IgG-HepG2细胞评价复方苦参注射液及其生产过程可能产生致敏原的研究——利用生物技术进行过程监控致敏性的方法学探索

目的:利用IgG promoter-HepG2细胞对复方苦参注射液生产过程中可能产生致敏原的生产节点进行研究。方法:构建IgG启动子调控绿色荧光蛋白表达质粒,转染入HepG2细胞,与常见致敏性物质(葛根素,卵白蛋白,LPS和伤寒菌疫苗)、复方苦参注射剂中使用到的辅料(NaOH,醋酸,聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯即吐温80和乙醇)和生产过程中关键节点样品(S1～S8)进行孵育,30 m in后拍照,图像分析软件统计细胞荧光强度变化。结果:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏性物质呈阳性反应。注射剂辅料中醋酸和吐温80有致敏性,生产过程8个样品中,2个样品有显著致敏性。结论:IgG promoter-HepG2细胞对常见致敏原反应敏感,特异性高,适用于中药注射剂中致敏原快速筛选,可实现对中药注射剂生产过程中致敏原的实时监控。     

巴西苏木红素与血清白蛋白及血浆成分结合率研究

 目的 建立测定巴西苏木红素与血浆结合率的平衡透析方法,并测定其体外与血浆总物质及牛血清白蛋白结合率。方法 采用平衡透析法测定巴西苏木红素与血浆总物质及牛血清白蛋白结合率,采用HPLC测定各成分的血药浓度及游离药物浓度,生物样品用乙酸乙酯液萃取的方法。 结果 在低、中、高3种浓度下,巴西苏木红素与牛血清白蛋白的结合率为38.5%~50.8%,与大鼠血浆总物质的结合率为86.2%~97.3%。结论 巴西苏木红素与大鼠血浆有较高的结合率,血浆中的磷脂部分可能为参与两者之间结合的主要物质。     

新药用资源菠萝叶小鼠一般生殖毒性的研究

目的：对菠萝叶小鼠的一般生殖毒性进行研究,有助于更好的评价该植物的药用价值。方法：分别灌胃给予成年雄性和雌性小鼠菠萝叶,然后合笼进行交配。对于交配成功的雌鼠继续饲养。分别对孕鼠的妊娠、胎鼠的发育及生产的子代小鼠的情况进行实验观察。结果：菠萝叶除了大剂量（4 g·kg-1）对亲本雄性鼠体重有一定降低外,对其它各项指标均无明显影响。对孕鼠及其子代小鼠均未见有明显影响。结论：提示菠萝叶对小鼠一般生殖功能无明显毒性。     

新药用资源菠萝叶的质量标准研究

目的：对菠萝叶质量标准进行研究,以更好的开发应用菠萝叶的药用资源。方法：利用组织切片法观察菠萝叶组织结构;利用薄层层析法以菠萝酰酯为对照品进行定性鉴别;利用高效液相色谱法对主要成分进行含量测定。结果：菠萝叶镜下可分上下表皮层,其间有气孔;薄层层析可以清晰检测到菠萝酰酯成分;高效液相色谱法可以准确的测定菠萝叶中对香豆酸和菠萝酰酯的含量,且不同产地的菠萝叶中对香豆酸和菠萝酰酯含量差异较大,其中以云南的菠萝叶含量最高,广西的菠萝叶含量最低。结论：以菠萝酰酯作定性鉴别,以对香豆酸和菠萝酰酯为指标成分进行定量检测,可以较好的控制菠萝叶药材的质量。     

HepG2IgG转基因细胞应用于中药致敏物质预测研究

本文对HepG2IgG细胞对于Ⅱ型致敏性预测进行了较为深入系统的研究,其中包括转染宿主细胞的筛选、转染最佳条件、最适检测仪器以及转染持续时间等。并对己知致敏原及其市售的几种中药注射剂进行了致敏性筛选。结果表明,该细胞系具有检出灵敏性高,细胞转染成功率高,致敏因子表达稳定等特点。为早期预测II型致敏反应的中药提供了一个有价值的工具。     

菠萝叶酚体外HepG2细胞跨膜转运及其对糖脂分布的影响

菠萝叶主要含酚类成分,具有抗氧化和调血脂作用。其主要成分为对香豆酸。该文以对香豆酸为主要测试成分,观察了菠萝叶酚类成分中对香豆酸体外人源肝HepG2细胞跨膜转运的特点及其对糖脂负荷细胞实验中葡萄糖,总胆固醇和甘油三醇的转运代谢的影响。结果表明,菠萝叶酚具有较好的跨膜转运特点。给药后5 min,菠萝叶酚中的对香豆酸即细胞内达到较高的浓度,60 min达峰值。具有时间和剂量依赖性。在促进葡萄糖转运体（GLUT4）和低密度脂蛋白受体（LDLR）表达的同时,菠萝叶酚能够降低细胞内的糖脂含量。这种降低细胞内脂含量的作用与促进脂蛋白脂酶（LPL）、肝甘油三酯脂酶（HTGL）表达有关,降低细胞内葡萄糖含量的作用与促进肝糖原合成有关。     

石榴叶酚对脑缺血再灌注引起的小鼠学习记忆能力降低的改善作用及其可能的机制

目的观察石榴叶总酚对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并研究其可能的作用机理。方法石榴叶总酚按照60,120和240 mg·kg-1给小鼠灌胃3 d后,第4天给药1 h后,采用双侧颈总动脉反复阻断再通造成小鼠脑缺血再灌注损伤模型,采用水迷宫实验检测术后不同时间小鼠学习记忆能力的变化。观察术后24 h内脑组织中MDA含量和SOD活性的变化以及相关炎性因子的表达。结果石榴叶酚可以显著改善脑缺血再灌小鼠学习记忆能力,降低脑组织内MDA含量,提高SOD活性,明显降低IL-1β,TNFα,COX2mRNA的表达,同时下调TLR2和NOD2mRNA的表达。结论石榴叶酚灌胃给药对双侧颈动脉缺血再灌注引起的小鼠学习记忆能力降低有明显的改善作用,该作用与其抗氧化和抑制局部脑组织内前炎性相关因子表达和固有免疫系统TLR2和NOD2的表达有关。     

新药用资源菠萝叶对小鼠相关药物代谢酶的诱导作用

目的：观察菠萝叶对小鼠肝脏药物代谢酶CYP1A2、2E1 和3A11的诱导表达及其活性作用,为药物相互作用提供实验依据。方法：采用整体动物实验方法,灌胃给予不同剂量的菠萝叶酚,取肝脏做mRNA和蛋白的表达。同时制备粗酶液,以相应的特异性底物探针观察相关酶活的影响。结果：小鼠连续灌胃给药3天,对CYP 2E1的mRNA表达有一定的诱导作用,但对蛋白表达及其活性没有明显影响;对CYP 1A2活性有一定的诱导作用,但对mRNA及蛋白无明显影响;对CYP 3A11的诱导作用不明显。结论：菠萝叶酚对CYP 1A2和2E1部分指标有一定的影响,表明其作用具有一定的复杂性,尚需进一步深入研究。     

小檗碱作用靶点及其吸收特点——老药如何新用

随着研究的不断深入,小檗碱的多种药理作用不断被发现。随之而来的是如何针对小檗碱的这些新的药理作用来合理用药。由于小檗碱具有一定的心肌毒性、且其口服吸收较差,因此导致了在如何提高生物利用度与控制其可能产生的毒性之间的矛盾。同时一些新的用途如调血脂、降血糖以及防治神经退行性病变等都需要长期给药,从而形成了长期口服与对肠道菌群失调及其对机体其他生理功能影响可能产生潜在的风险之间的矛盾。该文在阐明小檗碱作用靶点及其相关药学特性的基础上,就这方面议题进行了综合讨论分析。最后提出建议:长期口服给药对机体尤其是肠道菌群的影响尚需进一步考察;通过改变制剂提高口服药物的吸收率时应考虑由此带来的风险;对于药物浓度需求较高的治疗用药(如肿瘤),靶向给药值得考虑。     

小分子药物跨膜转运与作用靶点——对中药小分子药理研究的思考

本文以中药小分子为例对小分子药物的跨膜转运研究进展及方法进行了综述,并结合作者研究成果,对小分子药物跨膜转运与作用靶点进行了分析和探讨。目前,研究小分子转运的检测方法有HPLC、 LC/MS,还可以借助其荧光成像利用共聚焦技术进行观测。在研究过程中,确定小分子的转运方式的同时,也要探讨其外排方式,并要确定其有无代谢及其可能的代谢产物。对小分子药物的细胞跨膜转运研究将有助于确定小分子作用的靶点,有助于对其药理作用的探讨和阐释。