大黄素治疗代谢相关脂肪性肝病的作用机制研究进展

代谢相关脂肪性肝病既往称为非酒精性脂肪肝，与肥胖、糖尿病、高脂血症等关系密切，还明显增加心血管死亡的风险。大黄素是大黄、何首乌中主要的活性成分，具有多种生物学功能。大黄素可通过降低肝细胞脂质沉积、抑制肝脏炎症反应、抗胰岛素抵抗、抑制肝纤维化、抗氧化应激反应等多种途径对代谢相关脂肪性肝病发挥治疗作用。总结了大黄素治疗代谢相关脂肪性肝病的作用机制，为代谢相关脂肪性肝病的治疗提供参考。     

基于JAK2/STAT3信号通路探讨大黄素保护AR42J胰腺腺泡细胞损伤的作用机制

目的基于JAK2/STAT3信号通路探讨大黄素保护AR42J胰腺腺泡细胞损伤的作用机制。方法将AR42J细胞以1×10~5/mL铺于6孔板,分为对照组、雨蛙素组(雨蛙素10~(-8) mol/L)、大黄素组(终浓度0.25、0.5、1.0mg/L),通过碘-淀粉比色法淀粉酶(AMS)试剂盒测定细胞上清淀粉酶活力水平,确定雨蛙素刺激AR42J胰腺腺泡细胞损伤的收样时间;ELISA法检测TNF-α活力;Western blot法分析JAK2/STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果①与对照组比较,雨蛙素组中的AMS、TNF-α、JAK2/STAT3通路相关蛋白表达量显著提高,差异有统计学意义(P0.05)。②与雨蛙素组比较,大黄素各干预组可显著降低雨蛙素诱导的胰腺腺泡细胞损伤的淀粉酶活力、TNF-α含量、JAK2和STAT3的mRNA相对表达量,差异有统计学意义(P0.01)。③大黄素0.5、1.0 mg/L干预组的作用优于0.25 mg/L干预组,差异有统计学意义(P0.001)。结论大黄素能够减轻雨蛙素诱导的胰腺腺泡细胞损伤,其作用机制可能与调控JAK2/STAT3信号通路有关。     

基于“表里关联”的大黄炭炮制过程颜色和成分变化关系研究

目的 研究大黄炭炮制过程颜色特征与化学成分的关联性规律，为建立基于颜色量化值的大黄炭炮制过程控制方法和终点判断标准奠定基础。方法 分别在不同温度和时间下制备大黄炭样品，以大黄炭炮制的经验判断为依据，利用视觉分析仪与紫外-可见光谱仪量化大黄炭不同炮制条件的粉末和饮片颜色。同时采用HPLC指纹图谱的方法评价大黄炭炮制过程中化学成分动态变化，利用多元统计学方法对大黄炭炮制过程样品颜色量化值与特征成分进行关联分析。结果 在大黄炭炮制过程中，随着炭化程度的增大，样品表观颜色由淡黄棕色逐渐加深至焦黑色，样品饮片和粉末的明度值（L^*）、红绿色值（a^*）、黄蓝色值（b^*）之间高度相关。HPLC指纹图谱上26个特征峰的面积与色度值均有不同程度的相关性，其中随炭化程度加深而含量递减的5个结合蒽醌类成分（芦荟大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄酚-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷）和2个番泻苷类成分（番泻苷A、番泻苷B）与色度值呈线性相关关系，含量先增后减的5个游离蒽醌类成分（芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚）、没食子酸和5-羟甲基糠醛（5-HMF）与色度值呈二次相关关系。结论 大黄炭炮制过程中的颜色主观判断与量化检测的分析结果一致，颜色量化值与14种已知化学成分的含量具有显著的相关性，初步推断颜色量化值可作为大黄炭炮制过程的质量控制和终点判定指标，以提高大黄炭饮片的质量水平及其一致性。     

中药活性成分大黄素用于治疗新型冠状病毒肺炎的可能性

2019新型冠状病毒感染已严重威胁到人们的健康和生活,但目前尚无特效治疗药物对其进行有效的防控。大黄素作为蓼科植物大黄及虎杖的主要活性成分,具有广谱的抗病毒活性,对包括SARS冠状病毒(SARS-CoV)、流感病毒、HIV病毒、HBV病毒等的感染和复制具有抑制作用。因此,本文就抗SARS-CoV的中成药及中药复方、大黄素及复方制剂抗病毒的机制、含大黄及虎杖的复方制剂抗病毒的临床研究和大黄素用于治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的可能性进行综述,旨在探讨其治疗2019新型冠状病毒的临床可能性。     

响应面法优化何首乌不同炮制品种中游离大黄素及大黄素甲醚提取工艺的研究

目的:研究不同炮制方式的何首乌中大黄素与大黄素甲醚的最佳提取工艺。方法:采用HPLC来测定何首乌生药、制何首乌、豆制何首乌中大黄素与大黄素甲醚的含量,以成分含量为指标,用响应面法建立甲醇浓度、料液比、提取时间3个因素的回归模型,优化提取工艺。结果:最佳提取工艺条件为纯甲醇,料液比1:30,提取时间1.5 h。在此条件下制何首乌中大黄素的含量为1.63 mg·g~(-1)生药,大黄素甲醚含量为0.95 mg·g~(-1)生药。结论:制何首乌中大黄素与大黄素甲醚含量较高。优化后的工艺适用于何首乌不同炮制品中游离大黄素和大黄素甲醚的提取测定。     

转化生长因子β1在白细胞介素1β诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化及大黄素干预中的作用

目的:大黄素对白细胞介素1β诱导NRK52E细胞转分化有显著抑制作用。实验拟进一步观察转化生长因子β1在白细胞介素1β诱导大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化及大黄素抑制作用中的意义。方法:实验于2006-10/2007-05在泸州医学院附属医院免疫实验室完成。⑴实验材料及分组:以培养的大鼠肾小管上皮细胞株(NRK52E)为观察对象,按如下分组分别添加不同处理因素:①对照组:仅加入体积分数为0.05小牛血清的高糖DMEM培养基。②白细胞介素1β诱导组:加含白细胞介素1β终浓度为10μg/L的高糖DMEM培养基。③SB431542阻断组:加含白细胞介素1β终浓度为10μg/L及SB431542终浓度为10μmol/L的高糖DMEM培养基。④白细胞介素1β 大黄素组:同时加分别含白细胞介素1β终浓度为10μg/L及大黄素终浓度为25mg/L的高糖DMEM培养基。⑵实验评估:培养48h后用倒置相差显微镜观察细胞形态,细胞免疫化学染色法检测肌酸激酶、α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1的表达。结果:①白细胞介素1β可诱导部分细胞由卵圆形转变为梭形,且肌酸激酶表达减弱(P<0.01),α-平滑肌肌动蛋白及转化生长因子β1表达显著增强(P<0.01)。②SB431542特异性抑制转化生长因子β1作用后,白细胞介素1β诱导的细胞形态改变受抑,同时肌酸激酶表达增强(P<0.01),α-平滑肌肌动蛋白表达减弱(P<0.01),但转化生长因子β1的表达却无明显变化。③大黄素对白细胞介素1β诱导的细胞形态改变及肌酸激酶、α-平滑肌肌动蛋白的表达有明显抑制作用,其抑制作用与SB431542的作用相比无显著差异;同时,大黄素对白细胞介素1β诱导的转化生长因子β1的表达也有明显抑制作用(P<0.01)。结论:转化生长因子β1可能介导了白细胞介素1β诱导大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,并参与了大黄素抑制白细胞介素1β诱导大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用。     

大黄素通过非Caspase依赖通路诱导膀胱癌细胞BIU87凋亡的机制

目的 研究大黄素对人膀胱癌细胞BIU87凋亡及凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)和核酸内切酶G( Endonuclease G,Endo G)的mRNA和蛋白表达的影响,探讨大黄素的抗癌机制. 方法 取对数生长期的人膀胱癌细胞株BIU87,分别加入大黄素和Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同培养.实验分为4组:空白对照组、Z-VAD-FMK组、大黄素组、大黄素+Z-VAD-FMK组.采用甲基噻唑(MTT)比色法测定不同浓度大黄素在不同作用时间内对体外培养的BIU87细胞增殖的影响,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测各组细胞AIF和Endo G mRNA的表达,蛋白质印迹法检测各组细胞AIF和Endo G蛋白的表达. 结果 MTT检测显示,大黄素的浓度越高、作用时间越长,对肿瘤细胞生长的抑制作用越强.根据IC50值,选择80 μmol/L的大黄素干预72 h作为干预条件.大黄素组细胞凋亡率为(44.57±1.52)％,大黄素+Z-VAD-FMK组为(35.58±1.61)％,差异有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR和蛋白质印迹结果显示,大黄素+Z-VAD-FMK组中AIF mRNA和蛋白为1.74±0.11、2.59±0.13,大黄素组为1.36±0.08、1.89±0.14,空白对照组为0.37±0.02、0.53±0.11,Z-VAD-FMK组为0.42±0.06、0.44 ±0.07,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);大黄素+ Z-VAD-FMK组中Endo G mRNA和蛋白为2.28±0.15、3.31±0.36,大黄素组为1.85±0.13、2.15 ±0.27,空白对照组为0.53±0.07、0.71 0.16,Z-VAD-FMK组为0.61±0.04、0.67±0.22,大黄素+Z-VAD-FMK组与其他各组比较,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡.     

高效液相色谱法测定调经健胃丸中大黄素、大黄酚的含量

目的：通过高效液相色谱法测定健胃调经丸中大黄素、大黄酚的含量。方法：色谱柱为迪马DIKMA C18（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）,检测波长：254nm,流速：1.0mL/min。结果：大黄素在0.1021～0.9191μg范围内具有良好线性关系（r=1）,平均回收率为101.6%,RSD为1.24%;大黄酚在0.4124～3.7120μg范围内与峰面积具有良好线性关系（r=0.9994）,平均回收率为99.4%,RSD为1.31%。结论：高效液相色谱法灵敏度高,重复性好,准确可靠,可用于调经健胃丸的质量控制。