL-17水平为[（4.98±1.54） pg/ml],比对照组[（12.68±3.32） pg/ml]低,差异有统计学意义（t=10.35,P=0.006）。鼻相关淋巴组织中IL-23 mRNA的表达水平与IL-17的表达相似;而鼻腔灌洗液中IL-4的表达水平正好相反,与对照组 [（6.60±1.36） pg/ml]比较,模型组IL-4的表达水平[（31.20±4.25） pg/ml]高,差异有统计学意义（t=17.26,P=0.001）。结论：Th17相关的细胞因子IL-17、IL-23在AR动物模型中表达降低,而Th2细胞因子IL-4的表达水平明显升高,从而推测在AR中可能存在Th2/Th17细胞因子网络失衡,这种Th2/Th17细胞因子网络失衡可能对变应性炎症的发生起到关键的重要。     

三七总皂苷对类风湿关节炎环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞分泌干扰素-γ及白细胞介素-4的影响

目的 环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide, CCP)抗原与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的发病及致病过程密切相关,是RA原发致病靶抗原.文中通过观察三七总皂苷(panax notoginseng saponins, PNS)对RA患者外周血CCP抗原特异性T细胞(antigen special T cell,AST)分泌干扰素(interferon, INF)-γ、白细胞介素-4(interleukin-4, IL-4)水平的影响,进一步阐明PNS治疗RA的机制. 方法 体外分离培养24例RA患者外周血淋巴细胞,分为4组处理观察,分别是RA空白对照组、RA CCP组、RA甲氨喋呤(MTX)对照组及RA PNS组.各组细胞体外培养72h后,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞培养上清中INF-γ及IL- 4水平. 结果 与RA空白对照组相比,RA CCP组分泌的INF-γ升高(P<0.05),IL-4降低(P<0.05),INF-γ/IL-4升高(P<0.01).经PNS作用后,与RA CCP组相比,INF-γ有所下降(P<0.05),IL-4升高(P<0.05). 结论 PNS可抑制RA患者外周血CCP-AST分泌Th1型细胞因子INF-γ,促进Th2型细胞因子IL- 4的分泌,对Th1/Th2型细胞因子网络失衡状态有一定调节作用,可能在治疗RA中发挥重要作用.     

鼻康片对变应性鼻炎小鼠模型Th1/Th2平衡和血清总IgE的影响

目的 研究鼻康片对变应性鼻炎模型小鼠血清总IgE和Th1细胞/Th2细胞(Th1/Th2)平衡的影响,分析中成药鼻康片抗变应性鼻炎的作用机制.方法 24只7周龄Balb/c小鼠随机分成空白对照组(n=6)、模型组(n=6)、西药对照组(n =6)、实验组(n=6)4组.用卵清蛋白致敏建立实验变应性鼻炎模型,西药对照组和实验组分别给予西替利嗪和鼻康片治疗,疗程结束后应用酶联免疫法(ELISA)测定血清总IgE、白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)含量.结果 鼻康片可显著降低变应性鼻炎模型小鼠血清IgE和IL-4的水平,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).然而Th1/Th2的比值和IFN-γ的水平明显增高,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05).结论 鼻康片可通过降低变应性鼻炎模型小鼠血清IgE和IL-4的水平,增加IFN-γ的水平,调节Th 1/Th2的平衡来发挥抗变应性鼻炎的作用.     

重组人IL-18对辐射损伤后小鼠脾细胞因子的免疫调节作用

目的探讨重组人白细胞介素18(IL-18)对辐射损伤后小鼠脾细胞因子的免疫调节功能。方法32只C57小鼠分对照组、单纯辐射组、IL-18 辐射损伤组和辐射损伤 IL-18组进行辐射损伤,2周后取小鼠脾淋巴细胞体外培养,用试剂盒测定其培养上清中IL-2、γ干扰素(IFN-γ)、粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)、IL-4和血清中IgG的含量,观察IL-18对辐射损伤小鼠脾细胞因子的免疫调节作用。结果与对照组比较,重组人IL-18能够提高辐射损伤前后小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ、GM-CSF和IL-2的能力,辐射损伤后应用IL-18组细胞因子的水平高于辐射损伤前应用IL-18组;但对IL-4分泌能力和血清中IgG含量没有调节作用。结论重组人IL-18具有促进辐射损伤小鼠脾细胞因子分泌IL-2、IFN-γ和GM-CSF的作用。     

白细胞介素-18与白细胞介素-12协同增强肿瘤浸润淋巴细胞对胃癌细胞的杀伤作用

目的:研究白细胞介素-18(IL-18)与白细胞介素-12(IL-12)对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)杀伤功能的影响.方法:IL-18与IL-12共同刺激的TIL与人的胃癌细胞系SGC-7901共孵育后接种于BALB/c SCID小鼠皮下,测定小鼠肿瘤的生长大小并观察荷瘤小鼠的生存时间,酶联免疫吸附试验(ELISA方法)检测小鼠血清中Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ及Th2型细胞因子IL-10、IL-4的表达水平,同时体外测定NK细胞及CD8+T细胞的肿瘤杀伤活性.结果:IL-18与IL-12共同作用于TIL后,与对照组相比,SGC-7910细胞的荷瘤小鼠皮下肿瘤生长明显减慢,小鼠生存率明显延长;同时,两种细胞因子联合处理组荷瘤小鼠血清中细胞因子TNF-α、IFN-γ的水平明显增高,而IL-10与IL-4水平明显降低;体外LDH杀伤实验证实IL-18联合IL-12处理组NK细胞及CD8+T细胞杀伤活性明显提高.结论:IL-18与IL-12协同刺激能增强TIL对胃癌胞的杀伤功能.     

变应性鼻炎中医辨证分型与白细胞介素-4和干扰素-γ的相关性研究

干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)参与了变应性鼻炎(Allergic Rhinitis,AR)的发病及其病理过程,分别是Th1/Th2代表性的细胞因子,它们是一对相互拮抗、相互调节的细胞因子,因此Th1/Th2平衡可以通过IFN-γ和IL-4的水平来反映。Th1/Th2在体内的平衡可能是机体阴平阳秘、阴阳平衡的物质基础,回顾性研究了近年来有关文献,并探讨了IFN-γ和IL-4与AR中医证型的相关性。     

系统性红斑狼疮患者Th1/Th2细胞因子的研究

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)水平,探讨SLE患者的发病与Th1/Th2优势活化状态之间的关系。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定35例SLE患者和15名健康志愿者PBMC培养上清IL-4、IL-10、IL-2、IFN-γ水平。结果活动期SLE患者IL-4、IL-10水平明显高于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。活动期SLE患者IL-2水平明显低于非活动期、正常对照组,差异有显著性(P<0.01)。IFN-γ水平3组间差异无显著性(P>0.05)。结论Th2型细胞因子介导的免疫应答在活动期SLE的发病机制中占主导地位。活动期SLE患者存在分泌型Th1细胞因子的细胞活化减弱。     

变应性鼻炎患者外周血单个核细胞Th1／Th2细胞因子的检测及其意义

目的 :探讨T淋巴细胞活化及释放的Th1/Th2 细胞因子失平衡与变态反应性鼻炎发病的关系。方法 :用双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定 40例变态反应性鼻炎患者 ,2 0例慢性鼻炎患者和 2 0例健康人的外周血单个核细胞 (PBMC) ,经PHA诱导培养后上清液中Th1细胞因子γ干扰素 (IFN -γ)和Th2 细胞因子白介素 4(IL -4)、白介素 5 (IL -5 )的水平及血清中可溶性白介素 2受体 (sIL -2R)的水平 ,并分别对变应性鼻炎患者的sIL -2R与IFN -γ、IL-4、IL -5的相关性进行研究。结果 :PBMC培养的上清液中变应性鼻炎组的IL -4和IL-5水平显著高于慢性鼻炎组和正常组 (P <0 0 1 ) ;而IFN -γ水平却显著低于后两组(P <0 .0 1 )。变应性鼻炎组患者血清的sIL-2R变应性鼻炎组均显著高于后两组 (P <0 .0 1 )且与PBMC培养的上清液中IL -4和IL -5的浓度呈正相关 (r分别为 0 .62 5和 0 .5 95 ,P <0 .0 1 )。与IFN -γ浓度呈负相关(r=-0 .5 80 ,P <0 .0 1 )。结论 :变应性鼻炎患者体内激活的T淋巴细胞是Th2 细胞 ,并释放Th2 细胞因子 ,Th1细胞和Th1细胞因子分泌则受到抑制 ;Th2 细胞因子在调节变应性鼻炎IgE合成及嗜酸性细胞浸润等病理生理机制上起重要作用     

玫瑰糠疹患者血清中IL-2、IL-10和 IFN-γ水平的研究

目的 研究不同病程玫瑰糠疹(pityriasis rosea,PR)患者血清中白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和干扰素Ⅱ型(interferon type Ⅱ,IFN-γ)的水平. 方法采取双抗体夹心ELISA法检测PR患者病程≤4周时及病程>4周时血清中IL-2、IL-10和IFN-γ的水平.结果 病程≤4周时PR患者血清中IL-2、IL-10 的水平较对照组降低(P<0.01,P<0.05);病程>4周时IL-2水平仍低(P<0.01),IL-10恢复正常水平,IFN-γ水平较对照组无明显改变(P>0.05);但IFN-γ水平在病程>4周时低于病程≤4周时的水平(P<0.05).结论 PR患者的Th1 及Th2细胞亚群均受抑制,外周血Th1/Th2型细胞因子失调在PR的发生发展中可能起作用.     

重组白细胞介素-35对支气管哮喘模型小鼠T淋巴细胞亚群及细胞因子的影响*

目的 探究重组白细胞介素-35（rIL-35）对支气管哮喘模型小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子的影 响及其作用机制。方法 100只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、rIL-35低剂量组、rIL-35中 剂量组和rIL-35高剂量组,每组20只。哮喘组和rIL-35各剂量组小鼠采用卵白蛋白（OVA）复制支气管哮喘模 型,对照组小鼠则以生理盐水代替OVA进行处理。rIL-35各剂量组小鼠在OVA激发结束后腹腔注射不同剂量 rIL-35,连续3 d,对照组和哮喘组小鼠注射等剂量的生理盐水。比较各组小鼠的气道反应性、肺泡灌洗液 （BALF）中总细胞、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的数量;采用流式细胞仪检测各组小鼠BALF中T淋 巴细胞亚群的水平;采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测小鼠BALF中IgE、白细胞介素-2（IL-2）、干扰素-γ （IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-5（IL-5）、白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-22（IL-22）、 白细胞介素-10（IL-10）和转化生长因子-β（TGF-β）水平。结果 对照组小鼠未见明显异常状态。哮喘组小 鼠致敏后活动减少,雾化激发时出现不同程度的咳嗽、呼吸急促、烦躁不安等症状。rIL-35低、中和高剂量组小 鼠雾化激发时上述反应症状减轻。不同组激发时肺阻力（RL） 和肺顺应性（Cdyn） 比较,差异有统计学意义 （P <0.05）,不同剂量乙酰甲胆碱激发时RL和Cdyn比较,差异有统计学意义（P <0.05）。乙酰甲胆碱与rIL-35存 在交互作用,随着乙酰甲胆碱剂量增大,rIL-35剂量减小,激发时RL越大（F =202.320,P =0.000）,Cdyn越小（F = 5.623,P =0.000）。与对照组比较,哮喘组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等炎 症细胞的数量均增加（P <0.05）,Th2、Th17、Th17/Treg、IgE、IL-4、IL-5、IL-17、IL-22 水平升高（P < 0.05）,而Th1、Treg、Th1/Th2、IL-2、IFN-γ、IL-10 和TGF-β水平降低（P <0.05）。与哮喘组小鼠比较, rIL-35低、中和高剂量组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞等炎症细胞的数量降 低（P <0.05）,均呈随rIL-35剂量增加而减少的趋势,Th2、Th17、Th17/Treg、IgE、IL-4、IL-5、IL-17、IL- 22水平降低（P <0.05）,均呈随rIL-35剂量增加而降低的趋势,而Th1、Treg、Th1/Th2、IL-2、IFN-γ、IL-10 和TGF-β水平升高（P <0.05）,且呈随rIL-35蛋白剂量增加而升高的趋势。结论 rIL-35可通过调控Th1/Th2 和Th17/Treg细胞的失衡及炎症细胞因子的分泌,抑制支气管哮喘小鼠体内的炎症反应。     

平喘方对哮喘模型小鼠肺组织炎症及γ干扰素和白细胞介素4的影响

目的：研究1型辅助性T细胞（T helper1）/Th2（Th1/Th2）相关因子γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）和白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）在哮喘模型小鼠气道炎症进展过程中的改变以及中药平喘方对其的影响,探讨平喘方对支气管哮喘防治作用的机制。方法：80只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组及平喘方组,20只/组。除空白对照组外,其余大鼠采用卵清白蛋白致敏、激发诱导支气管哮喘,并均于致敏2周后开始灌胃,1次/d,共4周。于激发7d后和激发后2周分批处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液（bronchoalveo larlavage fluid,BALF）和肺组织。经苏木精和伊红染色、胶原染色检测肺组织病理学改变,并进行胶原染色图像分析;酶联免疫吸附测定法检测BALF中IFN-γ及IL-4水平。结果：激发7d后：与空白对照组比较,模型组BALF中IFN-γ水平明显降低,IL-4水平明显升高;与模型组比较,两治疗组IL-4水平均明显降低,IFN-γ/IL-4比值均明显升高;两治疗组间IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值比较,差异均无统计学意义。激发后2周：与空白对照组比较,模型组IFN-γ水平明显降低,而IL-4水平明显升高,IFN-γ/IL-4比值明显降低;与模型组比较,两治疗组的IL-4水平明显降低,IFN-γ/IL-4比值明显升高,且平喘方组IFN-γ水平明显升高;两治疗组间IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值比较,差异均无统计学意义。哮喘激发7d后及激发后2周,模型组肺组织胶原染色面积、面积与光密度乘积均较空白对照组明显增加;两治疗组细支气管壁上胶原纤维沉积较模型组明显减少,胶原染色面积与光密度乘积亦较模型组明显降低;两治疗组间胶原染色面积、面积与光密度乘积比较,差异均无统计学意义。结论：平喘方可调节哮喘模型小鼠IFN-γ、IL-4水平,改善气道炎症,抑制气道重建,疗效与地塞米松相近。     

哮喘鼠白细胞介素23水平变化及其作用机制

目的：通过检测哮喘鼠血清白细胞介素23（IL-23）在激素治疗前后的水平变化及与IL-4、IFN-γ、IL-17的相关性,探讨其在哮喘发病中的作用。方法：将30只健康雌性BALB/C小鼠按完全随机设计原则分为3组,每组10只,即OVA致敏并激发的哮喘模型组（A 组）、鸡卵白蛋白(OVA)致敏、激发并予激素治疗组（B组）和正常对照组（C 组）。末次激发24 h后,各组小鼠摘眼球取血,ELISA法检测血清IgE、IL-4、IFN-γ、IL-17和IL-23的含量。结果：① 小鼠的行为学改变、血清IgE水平增高以及 IL-4 显著增高而 IFN-γ降低、IL-4与IFN-γ呈负相关等,均证明哮喘模型制备成功。② A组小鼠血清中IL-23 的水平 ［(155.56±12.50) ng·L^-1］ 高于C组［(51.49±6.34) ng·L^-1］,而B组小鼠血清IL-23 的水平 ［(88.00±6.43) ng·L^-1］ 低于A组（P＜0.01）。③ IL-23与IL-17含量成正相关关系(r= 0.763,P＜0.05),与IL-4、IFN-γ均无相关性。结论：IL-23参与哮喘的发病,糖皮质激素对其有抑制作用。IL-23可能是通过诱导IL-17的产生间接促进哮喘发病,IL-23对于Th1 类细胞因子IFN-γ及 Th2 类细胞因子IL-4均无明显调节作用。     

卡介苗对支气管哮喘患者肺功能及外周血IL-4、IF Nγ及IL-12表达水平的影响

目的：探讨卡介苗在调节Th细胞的免疫失衡、改善哮喘发作时气道炎症反应的可能机制。方法随机将208名PPD试验阴性的哮喘患者分为干预组和常规治疗组,观察6个月,于治疗前后评估两组肺功能及血清IL-4、IFN-γ、IL-12水平的变化。结果两组治疗后肺功能均较治疗前有改善（P＜0．05）,治疗后干预组较常规治疗组肺功能改善明显,差异有显著性（P＜0．05）;治疗后干预组较常规治疗组 IFN-γ、IL-12升高明显,IL-4下降更明显,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论卡介苗通过调节哮喘患者Thl/Th2比例失衡改善肺功能。     

sCD86、HMGB1在过敏性鼻炎患儿外周血中表达及临床意义

目的：探讨可溶性CD86(sCD86)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在过敏性鼻炎患儿外周血中表达及临床意义。方法：选取过敏性鼻炎患儿150例作为观察组,按照病情严重程度分为轻度组74例和中重度组76例;另选择同期健康体检的正常儿童50名作为对照组。比较各组免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素(IL)-4、IL-9、干扰素-γ(IFN-γ)、sCD86、HMGB1水平,并对观察组患儿以上指标进行多因素分析和相关性分析。结果：观察组IgE、IL-4、IL-9、sCD86、HMGB1水平均明显高于对照组,IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.01)。中重度组患儿IgE、IL-4、IL-9、sCD86、HMGB1水平均明显高于轻度组,IFN-γ水平明显低于轻度组(P<0.01)。IgE、IFN-γ、IL-4、IL-9、sCD86及HMGB1均为过敏性鼻炎患儿病情严重程度的独立影响因素(P<0.05～P<0.01)。观察组患儿血清sCD86、HMGB1水平与IgE、IL-4、IL-9均呈正相关关系(P<0.05),与IFN-γ均呈负相关关系(P<0.05)。...     

重组葎草花粉主要变应原免疫特性研究

目的鉴定重组葎草花粉主要变应原pTSX2的免疫特性,并初步评价其安全性。方法应用Western blotting鉴定pTSX2
的免疫特性;ELISA法检测经pTSX2免疫的小鼠血清sIgE、sIgG水平;pTSX2免疫治疗小鼠哮喘模型后：ELISA法测定小鼠血
清sIgE、sIgG水平;计数小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及嗜酸性粒细胞（Eos）比值;ELISA法检测小鼠BALF中及
脾组织匀浆中细胞因子（IL-4、IFN-γ）水平;评价小鼠肺组织炎症程度。结果Western blotting结果显示重组表达的pTSX2可与
70%的葎草花粉特异性过敏的变应性哮喘患者血清发生抗原抗体反应;pTSX2免疫正常小鼠后主要诱导产生血清sIgG;pTSX2
免疫治疗小鼠哮喘模型后：血清中sIgE、sIgG的抗体水平分别为（146.74±28.57）和（548.76±11.98）μg/ml,与哮喘模型组的
（603.06±10.00）和（260.32±6.40）μg/ml相比差异有统计学意义（P<0.05）;BALF中细胞总数及Eos百分比与哮喘模型组相比明
显下降（P<0.05）;BALF中IL-4、IFN-γ水平分别为（56.74±28.57）和（49.7±11.98）pg/ml,与哮喘模型组的（89.03±10.00）和
（23.10±6.40）pg/ml相比差异有统计学意义（P<0.05）;脾组织匀浆中IL-4、IFN-γ水平分别为（126.24±37.00）和（1547.72±490.43）
pg/ml,与哮喘模型组的（457.95±70.06）和（720.34±93.96）pg/ml相比差异有统计学意义（P<0.05）;肺组织炎症程度减轻。结论
重组葎草花粉主要变应原pTSX2具有较好的免疫治疗作用,且安全性较高,其机制可能是抑制变应原sIgE抗体、诱导变应原
sIgG抗体产生,降低气道炎症细胞浸润,调节Thl/Ih2平衡。
     

复方别敏中黄芩苷、淫羊藿苷和黄芪甲苷配伍比例的优化

目的：探讨复方“别敏”中黄芩苷、淫羊藿苷与黄芪甲苷3种成分合用的优化配伍比例。 方法：采用卵清蛋白腹腔注射建立变应性鼻炎小鼠模型,以脾淋巴细胞增殖反应为指标,利用四唑氮氢氧化物法确定黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷各成分的有效剂量范围;选用U＊10（108）表组方设计所得的3种成分的10种组合进行干预,考察其对脾淋巴细胞增殖的抑制效应,经逐步回归统计分析,获得3种成分合用的最佳配比;通过淋巴细胞增殖反应和对淋巴细胞培养上清液中细胞因子含量检测,验证3种成分的最佳配伍效应是否优于各单一成分。 结果：2~10 μmol/L黄芩苷、2~10 μmol/L淫羊藿苷和1~10 μmol/L黄芪甲苷明显抑制致敏小鼠脾淋巴细胞增殖;当黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷以1∶2.14∶2.65比例配伍时,抑制细胞增殖的效应最明显;进一步的验证研究证实,该配伍对ConA刺激的淋巴细胞增殖的抑制效果及对淋巴细胞上清液中白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）、IL-5和γ干扰素（interferon-gamma, IFN-γ）的调节作用明显优于黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷单用的效果（P〈0.05,P〈0.01）。 结论：复方“别敏”中主要有效成分黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷按优化比例合用可最有效地抑制致敏小鼠脾淋巴细胞增殖,调节因变态反应引起的Th1、Th2型细胞因子失衡。     

腺病毒介导的"睡美人"转座子与IL-10共表达对NOD小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响

目的：观察腺病毒介导的"睡美人"（SB）转座子与白细胞介素10（IL-10）共表达对非肥胖糖尿病（NOD）小鼠脾细胞中Th17/Treg细胞平衡的影响,阐明IL-10对NOD小鼠的可能治疗机制。方法：提取C57BL6小鼠的脾细胞并培养,将脾细胞分为对照组、空载体组和治疗组。对照组脾细胞不做任何处理,空载体组将不含IL-10基因而有转座子序列的腺病毒载体和不含转座酶的腺病毒载体共同感染小鼠脾细胞,治疗组将含有IL-10基因和转座子序列的腺病毒载体以及含有转座酶的腺病毒载体共同感染小鼠脾细胞。感染48 h后RT-PCR法检测各组小鼠脾细胞中IL-10 mRNA表达水平。感染48 h后将上述3组处理的脾细胞分别种植到对照组、空载体组和治疗组NOD小鼠右后腿的腘窝皮下,每组6只小鼠,每周注射1次,共6次。注射结束后4周处死小鼠,ELISA法检测各组NOD小鼠血清中IL-10表达水平;流式细胞术检测各组NOD小鼠脾细胞中CD4+IL-10+、CD4+IFN-γ+、Th17和Treg细胞的比例。结果：与对照组和空载体组比较,治疗组C57BL6小鼠脾细胞中IL-10 mRNA表达水平明显升高（F=72.71,P<0.05）,NOD小鼠血清中IL-10表达水平明显升高（F=8.89,P<0.05）,NOD小鼠脾细胞中CD4+IL-10+细胞和Treg细胞比例明显升高（F=72.09,P<0.05;F=12.98,P<0.05）;但治疗组小鼠脾细胞中Th17细胞比例明显下降（F=6.39,P<0.05）;NOD小鼠脾细胞中CD4+IFN-γ+细胞比例在对照组、空载体组和治疗组之间比较差异无统计学意义（F=2.72,P>0.05）。结论：腺病毒介导的SB转座子与IL-10共表达后可以升高NOD小鼠血清中IL-10表达水平;同时可明显升高NOD小鼠脾细胞中CD4+IL-10+细胞比例,降低Th17细胞比例,升高Treg细胞比例,调控Th1/Th2和Th17/Treg的平衡,对NOD小鼠起到治疗作用。     

Effects of dermatophagoides pteronyssinus allergen-specific immunotherapy on the serum interleukin-13 and pulmonary functions in asthmatic children

Background Airway remodeling is the specific pathological characteristics of asthma, which is related to the clinical symptoms, pulmonary function, and airway hyperreactivity. This study aimed at exploring the effects of dermatophagoides pteronyssinus allergen-specific immunotherapy （SIT） on the serum interleukin （IL）-13 and pulmonary functions in asthmatic children.
Methods Fifty-eight pediatric asthma patients allergic to dust mite participated in this study. Thirty-five children received SIT with a standardized dermatophgoides pteronyssinus extract for one year （SIT group）, and the other 23 children treated with inhaled corticosteroids （ICS group） according to the Global Initiative for Asthma （GINA） for one year. Serum levels of IL-13, IL-4 and interferon （IFN）-γ were examined and the pulmonary functions were checked before and after the treatment.
Results After the treatment, the number of emergency visiting for asthma attack in SIT group was significantly less than that in ICS group. The serum levels of IL-4 and IL-13 were clearly reduced, IFN-γ and the ratio of IFN-γ/IL-4 were significantly increased, the pulmonary functions （forced vital capacity （FVC）, forced expiratory volume in one second percentage （FEV1%） and peak expiratory flow percentage （PEF%） were significantly improved in the SIT group. Meanwhile, IFN-γ and the ratio of IFN-γ/IL-4 were greatly increased, but serum levels of IL-4 and IL-13 had less changes, the pulmonary functions （FVC, FEV1% and PEF%） were poorly improved in ICS group. The basic pulmonary functions in both groups were at the same level, which had made more improvement in SIT group than in ICS group one year later.
Conclusions One year of dermatophagoides pteronyssinus SIT can significantly reduce the frequencies of emergency visiting for asthma attack and improve the pulmonary functions of children with allergic asthma, and that is attributed to SIT, which can reduce the levels of IL-4 and IL-13 and regulate the imbalance of the Th1/Th2 cells in asthmatic children. All of these might be effective in preventing the asthmatic airway from remodeling.     

电离辐射对小鼠免疫器官不同亚群T淋巴细胞调节因子的影响

目的:通过观察电离辐射作用后Th1、Th2、Th3/Tr1标志性细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)分泌量的变化,探讨其细胞平衡与辐射剂量之间的关系.方法:采用ELISA方法检测不同剂量(低剂量组为0.075、0.100和0.200 Gy,高剂量组为1.000、2....     

IL-17A抑制Th2细胞分化减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症

目的 研究IL-17A对哮喘小鼠Th2细胞分化及其相关炎症的作用.方法 24只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组和IL-17A处理组(n=8).哮喘组和IL-17A处理组予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激发.每次雾化激发前1h,IL-17A处理组给予重组小鼠IL-17A气道滴入.各步对照均予以生理盐水.末次激发后24h处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞总数及分类计数.ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-17A的浓度.HE和PAS染色及半定量评分评估小鼠肺部病理变化.流式细胞术检测脾脏和支气管淋巴结Th细胞分化.免疫磁珠分选健康小鼠幼稚CD4+T细胞,用Th2极化培养基体外培养,并给予IL-17A或等量PBS干预,检测Th2细胞的增殖、凋亡和分化.结果 哮喘组较对照组,BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数及其比例(P＜0.05)、IL-4、IL-5、IL-17A浓度均显著增高(P＜0.05),IFN-γ浓度显著下降(P＜0.05);支气管、血管周围炎症细胞浸润和杯状细胞化生明显加重(P＜0.01);脾脏和淋巴结Th2细胞分化比例显著增高(P＜0.05).IL-17A处理组较哮喘组,BALF中的细胞总数[(26.00±5.43)×104/mLvs(58.40 ±26.93)×104/mL,P＜0.05]、嗜酸性粒细胞数[(8.04±1.98)×104/mL vs(31.95±12.28)×104/mL,P＜0.05]及其比例[(29.93 ±3.03)％ vs(53.47 ±6.62)％,P＜0.01]显著降低,而中性粒细胞数及其比例无明显变化;BALF中Th2相关因子IL-4浓度[(9.86 ±2.77) pg/mL vs(28.13 ±4.62) pg/mL,P＜0.01]、IL-5浓度[(7.30 ±0.50) pg/mL vs(10.50±1.10) pg/mL,P＜0.01]均显著降低;支气管、血管周围炎症细胞浸润减轻,HE染色半定量评分降低[(2.00 ±0.51)vs(3.12 ±0.64),P＜0.05],杯状细胞化生减少[(0.80 ±0.45)vs(2.40 ±0.55),P＜0.01];脾脏[(2.24±0.44)％vs(4.82±1.83)％,P＜0.01]和淋巴结[(7.05±0.58)％vs(10.57±1.35)％,P＜0.05]中Th2细胞分化比例显著减少.极化培养的幼稚CD4+T细胞,予IL-17A干预后,诱导分化的Th2细胞比例显著减少(P＜0.05),而增殖和凋亡无显著变化.结论 IL-17A有抑制Th2细胞分化,减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症的作用.