蟾毒灵对肝细胞生长因子诱导阿法替尼耐药的逆转作用

目的：探讨蟾毒灵对肝细胞生长因子（ HGF）诱导的阿法替尼耐药肺癌细胞H1975生长的影响,并分析其可能的作用机制。方法采用外源性HGF和重组HGF腺病毒转染内源性HGF诱导的方法建立阿法替尼耐药的肺癌细胞H1975,应用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测蟾毒灵、阿法替尼及联合用药对阿法替尼耐药细胞H1975增殖的抑制作用,Transwell实验检测药物对阿法替尼耐药细胞H1975侵袭能力的影响,酶联免疫吸附试验（ ELISA）法检测转染后H1975细胞分泌的HGF水平以及药物对HGF分泌水平的影响,Western blot检测药物干预后EGFR、cMet信号通路及上皮细胞?间质转化（ EMT）相关蛋白的表达。结果 MTT结果显示,在外源性和内源性HGF刺激下,阿法替尼对H1975细胞生长无抑制作用,经蟾毒灵与阿法替尼联合处理后,可明显抑制肿瘤细胞的生长。Transwell实验结果显示,在外源性HGF作用下,阿法替尼组的穿膜细胞数为（118．92±37．29）个;蟾毒灵组的穿膜细胞数为（88．84±19．53）个;阿法替尼与蟾毒灵联合组的穿膜细胞数为（48．98±11．43）个,与阿法替尼组和蟾毒灵组比较,差异均有统计学意义（均P＜0．05）。 ELISA结果显示,H1975／HGF细胞（转染重组HGF腺病毒的H1975细胞）分泌高水平的HGF,蟾毒灵和阿法替尼干预后,H1975／HGF细胞分泌HGF水平差异无统计学意义（P＞0．05）。 Western blot结果显示,蟾毒灵联合阿法替尼能明显下调阿法替尼耐药细胞中 p?EGFR、p?cMet、p?AKT、p?ERK、vimentin 和 snail 蛋白的表达,上调E?cadherin蛋白的表达。结论蟾毒灵联合阿法替尼可显著抑制阿法替尼耐药细胞H1975的增殖,阻止H1975肺癌细胞侵袭;蟾毒灵逆转 HGF 诱导的 H1975肺癌细胞对阿法替尼耐药,可能与阻断cMet／PI3K／AKT、cMet／MAPK／ERK信号通路以及阻止EMT进程有关。     

肺岩宁方对ILK基因沉默后转染人肺癌A549细胞相关基因表达的影响

目的:探讨整合素连接激酶(ILK)基因沉默后及中药肺岩宁方对相关下游靶基因表达的影响。方法:构建载体转染人肺腺癌细胞A549后,随机分为阴性对照病毒感染细胞(NC)组、RNAi靶点病毒感染细胞(KD)组、10%肺岩宁含药血清干预的NC组与KD组、20%肺岩宁含药血清干预的NC组与KD组,以及阳性对照10%DDP干预的KD组,应用Real time-PCR及Western Blot方法检测下游靶基因蛋白激酶B(Akt/PKB)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、转录因子-1(AP-1)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、β-链蛋白(β-catenin)的mRNA及蛋白表达水平。结果:与NC组比较,KD组GSK-3β、VEGF mRNA和蛋白表达显著下调(P0.05,P0.01),cyclinD1、MMP-9 mRNA和蛋白表达显著上调(P0.05,P0.01),Akt表达无变化,AP-1与β-catenin在mRNA水平表达升高(P0.01)、蛋白水平表达则下降;与KD组比较,KD+10%肺岩宁含药血清和KD+10%DDP组具有下调VEGF、cyclinD1、MMP-9和β-catenin蛋白表达、上调GSK-3β蛋白表达,以及下调AP-1、cyclinD1 mRNA表达的作用(P0.01);与KD组相比,KD+20%肺岩宁含药血清具有下调AP-1、cyclinD1和MMP-9蛋白表达的作用。结论:沉默ILK基因后可以明显降低GSK-3β、VEGF的表达,10%的中药肺岩宁方含药血清可能通过下调靶基因AP-1、cyclinD1、MMP-9、VEGF和β-catenin蛋白表达的作用而发挥其抗肿瘤的作用。     

肺癌证候研究现状

原发性支气管肺癌是全球常见的恶性肿瘤之一,居我国恶性肿瘤死因之首,非小细胞肺癌占全部肺癌的75%～80%。通过对1998～2009年肺癌证候相关研究文献分析、总结可知,目前肺癌中医证候研究主要是中医证候与TNM分期相关性研究、预后相关性研究、病理分型相关性研究、病因病机研究及中医证候规范化研究等。并提出开展肺癌证候的动态变化与预后相关性研究,特别要重视舌象变化在肺癌辨证及预后中的重要性,进一步将现代医学诊疗手段整合到肺癌中医证候的客观化研究。     

中医药治疗肺癌VATS术后咳嗽的一项单臂临床研究

目的:中医药治疗肺癌术后咳嗽的临床疗效评价及用药规律分析。方法:收集2020年7月20日至2021年2月3日在我院就诊的肺癌术后1周内的患者32例,通过莱塞斯特咳嗽量表（Mandarin Chinese version of the Leicester cough quality of life questionnaire,LCQ-MC）调查及外周血采集,评价中药治疗肺癌术后咳嗽疗效,分析用药规律。结果:32例患者治疗后CRP、IL-6显著低于治疗前（P＜0.05）,其中22例术后咳嗽患者治疗后LCQ-MC总分、生理和心理领域评分高于治疗前（P＜0.05）,最后通过聚类分析将35种高频药物聚成6类。结论:肺癌术后患者咳嗽的发生及转归与CRP密切相关,中药干预对咳嗽的改善具有积极作用,治疗用药上要兼顾肺脾,标本同治。     

未来10余年肺癌中西医诊疗展望

通过分析肺癌流行病学情况及诊疗现状,从临床与基础研究角度探讨未来10余年肺癌中西医诊疗重点研究方向.主要应进一步开展肺癌病因研究;构建肺癌中医临床研究体系,重视中药维持治疗与中医药防治肺癌术后复发转移,加强中药与靶向药物联合治疗肺癌,研发治疗肺癌的纳米中药;开展中药对肺癌细胞信号转导网络调控系统的干预、对肺癌微环境的影...     

蛋白质组学技术在恶性肿瘤中医辨证及诊治中的研究进展

中医药治疗恶性肿瘤在整体观指导下辨证论治,具有切实有效、无明显副作用、经济实惠等特点,越来越受到重视.蛋白质组学是基于蛋白质分离技术、质谱鉴定技术和生物信息技术对基因所表达的全部蛋白质功能、结构、相互作用进行研究的学说,其整体性和动态性等技术特点与中医学的整体思维和辨证施治相符合.本文就近年来蛋白质组学在探究恶性肿瘤证...     

ILK基因RNAi慢病毒表达载体的构建与鉴定

目的:进一步研究整合素连接激酶(ILK)的功能,构建ILK基因RNAi慢病毒载体,并对其在肺腺癌A549细胞株中干扰效率进行鉴定.方法:针对ILK基因RNAi有效靶序列,合成4对oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeI和EcoRI酶切的质粒pGCSIL-GFP载体连接产生shILK-LV慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,用shILKi-LV载体、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0载体共转染包装细胞293 T细胞,包装产生慢病毒,以293 T细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达水平测定病毒滴度.获得重组慢病毒后感染人肺癌A549细胞,荧光显微镜观察GFP及Real-time PCR检测ILK在A549细胞中的表达.结果:PCR扩增出插入片段,测序证实成功构建了ILK-shRNA慢病毒载体shILKi-LV.包装并浓缩慢病毒,滴度分别为6×108、6×108、5×108和4×108 pfu/mL;将病毒感染A549细胞,荧光显微镜下观察80％细胞表达绿色荧光,Real-time PCR检测ILK mRNA表达明显下降,其中染shILKFKD-1的A549细胞中ILK2-△△Ct值为0.058,shILKi-KD-2、3和4的ILK2-△△Ct值分别为0.162、0.072和0.119,尤以ILKsiRNA-1抑制最明显.结论:成功构建shILKi-LV病毒载体并建立了A549-shILKi细胞模型,为ILK在肺癌信号转导通路中的研究提供了工作基础.     

佛鱼饮治疗29例慢阻肺病急性发作期患者的疗效观察

目的观察清热化痰活血法组方的佛鱼饮联合西药治疗慢阻肺病急性发作期的临床疗效。方法59例患者随机分为两组,治疗组29例在西医常规治疗基础上口服佛鱼饮;对照组30例,给予抗感染、祛痰止咳平喘等常规治疗。结果治疗14 d,治疗组的临床总有效率为69.69%,明显好于对照组;治疗组动脉血气较对照组明显好转（P〈0.05）;两组白细胞总数、中性粒细胞百分数均较疗前明显降低（P〈0.01）,淋巴细胞百分数明显升高（P〈0.01）,治疗组改善比对照组明显。结论佛鱼饮联合西药治疗慢阻肺病急性发作的疗效优于对照组,是治疗慢阻肺病急性发作的有效方,值得临床推广运用。     

开心胶囊治疗乳腺增生病疗效观察

目的：观察以疏肝理气，化痰散结活血为法组方之开心胶囊治疗乳腺增生病疗效；方法：治疗组应用开心胶囊，对照组应用逍遥丸治疗，疗程相同；结果：治疗组总有效率明显优于对照组；结论：开心胶囊对肝郁痰凝型乳腺增生疗效突出，优于逍遥丸。     

中医辨治老年晚期非小细胞肺癌67例

肺癌是发病率及死亡率最高的恶性肿瘤之一。80%~85%的肺癌为非小细胞型(NSCLC),非小细胞肺癌中50%以上确诊病例的年龄大于65岁,因此肺癌被视为老年疾病。但是因为其治疗方法选择常常受到