结直肠癌前哨淋巴结微转移免疫组化检测的研究

目的探讨细胞角蛋白（AE1/AE3）免疫组化在检测结直肠癌（CRC）前哨淋巴结（SLN）微转移灶上的意义。方法对63例CRC根治性标本进行术后亚甲蓝染色定位SLN,进行常规HE染色后以AE1/AE3免疫组化检测其微转移。结果共检出SLN146枚,每例患者1～7枚,平均2.16枚。HE染色共发现有转移者13例（39枚）。患者淋巴结转移率为20.6%（13/63）,淋巴结阳性率为26.7%（39/146）。免疫组化检测在50例HE染色阴性的患者中又发现有2例存在微转移,微转移的发生率为4%（2/50）;在HE染色阴性的107枚SLN中共有10枚AE1/AE3呈阳性,SLN微转移发生率为9.3%（10/107）。免疫组化检测SLN的转移率高于常规HE染色（〈0.05）。结论通过对CRC定位SLN,免疫组化检测其微转移有助于明显提高CRC淋巴结转移的检出率。     

乳腺癌前哨淋巴结微转移的检测

目的探讨检测乳腺癌前哨淋巴结（SLN）微转移的有效手段。方法以^99mTc标记的硫胶体作为前哨淋巴结示踪剂，使用7探测仪进行前哨淋巴结定位，对41例临床腋淋巴结阴性的乳腺癌患者实施前哨淋巴结活检（SLNB）。收集常规病理检查无转移的SLN行多层次连续切片，分别行HE染色和细胞角蛋白免疫组织化学染色。结果39例乳腺癌检出SLN，SLN检出成功率为95．1％（39／41例）。在常规病理学检查SLN无转移的20例中，连续切片H—E染色发现4例SLN微转移，免疫组织化学染色发现7例SLN微小转移癌。连续切片免疫组织化学染色对SLN微转移的检出率高于常规病理学检查（P〈0．05）。结论连续切片免疫组织化学染色是检测乳腺癌前哨淋巴结微转移的有效方法，可提高SLNB的准确性。     

甲状腺乳头状癌前哨淋巴结微转移检测的初步研究

目的探讨检测甲状腺乳头状癌（papillary thyroid careinoma,PTC）前哨淋巴结（sentinel lymph node,SLN）微转移的恰当方法。方法前瞻性分析2007年8月至2010年9月51例中国医学科学院肿瘤医院头颈外科SLN研究小组收治的临床淋巴结阴性PTC,采用核素（淋巴闪烁显像＋γ探针）、染料及联合应用染料与核素法定位SLN。对18例常规病理检查未发现转移的55枚SLN行多层间隔连续切片,分别行HE染色和细胞角蛋白（CK7）免疫组织化学染色,检测SLN微转移状况。结果51例全部检出SLN,检出率100％（51／51）。在常规病理切片检查SLN无转移的18例中,共发现5例微转移癌灶,SLN活检假阴性率由常规病理切片的15．4％降至2．6％。结论连续切片和免疫组织化学染色是检测PTC的SLN微转移有效、可行的方法,能明显提高SLN活检的准确性。     

乳腺癌前哨淋巴结活检及其微转移检测的临床意义

 【目的】探讨美蓝法示踪和定位行乳腺癌前哨淋巴结活检（SLNB）的可行性及其临床意义,并探索常规病理检查（HE染色）、免疫组化染色（IHC染色）及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对判断前哨淋巴结（SLN）微转移灶的价值。【方法】66例乳腺癌患者,用美蓝示踪行SLNB,对SLN及腋窝淋巴结（ALN）进行HE染色;随机选取40例SLN进一步行细胞角蛋白19（CK19）的IHC染色及RT-PCR检测;比较3种方法对SLN微转移灶检出的敏感性、准确率及假阴性率的差异。【结果】66例中,美蓝示踪成功检出63例,检出率达95.5%。IHC与RT-PCR比较无差异,而与HE比较差异有显著性。【结论】美蓝法SLNB也有很高的检出率,由于常规病理检查对微转移的诊断率低,结合IHC及RT-PCR检测能则有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,提高SLN中微转移的检出率,降低假阴性率。     

乳腺癌前哨淋巴结活检及其微转移检测的临床意义

【目的】探讨美蓝法示踪和定位行乳腺癌前哨淋巴结活检（SLNB）的可行性及其临床意义,并探索常规病理检查（HE染色）、免疫组化染色（IHC染色）及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术对判断前哨淋巴结（SLN）微转移灶的价值。【方法】66例乳腺癌患者,用美蓝示踪行SLNB,对SLN及腋窝淋巴结（ALN）进行HE染色;随机选取40例SLN进一步行细胞角蛋白19（CK19）的IHC染色及RT-PCR检测;比较3种方法对SLN微转移灶检出的敏感性、准确率及假阴性率的差异。【结果】66例中,美蓝示踪成功检出63例,检出率达95.5%。IHC与RT-PCR比较无差异,而与HE比较差异有显著性。【结论】美蓝法SLNB也有很高的检出率,由于常规病理检查对微转移的诊断率低,结合IHC及RT-PCR检测能则有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,提高SLN中微转移的检出率,降低假阴性率。     

前哨淋巴结检测在宫颈癌盆腔淋巴结微转移中的意义

目的：淋巴结转移是影响宫颈癌患者复发和预后的重要因素,找到一种可检测出盆腔淋巴结微小转移病灶的方法。方法：将我院2007年5月－2008年9月经体检及影像学检查均未发现有淋巴结转移的宫颈癌患者8例,术中行美兰染色定位前哨淋巴结,将蓝染的淋巴结进行HE染色和SP免疫组化染色。结果：在8例中共检出SLN34枚,单一HE染色无淋巴结转移,而免疫组化抗角蛋白阳性1例（2．94％）,l枚淋巴结出现微转移。结论：抗角蛋白免疫组化染色法较单一HE染色法更能准确检测出宫颈癌盆腔淋巴结微转移病灶。     

大肠癌前哨淋巴结定位切除及其微转移检测

目的:探讨大肠癌前哨淋巴结定位切除及检测淋巴结微转移的方法,并分析其临床意义。方法:对60例大肠癌患者采用亚甲蓝染法淋巴结示踪,寻找染色的前哨淋巴结,切除后行HE染色和细胞角蛋白20免疫组织化学检测,并与前期直接行淋巴结清扫的60例患者对比。结果:60例中可识别前哨淋巴结者54例,检出率为90.0%,高于前期直接清扫组的24例(40%)(P<0.05);其中常规HE染色检出36例阳性,18例前哨淋巴结阴性者应用免疫组织化学检测,6例检出有微转移灶,其阳性率大大高于对照组(P<0.05)。结论:联合应用亚甲蓝和细胞角蛋白20进行大肠癌前哨淋巴结定位优于单用其中一种方法;免疫组化方法是检测淋巴结微转移的敏感方法;前哨淋巴结定位和微转移的检测对大肠癌的治疗有重要意义。     

染料法术中标记34例大肠癌前哨淋巴结的意义

目的 探索前哨淋巴结活检(SLNB)技术在早期大肠癌中的应用及前哨淋巴结(SLN)微转移检测的临床意义.方法 应用染料法对34例大肠癌患者,在根治术中于肿瘤周围或基底部浆膜下注射亚甲蓝溶液2mL左右,识别和定位蓝染的淋巴结(即前哨淋巴结),术后行常规HE病理和鼠抗人细胞角蛋白单克隆抗体AE1/AE3免疫组化染色法(ELIVISION二步法)检查. 结果 34例大肠癌患者中33例检出SLN,检出率为97.1%.由SLN状态预测其周淋巴结转移情况的准确率为93.9%(31/33),敏感性为88.9%(16/18),特异性为100.0%(16/16),假阴性率为11.1%(2/18).免疫组化与常规HE对SLN转移的检出率相比较,差异有统计学意义(P=0.034),免疫组化法共检出12枚18例SLN存在微转移现象.结论 SLN能够较准确反映早期大肠癌的淋巴转移状况,免疫组化法较常规HE病理检查更为敏感,AE1/AE3免疫组化发能提高SLN微转移的检测,对确定临床分期诊疗及判断预后有积极临床意义.     

乳腺癌前哨淋巴结的检测及临床意义

目的：探讨乳腺癌前哨淋巴结(SLN)活检及其微转移的检测方法和临床意义。方法：对125例乳腺癌患者于术前2～4h在肿瘤下方或瘤床内注射0．4mL／37MBq放射性物质^99mTc—DX，术中用γ探测仪定位并切除前哨淋巴结，再行乳腺肿瘤切除及腋窝淋巴结清扫。首先对SLN及ALN进行常规HE检测，再行免疫组织化学(IHC)检测及逆转录多聚酶链反应(RT—PCR)检测细胞角蛋白19(CK19)mRNA的表达以检测淋巴结的微转移。结果：125例中发现116例SLN，其检出率为92．8％(116／125)，共检出SLN235枚，平均2．0枚，本组SLN的检出灵敏度为97．9％(47／48)，准确性99．0％(104/105)，假阴性率为2．1％(1／48)，假阳性率为0。结论：乳腺癌SLNB是可行的，SLN可以预测ALN的转移情况。SLN阴性的早期乳腺癌仅行局部切除是可行的。     

结直肠癌周围淋巴结CK20蛋白检测的临床应用研究

目的:探讨免疫组化(IHC)检测结直肠癌区域淋巴结微转移的细胞角蛋白20(CK20)对结直肠癌术后临床分期、预后判断和治疗干预的可行性和临床应用价值。方法:选取40例常规HE病理检查淋巴结转移阴性的结直肠癌患者为研究对象,术前抽取外周血行循环肿瘤细胞(CTCs)测定;术中、后沿亚甲蓝染剂标识的区域淋巴结按4站次淋巴结分别摘除、放置并标记,应用IHC技术检测淋巴结中CK20,统计淋巴结微转移患者的阳性例数及阳性率及其在各不同站次的分布情况,并对HE、CTC和IHC CK20方法检测的结果进行比较。结果:淋巴结CK20测定与HE染色法的淋巴结微转移阳性检出率间差异有统计学意义(P<0.01);不同站次间淋巴结微转移阳性检出率存在统计学差异(P<0.01或P<0.05);全组CK20检测有存在淋巴结微转移11例(11/40,27.5%);7例患者TNM分期提高,HE染色法重新分期率为17.5%(7/40)。全组CTC检测显现阳性7例,阳性表达率为17.5%(7/40),其中6例对应于IHC淋巴结CK20(+)患者,1例为IHC淋巴结CK20(-)患者,且CTCs细胞学分型表达与结直肠癌肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度呈正相关性。结论:CK20免疫组化法是检测淋巴结微转移可靠而敏感的方法,结合亚甲蓝染色法显影淋巴结可简便、快速地发现微转移灶,与CTC检测联用可达互补效能,进一步提高微转移检出率,减少假阴性发生。     

结肠癌前哨淋巴结的术中定位检测及其意义

目的探讨结肠癌前哨淋巴结(sentinellymph node,SLN)术中定位的可行性及其临床意义.方法对56例结肠癌患者(男35例,女21例,年龄34～86岁)应用术中染料定位的方法对其SLN进行了定位,绿染的第1个淋巴结为SLN,术后从根治性切除的标本中寻找SLN及区域淋巴结.常规HE染色检查找到的所有淋巴结;对常规检查为阴性的SLN进行抗CEA免疫组化染色(SP法),寻找阳性染色的淋巴结.结果共检出SLN 130枚,占全部区域淋巴结的13%(130/999).每例患者的SLN为1～4枚,平均2.5枚.HE染色共发现有SLN转移者15例,24枚,患者SLN转移率为27%(15/56);SLN阳性率为18%(24/130).除SLN外的869枚淋巴结的转移率为6%(52/869).肿瘤细胞在SLN的转移率明显高于在区域淋巴结内的转移率(P＜0.01).免疫组化法检测SLN微转移的发生率为75.5%(80/106),明显高于常规HE染色检出的转移率(P＜0.05).结论通过对结肠癌SLN进行术中定位,术后深入细致的病理学检测,可以在不增加病理科医生工作量的情况下明显提高对结肠癌淋巴结转移的检出率.     

乳腺癌前哨淋巴结转移检测方法的研究

目的探讨乳腺癌前哨淋巴结(SLN)活检的可行性、准确性以及比较几种方法对SLN转移灶检出率的差异。方法对86例乳腺癌患者用亚甲蓝示踪行SLN活检,获取的SLN分别进行常规HE染色、连续病理切片、免疫组化测定CK19和MUCI粘蛋白、RT-PCR法测定CK19和MUCI粘蛋白,比较4种方法对SLN转移灶的检出率。结果86例乳腺癌患者中,80例检出SLN,检出率93.0%,共切除151枚SLN。SLN常规HE染色法预测腋窝淋巴结转移状态敏感性94.74%(36/38),准确率97.50%(78/80),假阴性率5.26%(2/38)。常规HE染色诊断检出率46.36%;连续切片诊断检出率54.30%;免疫组化检测检出率56.29%;RT-PCR法CK19、MUCI粘蛋白联合检测检出率73.50%。结论SLN活检可有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,RT-PCR法检测乳腺癌SLN转移最敏感。     

Sentinel lymph nodes lymphoscintigraphy and biopsy in breast cancerv

目的：评价核素淋巴显像和γ线探测仪（γ探针法）定位前哨淋巴结（SLN）的临床价值,并评价HE染色和免疫组织化学分析（IHC）联合应用对淋巴结微转移灶检出的作用。方法：我们圣2名乳腺癌患进行了前瞻性的研究。在肿瘤周围注射^99Tc^m-右旋糖酐之后,进行核素淋巴显像。在术中用手持γ探针对前哨淋巴结进行定位切除,同时完整地切除腋窝淋巴结（ALN）。所有切除的淋巴结都先进行常规的HE染色。对经过前哨淋巴结HE染色没有发现有转移的患,再同时进行HE染色和免疫组织化学分析（IHC）。结果：在42名乳腺癌患中,定位并切除了39名患的前哨淋巴结。根据前哨淋巴结的病理检查判断腋窝淋巴结状况,其灵敏度、特异性及准确性分别为92.9％（13/14）、100％（25/25）和97.4％（38/39）。HE染色免疫组织化学分析相结合发现了3个前哨淋巴结（2名患）中有微转移灶,而在相应的非前哨淋巴结（NSLN）中则没有发现微转移灶。结论：核素淋巴结和γ探针法能准确地定位乳腺癌的前哨淋巴结。HE染色和免疫组织化学分析相结合可以提高乳腺癌前哨淋巴结中微转移灶的检出率。乳腺癌前哨淋巴结的病理检查不仅能反应腋窝淋巴结的情况,而且对乳腺癌的分期与治疗有着重要的指导意义。     

亚甲蓝示踪技术在胃癌前哨淋巴结中的应用价值

目的:探讨亚甲蓝示踪技术在胃癌前哨淋巴结(SLN)中的应用价值与临床意义。方法:胃癌60例患者,开腹术中于病灶周围浆膜下直接注入亚甲蓝,术后对被视为胃癌前哨淋巴结的蓝染的淋巴结行常规病理检查和免疫组织化学法检查。结果:胃癌60例中,检出SLN56例(93.3%)。HE检查发现24例49枚SLN转移,T1、T2期SLN示踪准确率93.9%,敏感性88.9%,假阴性率11.1%,特异性为100.0%。免疫组织化学法检查结果发现有32例67枚SLN转移。结论:亚甲蓝示踪技术在胃癌SLN的应用是安全可行的,对预测T1、T2期胃癌区域淋巴结状况具有重要参考价值。     

乳腺癌前哨淋巴结术中快速冷冻切片的临床意义研究

目的研究乳腺癌前哨淋巴结术中快速冷冻切片对腋窝淋巴结状态的预测价值及其临床意义。方法用美兰作为示踪剂对2006～2011年合肥市第二人民医院165例临床分期为T1～2 N0M0乳腺癌患者进行前哨淋巴结活检,所有患者均同时进行腋窝淋巴结清扫。术中前哨淋巴结冷冻切片,并与石蜡切片及免疫组化CK19检测作比较。结果 165例患者中有160例找到前哨淋巴结,活检成功率97.0%(160/165)。前哨淋巴结数量是1～4枚,平均1.4枚。腋窝淋巴结6～22枚,平均每例12.3枚。160例活检成功的患者中,41例冷冻快速切片报告有癌转移,其中27例(65.9%)患者腋窝淋巴结有转移。119例冷冻快速切片报告为阴性患者中,术后免疫组化CK19证实3例(2.5%)有微小转移(1 mm),其中有2例发现有腋窝淋巴结转移,组织学类型均为浸润性微乳头状癌。前哨淋巴结术中快速冷冻切片报告的准确性为98.1%(157/160),敏感性95.3%(41/44),特异度为100%(116/116)。结论前哨淋巴结术中快速冷冻切片有较高的准确性,对腋窝淋巴结状态有很好预测价值,浸润性微乳头状癌患者易出现前哨淋巴结假阴性,免疫组化染色可提高准确性。     

宫颈癌前哨淋巴结活检的假阴性原因分析

目的探讨染料法识别宫颈癌前哨淋巴结(SLN)活检时出现假阴性的原因。方法选择49例早期宫颈癌患者,术前宫颈瘤周注射亚甲蓝,行广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术;进行前哨淋巴结定位及病理学检查。结果SLN识别率为87.8%(43/49),灵敏度为81.8%,准确率为92%,假阴性率为18.2%。结论本组假阴性与肿瘤大小、淋巴转移的途径、术前放疗、病理检测方法有关。     

结肠癌术中前哨淋巴结定位对临床治疗的指导意义

目的:评价前哨淋巴结(SLN)对结肠癌腹腔淋巴结转移状况的预测价值,探讨检测SLN在指导结肠癌根治性切除术中的意义.方法:对42例结肠癌患者利用亚甲蓝行SLN检测术,并切除SLN送快速冰冻病理检查,然后行结肠癌根治性切除术,比较SLN快速冰冻切片,SLN及其他腹腔淋巴结石蜡切片和抗角蛋白免疫组织化学染色结果.结果:42例患者中39例成功检测到SLN,共检出SLN 95枚,平均2.4枚,SLN检出率为92.9%(39/42).SLN活组织检查术灵敏度为75%,准确性为85.7%,SLN预测腹腔淋巴结状态与术后病理检查符合率为92.3%.结论:SLN检测能较为准确地预测结肠癌腹腔淋巴结的转移状况,但以SLN活检术替代传统术式的可行性和安全性还需要更大样本的前瞻性病例研究来进一步评价.     

Detection of micrometastases in bone marrow and sentinel lymph nodes of breast cancer patients

To study the sensitivity and clinical significance of HE-staining,IHC and RT-PCR in detecting breast cancer micrometastases in bone marrow and sentinel lymph nodes （SLNs）. Methods ：After general anesthesia, all patients underwent bone marrow puncture and sentinel lymph node biopsy （SLNB） by 1% isosulfan blue, and then HE-staining,IHC and RT-PCR were used to detect micrometastases. Results：Of 62 patients with breast cancer whose axillary lymph nodes showed negative HE-staining results, 15 cases presented with positive RT-PCR and 9 cases showed positive IHC results positive in bone marrow micrometastases detection. PT-PCR and IHC showed good uniformity（kappa=0.6945）and there was significant difference in detective rate between these two methods （X2=4.1667,P = 0.0412）. In SLN samples, 13 showed positive RT-PCR results, while 7 showed positive IHC results. PT-PCR and IHC showed good uniformity （kappa=0.64.83）and significant difference was also found in detective rate between these two methods （X^2=4.1667 ,P = 0.0412）. Both bone marrow and SLN samples were RT-PCR positive in 3 cases, which indicated that bone marrow did not always accompany SLN micrometastases（X^2=0.067,P = 0.796）. Conclusion： Even if no axillary lymph node involvement or distant metastases are present in routine preoperative examination, micrometastases can still be detected in bone marrow or SLNs. Because the bone marrow micrometastases and axillary node micrometastses are not present simultaneously, combination test of multiple indicators will detect micrometastases more accurately.