非小细胞肺癌组织中高表达的miR-1269 对肺癌细胞A549 生物学行为的影响

目的:探讨miR-1269 在非小细胞肺癌（non-small-cell lung cancer, NSCLC）组织中的表达和对人NSCLC A549 细胞生物学特性的影响及其作用机制。方法：选取2017 年1 月至2018 年1 月在河北医科大学第四医院胸外科进行首次手术切除的34例新鲜NSCLC 癌组织及相应的癌旁组织,应用qRT-PCR 检测NSCLC 癌组织及相应的癌旁组织中miR-1269 的表达水平。将miR-1269 mimics 和mimics NC转染至A549 细胞后,应用MTS实验、细胞划痕实验和Transwell 实验检测A549 细胞增殖、迁移和侵袭能力,流式细胞术检测其细胞周期的变化。生物信息学软件预测miR-1269 的靶基因,并通过Western blotting 和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269 对靶基因的调控作用。采用Western blotting 检测已转染的A549 细胞的细胞周期依赖性激酶抑制剂p21、细胞周期蛋白D2 以及上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白ZEB2 和E-cadherin 的表达情况。结果：NSCLC癌组织中miR-1269 的表达水平显著高于对应的癌旁组织（2.81±2.27 vs 1.61±1.36,P<0.05）。miR-1269 mimics 转染组A549 细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著高于空白对照组和mimics NC转染组（均P<0.01）。转染miR-1269-mimics 的A549 细胞S期细胞比例明显高于mimics NC转染组[ （46.54±1.57）% vs（23.32±3.15）%,P<0.01]。miR-1269 可与FOXO1 基因3’端非翻译区的结合位点相结合,且过表达miR-1269 后,A549 细胞中FOXO1 的表达水平及荧光素酶报告基因的活性均明显降低（均P<0.01）。miR-1269 mimics 转染组A549 细胞中p21、E-cadherin 蛋白表达水平降低（均P<0.05）,而CyclinD2、ZEB2 蛋白表达水平升高（均P<0.05）。结论：miR-1269 在NSCLC组织中表达上调,并且能够促进A549 细胞的增殖、迁移、侵袭能力和影响细胞周期进程;其作用机制可能与靶向调控抑癌基因FOXO1 的表达有关。     

MiR-429及Bmi-1 mRNA在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的：研究miR-429和Bmi-1 mRNA在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）组织中的表达及其临床意义。方法：选取自2014年1月—2015年12月河北医科大学第四医院的45例DLBCL患者瘤组织和28例正常对照人群淋巴结组织，用实时荧光定量反转录PCR（RT-qPCR）技术检测组织中miR-429及Bmi-1 mRNA的表达水平，并分析二者之间的关系及其与患者临床病理指标之间的关系。结果：DLBCL组织中miR-429表达水平较正常淋巴结组织明显降低，而Bmi-1 mRNA的表达水平明显升高（P < 0.01）。miR-429低表达组和Bmi-1 mRNA高表达组患者临床分期、骨髓浸润程度、Ki-67阳性率和IPI积分均分别高于miR-429高表达组和Bmi-1 mRNA低表达组（P < 0.05）。结论：DLBCL组织中miR-429及Bmi-1 mRNA的表达水平与患者病情进展和预后密切相关。组织中低表达miR-429及高表达Bmi-1 mRNA可能是患者临床预后较差的预测指标。     

MiR-429及Bmi-1 mRNA在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的:研究mi R-429和Bmi-1 m RNA在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及其临床意义。方法:选取自2014年1月-2015年12月河北医科大学第四医院的45例DLBCL患者瘤组织和28例正常对照人群淋巴结组织,用实时荧光定量反转录PCR(RT-q PCR)技术检测组织中mi R-429及Bmi-1 mRNA的表达水平,并分析二者之间的关系及其与患者临床病理指标之间的关系。结果:DLBCL组织中mi R-429表达水平较正常淋巴结组织明显降低,而Bmi-1 mRNA的表达水平明显升高(P<0.01)。mi R-429低表达组和Bmi-1 mRNA高表达组患者临床分期、骨髓浸润程度、Ki-67阳性率和IPI积分均分别高于miR-429高表达组和Bmi-1 m RNA低表达组(P<0.05)。结论:DLBCL组织中mi R-429及Bmi-1 mRNA的表达水平与患者病情进展和预后密切相关。组织中低表达miR-429及高表达Bmi-1 mRNA可能是患者临床预后较差的预测指标。     

香加皮宝藿苷-Ⅰ抑制结肠癌细胞株SW480 和RKO的恶性表型及其作用机制

目的：探讨香加皮宝藿苷-Ⅰ对人结肠癌细胞株SW480 和RKO增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响，并对其机制进行初步的探讨。方法：用不同质量浓度（0、5、10、20 μg/ml）的香加皮宝藿苷-Ⅰ溶液分别处理结肠癌细胞株SW480 和RKO，采用MTT法检测细胞的增殖情况，通过细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力，通过Transwell 方法检测细胞的迁移和侵袭能力，通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。通过Western blotting 检测C-PARP、Bcl-2 与caspase-3 蛋白的表达水平，通过RNA-seq 检测分析香加皮宝藿苷-Ⅰ对SW480 细胞转录组的影响及其可能影响的信号通路。结果：香加皮宝藿苷-Ⅰ能抑制SW480 和RKO细胞的增殖、侵袭和迁移，并且能够诱导细胞凋亡和阻滞于细胞G0/G1期。香加皮宝藿苷-Ⅰ处理可上调SW480 和RKO 细胞株中C-PARP与caspase-3 蛋白的表达水平、下调Bcl-2 蛋白的表达水平；RNA-seq数据分析显示，SW480 细胞DNA复制及ERBB信号通路等相关基因的转录都受到香加皮宝藿苷-Ⅰ的影响。结论：香加皮宝藿苷-Ⅰ通过影响凋亡相关蛋白的表达、细胞DNA复制和ERBB信号通路来诱导细胞凋亡和细胞G0/G1期阻滞，进而抑制人结肠癌细胞株SW480和RKO的恶性表型。     

肉桂醛诱导食管癌鳞状细胞癌Eca109细胞凋亡作用及机制研究

目的探究肉桂醛对食管癌鳞状细胞癌Eca109细胞增殖活性及凋亡的作用,并探讨其机制。方法 MTS实验检测不同质量浓度(1.88、3.75、7.50、15.00、30.00μg/m L)肉桂醛对Eca109细胞增殖活性的影响;倒置相差显微镜观察Eca109细胞形态学变化;流式细胞术检测不同质量浓度肉桂醛对Eca109细胞周期分布和凋亡的影响;Westernblotting检测不同质量浓度肉桂醛作用24h对Eca109细胞凋亡相关蛋白Caspase-3/Caspase-9、促凋亡蛋白Bax以及抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1表达水平的影响。结果质量浓度为15.00、30.00μg/m L的肉桂醛作用Eca109细胞24 h后,与对照组相比,肉桂醛组细胞增殖活性显著降低(P0.05);经肉桂醛作用后,Eca109细胞呈现明显的凋亡形态学变化;经不同质量浓度肉桂醛处理Eca109细胞24 h后,G0/G1期细胞比例明显下降(P0.05),而G2/M期细胞比例明显增加(P0.05);肉桂醛处理Eca109细胞24h后,细胞凋亡率明显上升(P0.05);与对照组相比,经不同质量浓度肉桂醛处理24 h后,Eca109细胞中凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9出现明显的裂解片段(P0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1表达水平显著降低(P0.05),而促凋亡蛋白Bax表达明显上调(P0.05)。结论肉桂醛可抑制食管癌鳞状细胞癌Eca109细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能与上调凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、促凋亡蛋白Bax表达,以及下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1表达有关。     

中药木鳖子乙醇提取物对羟基桂皮醛对小鼠的毒性

目的：检测中药木鳖子乙醇提取物对羟基桂皮醛（CMSP）的毒性,为其应用于临床肿瘤治疗提供毒理学依据。方法：60只昆明小鼠（4~6周龄,雌雄各半）分为空白对照组,CMSP 200 mg/kg和400 mg/kg染毒组,每组20只,采用腹腔注射的方式染毒,每周3次,每次100 μL,连续28 d。观察各组小鼠一般状态,28 d后,处死小鼠,摘眼球取血,采用全自动血细胞分析仪及全自动生化分析仪检测小鼠血常规、肝肾功能和心肌酶谱等生化指标,并计数雄性小鼠精子畸形率,同时采用HE染色观察各组小鼠重要脏器组织的病理改变。观察骨髓细胞微核形成率。结果：观察期内无小鼠死亡,各组小鼠血常规指标、雄性小鼠精子畸形率与对照组相比,差异均无统计学意义（P > 0.05）,高剂量CMSP组小鼠外周血ALT和AST较对照组高（P < 0.05）,肾功能及心肌酶谱无明显差异（P > 0.05）。HE染色结果显示各组小鼠内脏组织均未观察到肉眼可见的病理改变。小鼠骨髓细胞微核形成率亦无明显变化（P > 0.05）。结论：在本研究中,我们发现CMSP具有相对较小的毒性作用,因此可考虑应用于肿瘤临床治疗中,但在后续研究中需充分关注其可能具有的肝功能损伤作用。     

膀胱癌组织中高表达的MTA2 促进膀胱癌细胞T24 的恶性生物学行为

［摘要］ 目的：分析肿瘤转移相关蛋白（MTA2）在人膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞系T24 恶性生物学行为的影响,探讨MTA2 对膀胱癌进展中的作用。方法：收集河北省人民医院2012 年12 月至2014 年12 月收治的62 例膀胱癌患者癌组织和28 例正常膀胱组织（取自膀胱炎患者,病理学诊断为正常组织）标本,通过免疫组织化学染色检测膀胱癌和正常膀胱组织中MTA2 的表达水平;分析MTA2 表达水平与患者临床病理特征的相关性。构建稳定高表达MTA2 的膀胱癌T24 细胞系,通过MTS、克隆形成、划痕愈合和Transwell 实验检测MTA2 对膀胱癌T24 细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响。结果：与正常膀胱组织相比,膀胱癌组织中MTA2 呈明显高表达（P<0.01）;MTA2 的高表达状态与膀胱癌患者的性别、年龄、肿瘤体积无关（P>0.05）,而与患者更高的TNM分期、肿瘤的组织学分级、淋巴浸润和转移有关（均P<0.05）。在膀胱癌T24 细胞系中过表达MTA2 后,细胞的增殖活性明显升高（P<0.05）,克隆形成、划痕愈合、迁移和侵袭能力均明显增强（均P<0.01）。结论：MTA2 在人膀胱癌组织中表达上调,能够促进T24 细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭等恶性生物学行为。     

Mda-7/IL-24和C-myb在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的：研究弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中Mda-7/IL-24和C-myb的表达水平及其临床意义。方法：收集72例DLBCL患者的瘤组织及36例正常淋巴结组织;通过半定量逆转录PCR及免疫组化技术分别从mRNA及蛋白水平检测各组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达水平,并对Mda-7/IL-24与C-myb进行相关性分析;收集患者临床资料,分析瘤组织Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平与患者年龄、性别、临床分期、是否骨髓浸润、Ecog评分及国际预后指数（IPI）之间的关系;分析瘤组织Mda-7/IL-24与C-myb蛋白表达水平与患者无进展生存期之间的关系。结果：与正常淋巴结组织相比,DLBCL组织中Mda-7/IL-24 mRNA的表达水平明显降低,而C-myb mRNA的表达水平则明显增高（P < 0.01）;72例DLBCL患者瘤组织中Mda-7/IL-24与C-myb mRNA表达水平呈明显负相关（r=-0.43,P < 0.01）;瘤组织低表达Mda-7/IL-24、高表达C-myb的患者其临床分期晚、易骨髓转移、瘤细胞增殖活性强、IPI积分较高,同时患者无进展生存期较短（P均 < 0.05）。结论：DLBCL组织中Mda-7/IL-24与C-myb的表达呈明显负相关,Mda-7/IL-24低表达或C-myb高表达是DLBCL患者临床预后较差的指标。     

非编码RNA snord105b 在胃癌组织和血清中的表达及其对胃癌细胞增殖能力的影响

[摘要] 目的：检测非编码RNA snord105b 在胃癌患者组织和血清及胃癌细胞中的表达水平及其与胃癌患者临床病理特征的相关性,并分析其对多种胃癌细胞增殖能力的影响。方法：收集2016 至2017 年河北医科大学第四医院普外三科未经放化疗的胃癌患者手术切除癌组织及相应的癌旁组织样本120 例、术前胃癌患者外周血50 例、健康献血者外周静脉血30 例,以及5 种胃癌细胞系SGC-7901、AGS、MGC-803、BGC-823、HGC-27 和胃黏膜正常上皮细胞GES-1。采用qPCR方法检测胃癌患者组织、血清和胃癌细胞系中snord105b 的表达水平,分析其与患者临床病理特征的相关性。通过MTS检测敲低或者过表达snord105b 对4 种胃癌细胞体外增殖能力的影响。结果：胃癌组织、血清及细胞系中snord105b 的表达水平显著高于癌旁组织、正常献血者血清及GES-1 细胞（均P<0.05）,并且胃癌组织中snord105b 的表达水平与患者年龄、肿瘤大小、分化程度、TNM分期明显相关（P<0.05）;在4 种胃癌细胞中,敲低snord105b,胃癌细胞的增殖能力显著低于对照组,而过表达snord105b,胃癌细胞增殖能力则高于对照组,差异均具有统计学意义（均P<0.05）。结论：非编码snord105b 在胃癌组织、血清和细胞系中表达明显异常,与患者的年龄、肿瘤大小、分化程度及TNM分期密切相关,其可促进多种胃癌细胞的增殖能力,可能成为胃癌早期诊断及预后判断的分子标志物。