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1.
目的评价由丹娜(天津)生物科技股份有限公司生产的隐球菌荚膜多糖检测试剂盒(胶体金法,考核试剂)的检测性能。方法选取隐球菌和隐球菌近缘菌及肺部感染常见菌种共28属100株菌作为研究对象,配制0.5麦氏浊度单位(0.5 M)菌液检测试剂的特异性,0.5 M阳性的菌株以10倍倍比稀释液作为灵敏度检测菌液,以2 M和4 M浓度菌液作为钩状效应检测菌液,并以美国Immuno Mycologics公司生产的隐球菌抗原检测(胶体金免疫层析法)试剂盒作为对比试剂,比较两家试剂的一致性。结果31株隐球菌属菌株中,考核试剂检测出阳性25株(新型隐球菌和格特隐球菌均为阳性),阴性6株(维多利亚隐球菌、C.dimennae和大隐球菌);16株毛孢子菌属菌株中,检测出阳性12株,阴性4株;1株Cutaneotrichosporon curvatum检测结果为阳性;52株其他菌株的检测结果均为阴性;灵敏度实验结果显示考核试剂隐球菌最低检出限为1.0×102 CFU/mL;2 M和4 M浓度菌液均未出现钩状效应。结论考核试剂隐球菌荚膜多糖检测试剂盒(胶体金法)检测隐球菌属的灵敏度高于比对试剂;特异性方面存在一定的属内和属外交叉反应,但与对比试剂的检测结果高度一致;考核试剂与比对试剂均无钩状效应产生。 相似文献
2.
3.
4.
目的:获得热休克蛋白90β(HSP90β)基因干扰和过表达慢病毒表达系统,并检测其在人骨肉瘤细胞株Saos-2中的表达水平。方法:设计合成shRNA,以慢病毒表达质粒构建HSP90β干扰和过表达载体,酶切电泳、测序技术鉴定载体构建是否成功。重组病毒转染H1299细胞,以嘌呤霉素筛选稳定转染的Saos-2细胞,通过荧光显微镜观察计数获得转染效率。将感染好的细胞分为干扰NC组(NEG-shRNA)、干扰组(shRNA-HSP90β)、过表达NC对照组(NEG-pEZ)及过表达组(pEZ-HSP90β)。通过qRT-PCR 与Western blotting 分别从mRNA 和蛋白表达水平验证目的基因的干扰和过表达水平。结果:插入慢病毒表达载体的基因片段与目的基因的碱基序列完全一致。病毒包装成功后,嘌呤霉素最小致死浓度1 μg/ml,感染复数200,感染人Saos-2的感染效率达80%,其中shRNA-HSP90β组干扰效率为86.35%,pEZ-HSP90β组的mRNA相对表达量增加2.8倍。进一步研究发现,shRNA-HSP90β组较NEG-shRNA组中HSP90β蛋白表达明显降低,pEZ-HSP90β组较NEG-pEZ组HSP90β蛋白表达增加。结论:HSP90β基因干扰和过表达慢病毒载体构建成功,并能够在Saos-2中稳定表达。 相似文献
5.
妊娠期附件包块包括生理性包块、炎性包块、良性肿瘤、恶性肿瘤等,近年来发生率有上升趋势。妊娠期卵巢生理性包块多在妊娠中、晚期或产后自行消失;卵巢良性肿瘤若无并发症出现,未阻塞产道,妊娠期可密切观察;而妊娠期卵巢恶性肿瘤危及母胎安全,需积极干预处理。因此,孕期对于卵巢恶性肿瘤的诊断和鉴别诊断具有重要的意义。在诊断过程中,影像学检查及肿瘤标志物的结果需考虑妊娠本身的影响。文章主要阐述妊娠期附件包块的诊断方法及特点。 相似文献
6.
目的建立青霉素杂质谱HPLC分析方法,并将其转换成UPLC/UHPLC方法。方法以青霉素混合降解溶液为样品;首先分析《中国药典》(2010年版,ChP2010)方法甲醇-缓冲盐二元流动相色谱系统的缺陷;再利用实验设计理念,以响应曲面法(response surface methodology,RSM)的中心组合设计(central composition design,CCD)对色谱系统进行优化,满意度函数法确定最优色谱条件,并优化梯度洗脱条件;最后,利用软件对HPLC方法的流速、进样体积和梯度时间进行几何缩放,并通过色谱柱的选择,将其分别转换为UPLC方法和UHPLC方法。结果新HPLC方法:色谱柱为Capcell Pak C18 MGII(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0m L/min,进样体积:20μL;UPLC方法:色谱柱为Cortecs C18(2.1mm×100mm,1.6μm),流速:0.35m L/min,进样体积:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18(4.6mm×150mm,2.76μm),流速:0.8mL/min,进样体积:10μL。3种方法的检测波长均为225nm,柱温均为34℃;流动相A均为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000mL,用磷酸调pH至3.4)-甲醇(72:14,V/V),流动相B均为乙腈;均为梯度洗脱,但梯度洗脱表不同。结论 3个色谱系统的分离效果(出峰顺序和个数)相似。新HPLC方法可以分离出更多的降解杂质,并明显改善了青霉素峰的拖尾,缩短了分析时间。 相似文献
7.
目的:探究miR-122-5p在婴儿胆道闭锁(BA)中的作用及其机制。方法:RT-qPCR检测miR-122-5p在BA患儿及胆总管囊肿(CC)患儿血清中的表达,及miR-122-5p和PPP2R2A mRNA在LX-2细胞中的表达。CCK-8检测不同组别中LX-2细胞的增殖活性。Western blot检测p-AKT、AKT、PPP2R2A及Ki67蛋白在LX-2细胞内的表达。通过生物信息学网站预测miR-122-5p的下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验验证其靶向关系。结果:miR-122-5p在BA患儿血清中的表达水平显著升高。抑制miR-122-5p的表达显著抑制LX-2细胞的增殖、细胞内AKT的激活并促进LX-2细胞的凋亡,过表达PPP2R2A对LX-2细胞生物学行为的影响与前述一致。双荧光素酶报告基因实验证实PPP2R2A是miR-122-5p的下游靶基因。同时过表达LX-2细胞内miR-122-5p及PPP2R2A的表达水平对LX-2细胞的生物学行为无显著影响。结论:miR-122-5p在BA患儿血清中过表达,并通过体外实验证实miR-122-5p靶向PPP2R2A影响AKT信号通路的激活调控肝纤维化的进程。 相似文献
8.
目的:探讨食管鳞癌肿瘤组织中ERCC1、TYMS、TUBB3基因表达与预后生存的关系。方法:选择2012年9月至2016年5月我科收治的68例食管鳞癌患者,术后病理分期IIa-IIIa期;检测肿瘤组织ERCC1、TYMS、TUBB3 mRNA表达水平。术后患者分为个体化化疗组和标准化疗组,个体化组患者根据基因检测结果选择敏感药物化疗方案(CF/DCF/TC方案)进行化疗,标准组应用CF方案化疗,所有患者长期随访,统计化疗不良反应及生存数据。结果:肿瘤组织中ERCC1、TYMS、TUBB3阳性表达率分别为43%、47%、51%,无统计学差异(P>0.05)。所有患者总一年生存率、两年生存率及三年生存率为分别为90.57%,72.45%和59.77%。生存曲线分析提示:0项基因阳性组预后最佳(P<0.05),而1项、2项和3项基因阳性组间无统计学差异(P>0.05)。个体化化疗组的III/IV级化疗不良反应发生率明显低于标准化疗组(P<0.05)。结论:食管鳞癌患者中ERCC1、TYMS、TUBB3表达具有特定的临床特征,其高表达患者预后欠佳。根据基因检测结果进行个体化化疗可以获得更好的疗效和耐受性,不良反应更轻。 相似文献
10.