多巴胺激动剂耐受的垂体泌乳素腺瘤的研究进展

多巴胺激动剂是大多数垂体泌乳素(Prolactin,PRL)腺瘤的首选治疗药物,溴隐停是其代表。它可使血中PRL降至或接近正常水平,改善高PRL血症症状,恢复月经周期,使肿瘤体积缩小。但临床上发现,有些患者在服用溴隐停过程中,即使很大剂量,血PRL水平也无明显的下降,有学者[1]将这种现象称为多巴胺激动剂耐受。目前对于此类垂体腺瘤的治疗仍较困难,现对其耐受的发生机制、诊断及治疗的最新进展做一综述。1多巴胺激动剂的作用机制多巴胺激动剂通过结合并激活垂体PRL细胞上D2受体,使血中PRL水平下降。D2受体属于G蛋白耦联家族,有7个跨膜结构域…     

miR-134在无功能垂体腺瘤中的表达及其与肿瘤增殖侵袭能力的关系

目的 检测miR-134在正常垂体组织和各垂体腺瘤亚型中的表达情况,分析其表达水平与无功能垂体腺瘤(NFPA)增殖侵袭能力的相关性.方法 收集垂体腺瘤标本52例(NFPA33例,PRL腺瘤5例,GH腺瘤9例,ACTH腺瘤5例)和尸检正常腺垂体4例及临床相关病例资料,利用免疫组织化学、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等实验技术检测miR-134、MEG3和Ki-67等在各标本中的表达量,并结合病例资料分析数据.结果 miR-134在NFPA中表达水平明显低于其他类型垂体腺瘤和正常腺垂体(P＜0.01);并且miR-134的表达水平与NFPA患者发病年龄、肿瘤细胞Ki-67阳性率及肿瘤侵袭性呈负相关(P＜0.01).结论 miR-134表达下调可能是NFPA肿瘤发生及肿瘤呈侵袭样生长的重要原因之一;miR-134有望成为用于NFPA诊疗的新靶点.     

神经肽Y受体在人垂体腺瘤中的基因表达

目的研究NPY受体在人垂体腺瘤中表达及其规律。方法收集2004年1月~2005年8月期间我院神经外科手术切除垂体腺瘤获取标本57例。通过巢式聚会酶链反应(N-PCR)测定NPY的Y1R和Y2R受体。结果不同类型垂体腺瘤中均有NPY的Y1R、Y2R mRNA表达。Y1R基因表达的差异无统计学意义(F=1.97,P=0.098);Y2R表达的差异有显著统计学意义(F=2.703,P=0.03)。NPY与Y2R呈正相关(r=0.414,P=0.003),但与Y1R无相关性(r=-0.123,P=0.405),且Y1R与Y2R之间也无相关性(r=0.158,P=0.284)。PRL腺瘤中Y2R的表达明显低于GH腺瘤和促性腺瘤。GH腺瘤中NPY与Y2R表达呈正相关(r=0.558,P=0.025)。结论垂体腺瘤中存在NPY和Y1R及Y2R表达;Y2R表达的差异有显著统计学意义。Y2R在GH腺瘤和促性腺细胞腺瘤中的表达水平明显高于PRL腺瘤,而Y1R的表达无显著性差异。NPY受体的表达差异可能与不同类型垂体腺瘤的发生、发展及其内分泌行为有关。     

神经生长因子受体在垂体泌乳素腺瘤中的表达及其与肿瘤生物学特点的相关性研究

目的探讨垂体泌乳素腺瘤中神经生长因子受体(NGFR)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达与其生物学特性之间的相关性。方法应用免疫组化方法检测38例泌乳素腺瘤中两种NGFR(TrKA和P75-NGFR)及PCNA的表达情况,并根据肿瘤的侵袭性、对多巴胺受体激动剂敏感性、患者的性别、血清泌乳素水平、肿瘤大小进行分类。结果p75-NGFR的表达在侵袭性垂体腺瘤、高泌乳素水平、大腺瘤、多巴胺受体激动剂耐受的垂体腺瘤中的表达明显要低于非侵袭性垂体腺瘤、低泌乳素水平、小腺瘤、多巴胺受体激动剂敏感的垂体腺瘤,而PCNA表达则明显要高,两者在各组中比较均具有显著性差异(P<0.05),而TrkA的表达在各组间没有明显差异;男性泌乳素腺瘤PCNA表达明显要高于女性(P<0.05),而p75-NGFR及TrkA的表达在男性与女性泌乳素腺瘤之间没有明显差异(P>0.05)。结论p75-NGFR表达水平能间接反映垂体泌乳素腺瘤的增殖活性及对多巴胺受体激动剂的敏感性。     

雌激素受体及多巴胺受体在泌乳素腺瘤的表达

目的研究雌激素受体(ESR)及其亚型mRNA、多巴胺受体(D2R)及其亚型mRNA在泌乳素腺瘤中的表达。方法应用逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)测定30例泌乳素腺瘤标本ESR1mRNA、ESR2mRNA、第五外显子缺失的1型雌激素受体(△5-Del-ESRl mRNA)及D2RmRNA的表达,研究其表达水平与患者性别、肿瘤体积、侵袭性及泌乳素(PRL)水平的关系。结果男性和绝经后女性患者肿瘤ESR1 mRNA表达高于育龄女性患者;侵袭性泌乳素腺瘤高于非侵袭性肿瘤;PRL≥1 000 ng/ml的患者△5-Del-ESRl mRNA表达水平较PRL1 000 ng/ml的患者明显增高。D2RmRNA异构体的表达水平与泌乳素腺瘤生物学行为有关系,D2SmRNA的表达水平在侵袭性与非侵袭性泌乳素腺瘤中存在显著差异,D2SmRNA在侵袭性泌乳素腺瘤中呈低水平表达。结论 ESR1及其亚型△5-Del-ESRl mRNA、D2R及其亚型mRNA表达与泌乳素腺瘤PRL分泌及肿瘤侵袭有关。     

垂体腺瘤中NPY的表达和细胞定位

目的探讨不同病理类型垂体腺瘤中NPY的表达水平及其在瘤细胞中的定位特点。方法收集我科2003年~2005年诊治的垂体腺瘤57例。所有病例均经手术和病理确诊。肿瘤标本进行NPY免疫组化染色。6例垂体瘤标本进行免疫电镜研究。结果本组34/57例垂体腺瘤的NPY呈阳性表达,占59.65%。NPY阳性表达率在促性腺细胞腺瘤中最高达91.7%,生长激素腺瘤和促肾上皮质激素腺瘤次之均为66.7%,零细胞腺瘤和混和性腺瘤均为50%,泌乳素腺瘤表达率最低25%。NPY在不同类型垂体腺瘤中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。NPY在亚细胞水平的定位:4/6例(GH腺瘤2例,GH-PRL混合性腺瘤1例,PRL腺瘤2例和促性腺细胞腺瘤1例)NPY免疫电镜结果呈阳性,胶体金颗粒呈散在或小簇状分布,主要存在于胞质中分泌颗粒上,此外,粗面内质网和细胞基质中也偶见散在的胶体金颗粒,其余细胞器很少有非特异吸附的胶体金颗粒。2例PRL腺瘤偶见NPY阳性颗粒。结论①不同类型垂体瘤的NPY表达各有差异。②促性腺细胞腺瘤中的NPY表达水平较高,泌乳素腺瘤中NPY表达较低。     

溴隐亭治疗垂体腺瘤后超微结构改变和相关基因表达的研究

目的 从多巴胺2型受体表达水平和服药后细胞超微结构改变来阐明垂体腺瘤溴隐亭治疗的作用机制.方法 4例垂体无功能腺瘤和9例催乳素(PRL)腺瘤患者术前接受溴隐亭治疗,术后观察肿瘤细胞的超微结构改变.肿瘤标本送QRT-PCR检测细胞表面D2R和ER亚型的相对表达水平.结果 PRL腺瘤和临床无功能腺瘤细胞的D2S、D2L、ERα基因在mRNA水平存在差异表达(分别为P＜0.01,P＜0.01,P=0.019),PRL腺瘤的表达水平明显较高.除1例颗粒密集型PRL腺瘤外,颗粒稀疏型PRL腺瘤服用溴隐亭后肿瘤细胞体积缩小,染色质异常凝集,胞质空泡变性,细胞器减少,可见裸核细胞、暗细胞和不同程度的细胞坏死崩解.垂体无功能腺瘤与PRL腺瘤比较,细胞大小、形态改变较少,胞质内细胞器未见明显减少,少见染色质边聚、胞质空泡变性和裸核细胞.结论 垂体无功能腺瘤和PRL腺瘤在D2R和ER受体水平存在差异表达.垂体无功能腺瘤中D2R表达水平高者也存在溴隐亭治疗后细胞的超微结构改变.溴隐亭治疗后垂体肿瘤细胞超微结构改变和D2R表达水平存在一定的相关性.

Abstract：

Objective The aim of this study is to analyze the ultrastructural changes and dopamine 2 receptor(D2R) expression levels of pituitary adenomas to clarify the mechanism of medical management.Method 9patients with prolactinomas and 4 with nonfunctioning pituitary adenomas( NFPAs)were treated with bromocriptine preoperatively.Ultrastructure changes of tumor cells were observed through electron microscopy.Tumor tissue samples were examined for the expression of both ER mRNA and D2R mRNA isoforms by means of QRT- PCR analysis.Results Expressions of D2S mRNA、 D2L mRNA、 ERα mRNA were significant difference between prolactinomas and NFPAs( P ＜0.01, P ＜0.01, P =0.019,respectively),in which was higher in prolac tinomas as compared to NFPAs.Except for 1 patient with densely granulated lact otroph adenomas,8 sparsely granulated lactotroph adenomas showed that cytoplasm was shrunken and the karyoplasmic ratio was enlarged.Ultrastructural analysis confirmed a series of changes including nuclear chromatin aggregation and margination,marked reduction of rough endoplasmic reticulum and Golgi complexes, vascular degenerations, necrosis and autolysis of tumor cells with dark cell or naked nuclear cell Compared to prolactinomas,NFPAs had little changes in cell size and cytoplasmic apparatus but also had chromatin aggregation, cytoplasmic vacuolization and unconspicuous necrosis of tumor cell.Conclusions This study shows the differential expression of ER mRNA and D2R mRNA isoforms between prolactinomas and NFPAs.Comparinb to prolactinomas,NFPAs with medical treatment also have some ultrastructural changes according to their exression levels of D2R isoforms.Ultrastructural changes in those adenomas are closely correlated with the expression levels of D2R isoforms.     

白黎芦醇对GH3细胞生长和泌乳素合成分泌的抑制作用及其与雌激素受体的关系

目的探讨白黎芦醇（RE）对垂体腺瘤GH3细胞增殖和泌乳素（PRL）合成分泌的影响，及其与雌激素受体（ERs）的关系。方法RE作用于GH3细胞．用免疫荧光法和Western印迹法测定ERs的表达情况．分别用ELISA法和Western印迹法测定培养基内和细胞内PRL水平，用MTT法测定细胞增殖，同时观察了雌二醇（E2）和特异性雌激素受体激动剂对RE的拮抗作用。结果RE改变ERs表达水平，减少PRL合成分泌，抑制GH3细胞增殖，E2和特异性雌激素受体激动剂对RE有拮抗作用。结论RE通过ERs抑制PRL合成、分泌及细胞增殖，从而发挥抗肿瘤作用，两种效应的信号转导途径不尽相同。     

多巴胺受体激动剂治疗泌乳素瘤的机制及研究进展

垂体泌乳素腺瘤是神经和内分泌系统的常见肿瘤,约占功能性腺瘤的40%～60%。近年来随着多巴胺受体激动剂研究和临床应用的不断深入,多巴胺受体激动剂已经成为大多数泌乳素瘤的首选治疗。本文就多巴胺受体激动剂在泌乳素腺瘤治疗方面的研究做一综述。一、垂体泌乳素腺瘤     

神经肽Y在人垂体腺瘤中组织学和分子生物学变化的研究

目的 探讨NPY在人垂体腺瘤细胞中的位置和表达,不同类型中的特点.方法 收集我院神经外科经手术和病理确诊的垂体腺瘤57例.免疫电镜研究NPY在垂体腺瘤细胞中的位置.免疫组化和RT-PCR检测NPY的表达.结果 (1)免疫电镜:NPY主要位于胞质的分泌颗粒中,其次位于粗面内质网和细胞基质中.(2)免疫组化:NPY在垂体腺瘤中总体表达的结果为59.6%(34/57);促性腺瘤91.7%,GH腺瘤和ACTH腺瘤均为66.7%,零细胞腺瘤和混合性腺瘤均为50%,PRL腺瘤为25%,它们间的差异有统计学意义(P=0.04).(3)RT-PCR:NPY mRNA在垂体腺瘤中均表达,其差异有统计学意义(P<0.01);促性腺瘤最高是PRL腺瘤的9.3倍、无功能腺瘤5.8倍、GH腺瘤2.7倍,其余组间的差异无统计学意义.结论 (1)人垂体腺瘤中存在NPY.(2)垂体腺瘤中的确有NPY表达,不同类型中的表达各有差异;促性腺瘤表达最高,PRL腺瘤表达最低.(3)为今后深入探讨NPY在垂体腺瘤中的作用奠定了基础.     

FRα在垂体腺瘤中的表达及其与无功能垂体腺瘤侵袭性的关系

目的 检测叶酸受体α(FRα)在各型垂体腺瘤和正常腺垂体中的表达情况;寻找对无功能垂体腺瘤(NFPA)诊断及其侵袭性判断具有重要意义的分子生物学指标.方法 收集垂体腺瘤组织标本44例和正常腺垂体组织3例,利用免疫荧光共聚焦,实时定量反转录(real-time RT-PCR)方法检测FRα在各标本中的表达.结果 FRa仅在NFPA中特异性表达,在其他类型的垂体腺瘤和正常腺垂体中不表达,差异具有统计学意义(P＜0.01);FRa的表达水平与NFPA侵袭性存在显著相关性(P＜0.05).结论 FRα可能在NFPA的发生发展中起到重要的作用;同时FRα可能作为NFPA特异性的诊断指标,为肿瘤的靶向诊治提供理论基础.     

垂体分泌性腺瘤培养细胞对TRH和多巴胺反应的研究

应用细胞培养技术研究35例垂体分泌性腺瘤体外培养细胞对 TRH 和多巴胺的反应,结果显示培养成活率高。82%的泌乳素(PRL)瘤细胞在2.5μmol 的 TRH 作用下,激素分泌明显增加。10μmol 的多巴胺(DA)使77%的 PRL 瘤细胞分泌受到明显抑制。33%的生长激素(GH)瘤细胞在2.5μmol 的 TRH 作用下,激素分泌明显增加。10μmol 的 DA 使55%的 GH 瘤细胞分泌明显减少。混合性腺瘤又以 PRL 分泌对 TRH 和 DA 更为敏感,可能和瘤细胞的受体功能和受体后过程功能失调有关。本实验提示垂体分泌性腺瘤在一定程度上受下丘脑的调节和影响,可能是一种“部分自主性”的肿瘤。     

垂体生长激素腺瘤细胞表皮生长因子受体的表达

目的了解大鼠垂体生长激素腺瘤(GH3)细胞的表皮生长因子受体(EGFR)的表达情况.方法应用免疫组化的方法检测GH3细胞及阴性对照U-2OS细胞和阳性对照HO8910PM细胞的EGFR表达情况.结果 GH3细胞和HO8910PM细胞明显黄染,U-2OS细胞无明显染色;GH3、U-2OS和HO8910细胞表达EGFR的阳性细胞率分别为90.57%、4.84%和93.33%.结论垂体生长激素腺瘤细胞中存在着广泛的EGFR表达,而且具有较高的表达强度.     

人体血浆和垂体腺瘤组织神经肽Y的含量及其基因转录水平的临床意义

目的研究人体血浆和垂体腺瘤的NPY含量及其mRNA表达水平,探讨NPY与垂体腺瘤发病机制及侵袭性的关系.方法选择48例垂体腺瘤组织采用RT-PCR方法检测NPYmRNA基因表达水平,其中33例肿瘤组织及20例病人血液标本进行NPY含量的放射免疫分析测定.结果人垂体腺瘤的NPYmRNA表达率较低,占12.5%,其中12例无功能腺瘤中3例、15例PRL腺瘤中2例及11例混合型腺瘤中1例检测出NPYmRNA表达,9例GH腺瘤中未检出NPYmRNA表达.侵袭性肿瘤的NPYmRNA表达和含量明显高于非侵袭性肿瘤.垂体肿瘤组织的NPY含量有显著差别,其中PRL腺瘤含量最高(17.79±10.44pmol/g),GH腺瘤含量最低(2.01±1.51pmol/g).血浆中NPY含量明显增高,但在手术前、后无显著差别.血浆与肿瘤组织的NPY含量呈正相关.结论NPYmRNA表达水平的检测对于探讨垂体腺瘤的发病机制及肿瘤的生物学行为有重要意义.     

泌乳素腺瘤药物治疗耐药性的分子机制研究

泌乳素腺瘤是激素分泌性垂体腺瘤中最常见的一种,药物即多巴胺受体激动剂是首选的治疗方法,其中溴隐亭是代表性药物.泌乳素腺瘤的耐药性是多因素、多机制造成的,其直接原因是多巴胺D2受体数量下降,或受体亚型D2S/D2L的比例下降.而多巴胺D2受体水平下降的原因包括:mRNA交替剪接修饰缺陷、腺苷酸环化酶活性下降及D2R基因调控因子(如NGF水平)的影响等.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在垂体腺瘤中的表达

目的 通过检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在人垂体腺瘤组织中的表达,探讨其在垂体腺瘤中的相关机制.方法 通过免疫组化法确定经手术切除的83例垂体腺瘤组织细胞来源;采用RT-PCR、适时定量PCR检测研究83例垂体腺瘤组织及6例正常垂体组织PPARγ的mRNA表达量,采用Western blot法检测组织PPARγ蛋白质表达水平,分析不同类型垂体腺瘤组织之间核酸及蛋白水平表达量的差异.结果 GH腺瘤17例、PRL腺瘤15例、ACTH腺瘤18例、多激素腺瘤(MCPAs)17例、无功能腺瘤(NFAs)16例及正常对照组6例;mRNA水平检测显示所有垂体腺瘤组织的表达量均高于正常对照组,其中GH腺瘤的表达量最高,与其他组比较P＜0.05;蛋白水平检测显示GH腺瘤、PRL腺瘤、ACTH腺瘤及MCPAs的表达量均高于正常对照组(P＜0.05),GH腺瘤的表达量最高,NFAs的表达量与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PPARγ转录及蛋白表达水平在人GH、PRL、ACTH及MCPAs垂体腺瘤组织中高表达,该基因与垂体腺瘤有一定的相关性,而无功能垂体腺瘤在核酸水平的表达量增高,蛋白水平的表达量不高,可能与激素的分泌水平有关;在GH腺瘤中的表达量最高,且与其他组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),说明该类肿瘤与PPARγ的关系最为密切,可能与生长激素能刺激PPARγ的表达有关.     

垂体泌乳素腺瘤雌激素α受体与多巴胺2型受体L亚型表达及意义

目的探讨雌激素α受体(ERα)及多巴胺2型受体L亚型(D2-LR)表达差异与肿瘤生物学行为的关系。方法收集37例泌乳素腺瘤标本,应用免疫组织化学DAB法对标本ERα及D2-LR表达进行检测,比较性别、侵袭性等参数表达差异。结果 D2-LR表达在男女病例及侵袭性或非侵袭性泌乳素腺瘤中,无显著性差异(均P0.05)。在男性及侵袭性泌乳素腺瘤中,ERα表达明显高于女性及非侵袭性泌乳素腺瘤(均P0.05)。结论垂体泌乳素腺瘤侵袭性及性别差异可能与ERα表达有关,而与D2-LR表达可能无相关性。     

雌激素受体拮抗剂对垂体腺瘤GH3细胞增殖、凋亡、催乳素分泌及雌激素受体蛋白表达的影响

目的 通过检测雌激素受体拮抗剂对垂体腺瘤GH3细胞增殖、凋亡、催乳素(PRL)分泌及雌激素受体蛋白表达的影响,探讨雌激素在垂体催乳素腺瘤发生、发展中的作用机制.方法 对去激素培养条件及加入外源性E2培养条件下的GH3细胞采用不同方法进行检测:应用MTT 法检测OHTam与ICI对GH3细胞增殖的影响;ELISA法检测对GH3细胞PRL分泌的影响;流式细胞仪测定细胞凋亡率;Western blot检测对GH3细胞ERα、ERβ表达的影响.结果 E2对GH3细胞增殖有显著的生长刺激作用,低浓度E2(10-12mol/L)即显著高于去激素培养组;OHTam与ICI对GH3细胞增殖有抑制作用,当给药浓度达到10 -6mol/L时,增殖指数分别为0.62和0.47,呈剂量依赖性;OHTam与ICI可抑制E2对GH3细胞的生长刺激作用;以上结果与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).E2可促进GH3细胞的PRL的分泌,随着E2浓度的增高,PRL的分泌增加;OHTam与ICI可抑制GH3细胞PRL的分泌,并且能够抑制E2的促进作用.OHTam与ICI能够诱导GH3细胞凋亡,以早期凋亡为主.GH3细胞有ERα与ERβ的表达,E2可上调ERβ的表达水平,ICI可下调ERα的表达水平,而OHTam对ERα与ERβ的表达水平无显著影响.结论 雌激素受体拮抗剂是通过抑制细胞增殖、PRL分泌及抗雌激素而发挥抑瘤作用,而ICI的作用还与下调ERα的表达有关.     

肢端肥大症诊治规范(草案)

3.多巴胺受体激动剂多巴胺受体激动剂可以使部分肢大症患者的血清GH水平降低和症状改善。常用的多巴胺受体激动剂包括麦角衍生物溴隐亭、cabergoline等和非麦角衍生物如喹高利特等。这类药物在GH水平轻中度升高的患者中,有10%～20%的患者GH和IGH-1水平降至满意水平,其剂量是治疗PRL瘤的2-4倍。目前国内仅有第一代多巴胺受体激动剂溴隐亭,国内使用该药降低GH水平至满意水平的很少。     

垂体腺瘤分型的历史、现状及展望

<正>垂体腺瘤分型(pituitary adenoma,PA)种类繁多:内分泌科医生根据临床表现和内分泌激素水平,进行临床功能分型,包括无功能垂体腺瘤(nonfunctional PA,NFPA)、泌乳素垂体腺瘤(prolactin,PRL)、生长激素垂体腺瘤(growth hormone,GH)、促肾上腺激素垂体腺瘤(adrenocorti cotrophic hormone,ACTH)、促甲状腺激素垂体腺瘤(thyrotropin,TSH)和多功能型垂体腺瘤等;神经外科及影像科医生则