泼尼松对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠股骨微结构及生物力学的影响

目的应用骨生物力学和micro-CT技术,探讨泼尼松对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠股骨微结构及生物力学的影响。方法 40只8周龄Lewis♂大鼠,随机分为正常对照(CON)组6只、其余34只用来建立CIA模型。免疫3周后筛选出CIA大鼠随机分成CIA组、CIA加泼尼松4.5mg·kg-1·d-1组和CIA加泼尼松9 mg·kg-1·d-1组。CON和CIA组给予溶剂对照溶液,其它2组给予泼尼松4.5、9 mg·kg-1·d-1。连续给药90 d后处死,取左股骨进行生物力学测定,然后进行micro-CT扫描及三维重建。结果与CON组比较,CIA组骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积分数、骨密度明显减小,而骨小梁分离度、结构模型指数明显增加,骨生物力学参数(弹性载荷、最大载荷、断裂载荷、刚度)均明显减小。与CIA组比较,泼尼松2个剂量组骨体积分数与骨小梁数量均增加,骨小梁分离度均减小,而骨生物力学参数均无明显变化。结论泼尼松治疗CIA大鼠3个月后,对股骨松质骨微结构破坏有所改善,但对股骨生物力学性能和骨密度没有明显改变。     

白芍总苷对大鼠实验性关节炎的作用

目的观察白芍总苷对大鼠胶原性关节炎(CIA)关节肿胀度和组织学的影响。方法用鸡Ⅱ型胶原诱导建立CIA大鼠模型,造模后第7～27 d,用药组每日白芍总苷(TPG,25,50,100 mg.kg-1.d-1)灌胃,模型组等量生理盐水灌胃。观察CIA大鼠足爪组织病理学变化及关节指数、体重变化。结果与模型组相比,TPG可明显降低CIA大鼠关节指数(P<0.05),大、中剂量白芍总苷使CIA大鼠体重明显减轻(P<0.01)。结论白芍总苷对大鼠胶原性关节炎有明显抑制作用,能明显改善CIA大鼠症状。     

地塞米松改善胶原性关节炎大鼠免疫功能与其血药浓度的相关性研究

目的研究地塞米松对胶原诱导性关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)大鼠炎症和免疫的调节作用。方法32只Wistar大鼠,分为3组,正常组10只、模型组11只,给药组11只。建立CIA模型后,给药组腹腔注射地塞米松(1 mg/kg),每周3次。连续给药4周后,处死并计算脾脏指数、胸腺指数。采用Real-time PCR方法检测脾淋巴细胞炎症因子IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α,转录因子T-bet、GATA3、RORγT、Foxp3mRNA的表达。HPLC法测大鼠地塞米松血药浓度,并将血药浓度与脾脏指数、Th亚型淋巴细胞亚群特异性转录因子做相关性分析。结果腹腔注射地塞米松能显著缓解CIA足爪肿胀、预防踝关节变形,降低脾脏指数、胸腺指数(P<0.01)。PCR结果显示,地塞米松抑制CIA大鼠脾淋巴细胞中炎症因子,并改善Th1/Th2、Th17/Treg的失衡(P<0.05)。HPLC法检测大鼠地塞米松平均血药浓度为0.1738μg/ml。血药浓度与脾脏指数呈负相关,与T-bet、RORγT呈负相关,与GATA3、Foxp3呈正相关。结论地塞米松对CIA大鼠具有强大的抗炎和免疫调节作用。     

甲氨蝶呤联合环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡作用的研究

目的通过对类风湿关节炎(RA)动物模型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的实验研究,从滑膜细胞凋亡的角度,探讨甲氨蝶呤(MTX)联合环磷酰胺(CTX)的协同作用和机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导性雌性Wistar大鼠CIA模型,将造模成功的60只大鼠随机分成4组:CIA模型对照组、小剂量MTX治疗组(MTX0.9mg/kg,每周1次)、小剂量CTX治疗组(24mg/kg,每3周1次)及小剂量MTX联合小剂量CTX治疗组(0.9mg/kg,每周1次,CTX24mg/kg,每3周1次);再选8只为正常对照组。治疗24周后全部动物处死取材,再经固定、脱钙、包埋,通过TUNEL法检测滑膜细胞凋亡。结果各治疗组滑膜细胞凋亡均较CIA模型组增加,联合治疗组凋亡程度最高,各组间平均灰度值差异有统计学意义(P<0.05)。结论提示MTX和CTX联合治疗RA为协同作用。     

参芎葡萄糖注射液在正常和急性心肌缺血大鼠体内的药动学差异

目的 比较参芎葡萄糖注射液(SGI)中盐酸川芎嗪、丹参素、迷迭香酸在正常和急性心肌缺血(AMI)模型大鼠体内的药动学差异.方法 将雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组,每组9只.模型组大鼠采用盐酸异丙肾上腺素造模法复制AMI模型.每组各取3只大鼠进行模型验证后,剩余6只大鼠尾静脉注射SGI(12 mL/kg)或等体积生理...     

胶原性关节炎大鼠滑膜组织G蛋白偶联受体激酶的表达及白芍总苷对其的影响

目的研究胶原性关节炎(CIA)大鼠滑膜组织中G蛋白偶联受体激酶(GRKs)表达以及白芍总苷(TGP)对其的影响。方法SD大鼠随机分成6组:正常组、模型组、TGP(25、50、100mg.kg-1)组、雷公藤(GTW40mg.kg-1)组。用鸡Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,Western blot检测滑膜组织GRKs表达水平,并观察TGP灌胃给药对其的影响。结果正常SD大鼠滑膜组织GRK2、GRK5、GRK6均有表达,CIA大鼠关节滑膜组织GRK2、GRK5、GRK6的表达明显升高,TGP给药后GRK2,GRK5,GRK6的表达水平降低,差异有显著性。结论CIA滑膜组织GRKs表达增加,TGP抑制这种异常的变化可能是其治疗CIA的机制之一。     

红曲对胶原诱导性关节炎大鼠的抗炎作用及机制探讨

目的:观察红曲对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的抗炎作用,并探讨可能的作用机制.方法:利用牛Ⅱ型胶原建立Wistar大鼠CIA模型,大鼠在首次注射Ⅱ型胶原后d 14灌胃红曲500 mg·kg-1,qd,给药至d 48处死大鼠(共给药34 d).分别测量不同时间点大鼠的后足容积,并对关节炎的肿胀程度进行评分;对大鼠的踝关节拍摄X线片,评价CIA大鼠的软骨和骨的破坏程度;同时对大鼠踝关节的滑膜进行组织病理学评分,分析单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)在CIA大鼠关节滑膜的表达情况,比较不同时间点各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果:在首次注射Ⅱ型胶原后11-13 d,大鼠关节炎形成.红曲组大鼠的踝关节肿胀程度于首次注射Ⅱ型胶原后第4周开始下降,与CIA模型组相比有显著差异(P＜0.05),关节炎评分与CIA模型组相比显著降低(P＜0.05).在d 48,红曲组血清中炎性细胞因子TNF-α的含量、踝关节滑膜组织中MCP-1和RANTES阳性细胞均显著低于CIA模型组(P＜0.05).结论:红曲对CIA大鼠具有较强的抗炎作用,其作用机制可能与抑制踝关节滑膜组织中MCP-1和RANTES的表达有关.     

OPG-HSP70融合蛋白对CIA大鼠的保护性作用

目的:研究人骨保护素(OPG)-分枝杆菌热休克蛋白70(HSP70)融合蛋白对类风湿关节炎动物模型--胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠的保护性作用.方法:将OPG-HSP70重组基因菌株诱导表达,收集蛋白并鉴定,大量提取,纯化,复性;实验大鼠分为OPG-HSP70组、OPC组、HSP70组、模型组和正常对照组,CIA大鼠模型制备后分别给予相应处理,观察对大鼠关节病变的影响.结果:与模型组相比,OPG-HSP70组关节炎指数明显降低(P<0.05);关节病理切片显示关节滑膜无明显增生;骨密度值增高(P<0.05).结论:OPGHSP70融合蛋白具有减轻CIA大鼠关节病变的作用.     

新疆准噶尔乌头及其炮制品对CIA大鼠治疗作用的实验研究

目的观察准噶尔乌头及其炮制品对II型胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠治疗作用。方法设空白对照组、模型组、阳性对照组(醋酸地塞米松片6 mg·kg-1)、准噶尔乌头及其3种炮制品高、中、低剂量组。除空白对照组外,其余各组均采用牛Ⅱ胶原乳剂和弗氏完全佐剂(FCA)诱导大鼠CIA模型。各组于造模致炎后灌胃给药,连续6周。观察各药对CIA大鼠关节肿胀率的影响。采用ELISA法检测各组血清中IL-2、SA、TNF-α的含量。取CIA大鼠膝关节滑膜组织病理切片行染色后,采用光学显微镜观察滑膜组织的病理改变。结果①与空白对照组比较,模型组大鼠关节肿胀率、血清IL-2、SA、TNF-α水平均高于空白对照组(P<0.01),大鼠关节滑膜炎性病理变化显著;②与模型组比较,准噶尔乌头及其炮制品可降低CIA大鼠关节肿胀率、血清中IL-2、SA、TNF-α含量(P<0.05或P<0.01);③与模型组比较,准噶尔乌头及其炮制品可改善CIA大鼠关节滑膜的炎性病理改变。结论准噶尔乌头及其炮制品具有抗炎作用。     

黄芪桂枝五物汤对胶原诱导性关节炎大鼠血清中白细胞介素-20的影响

目的观察黄芪桂枝五物汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的一般情况、体质量、血红蛋白、血清中白细胞介素-20(IL-20)水平的影响,以阐明黄芪桂枝五物汤治疗类风湿关节炎的作用机制。方法选用健康清洁级SD大鼠32只,随机分为4组,正常对照组、模型组、雷公藤多苷组、黄芪桂枝五物汤组。除正常对照组外,其余各组均行CIA大鼠模型。观察造模后大鼠一般情况及造模后第1、2、3、4周的体质量变化情况;采用全自动血细胞分析仪测定各组大鼠血红蛋白含量,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定各组大鼠血清中IL-20的水平。结果造模后第1、2、3周大鼠体质量各组之间差异无统计学意义(P>0.05),造模后第4周模型组体质量低于正常对照组、雷公藤多苷组、黄芪桂枝五物汤组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗1个月后,与正常对照组相比,模型组大鼠血清中IL-20水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,黄芪桂枝五物汤组血红蛋白水平高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);经雷公藤多苷、黄芪桂枝五物汤治疗后大鼠血清中IL-20的水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);雷公藤多苷组、黄芪桂枝五物汤组血清IL-20差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄芪桂枝五物汤能升高CIA大鼠血红蛋白含量,有抑制CIA大鼠血清中IL-20升高的作用。     

胶原诱导性关节炎大鼠Th17细胞相关因子表达的研究

目的观察胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血中T辅助细胞17(Th17)相关细胞因子白细胞介素(IL)-6,IL-17和IL-23水平的变化。方法取40只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组、CIA模型组,利用牛Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,造模成功后观察CIA大鼠的关节肿胀程度,免疫后第48天处死大鼠,抽取静脉血,取血清,同时留取大鼠的肿胀的关节,留取滑膜组织。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察各组对血清中细胞因子IL-6,IL-17和IL-23水平。结果 CIA鼠与正常对照组比较关节肿胀度明显升高。CIA大鼠外周血血清IL-6,IL-17和IL-23水平明显高于正常对照组。2组比较差异均有统计学(P<0.05)。结论 Th17相关细胞因子IL-6,IL-17和IL-23在CIA鼠的外周血中过度表达,提示Th17型细胞因子在RA的免疫致病机制中可能起重要作用。     

白芍总苷对大鼠胶原性关节炎体质量及足肿胀度和足爪组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的 研究白芍总苷(TGP,抗变态反应药)对大鼠胶原性关节炎(CIA)及足爪组织MMP-9表达的影响.方法 用鸡Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型,观察药物对CIA大鼠体质量及足肿胀度的影响,用免疫组化法观察大鼠足爪组织中MMP-9蛋白的表达.结果 TGP可有效缓解CIA大鼠体质量减轻,明显抑制CIA大鼠足爪肿胀;大、中剂量TGP组的足爪组织MMP-9阳性表达较模型对照组明显降低,有非常显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论 TGP可明显改善CIA大鼠症状,其机制可能与其下调MMP-9表达、降低血清IL-1β水平有关.     

来氟米特联合甲氨蝶呤对胶原诱导的关节炎大鼠骨破坏因子RANKL和IL-17的影响

目的探讨来氟米特(LEF)联合甲氨蝶呤(MTX)治疗大鼠胶原诱导的关节炎(CIA)的骨保护作用。方法建立CIA模型后,大鼠分为模型对照组、LEF组、MTX组、MTX+LEF(联合组);另设立空白对照组。用ELISA分析核因子κB受体活化因子的配体(RANKL)和白细胞介素17(IL-17)水平。结果与空白对照组比较,CIA大鼠模型外周血RANKL、IL-17水平明显升高(P<0.05)。与模型对照组比较,LEF组、MTX组、联合组大鼠模型外周血RANKL及联合组IL-17的水平均明显下降(P<0.05);与MTX组比较,联合组外周血RANKL、IL-17水平明显下降(P<0.05)。结论在成功建立的CIA大鼠模型中,LEF联合MTX对类风湿关节炎有协同骨保护作用,可能与下调外周血RANKL、IL-17水平有关。     

桂芍知母汤对类风湿关节炎模型鼠滑膜组织血管内皮生长因子的影响

目的观察桂芍知母汤对胶原诱导类风湿关节炎(CIA)模型鼠血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨其作用靶点。方法将40只健康雌性大鼠随机分为正常组、模型组、来氟米特组、桂芍知母汤组,除正常组之外,其余各组使用Ⅱ型胶原诱导大鼠造成CIA模型。桂芍知母汤组、来氟米特组,造模后开始给药,共计30 d。按评分法评价关节炎指数,ELISA法检测VEGF表达。结果给药组较模型组关节发病数目减少,关节肿胀程度减轻,皮肤红肿不明显,关节变形程度减轻。给药组与模型组在关节炎指数方面比较有明显差异(P<0.05)。给药组CIA大鼠踝关节滑膜组织升高的VEGF水平显著降低(P<0.01)。结论桂芍知母汤组与模型组比较,关节炎指数明显降低,大鼠踝关节滑膜组织VEGF水平明显下降。     

重组人Ⅱ型TNF-α受体-抗体融合蛋白对胶原诱导性关节炎模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达的影响

目的:探讨重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(rhTNFR:Fc)对胶原诱导性关节炎(CIA)模型大鼠关节滑膜细胞NF-κB信号表达的影响。方法:将40只6周龄的雌性Wistar大鼠按照随机数表法随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松对照组和rhTNFR:Fc治疗组,每组10只。制备CIA模型,以Western blotting法检测关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα表达的情况。结果:rhTNFR:Fc治疗组和醋酸泼尼松对照组可下调CIA大鼠滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα的表达,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:rhTNFR:Fc可通过降低CIA大鼠关节滑膜细胞NF-κB/P65、p-ⅠκBα蛋白表达以达到缓解炎症的作用。     

甲氨蝶呤、环磷酰胺对胶原诱导性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-1的影响

目的研究甲氨蝶呤(MTX)联合环磷酰胺(CTX)治疗对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced arthritis,CIA)大鼠血清TNF-α、IL-1水平的影响,探讨甲氨蝶呤(M TX)联合环磷酰胺(CTX)治疗类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的机制。方法建立Ⅱ型胶原诱导的雌性Wistar大鼠CIA模型。取15只未造模的健康大鼠作为健康对照组(A组)。将造模成功的75只大鼠随机分成5组(每组15只),B组:造模对照组;C组:小剂量MTX组(每周0.9 mg/kg);D组:大剂量MTX组(每周2.7 mg/kg);E组:小剂量CTX组(每3周24 mg/kg);F组:小剂量M TX联合小剂量CTX组(M TX每周0.9 mg/kg,CTX每3周24 mg/kg)。分别在6周、24周检测各组大鼠血清中TNF-α、IL-1的水平。结果联合应用MTX和CTX优于小剂量MTX、小剂量CTX单药治疗组。结论 MTX和CTX联合应用在RA的治疗中具有协同效应。     

黄芩苷对大鼠胶原诱导性关节炎JAK/STAT3信号通路及Th17/Treg免疫平衡的影响

摘要：目的:探讨黄芩苷对大鼠胶原诱导性关节炎（CIA） Janus激酶（JAK）/信号转导及转录激活因子3（STAT3）信号通路及Th17/Treg免疫平衡的影响。方法:SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性对照组(甲氨蝶呤,1 mg·kg-1)、黄芩苷低(50 mg·kg-1)、中(100 mg·kg-1)、高(200 mg·kg-1)剂量组,每组12只。除正常对照组外,其余各组建立CIA大鼠模型。各给药组腹腔注射给药,正常对照组和模型组给予等量生理盐水。对大鼠进行关节炎症评分,检测各组大鼠关节肿胀度;采用HE染色检测大鼠关节病理变化;流式细胞技术检测大鼠脾脏Th17、Treg亚群比例;酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β（TGF-β）水平;免疫印记法检测大鼠关节滑膜组织JAK/STAT3通路相关蛋白JAK、p-JAK、STAT3、p-STAT3的表达。结果:与模型组相比,黄芩苷组和阳性对照组大鼠关节上述病理损伤症状减轻,关节肿胀度、炎症评分、脾脏Th17亚群比例及Thl7/Treg比值、血清TNF-α、IL-6及IL-17水平、关节滑膜组织p-JAK/JAK及p-STAT3/STAT3显著降低（P<0. 05）,脾脏Treg亚群比例、血清TGF-β水平显著升高（P<0. 05）,且黄芩苷组呈剂量依赖性（P<0. 05）。黄芩苷高剂量组与阳性对照组相比差异无统计学意义（P>0. 05）。结论:黄芩苷可调控CIA大鼠Th17/Treg免疫平衡,使其向Treg偏移,改善大鼠关节炎症状,抑制JAK/STAT3信号激活。     

二妙散对类风湿关节炎调控基因Toll样受体4和重组牛磷酸肌醇3激酶A表达的影响

目的研究二妙散对类风湿关节炎(RA)调控基因Toll样受体(TLR4)和重组牛磷酸肌醇3激酶A(PI3KA)表达的影响。方法通过构建Wistar大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型,不同浓度二妙散灌胃治疗,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中炎症因子的表达,苏木精-伊红(HE)染色进行病理学分析,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分析TLR4和PI3KA的表达特性。结果二妙散组与CIA模型组相比,脾脏指数差异无统计学意义(P>0.05);CIA模型组与对照组相比,脾脏指数显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);二妙散组滑膜组织炎性细胞较少;较正常组白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达量极显著降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),较模型组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);随二妙散浓度增加IL-37表达量显著增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。模型组大鼠关节中IL-6、TLR4和PI3KA mRNA水平表达量极显著高于对照组和甲氨蝶呤组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论本实验成功构建CIA大鼠模型,TLR4和PI3KA在不同实验组大鼠关节组织中均有不同程度的表达,说明TLR4和PI3KA参与CIA大鼠炎性反应的形成,介导RA炎性因子的形成和发展,二妙散对于减少炎症因子和增加抑炎因子的表达具有重要作用,具体作用机制需进一步研究证实。     

99锝［99Tc］亚甲基二膦酸盐对胶原诱导性关节炎大鼠的疗效观察

目的 探讨⁹⁹锝［⁹⁹Tc］亚甲基二膦酸盐（⁹⁹Tc-MDP）对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的治疗作用. 方法 设立正常组大鼠10只, 建立CIA大鼠模型18只, 分为模型组和 ⁹⁹Tc MDP组各9只. ⁹⁹Tc-MDP组CIA大鼠予以尾静脉注射⁹⁹Tc-MDP, 相当于⁹⁹TC 0.04 μg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1共21 d. 测量各组大鼠体重、关节肿胀程度和关节炎指数（AI）, 观察滑膜病理组织形态学变化, 并用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF-α）水平. 结果 ①与正常组大鼠比较, 模型组CIA大鼠体重明显减轻, 关节肿胀程度严重, AI 评分明显升高, 滑膜组织病理评分也明显升高（均P<0.01）; ②⁹⁹Tc-MDP干预治疗可明显缓解CIA大鼠体重下降, 改善关节肿胀程度, 降低AI 评分和滑膜组织病理评分; ③正常对照组和⁹⁹Tc-MDP组大鼠血清TNF-α水平显著性低于模型组大鼠（均P<0.01）. 结论 CIA大鼠关节炎症状明显, ⁹⁹Tc-MDP可明显改善CIA大鼠一般状况, 减轻关节炎症状及滑膜组织的病理评分, 降低血清TNF-α水平, 对CIA有显著治疗效果.     

硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型的制备

目的:建立稳定高效的硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)大鼠肝纤维化模型,分析大鼠肝脏病理纤维化分级与血清检测物指标,为临床提供适用的监测手段及理论依据。方法:选取SD雄性大鼠48只,随机分为4组,即对照组(12只)、模型-Ⅰ组(12只)、模型-Ⅱ组(12只)和模型-Ⅲ组(12只)。根据大鼠体重,采用腹腔注射TAA诱导肝纤维化。按实验给定时间给药,在不同时间段内测定谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)血清浓度,并进行肝脏病理组织学检查。结果:模型-Ⅰ组大鼠死亡率为25.00%(3/12)、肝纤维化形成率为75.00%(9/12);模型-Ⅱ组大鼠死亡率为8.33%(1/12)、肝纤维化形成率为91.67%(11/12);模型-Ⅲ组肝纤维化形成率为83.33%(10/12)。各组AST和ALT血清浓度均升高,肝脏病理组织学检查发现肝组织病变。结论:本法病理组织学检查结果可靠,操作简便,适用于实验肝纤维化模型制备。