VEGF、PEDF在寻常型银屑病组织中的表达及与微血管密度的关系

目的探讨VEGF、PEDF蛋白在寻常型银屑病组织中的表达及与真皮浅层微血管密度(MVD)的关系,从而阐述寻常型银屑病的发病机制。方法应用免疫组织化学方法(PV-9000)检测皮肤组织中VEGF、PEDF蛋白的表达水平,CD_(31)蛋白标记微血管计算真皮浅层MVD;采用Spearman法进行相关性分析。结果 VEGF、PEDF蛋白表达水平及真皮浅层MVD值在阳性组中明显高于阴性组和对照组,差异显著有统计学意义(P 0.05),而阴性组和对照组相比较差异无统计学意义(P 0.05);相关性分析显示MVD与VEGF的表达水平呈正相关(P 0.001);MVD与PEDF的表达水平呈负相关(P 0.001)。结论 VEGF、PEDF可能通过调节血管增生参与银屑病的发病过程。     

健脾补肾法针刺治疗膝关节骨性关节炎临床疗效观察

膝关节骨性关节炎是由于各种原因（创伤、持续劳损、肥胖等）所致关节软骨出现原发性或继发性退行性改变,并伴有软骨下骨质增生,从而使关节面逐渐被破坏,产生畸形,影响膝关节功能的一种退行性疾病,多发于中老年人,女性多于男性.我们运用自拟健脾补肾针刺疗法结合膝关节局部针刺治疗本病,疗效满意,现报道如下.     

丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定

目的建立HPLC法测定丙泊酚中/长链脂肪乳注射液中溶血磷脂酰胆碱(LPC)和溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的含量。方法采用HPLC法,色谱柱:Lichrospher 100 DIOL(250 mm×4 mm,5μm);流动相:乙腈-水-冰醋酸-三乙胺(85∶15∶0.45∶0.05)为流动相A,正己烷-异丙醇(18∶30)溶液为流动相B;梯度洗脱;柱温:35℃。结果溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的线性范围分别为0.03~0.25(r1=0.9997)和0.01~0.10(r2=0.9962)mg·mL^-1,定量限分别为0.72和0.31μg。结论该方法准确、可行,精密度高,可用于溶血磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰乙醇胺的含量测定。     

肥厚型心肌病伴心房颤动患者临床特点分析

目的分析32例肥厚型心肌病伴心房颤动患者的临床特点。方法选择1994-2005年在解放军总医院心脏中心就诊的肥厚型心肌病患者158例，平均随访（4．2±2．8）年，按病史、心电图、动态心电图是否记录到心房颤动分为房颤组和非房颤组，观察并比较2组患者的临床特点。结果（1）肥厚型心肌病伴房颤患者共32例，占全部肥厚型心肌病患者的20．3％，其中阵发性房颤14例（43．7％），持续性房颤18例（57．3％），无症状性房颤5例（15．6％）；（2）与非房颤组患者比较，房颤组患者平均年龄偏大（58±10．4vs46±12．6）岁（P〈0．01），左房直径大（42±3．5vs34±5．3）mm（P〈0．01）；（3）房颤组12例（心力衰竭8例，猝死4例）发生心血管事件，非房颤组9例（心力衰竭6例，猝死3例）发生心血管事件。房颤组患者中，房颤引发室颤1例（3％），脑栓塞2例（6．3％），下肢动脉栓塞2例（6．3％）。结论（1）20．3％肥厚型心肌病患者伴心房颤动，其中43．7％为阵发性房颤，57．3％为持续性房颤，15．6％为无症状性房颤；（2）与肥厚型心肌病不伴房颤患者相比，伴房颤患者年龄偏大，心血管事件发生率高。     

脓毒症时各型一氧化氮合酶在大鼠心脏中的表达及其可能机制

目的研究脓毒症时各型一氧化氮合酶(NOS)在心脏中的损伤作用及其机制。方法成年雄性Wistar大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)制备脓毒症模型。应用多导生理仪监测大鼠心功能变化;用分光光度计法测定大鼠心肌组织NOS的活性;用RT-PCR和Western blot对大鼠心肌组织各型NOS的表达进行半定量分析。结果给予LPS后6h大鼠心肌收缩和舒张功能受损下降,心肌中iNOS的活性明显升高,eNOS和nNOS(合称cNOS)活性减弱;RT-PCR和Western blot结果显示,给予LPS后cNOS的表达减少,给予LPS后iNOS表达量明显增加。结论脓毒症时,iNOS、nNOS和eNOS的表达和活性发生改变;心肌细胞上iNOS表达及活性升高,这些变化可能在心功能降低中发挥作用。     

疏血通注射液的抗凝生物活性测定方法及其机制研究

目的:建立适合的疏血通注射液抗凝生物活性测定的方法,并探索疏血通注射液的抗凝作用机理。方法:通过实验建立了疏血通注射液生物活性测定的3钟方法,即《中华人民共和国药典》上收载的凝血酶滴定法(挑丝法)、临床上常用的凝血仪测定法、以及国际上通用的测定凝血酶活性的荧光共振能量转移(FRET)法,并进行了3种方法的比较。结果:确定3种方法都可以使用,但以FRET法比较稳定,受人工操作误差影响小,灵敏度最高。结论:建立了适合疏血通注射液的3种抗凝生物活性方法。通过测定疏血通注射液对活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)的影响,以及对凝血酶活性的抑制作用,推测凝血酶可能是疏血通注射液抗凝作用的主要靶点。     

VEGF和CD31在皮肤鳞癌中的表达

目的 观察皮肤鳞癌(SSCC)中血管内皮生长因子(VEGF)和内皮细胞黏附分子(CD31)的表达,研究其与皮肤鳞癌发展的关系.方法 采用免疫组化染色法检测正常皮肤组织及鳞癌组织中VEGF和CD31的表达变化.结果 在正常组织中,VEGF和CD31表达低于鳞癌皮损组织,在Ⅲ~Ⅳ期鳞癌中的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期鳞癌中的表达(P<0.05).结论 VEGF及CD31蛋白的异常表达在皮肤鳞癌的进展过程中发挥重要作用.     

左卡尼汀注射液中三甲胺分离提取及其离子色谱测定法研究

目的 建立分离提取左卡尼汀注射液中三甲胺含量的方法,及采用离子色谱法对三甲胺进行检测研究。方法 以L₉(3⁴)正交试验优化提取条件,采用0.25 mol·L^-1NaOH溶液创造碱性环境,40 ℃加热20 min,连接N₂流量为0.4 L·min^-1,用0.1 mol·L^-1甲磺酸溶液吸收气体,有效实现左卡尼汀注射液中三甲胺的分离提取;采用DionexIonPac^TM CS12A(4.0 mm×250 mm)色谱柱,DionexIonPac^TM CG12A(4.0 mm×50 mm)保护柱,以17 mmol·L^-1甲磺酸溶液为淋洗液,流速0.5 mL·min^-1,柱温30 ℃,电导检测。结果 三甲胺在0.30~48.64 μg·mL^-1内线性关系良好,相关系数为0.999 3,检出限为0.012 μg·mL^-1(S/N=3),定量限为0.3 μg·mL^-1(S/N=10),精密度良好,溶液置于室温24 h或2~8 ℃48 h内稳定。平均加样回收率在97.33~100.82%内,相对标准偏差(RSD)为1.07%(n=9)。结论 该方法能够有效提取分离左卡尼汀注射液中的三甲胺,离子色谱检测方法灵敏度高,回收率和重现性良好。     

软质神经内窥镜治疗小儿脑积水并发症的观察及护理

目的:探讨软质神经内窥镜治疗小儿脑积水术后常见并发症的观察和护理。方法:回顾性分析32例行软质神经内窥镜三脑室底造瘘术和双侧脉络丛烧灼术的术后并发症资料。结果:术后发热10例,癫痫发作5例,硬膜下积液2例,造瘘口梗阻需行分流术2例,无颅内感染和死亡病例。结论:软质神经内窥镜行三脑室底造瘘术和双侧脉络丛电凝术是治疗小儿脑积水的一种安全、有效、微创的外科治疗手段,加强并发症的观察和处理是保证治疗成功的关键。     

β-catenin在硬皮病皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化的影响

  目的  探讨β-连环蛋白(β-catenin)在系统性硬皮病(SSc)患者皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。  方法  采用免疫组织化学SP法检测45例SSc患者皮损组织及20例健康成人皮肤组织中β-catenin、Snail1、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况。采用不同质量浓度Wnt10b〔0(空白对照)、2、4 ng/mL〕处理人表皮角质形成细胞HaCaT 48 h,免疫荧光实验检测β-catenin在HaCaT细胞中的定位;实时荧光定量PCR检测HaCaT细胞中Snail1、Snail2 mRNA水平;Western blot法检测HaCaT细胞中β-catenin、波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、E-cadherin蛋白表达。  结果  β-catenin、Snail1、E-cadherin阳性率在SSc患者皮损组织中依次为100%、88.89%和2.22%,在健康成人皮肤组织中依次为0%、10.00%和95.00%,两组比较差异均有统计学意义(P < 0.05)。与空白对照组比较,不同质量浓度Wnt10b(2、4 ng/mL)处理可诱导HaCaT细胞中β-catenin表达上调并促进β-catenin由细胞质向细胞核中转位,同时还可以提高HaCaT细胞中Snail1和Snail2 mRNA表达(P < 0.05),并上调Vimentin、N-cadherin蛋白表达和下调E-cadherin蛋白表达(P < 0.05)。  结论  SSc皮损中存在异常活化的Wnt/β-catenin信号通路及异常表达的EMT相关蛋白,且激活Wnt/β-catenin信号通路可促进HaCaT细胞EMT的发生。