脂质体辅助递送CTLA-4 siRNA通过激活系统性抗肿瘤免疫反应抑制肾细胞癌生长

目的:探索携带CTLA-4 siRNA的适配子偶联脂质体颗粒是否可以激活肿瘤部位的抗肿瘤免疫反应，抑制肾细胞癌的生长。方法:采用薄膜水化法制备脂质体；使用透射电子显微镜观察脂质体的形态和结构；用Zetasizer测量Zeta电位；共孵育实验观察靶细胞对Lipo-siRNA的摄取；qPCR检测Lipo-siRNA对CTLA-4基因的沉默；小鼠移植瘤模型检测Lipo-siRNA的体内抑瘤能力；流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞的激活状态；免疫荧光法检测肿瘤浸润T细胞的数目。结果:成功制备Lipo-siRNA，电镜结果显示其具有双层球状结构；Zetasizer测得其Zeta电位为(+20.53±2.66)mV；荧光显微镜观察结果表明Lipo-siRNA可以被靶细胞有效摄取，qPCR检测Lipo-siRNA可以显著降低CTLA-4基因的表达（P＜0.001）；小鼠移植瘤模型显示Lipo-siRNA较对照组而言可以显著抑制肿瘤生长（P＜0.001），降低肿瘤细胞中CTLA-4的表达（P＜0.001），提升肿瘤浸润T细胞的数量（P＜0.000 1），并且提高了肿瘤浸润T细胞中IL-2（P＜0.000 1）和IFN-γ（P＜0.000 1）的表达水平。结论:适配子偶联脂质体可以携带CTLA-4 siRNA靶向肿瘤细胞，激活肿瘤部位的抗肿瘤免疫反应，抑制肿瘤的生长，对肾细胞癌的治疗具有潜在的临床应用价值。     

预测非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌患者复发的炎症反应标志物评分系统构建

目的探讨采用4种炎症反应标志物构建预测非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌(NMIBC)患者复发的炎症评分系统。方法选取海南医学院第一附属医院在2012-01-01-2016-02-27收治的271例NMIBC患者。术前1周收集患者中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、白蛋白与球蛋白比值(AGR)、淋巴细胞与单核细胞比值(LMR)。基于NLR、PLR、AGR和LMR最佳截断值构建中性粒细胞与淋巴细胞比值-血小板和淋巴细胞比值-白蛋白球蛋白比值-淋巴细胞和单核细胞比值(NPAL)评分系统(NPALSS),并结合多因素Cox风险比例模型分析NPALSS的临床价值。结果所有患者均获得随访,随访时间18~89个月,平均时间为(55.84±22.68)个月。随访末期64例患者复发,复发率为23.6%,中位无复发生存时间41个月。NLR、PLR、AGR和LMR 4种炎症反应标志物的曲线下面积(AUC)分别为0.785、0.694、0.866和0.750,最佳截断值分别为2.37、136、1.71和3.64。NLR≤2.37、PLR<136、AGR≥1.71、LMR≤3.64患者的无复发生存率高于NLR>2.37、PLR≥136、AGR<1.71、LMR>3.64患者,均Log-rank P<0.001。NPALSS不同等级的生存曲线比较差异有统计学意义,均Log-rank P<0.001。肿瘤数量(HR多发=1.026,95%CI为1.002~1.051)、T分期(HRT1=1.031,95%CI为1.009~1.054)、NPALSS(HR_1级=1.017,95%CI为1.001~1.034;HR_2级=1.935,95%CI为1.438~2.605;HR_3级=2.213,95%CI为1.646~2.977;HR_4级=2.518,95%CI为1.810~3.503)是NMIBC患者复发的独立危险因素,均P<0.05。结论结合NLR、PLR、AGR和LMR最佳截断值所构建的NPALSS可以有效预测高复发风险的NMIBC患者。     

调血脂中药专利信息分析

基于Patsnap数据库收集2000～2018年调血脂中药的相关专利,运用专利分析法揭示该领域研究的发展脉络,分析专利申请趋势和申请人分布,探讨影响因素和提升方向。     

自血疗法配合穴位埋线治疗神经性皮炎临床研究

目的:观察自血疗法配合穴位埋线治疗神经性皮炎的临床疗效。方法:将符合纳入标准的104例神经性皮炎患者按随机数字表法分为观察组和对照组各52例。对照组外用复方醋酸地塞米松乳膏治疗,观察组采用自血疗法配合穴位埋线治疗。观察2组治疗前后皮损面积及瘙痒评分,并评价临床疗效。结果:与治疗前比较,2组患者治疗7天、14天、21天、28天后皮损面积评分显著下降(P 0.05)。治疗21天、28天后观察组皮损面积评分显著低于对照组(P 0.05)。与治疗前比较,2组患者治疗7天、14天、21天、28天后皮肤瘙痒评分显著下降(P 0.05)。治疗21天、28天后观察组皮肤瘙痒评分显著低于对照组(P 0.05)。观察组总有效率为91.7%,显著高于对照组86.0%,差异有统计学意义(P 0.05)。观察组复发率为12.2%,显著低于对照组的35.9%(P 0.05)。结论:自血疗法配合穴位埋线治疗神经性皮炎疗效肯定,能有效改善患者临床症状且不易复发。     

基于网络药理学及定性定量研究的甘草质量标志物预测分析

目的基于中药质量标志物(Q-marker)的理念,对甘草从化学成分有效性和可测性的角度进行Q-marker的初步预测。方法基于文献整合及数据分析对甘草Q-marker的来源范围进行筛选,通过网络药理学进行成分有效性分析,采用高效液相色谱法对4个产地15批甘草药材进行定性和定量研究,运用模式识别方法筛选出造成组间差异的主要标志性成分,结合网络药理学结果进一步确定甘草的Q-marker。结果文献研究确定黄酮类和三萜类成分为甘草Q-marker的主要来源范围;网络药理学结果表明甘草苷、甘草酸等成分在"成分-靶点-通路"网络中具有高连接度,是其主要活性成分;建立15批甘草样品的指纹图谱,通过偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)明确了甘草苷、芹糖甘草苷等5个成分为主要标志性成分;甘草苷、芹糖甘草苷、甘草酸、甘草次酸4个成分含量测定结果表明不同产地间成分含量具显著差异,结合网络药理学分析结果进一步明确了甘草苷、芹糖甘草苷、甘草酸、甘草次酸可作为甘草Q-marker。结论以黄酮类和三萜类成分作为甘草Q-marker的来源范围,通过网络药理学(有效性)结合多产地甘草药材定性定量(可测性)研究最终确定甘草苷、芹糖甘草苷、甘草酸和甘草次酸4个成分可作为甘草潜在Q-marker科学合理,为甘草的质量控制提供参考依据。     

基于指纹图谱及网络药理学的白芍质量标志物(Q-marker)预测分析

目的基于指纹图谱和网络药理学方法,分析预测当归四逆汤中单味药白芍潜在的质量标志物(Q-marker)。方法建立白芍水煎液和当归四逆汤指纹图谱,明确成分传递规律;进一步通过网络药理学方法,构建"成分-靶点-通路"网络,预测白芍的Q-marker。结果建立了15批白芍水煎液和15批当归四逆汤指纹图谱,并各指认其中5个色谱峰,分别为没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷;经网络药理学分析,筛选出潜在的2个活性成分、8个核心靶点、13条关键通路,表明白芍主要通过这些成分、靶点、通路发挥作用,初步预测芍药苷、芍药内酯苷为白芍潜在的Q-marker。结论研究分析预测的Q-marker,为白芍质量的全面控制提供参考,同时也为白芍功效关联物质的研究及作用机制的阐释奠定基础。