FISH技术在乳腺癌HER-2基因检测中的应用价值评估

目的研究荧光原位杂交(FISH)技术在乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)基因检测中的应用价值。方法50例新发乳腺癌患者,采集乳腺癌标本,分别采用FISH技术和免疫组化(IHC)技术进行HER-2基因检测。观察IHC与FISH检测结果、FISH检测17号染色体多体发生情况。结果IHC结果为+++、++、+/0时,FISH与IHC检测结果的阳性符合率分别为87.50%、94.59%、20.00%,经一致性检验,IHC与FISH检测结果一致性较好(Kappa值=0.543,P<0.05)。IHC检测HER-2高表达(+++、++)患者中17号染色体多体发生率为17.78%,在HER-2低表达或无表达(+、0)患者中的多体发生率为20.00%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论FISH技术与IHC技术在乳腺癌HER-2基因检测中的一致性较好,17号染色体多体可能是导致IHC与FISH检测结果不一致的原因之一,FISH技术可以作为检测HER-2基因扩增的确诊手段在临床上应用。     

外胚叶发育不全基因及其受体在斑马鱼牙齿早期发育中的表达

目的 探讨外胚叶发育不全（EDA）基因及其受体（EDAR）基因在斑马鱼早期咽齿发育过程中的表达模式,为进一步研究其在牙齿发育过程中的功能奠定基础。方法 提取受精后48 h（48 hpf）的斑马鱼胚胎总RNA,之后逆转录合成cDNA,以该cDNA为模板,特异性扩增斑马鱼咽齿特异性标记基因dlx2b、Eda信号通路相关基因eda及edar基因片段,用TA克隆试剂盒将这3个基因片段分别连接到pGEMT载体上,将对应质粒用聚合酶链反应（PCR）线性化,以PCR线性化做模板,选择相应的RNA聚合酶体外转录,合成dlx2b、eda及edar基因的反义mRNA探针。收集36、48、56、60、72、84 hpf的斑马鱼胚胎,运用全胚原位杂交技术检测eda及edar基因在斑马鱼咽齿发育部位的表达分布。比较原位杂交结果eda及edar表达区域与斑马鱼咽齿特异性标记基因dlx2b所指示咽齿部位的关系。结果 获得了dlx2b、eda及edar基因的反义mRNA探针。原位杂交结果显示,48~72 hpf时eda及edar在鳃弓牙齿相应部位可见强棕褐色阳性信号,与dlx2b所指示咽齿部位吻合。结论 Eda信号通路配体与受体在斑马鱼咽齿早期发育过程中即牙齿发生至形态发生阶段于咽齿部位特异性强表达,这一结果显示该信号通路可能参与斑马鱼咽齿早期发育的调控。     

一例外周血染色体核型为单纯型18三体但智力正常女性的遗传学研究

目的分析1例外周血染色体核型为单纯型18三体但智力正常女性的遗传学机制。方法用G显带染色体核型分析、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)和单核苷酸多态性微阵列芯片(single nucleotide polymorphism microarray,SNP-array)技术对患者的外周血和颊粘膜细胞进行检测。结果患者的外周血染色体核型、SNP-array以及FISH检测结果均提示为47,XX,+18;颊粘膜间期细胞FISH检测结果提示为45,X合并低比例的18三体和18单体。结论胚层染色体嵌合的个体临床表现复杂,遗传学异常所造成的影响取决于相关胚层分化所形成的器官及功能。     

非肌性肌球蛋白II-C在斑马鱼胚胎发育过程中的表达*

目的：分析NM II-C在斑马鱼胚胎发育过程中表达的时空变化。方法：收集不同发育阶段的斑马鱼胚胎，应用整体原位杂交技术研究NM II-C在斑马鱼胚胎发育过程中的表达变化情况。结果：受精后17和22小时，NM II-C由原先的广泛表达渐渐集中于前脑、中脑和后脑；受精后26和36小时，NM II-C表达分布到整个中枢神经系统；受精后48小时，NM II-C表达在脊髓变得很弱，主要集中于大脑。结论：揭示了NM II-C基因在斑马鱼胚胎发育过程中的时间和空间上的表达进程，为进一步探讨其在发育中的调控作用提供了实验基础。     

少见部位结节性筋膜炎临床病理及分子遗传学特征

目的探讨少见部位结节性筋膜炎(nodular fasciitis, NF)的临床病理、免疫表型及分子遗传学特征。方法收集河南省人民医院病理科2015年1月至2021年1月诊治的50例NF患者的临床及病理资料, 其中少见部位14例, 采用免疫组织化学染色检测相关蛋白的表达情况, 采用荧光原位杂交(FISH)检测USP6基因断裂情况。结果 14例少见部位NF中, 男性、女性各7例, 位于肢端、会阴部、乳腺、腕关节内、腰4/5椎间隙, 其中8例存在少见组织累及(骨骼肌内6例、神经根1例、血管内1例), 肿瘤边界不清, 呈浸润性生长, 梭形肌纤维母细胞束状或杂乱排列, 形态温和, 可见小核仁及多少不等核分裂象, 间质胶原化至黏液样变, 可见红细胞外渗及炎性细胞浸润;免疫组织化学示梭形细胞局灶或部分表达平滑肌肌动蛋白, 弥漫强表达p16。FISH示14例中12例存在USP6基因断裂, 其中2例发生于胸壁骨骼肌内者同时合并USP6基因红色信号扩增。结论少见部位NF具有与经典部位相似的临床病理和遗传学特征, 但肿瘤组织边界多呈浸润性生长, 存在非特异性p16强表达和USP6红色信号扩增现象。少见部位...     

不同保存条件下石蜡切片乳腺癌PR、ER和HER-2状态的变化

<正>在临床及科研工作中,经常要对石蜡组织进行预切片,其组织抗原性必然受到外界的影响。临床工作中,为了减少组织浪费,尤其是一些微小病变,进行组织切片时会保存一些未染色的切片;再者在利用组织芯片进行科研工作时,科研工作者也习惯将组织芯片连续切片,贴好片后保存。本文通过观察三种不同条件下长期保存的乳腺癌石蜡切片PR、     

荧光原位杂交技术和流式细胞仪在菌斑中致龋性变形链球菌定量检测中的应用

目的:建立快速定量检测菌斑中主要致龋菌变形链球菌的方法,为龋齿活跃性评估提供参考数据。方法:收集无龋(caries free,CF)和高龋(caries susceptib le,CS)儿童牙菌斑各15例,将不同荧光素标记的寡核苷酸探针:细菌通用探针和变形链球菌特异性探针进行荧光原位杂交,结合流式细胞仪检测菌斑中变形链球菌所占的比例。结果:在无龋儿童菌斑中,变形链球菌在总菌中所占比例数是1.24%~3.4%(2.25±0.71),而在高龋儿童菌斑中比例为5.04%~9.7%(7.37±1.34),两组比较有着明显的统计学差异(P<0.01)。结论:流式细胞仪结合荧光原位杂交技术,可作为一种细菌定量检测方法应用于致龋性变形链球菌的定量分析中。     

颌骨骨肉瘤中BMP-2mRNA的表达及其与淋巴结转移的关系

目的：观察颌骨骨肉瘤(osteosarcoma of the jaw，OSJ)中BMP-2 mRNA的表达，并探讨其与淋巴结转移的关系。方法：采用原位杂交方法．对21例OSJ标本进行BMP-2 mRNA检测。应用卡方检验．对OSJ中BMP-2 mRNA表达与淋巴结转移问的关系作统计分析。结果：21例OSJ中，17例BMP-2mRNA表达阳性(80.95％)，包括全部15例成骨细胞型和2例(2／4)成软骨细胞型OSJ。梭形或多边形的肿瘤细胞．细胞质中可见明显的阳性染色。12例出现淋巴结转移的OSJ标本，BMP-2mRNA表达均为阳性，而无BMP-2mRNA表达的OSJ标本中，无1例出现淋巴结转移。淋巴结阳性组，BMP-2mRNA的阳性表达率为100％；淋巴结阴性组，BMP-2mRNA的阳性表达率为55．56％．两者差异有统计学意义(P=0．021)。结论：BMP-2mRNA主要在成骨细胞型及部分成软骨细胞型OSJ中表达，其表达可能与OSJ的淋巴结转移存在一定关系。