不同剂量甲状旁腺素氨基端1-34片段连续刺激对SaoS-2人成骨肉瘤细胞系的影响

目的　观察不同剂量人甲状旁腺素氨基端 1 34片段 (hPTH1 34)连续刺激对SaoS 2人成骨肉瘤细胞系功能、信号传导的影响及机制。方法　对于对数生长期的SaoS 2细胞 ,采用 5、50、50 0和 5 0 0 0 μg/L浓度hPTH1 34连续刺激 8d。于刺激前、刺激中及刺激后 ,采用“金氏”化学法和放射免疫法测定培养液中碱性磷酸酶 (ALP)和骨钙素 (BGP)浓度 ;采用竞争蛋白结合法测定环磷酸腺苷(cAMP)浓度 ;采用逆转录 (RT) PCR对c fos基因表达水平进行半定量分析。结果　 50 0 μg/LhPTH1 34刺激显著增高ALP水平 (P <0 .0 5 ,比对照组 ) ,促进成骨细胞分化。 5 0 0 0 μg/L刺激组BGP水平逐渐下降 (P值均 <0 .0 5 ,比对照组和刺激前 )。 50、50 0 μg/LhPTH1 34连续刺激组cAMP明显增高 (P值均<0 .0 5)。 5μg/L和 5 0 0 0 μg/L组cAMP无显著改变。 50、50 0 μg/L组c fos基因表达水平高于其他组。结论　hPTH1 34对成骨样细胞的影响与剂量显著相关 ,50及 50 0 μg/LhPTH1 34连续刺激显著促进成骨样细胞分化 ,增加骨骼的合成代谢。ALP、cAMP的水平及c fos基因表达对不同浓度hPTH1 34刺激的反应明显同步 ,提示hPTH1 34主要通过蛋白激酶A信号途径影响成骨细胞功能及c fos基因的表达 ,后者进一步在转录水平调节成骨细胞     

血管紧张素-(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞原癌基因c-fos表达的影响

目的　探讨血管紧张素 - (1- 7) [Ang- (1- 7) ]对血管紧张素 (Ang )诱导心肌细胞原癌基因 c- fos表达的影响。方法　在 Ang 诱导培养的新生 SD大鼠心肌细胞中应用 Ang- (1- 7) ,用 TRIzol试剂法提取心肌细胞总 RNA,用特异性 c- fos引物 (GAPDH作内参 )和 Super Script一步法 RT- PCR试剂盒进行逆转录 -聚合酶链式反应 ,RT-PCR产物在琼脂糖凝胶上电泳 ,用 GSD凝胶成像系统拍摄打印 ,条带用计算机图像分析系统扫描定量。结果　 Ang 作用心肌细胞 3 0 min后 ,心肌细胞原癌基因 c- fos表达较对照组 c- fos表达明显增加 (P<0 .0 1) ,而当用 Ang- (1- 7)与 Ang 联合作用时 ,Ang 诱导心肌细胞 c- fos基因表达作用明显受到抑制 (P<0 .0 1)。予 A- 779预处理后 ,Ang- (1- 7)抑制 Ang 诱导的心肌细胞原癌基因 c- fos的表达作用消失 ,而 A- 779其本身对心肌细胞原癌基因 c- fos表达无明显影响。结论　 Ang- (1- 7)可抑制 Ang 诱导的心肌细胞原癌基因 c- fos的表达 ,其作用能被A- 779阻断     

肝细胞生长因子及其受体在血管外膜成纤维细胞中的表达

目的 检测肝细胞生长因子（HGF）及其受体c-met在血管外膜2种表型成纤维细胞中的表达，探索其在血管外膜重塑中的作用。方法 用转化生长因子-β1建立大鼠主动脉外膜成纤维细胞和肌成纤维细胞2种细胞表型。以实时定量逆转录聚合酶链反应技术和蛋白免疫印迹方法分析HGF及c-met在2种不同表型细胞中的表达。酶联免疫吸附试验检测2种细胞无血清培养上清液中HGF的含量。结果 HGFmRNA及HGF蛋白，c-metmRNA及c-met蛋白在主动脉外膜成纤维细胞。肌成纤维细胞中均有表达。在主动脉外膜成纤维细胞转变为肌成纤维细胞后表达明显上调，随转化生长因子-β1刺激浓度和时间的增加，在主动脉外膜成纤维细胞逐渐表达-α-平滑肌肌动蛋白转变为肌成纤维细胞的过程中HGF表达逐渐上调。结论 血管外膜成纤维细胞存在局部HGF系统。HGF可能在血管外膜细胞瑶型转化中有一定作用。     

外力诱导培养兔成骨细胞表达c—fos的实验研究

目的：探讨兔成骨细胞在机械力作用下将机械力信号转变为生物学效应的作用机理；方法：利用ＦＯＳ免疫组化技术观察在受到外力后培养的兔成骨细胞对立即早期基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白产物（ＦＯＳ）的表达情况；结果：几乎所有的成骨细胞核均染成黄褐色，为ＦＯＳ免疫组化反应阳性；结论：ｃ－ｆｏｓ在兔成骨细胞的机械力信号向生物学效应转换的过程中可能发挥重要作用。     

病理性瘢痕中c-myc、c-fos和ras原癌基因表达的实验研究

目的 探讨原癌基因的表达与病理性瘢痕形成的相关性。方法 应用免疫组化SP法及图像定量分析，检测c-myc、c-fos和ras p21蛋白在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的表达，结果 在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的成纤维细胞中c-myc和c-fos呈强阳性表达，而ras p21蛋白在病理性瘢痕的成纤维细胞中缺乏表达。结论 ①病理性瘢痕中c-myc和c-fos癌基因受激活，可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与降解以及对细胞因子的调控，并导致瘢痕增生。②ras癌基因在病理性瘢痕形成中可能不突变或不起主要作用。③病理性瘢痕只是部分原癌基因的有限制性表达，不存在多基因无限制性的共同表达可能是其较少癌变的原因。     

Ki-67与Bcl-2在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测,观察其在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中的表达及临床意义。方法：用免疫组织化学染色的方法,对35例NHL外科活检石蜡包埋组织切片进行Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的检测。结果：（1）Ki-67在低度恶性NHL组中的表达低于高度恶性组（P＜0．01）,而Bcl-2在低度恶性NHL组中的表达高于高度恶性组（P＜0．01）。（2）B细胞性NHL中Bcl-2的表达高于T细胞性NHL（P＜0．02）,而Ki-67表达差异差异无显著性（P＞0．1）。（3）首次化疗缓解组中的Bcl-2表达低于未缓解组（P＜0．01）,而Ki-67表达差异无显著性。（4）高Ki-67表达组的生存期比低表达组短（P＜0．05）,而Bcl-2的表达在两组之间无差异。结论：增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达与NHL的恶性程度和预后密切相关,是了解肿瘤发生和判断NHL预后的有效指标。     

表皮生长因子受体跨膜区编码序列的克隆

目的：克隆表皮生长因子受体跨膜区（Transmembrane,TM）编码序列，为构建跨膜型超抗原和细胞因子的表达载体奠定基础。方法：以表达c-erb-B2癌基因的中国卵巢癌细胞系HO－8910细胞的RNA逆转录产物(cDNA）为模板，用两条针对c-erb-B2全长基因序列中编码TM区序列特异性的引物，采用RT－PCR方法克隆TM区片段并测序。结果：实验克隆的TM编码序列，经测序证实与Genbank中接受号为M11730的TM区序列完全一致；与接受号为X03363的TM区序列存在G→A的多态性。结论：成功地克隆了TM编码序列，并证实源于中国的卵巢癌细胞系HO－8910中所包含的表皮生长因子受体基因中编码的TM区序列存在多态性。     

胶质瘤bcd—2基因表达水平与其细胞增殖和凋亡关系的研究

目的 探讨胶质瘤细胞ｂｃｌ－２基因表达水平与肿瘤恶性程度、细胞增殖活性及凋亡程度的关系。方法 以６９例不同级别的人胶质瘤组织为研究对象,用原位杂交及免疫组化染色ＡＢＣ法分别检测ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ、ｂｃｌ－２蛋白和增殖细胞核抗原（细胞增殖活性标记物）的表达,并用３’末标记法做原位细胞凋亡检测。结果 ６４例（９２．８％）表达ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ,６０例（８７．０％）表达ｂｃｌ－２蛋白,两者的表达水平呈正     

Relationship between lead concentration in blood and biological response for porphyrin metabolism in workers occupationally exposed to lead

Summary The biological responses of the heme biosynthesis pathway in male workers moderately exposed to lead are discussed in relation to the concentration of lead in the blood. The level of erythrocyte delta-aminolevulinic acid dehydratase (ALA-D) activity in the group of lead-exposed workers was remarkably reduced while the level of erythrocyte protoporphyrin (Proto) in them was strikingly increased, compared to normal levels. On the other hand, the amounts of hemoglobin (Hb) and urinary delta-aminolevulinic acid (ALA) in the group of lead-exposed workers kept the normal levels.In the workers moderately exposed to lead, the log of erythrocyte Proto level was closely correlated to the blood lead level and the sensitivity of the Proto test was almost equal to that of erythrocyte ALA-D test. It was observed that the erythrocyte Proto was remarkably increased even in lead-exposed workers whose ALA excretion into the urine was in the range of normal level.