CAG方案治疗复发性急性髓细胞白血病疗效观察

目的:探讨CAG方案对复发性急性髓细胞白血病(AML)的临床疗效和不良反应.方法:选择在我院治疗的复发AML 46例,复发后20例选用CAG方案:阿克拉霉素(ACR)10～14 mg·m-2·d-1 (第1～4天,10～14天),静脉滴注;阿糖胞苷(Ara-C)10 mg·m-2·d-1 q12h(第1～14天),皮下注射;粒细胞集落刺激因子(G-CSF)200 μg·m-2·d-1(第1～14天),皮下注射.26例选用对照方案:①DAH:柔红霉素40 mg·m-2·d-1(第1～3天);Ara-c 200 mg·m-2·d-1(第1～7天),高三尖杉酯碱(HHT)3～4 mg·m-2·d-1(第1～7天);②MAE:米托蒽醌(Mito)10 mg·m-2·d-1(第1～3天),Ara-c 200 mg·m-2·d-1(第1～7天),依托泊甙(VP-16)60 mg·m-2·d-1(第1～5天).结果:强化疗组26例,经上述化疗1个疗程后6例获得完全缓解(CR),部分缓解(PR)10例,未缓解(NR)10例.PR和NR 20例患者中6例一般情况差,未能继续强化疗,换用CAG方案;14例予第2个疗强化疗,CR 4例,NR 10例;2疗程CR共10例(38.4%).26例CAG组第1个疗程CR 12例,PR 10例,NR 4例.PR和NR 14例予以CAG第2个疗程治疗,CR 8例,PR 2例,NR 4例,2疗程CR共18例(69.2%).2组CR率差异有统计学意义(P<0.05).CAG组骨髓抑制不明显,不良反应也低.结论:复发AML治疗中,CAG方案是较对照组方案更为有效的且不良应低的治疗方法.     

急性髓细胞白血病CD7表达的意义

目的:分析表达CD7抗原的急性髓细胞白血病(AML)的临床特点、治疗效果及预后。方法:38例初发AML住院患者,采用一组CD系列单克隆抗体检测免疫表型,用G显带进行染色体核型分析,将CD7+AML与CD7-AML进行对比。结果:CD7+AML的髓外白血病发生率高于CD7-AML(P<0.05),其他方面差异没有显著性。结论:CD7抗原表达与AML临床特点、治疗效果及预后没有明显相关性。     

小鼠白血病细胞L1210外泌体微RNA表达谱及其功能分析

目的：对白血病细胞外泌体（LCEX）中微 RNA（miRNA）的表达特点及其功能进行分析。方法以小鼠白血病细胞株 L1210为模型,应用密度梯度超速离心法分离其培养上清,获得 LCEX L1210,应用基因芯片技术检测 L1210细胞和 LCEXL1210中 miRNA 的表达,比较二者 miRNA 的表达,对部分差异表达的miRNA 应用实时荧光定量 PCR 进行验证,通过 Gene Ontology 数据库分析。结果在 LCEX L1210中共鉴定出1044种 miRNA,L1210细胞中共鉴定出872种 miRNA,其中732种 miRNA 为两者共有,两者共同表达的 miRNA 占 L1210细胞的83.9%,占 LCEXL1210的70.1%,提示 LCEXL1210中70%以上 miRNA 来自于其母细胞。在 LCEXL1210中有312种 miRNA 在其母体细胞中没有鉴定出,为 LCEXL1210所特有。有些miRNA 在 LCEXL1210中表达明显高于 L1210细胞,如 miR-16-1、miR-210及 miR-195等,提示 LCEX 的miRNA 表达与其母体细胞存在表达差异。对部分表达差异的 miRNA 应用实时荧光定量 PCR 验证显示,这些 LCEX 高表达的 miRNA 参与多种生物学功能及信号转导途径的调控。结论 LCEXL1210所含的miRNA 与其来源细胞 L1210细胞所含的 miRNA 有高度相似性,但有1／3的 miRNA 为其所特有。这些LCEXL1210中高表达的 miRNA 参与多种生物学功能及信号转导途径的调控。     

ATG用于异体造血干细胞移植前预防移植物抗宿主反应

目的分析异体造血干细胞移植前加用抗T淋巴细胞球蛋白(ATG)预防移植物抗宿主反应(GVHD)的疗效。方法27例白血病患者分为两组,每组移植供体来源及病种类似,分别有同胞兄妹、无关供体和人类白细胞抗原(HLA)半相合供体。A组(n=12):采用经典的CsA MTX预防GVHD;B组(n=15):采用CsA MTX ATG预防GVHD。结果B组15例患者全部存活,除4例出现Ⅱ°急性GVHD(aGVHD)外,其余11例均在移植后30 d左右仅出现Ⅰ°GVHD,并很快控制。A组12例患者中,3例HLA半相合移植患者分别在移植后第7、9和10天即出现Ⅳ°超急性GVHD,另有1例无关供体患者出现Ⅲ°aGVHD,该4例患者由于重度GVHD继发肺部感染而死亡;其余8例同胞之间的移植分别出现Ⅱ°~Ⅲ°aGVHD。结论在异体造血干细胞移植前应用ATG可以有效预防GVHD的发生或减轻GVHD的严重度,明显减少移植相关死亡率。     

三种血细胞去除术的临床应用比较

目的对三种血细胞去除术进行比较.方法采用连续流动血细胞分离机对37例高细胞性血液病患者进行40例次血细胞去除术.结果行白细胞去除术后,患者外周血白细胞数由(231.52±79.5)×109/L降至(140.64±51.62)×109/L(P＜0.01);行血小板去除术后,患者外周血血小板数由(944.69±311.69)×109/L降至(458.15±198.35)×109/L(P＜0.01);行红细胞去除术后,患者外周血血红蛋白数由(192.14±32.2)g/L降至(149.43±34.54)g/L(P＜0.01).临床症状明显改善.去除过程中有3例出现口唇麻木,经治疗后症状缓解.结论血细胞去除术是一种快速有效安全的治疗方法.     

白血病细胞来源胞外体的生物学特性及其致敏DC的抗白血病效应

目的:探索白血病细胞来源的胞外体(leukemia cell-derived exosome,LEX)的生物学特性及其致敏DC的抗白血病免疫效应.方法:超速离心分离纯化BCR-ABL阳性的白血病K562细胞来源的胞外体(LEXK562),采用免疫电镜及Western blotting检测LEXK562中热激蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)及BCR-ABL的表达,采用激光扫描共聚焦显微镜及流式细胞术检测LEXK562靶向结合DC的动力学,采用LDH释放法以及小鼠模型体内实验检测LEX及其致敏DC的抗白血病免疫效应.结果:与其他细胞来源的胞外体相似,K562细胞来源的胞外体LEXK562为直径50 ～ 100 nm的囊状结构,且表达K562细胞特异性的BCR-ABL和HSP70分子.LEXK562在体外可靶向结合DC,3～4h到达高峰,并能在DC中稳定存在72 h以上.LEXK562致敏DC(DC/LEXK562)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)可有效杀伤K562靶细胞,效靶比为50:1时,其杀伤活性显著高于LEXK562诱导的CTL[(68.6±5.7)％vs(22.5±2.9)％,P＜0.01];体内实验进一步证实,白血病L1210细胞来源的胞外体(LEXL1210)免疫后小鼠接种L1210细胞的成瘤率明显高于LEXL1210致敏DC(DC/LEXL1210)免疫小鼠的成瘤率[(54.17±8.33)％vs(16.67±4.18)％,P＜0.05].结论:LEX表达白血病细胞相关抗原,LEX体外可靶向结合DC,其致敏的DC能诱导更强的抗白血病免疫效应.     

以LacZ基因标记的大鼠微量残留白血病细胞的分布研究(摘要)

目的　了解微量残留白血病 (ＭＲＬ)在体内的分布状态。方法　利用携带外源性标志基因ＬａｃＺ的白血病细胞株ＬＴ1 2ｎｌ建立了ＢＮ大鼠ＭＲＬ模型。应用逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)及巢式ＰＣＲ方法 ,结合Ｘ ｇａｌ染色法、细胞形态学及病理形态学方法检测ＢＮ大鼠ＭＲＬ阶段白血病细胞中的特异性标志基因ＬａｃＺ。结果　化疗后第 4天肱骨标本中出现阳性条带 ;第6天股骨出现阳性条带 ;第 9天脾脏出现阳性条带 ,肱骨条带的信号明显较前增强。同期Ｘ ｇａｌ检测脾脏阴性。外周血、肝脏持续阴性。结论　ＰＣＲ方法可作为实验性ＭＲ…     

以LacZ基因标记的大鼠微量残留白血病细胞的分布研究

目的 了解微量残留白血病（ＭＲＬ）在体内的分布状态。方法 利用携带外源性标志基因ＬａｃＺ的白血病细胞株ＬＴ１２ｎｌ建立了ＢＮ大鼠ＭＲＬ模型。应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及巢式ＰＣＲ方法,结合Ｘ－ｇａｌ染色法,细胞形态学及病理形态学方法检测ＢＮ大鼠ＭＲＬ阶段白血病细胞中的特异性标志基因ＬａｃＺ。     

自身骨髓瘤抗原致敏树突细胞介导特异性CTL反应的研究

目的：研究多发性骨髓瘤(MM)患者肿瘤冻融物致敏的树突细胞(DC)能否诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应。方法：用MM患者骨髓CD34^ 细胞诱生DC。将MM患者骨髓瘤冻融物冲击致敏DC。MTT法检测骨髓瘤抗原致敏及非致敏DC诱导的自身T细胞对不同靶细胞(患者骨髓瘤细胞、K562细胞)的杀伤率。结果：骨髓瘤冻融物致敏DC诱导的自身T细胞对患者骨髓瘤细胞的杀伤远大于对K562细胞的杀伤。结论：患者骨髓瘤冻融物致敏的DC能有效诱导自身T细胞特异性抗瘤免疫。