CD55CD59CD34对PNH早期诊断研究应用

目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在阵发性睡眠性血红蛋白尿综合征(PNH)的早期诊断中的价值。方法:应用流式细胞仪测定PNH患者CD55、CD59、CD34抗原阳性表达变化,并与非PNH组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原表达情况进行分析,同时做糖水试验、Ham试验、RC%、NAP积分检测。结果:PNH、AA-PNH患者CD55+、CD59+表达率较正常对照组及其它病组明显减少,差异有显著性(P<0.01);PNH患者CD34+表达率较正常对照组及其它病组明显增高(P<0.01),而AA患者CD34+表达率最低。结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH综合征早期诊断最敏感指标,而基础检测对PNH的诊断及病情监控有重要意义,可达到早发现、早鉴别、早诊断、早治疗的目的。     

血液病贫血患者血清促红细胞生成素水平临床分析

目的：分析血液病贫血患者血清促红细胞生成素（EPO）的水平,指导临床治疗。方法：对39例血液病贫血患者,包括再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）、真性红细胞增多症（PV）采用ELASA法测定血清EPO水平,同时检测各组血红蛋白浓度、红细胞数,分析各组血清EPO水平差异及其与血红蛋白浓度、红细胞数的相关性。结果：AA、MDS患者血清EPO水平较正常对照组明显增高,P〈0.01;PV患者血清EPO水平正常或降低,与正常对照组比较无统计学意义。结论：血清EPO水平除与缺氧、贫血有关外,可能还与骨髓功能有关;血清EPO水平与血红蛋白浓度及红细胞数之间均呈明显负相关关系。     

微RNA-34a在多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226中的作用及其机制

目的探讨微RNA-34a在多发性骨髓瘤增殖、耐药中的作用及其分子机制。方法采用Lipofectamine2000瞬时转染微RNA-34a,荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果;CCK-8法检测转染微RNA-34a细胞培养24,48和72 h后细胞存活率。转染微RNA-34a细胞给予硼替佐米5和10 nmol·L-1或马法兰50和100μmol·L-1处理48 h后,流式细胞术分别检测细胞周期和凋亡及药物敏感性。Western蛋白印迹法检测转染微RNA-34a对细胞内CDK4,CDK6,CCND1和Bcl-2蛋白表达的影响。结果CCK-8结果显示,转染微RNA-34a可显著抑制细胞增殖(P<0.01),且呈时间依赖性(r=-0.952,P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,转染微RNA-34a可使细胞发生G0/G1期阻滞;转染微RNA-34a组细胞凋亡率为(5.8±0.5)%,与阴性对照组(2.3±0.3)%比较明显升高(P<0.01);与阴性对照组相比,转染微RNA-34a细胞给硼替佐米5和10 nmol·L-1或马法兰50和100μmol·L-1处理,细胞凋亡率均显著升高(P<0.01)。Western蛋白印迹法检测表明,转染微RNA-34a可下调周期相关蛋白CDK4,CCND1和抗凋亡蛋白Bcl-2表达。结论转染微RNA-34a能够抑制RPMI-8226细胞增殖,引起细胞周期阻滞,诱发细胞凋亡,增加药物敏感性;这可能与其下调周期相关蛋白CDK4,CCND1及抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关。     

MLL-AF6融合基因阳性急性髓系白血病的临床特征及预后

目的: 探讨MLL-AF6融合基因阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)患者的临床特征和预后。方法: 回顾分析11例初治MLL-AF6阳性AML患者的临床和实验室资料,复习文献,总结该类疾病的临床特征及预后。结果: 11例患者中男6例,女5例,中位年龄36岁,急性白血病的分型诊断标准FAB分型(French-American-British classification systems)M5 6例,M4 5例。起病症状为牙龈肿痛6例,发热5例,初诊时中位白细胞计数55.5×10⁹/L,免疫分型可见髓系细胞、单核细胞系统及干细胞系列抗原表达。MLL-AF6融合基因水平(实时定量PCR法)为14.2%~214.5%,6/11例(54.5%)合并EVI1基因高表达。4例患者二代测序检测出合并KRAS、TET2、ASXL1、TP53、DNMT3A及FLT3-ITD基因突变。染色体G显带检查,2例为t(6;11)(q27,q23)伴复杂核型异常,4/9例(44.4%)伴有+8异常,2例为正常核型。给予患者常规诱导化疗,达到完全缓解者8/11例(72.7%),3例患者原发耐药。8例完全缓解的患者中,2例达到微小残留病(minimal residual disease, MRD)阴性,中位完全缓解的持续时间为4.5个月。2例MRD阳性及3例难治复发患者接受了异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT), 后均死于白血病进展。随访至2019年12月1日, 2例存活,9例死亡,中位生存时间9个月。结论: MLL-AF6融合基因阳性AML多为年轻患者,FAB分型以M4、M5居多,常以发热起病,白细胞增高,可伴器官浸润,合并EVI1基因高表达多见。本病常规化疗的缓解率不低,但达到分子学缓解困难,极易出现早期复发,持续分子学阴性状态下尽早行allo-HSCT可能获得长期完全缓解。     

骨髓出现多核巨组织细胞的动态观察

多核巨组织细胞是恶性组织细胞病的主要诊断依据之一。然而仅凭一次骨髓出现多核巨组织细胞作出恶性组织细胞病的形态学诊断常有困难。多核巨组织细胞目前尚缺乏特异性分子标志。骨髓出现多核巨组织细胞的动态变化对鉴别恶性组织细胞病和反应性组织细胞增多有较大的临床意义。对我院 8例骨髓出现多核巨组织细胞患者的动态观察结果进行分析 ,以此提高其形态学诊断水平。报告如下 :1　资料与方法1.1　一般资料　本组 8例出现多核巨组织细胞患者 ,根据文献 [1]标准分别在临床治疗观察和实验支持下确定诊断。1.2　方法　分别多部位采集治疗前后…     

bcr-abl阴性骨髓增生性疾病患者JAK2V617F点突变检测的临床意义

目的 探索Janus Kinase 2V617F基因突变(JAK2V617F)在bcr-abl阴性骨髓增生性疾病(MPD)的发生率和临床意义.方法 基因组DNA从患者骨髓或外周血粒细胞中提取.采用等位基因特异性PCR(AS-PCR)、限制性内切酶消化和PCR产物测序的方法检测JAK2V617F突变.共检测患者110例,其中bcr-abl阴性MPD 41例、bcr-abl阳性慢性粒细胞白血病(CML)25例和急性白血病44例.结果 JAK2V617F阳性结果分别为真性红细胞增多症(PV)11例(91.7%)、原发性血小板增多症(ET)8例(53.3%)、特发性骨髓纤维化(IMF)4例(57.1%),而高嗜酸粒细胞增多症(HES)7例、bcr-abl阳性CML 25例和急性白血病44例[包括急性髓细胞白血病(AML)24例、急性淋巴细胞白血病(ALL)18例、急性混合细胞白血病2例1均未检测到JAK2V617F基因突变.在所有JAK2V617F阳性的标本和10份阴性标本中,AS-PCR和限制性内切酶消化方法的测定结果都可经测序进一步证实.结论 90%以上的PV、50%以上的ET和IMF可检测到JAK2V617F基因突变;JAK2V617F基因突变在PV、ET和IMF的诊断和鉴别诊断中有重要意义,可以作为诊断的分子标志,也可能是治疗的新靶点.     

骨髓坏死18例临床分析

目的：分析不同原发病骨髓髓坏死（BMN）愈后与原发病的关系。方法：观察我院1995年12月-2005年1月治疗的18例骨髓坏死患者骨髓象动态变化的情况以及愈后。结果：12例恶性实体肿瘤BMN生存期〉9个月2例，〈6个月10例；急性白血病和恶性淋巴瘤患者中骨髓缓解时间在1个。2个月之间，生存期达2年以上者1例，6个。12个月3例，1例1月内死亡。1例高雪病失访。结论：恶性实体肿瘤BMN生存期短，急性白血病缓解时间相对较短生存期较长。     

Hyper-CVAD/MA治疗急性淋巴细胞白血病临床观察

目的:评价Hyper-CVAD/MA方案作为成人急性淋巴细胞白血病强化治疗方案的安全性和有效性.方法:回顾性分析近5年来此方案强化治疗50例成人急性淋巴细胞白血病患者的疗效、安全性及毒副反应.结果:①50例患者接受周期数不等的此强化方案治疗,副反应主要为血液学毒性及感染,毒副反应易于控制,无治疗相关死亡.②标危组急淋患者中位生存时间23个月,1年生存率A组中(50.1±3.9)%,B组中(77.8±4.1)%,C组中(88±5.4)%,D组中(89±5.8)%.2年生存率B组(33±4.8)%,C组(79±5.3)%,D组(89±7.1)%.3年生存率C组(28±3.8)%,D组(50±4.5)%.A组生存时间最短,1年之内均复发,其余组随着接受Hyper-CVAD方案强化周期循环数的增加,生存时间明显延长.③高危组急淋患者中位生存时间19个月,1年生存率A组(40.1±3.2)%,B组(85.8±6.1)%,C组(88.9±7.4)%,D组(89±4.8)%.2年生存率B组(14.3±4.1)%,C组(55.6±5.4)%,D组(77.8±7.4)%.D组生存时间超过3年,而B组和C组生存时间达到2年以上.结论:此方案用于成人急性淋巴细胞白血病强化治疗近期疗效满意,治疗相关毒副反应易于控制.     

TF及TFPI在急性白血病患者血浆中检测的临床意义

目的:检测急性白血病(AL)患者化疗前后血浆中组织因子(TF)及组织因子途径抑制物(TFPI)的含量变化,探讨血浆TF及TFPI在AL病情进展、疗效观察、预后判断中的意义,为AL患者发生凝血功能异常提供临床诊断和治疗依据.方法:选择2009年7月-2010年2月间住院的各型初诊AL患者48 例,正常对照组20 例,采集空腹外周肘静脉血,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测AL患者血浆中TF及TFPI的含量,同时检测其他的临床相关指标,比较血浆TF及TFPI含量在AL患者化疗前后的变化.结果:初诊的AL患者经治疗缓解后血浆TF和TFPI含量均较治疗前明显下降,差异有统计学意义;急性早幼粒细胞白血病(APL)患者化疗前血浆TF和TFPI含量均明显高于其他类型AL,APL患者化疗前后血浆TF和TFPI含量均有明显差异;合并DIC组的AL患者血浆TF和TFPI含量均明显高于不合并DIC组的AL,且化疗前后血浆TF和TFPI含量有显著差异.结论:初诊的AL患者血浆中TF和TFPI的含量均明显增高,而治疗缓解后降低,提示血浆中TF和TFPI含量变化与疾病的发生、进展及临床疗效有一定关系;血浆中TF和TFPI含量的升高与DIC的发生密切相关,在一定程度上对DIC的疗效判断具有预示作用.