人TERT基因启动子区生物信息学分析

目的：探讨人端粒酶逆转录酶基因启动子区的序列特征、转录因子及其结合位点。方法：从NCBI数据库中获取人TERT基因组序列及其启动子序列：利用EMBOSS 6.6.0、CpGfinder 1.0和MethPrimer 1.0软件预测启动子区CpG岛的位置；利用Patch 1.0和PROMO 3.0.2软件预测可与TERT基因结合的潜在转录因子及结合位点。结果：TERT基因定位于5q 13.33,基因序列全长共41 881bp,其启动子位于TERT基因5｀端上游2500bp处，全长2043bp。TERT基因启动子区可能存在２个CpG岛和118个转录因子。结论：通过生物信息学软件对hTERT基因启动子进行预测分析，可提高对hTERT基因启动子的研究效率，以便更加深入了解hTERT基因的调控机制及其生物学功能。     

跟骨骨折手术切口一期愈合的经验体会

目的 总结跟骨骨折手术切口一期愈合的经验体会.方法 2009年5月至2010年9月应用切开复位内固定治疗32例(36足)跟骨骨折患者,均为男性；年龄18～50岁,平均36.5岁.入院后即刻行手法复位石膏托外固定和脱水消肿.手术采用足外侧“L”形切口,于跟骨表面全层剥离软组织,显露跟骨外侧面,恢复跟骨的高度、宽度及距下后关节面平整,再用钢板螺丝钉内固定.结果 术后3周切口均获一期愈合.患者术后获6～12个月(平均9个月)随访,全部患者切口愈合平整,无切口感染、破溃及皮肤坏死等并发症发生.结论 选择合适手术时机,重视软组织保护和手术操作技巧,是确保切口一期愈合的重要因素.     

新兵股骨疲劳性骨折诊断治疗与预防

疲劳性骨折是部队常见训练性损伤,如何早期诊断,正确治疗和有效预防是每一个基层军医要掌握的基本技能。现将我院2008-01～2011-03诊断治疗的46例股骨疲劳性骨折进行回顾性分析,总     

经椎弓根及伤椎内固定治疗胸腰段椎体骨折体会

目的总结跨伤椎和经伤椎椎弓根置钉复位固定治疗胸腰椎骨折的临床效果。方法 2003年1月至2010年4月我们收治126例胸腰段椎体骨折,年龄23～61岁。采用后路减压椎管成形椎弓根内固定植骨融合术,跨伤椎固定97例,经伤椎置钉固定29例。结果所有伤椎椎体前缘高度与后缘高度（PVH）的比值由术前（0.34±0.11）增加到术后（0.84±0.10）;矢状位后凸Cobb角由术前（25.46±2.59）°减少至术后（12.12±1.23）°。跨椎体组伤椎椎体前缘高度与后缘高度的比值由术前（0.36±0.12）增加到术后（0.83±0.11）;矢状位后凸Cobb角由术前（25.40±2.50）°减少至术后（12.2±1.21）°。经伤椎组伤椎椎体前缘高度与后缘高度的比值由术前（0.345±0.11）增加到术后（0.882±0.12）,矢状位后凸Cobb角由术前（25.43±2.53）°减少至术后（10.17±1.21）°。两组间结果对比显示经伤椎组椎体高度恢复和矫正后凸畸形效果好于跨椎体组（P〈0.01）,末次随访显示跨椎体组矫正角度有所丢失。跨伤椎组发生断钉3例,松动2例,经伤椎椎弓根螺钉内固定组无松动,无断裂、断棒。结论椎弓根钉固定是治疗胸腰椎骨折的一种有效方法,经伤椎固定可以有效维持脊柱复位效果。     

内毒素血症小鼠骨骼Toll样受体4基因的变化

目的 通过检测内毒素血症模型动物骨骼相关基因表达变化,进一步明确内毒素对机体的损害机制,为下一步研究骨骼变化对脏器产生何种影响奠定基础.方法 腹腔注射内毒素脂多糖(LPS)制作内毒素血症小鼠模型.将48只小鼠随机分为正常组和LPS处理4、6、8、12、24、48和72 h组,每组6只.采尾血计数全血白细胞;取眼眶血检测肝、肾功能;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨骼中TLR4 mRNA表达;苏木素-伊红(HE)染色,镜下观察骨骼病理学变化.结果 与正常组比较,LPS 4 h组白细胞计数显著下降(P＜0.01),之后逐渐升高,于72 h时显著高于正常组(P＜0.05);LPS 4 h和6 h组丙氨酸转氨酶(ALT)水平显著升高(P均＜0.05),于8 h降至正常水平(P＞0.05);LPS 6 h组血尿素氮(BUN)水平逐渐升高(P＜0.05),于8 h达峰值(P＜0.05),然后下降,12 h趋于正常(P＞0.05);LPS 6 h组TLR4 mRNA表达增加(P＜0.01),24 h达峰值(P＜0.01),然后逐渐下降,72 h仍处在较高水平(P＜0.05).LPS作用于骨骼后,HE染色显示骨骼无明显改变.结论 内毒素血症中骨骼TLR4 mRNA表达量显著增加.     

成骨细胞特异性过表达h1 calponin转基因小鼠的建立

目的为从整体动物水平研究碱性调宁蛋白（h1-calponin）在骨形成过程中的直接作用，我们构建了成骨细胞中特异性过表达h1—calponin的转基因小鼠模型，并对其表型进行了初步分析。方法构建在成骨细胞特异性启动子（collagen I promoter）驱动下表达h1—calponin的载体（pColl-calponin），纯化DNA片段，再以显微注射的方法将转基因片段导人小鼠受精卵，经移植后得到小鼠。PCR法检测整合到小鼠基因组中的外源基因，提取F1代阳性小鼠原代成骨细胞RNA，RT-PCR检测h1-calponin在小鼠成骨细胞中的表达情况，并观察转基因小鼠表型及体重变化情况。结果PCR检测结果显示1只Go代转基因鼠中检测到阳性信号，RT-PCR显示F1代转基因小鼠成骨细胞中表达h1—calponin较野生对照小鼠明显增加，且转基因小鼠体重与野生小鼠相比有明显降低。结论成功构建了在成骨细胞特异性过表达h1—calponin的转基因小鼠，为深入研究h1—calponin在骨骼发育中的作用提供了良好的动物模型。     

耳部瘢痕疙瘩核切除联合术后放疗的临床研究

目的：观察采用瘢痕核切除方案联合术后浅层电子线放疗治疗耳部瘢痕疙瘩临床疗效。方法：选取2016年3月-2021年3月新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科治疗的耳廓瘢痕疙瘩48例，根据瘢痕疙瘩的分型及大小设计切口线，采用瘢痕核切除的方式尽量切除瘢痕保证无张力缝合，术后24 h内联合浅层电子线放疗，随访分析治疗效果及满意度。结果：本组48例患者，病灶62处，所有患者均一期愈合，外形良好，术后均按要求联合放射治疗，术后随访12～36个月，治愈32例（66.6%），显效14例（29.2%），总有效率95.83%，复发2例（4.16%）。结论：采用核切除联合放疗治疗耳部瘢痕疙瘩效果理想，复发率低，手术创伤小简单易行，值得推广应用。     

山柰酚对人表皮黑素细胞黑素合成及增殖凋亡的影响观察

目的 观察山柰酚对人表皮黑素细胞黑素合成及增殖凋亡的影响。方法 取20岁以下男性包皮标本制作人表皮黑素细胞悬液,培养后采用CCK-8法确定山柰酚、H₂O₂的应用剂量。取黑素细胞分成10μmol/L山柰酚组、阴性对照组：10μmol/L山柰酚组加入10μmol/L的山柰酚,阴性对照组加入等体积培养液,采用NaOH裂解法观察山柰酚对人表皮黑素细胞黑素合成的影响,以黑素合成量表示。取黑素细胞分成对照组、山柰酚组、H₂O₂组、山柰酚+H₂O₂组：对照组加入黑素细胞培养48 h,山柰酚组加入10μmol/L山柰酚培养48 h,H₂O₂组加入0.8 mmol/L H₂O₂培养48 h,山柰酚+H₂O₂组加入10μmol/L山柰酚处理24 h后继续加入0.8 mmol/L H₂O₂再培养24 h;...     

软骨细胞条件性敲除PTEN基因的FGFR3功能增强型点突变小鼠的获得及其表型初步分析

目的 获得在软骨细胞中条件性敲除PIEN基因的FGFR3增强型点突变小鼠并进行初步表型分析.方法 通过FTEN条件性基因敲除小鼠(Ptenflox/flox小鼠),与软骨细胞特异表达Cre重组酶的小鼠(Col2aCre)交配,获得在软骨细胞中特异敲除PTEN基因小鼠(Col2aCre:Ptenfolox/flox);同时,利用Ptenflox/flox小鼠与FGFR3增强型点突变小鼠(Fgfr3G369C/+小鼠,即ACH小鼠)交配,子代杂合子小鼠(Ptenflax/:ACH)之间再交配,获得Ptenflox/flox:ACH小鼠;通过Col2aCre:Ptenflox/flox和Ptenflox/flox:ACH交配即可获得在软骨细胞中特异性敲除PTEN基因的FGFB3增强型点突变小鼠((Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH).采用PCR对小鼠基冈型进行鉴定,免疫荧光染色检测PTEN基因的敲除效率,通过X光平片摄影对小鼠的表型进行初步分析.结果 获得了在软骨细胞中敲除PTEN的FGFR3点突变小鼠,免疫荧光染色证实Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠软骨细胞中PTEN蛋白因为基因敲除而表达很低.初步的表型分析显示:Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠身长、尾长均较Pten flox/flox:ACH小鼠长(P＜0.05,n=5).Col2aCre:Ptenflox/flox:ACH小鼠表型,较Ptenflox/flox:ACH小鼠的侏儒表型有所缓解.结论 采用基于Cre/LoxP系统的条件性基因敲除策略,获得了在软骨细胞中敲除PTEN基因的FGFR3增强型突变小鼠,表型分析初步显示,软骨细胞特异性敲除PTEN基因可部分缓解由FGFR3增强型点突变所导致的小鼠侏儒表型.该小鼠的获得,为研究P13K/AKT信号通路在FGFR3突变介导的软骨生长抑制中的作用提供了实验动物平台.