肿瘤抑制基因HTPAP单体型构建及其与肝癌转移潜能的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者肿瘤组织DNA的HTPAP基因单体型与肝癌转移潜能的关系。方法提取864例HCC手术样本DNA,应用焦磷酸测序行SNPs检测,并予单体型构建,分析其与肝癌转移潜能的关系。构建HTPAP启动子单体型pGL3质粒,并分别转染MHCC-97H、HepG2肝癌细胞和正常的肝Hela细胞,分析不同HTPAP启动子单体型对基因转录活性的影响。结果共发现6个SNPs位点[-1053A/G、+64G/C、+357C/G、+1648-/TAAG(无插入和插入TAAG等位基因分别以T/G示,后同)、+1838A/G、+3528C/T]。单体型构建发现HTPAP中共存在11个单体型,其中AGCTAC、GCGGGT、AGCTGC、GCGGAT四种单体型占94.75%。临床病理特征分析提示单体型GCGGGT与高转移潜能正相关(P=0.0003)。启动子序列中两个SNPs(-1053AG和+64GC)存在完全LD,故只有三种启动子单体型(-1053AA/+64GG、-1053AG/+64GC GC和-1053GG/+64CC);双荧光报告法发现三种单体型的HTPAP启动子都具有显著转录活性,其中-1053AA/+64GG单体型启动子转录活性较-1053GG/+64CC和-1053AG/+64GC单体型启动子强,差异具有统计意义(P=0.005,0.009)。结论肿瘤转移抑制基因HTPAP的GCGGGT单体型与HCC高转移潜能正相关。HTPAP启动子单体型对基因的转录活性有显著影响并与术后复发密切相关,提示HCC中HTPAP的不同SNP单体型可能是潜在侵袭转移和复发预后的预测指标。     

shRNA下调Tspan8基因对肝癌细胞侵袭与转移的影响

目的 探讨Tspan 8基因对人肝癌细胞侵袭与转移的影响.方法 应用RT-PCR与Western印迹检测不同转移潜能肝癌细胞及组织中Tspan 8的表达;应用shRNA-Tspan 8(LV/GFP/Tspan 8)下调Tspan 8表达;MTT法检测细胞增殖变化;Western印迹检测基质金属蛋白酶12表达改变;最后应用Transwell检测细胞侵袭能力变化.结果 高表达Tspan 8见于高转移潜能的肝癌细胞,Tspan 8在肝癌组织中表达明显高于相应癌旁组织.感染LV/GFP/Tspan 8、LV/GFP后,LV/GFP/Tspan 8感染肝癌细胞的Tspan 8表达显著下调(P＜0.01);下调Tspan 8后,细胞增殖反应变化不明显(24 h,48 h与72 h,P＞0.05);但MMP-12表达抑制明显(P＜0.01),细胞侵袭能力明显下降.结论 下调Tspan 8基因的表达对肝癌侵袭与转移能力有明显抑制.     

CD151在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

CD151是最早发现与肿瘤转移呈正相关的四跨膜蛋白,是四跨膜网络形成最为关键的分子之一[1].迄今已在胃癌、前列腺癌、肺癌的研究中均发现其过表达与肿瘤的转移与复发有关[2-5],但在肝癌中的表达情况鲜见报道.我们通过检测原发性肝细胞癌、癌旁与正常肝脏组织中CD151蛋白及mRNA的表达情况并分析其与肝癌临床病理学因素间的关系,对CD151在原发性肝细胞癌的侵袭与转移中的作用作进行了初步探讨.     

肝癌的热疗方法与新进展

热疗是继手术、放疗、化疗和生物四大肿瘤治疗以外的第五种新生的疗法。经过深入应用和研究,其安全性与疗效性已毋容置疑。肝癌的热疗方法已存在多种并且还不断地更新和发展。近年我院开展的手术加术中温水浴疗治疗肝癌的方法是安全、可行的,疗效性已经得到了初步的肯定,长期疗效需要进一步研究证实,其有望成为一种肝癌综合治疗的好方法。     

肝癌肉瘤1例报告

<正>1 病例资料患者女性,51岁,因“右上腹隐痛3 d”于2016年1月21日入住海南省人民医院。患者于3 d前无明显诱因出现右上腹隐痛,无腹胀腹泻,无畏寒发热,无恶心呕吐。于当地医院医院查腹部彩超提示：右肝前叶占位,考虑原发性肝癌。入院查体：巩膜无黄染,无肝掌和蜘蛛痣。腹平坦,无压痛,肝脾未及,移动性浊音阴性。肝功能分级Child A级。血AFP 0.67 ng/mL,CA19-9 38.91 U/mL,     

术后胆漏原因分析与处理对策

胆漏（瘘）是肝胆疾病手术后较常见的并发症。我院在1995年1月至2004年12月共施行肝胆手术4687例，发生术后胆漏（瘘）39例（包括外院转入6例）。现就其发生原因、处理方法及预防措施总结报告如下。     

TNF-α与胆管癌侵袭转移的研究进展

胆管癌是一种恶性胆管上皮肿瘤,其早期诊断困难,导致胆管癌患者预后差。TNF-α作为一种主要的炎性因子,在很多肿瘤的发生发展中起重要作用。在慢性胆管炎症中能诱导胆管癌的发生发展,并在促进胆管癌侵袭转移中扮演一种总开关角色,本综述分析它与胆管癌的侵袭与转移之间的密切关系,并提示抑制TNF-α对胆管癌治疗及预防具有重要作用。     

肝癌术后复发再手术进展

近年来由于肝切除技术的发展 ,原发性肝癌术后近期效果显著提高 ,有报道手术死亡率接近为零 ,但肝癌术后 5年累计复发率达 75 %～ 10 0 % ,仍为主要死亡原因。[1 ,2 ] 如何提高肝癌患者生存期及远期疗效成为外科医生所面临的新挑战。近年来 ,有关术后复发的预防及治疗的文献较多 ,现综述如下。1　肝癌术后复发因素肝癌术后复发有肝内复发及肝外复发两种。前者分为单中心复发及多中心复发两组。单中心复发是指原发性肝癌侵入肝内门静脉分支形成微小癌栓 ,首次肝切除时未能彻底而残留复发 ,复发的实质为肝内转移。多中心复发指原发性肝癌手术…     

DNA载体介导的RNAi抑制肝癌细胞的骨桥蛋白表达及侵袭性

目的探讨骨桥蛋白(OPN)对高转移潜能人肝癌细胞系HCCLM3侵袭性影响。方法构建两个针对人OPN mRNA干扰质粒pENTR~(TM)/U6-INF(pINF-1、2)及对照质粒pENTR~(TM)/ U6-CTR(pCTR),并将其转染HCCLM3细胞。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定OPN的mR—NA表达量；Western印迹测定OPN蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)比色法实验检测HCCLM3的增殖力；Matrigel侵袭实验检测细胞侵袭力的改变；结果与仅加转染试剂的空白对照组(2．01±0．13)相比。转染24h后,plNF-1组OPN mRNA用RT-PCR无法检测到,pINF-2组mRNA(1．00±0．12)下降50%,而pCTR组mRNA(2．02±0．13)表达差异无统计学意义(P＞0．05)。转染48h后plNF-1组OPN蛋白表达(0．11±0．02)与空白对照组(1．02±0．11)相比下降90%；转染plNF-1后,HCC-LM3细胞的增殖力下降2%。但与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。Matrigel侵袭实验结果显示,与空白对照组(28．4±1．5)相比,转染plNF-1后HCCLM3细胞穿过人工基底膜的数量(10．2±0．8)明显减少,差异有统计学意义(P＜0．01)。结论pINF-1可以特异性抑制高转移肝癌细胞系HCCLM3中OPN的表达,并显著降低其侵袭力,但对细胞增殖力影响不大,此技术有望成为抑制肝癌侵袭转移的新途径。     

肿瘤转移抑制基因HTPAP的Haploview单体型构建分析

目的 通过单核苷酸多态性(SNP)检测对肿瘤转移抑制基因HTPAP进行单体型构建和分析.方法 取100例肝细胞癌(HCC)新鲜标本,应用激光捕获组织显微切割获取纯肝癌细胞、提取DNA,对HTPAP基因上已登录的15个SNP位点进行检测,应用Haploview软件构建单体型.结果 15个SNP位点中,有8个表现为单态、5个呈多态性、2个未能检测出.对100例肝细胞癌的该5个多态位点进行单体型构建后发现11种单体型,其中3种单体型(C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G)最常见,占87%,另外8种单体型占13%.4个SNP(rs7007097、rs3830326、rs1149、rs3739252)表现为强连锁不平衡关系,尽管rs11539529出现重组现象,但从整体看还是属于同一个单体型块.结论 肿瘤转移抑制基因HTPAP在肝癌中常见C-A-T-C-A、C-G-T-C-A和T-A-G-G-G三种单体型,针对不同单体型研究分析可能为肝癌转移复发、预后预测提供新的途径和指标.