靶向抑制miR-155增加骨髓瘤细胞对化疗药物的敏感性

目的:探讨靶向抑制miR-155对骨髓瘤细胞化疗敏感性的影响,并研究其分子作用机制。方法:利用qRT-PCR测定人骨髓瘤细胞株及耐药株中miR-155的表达水平;利用LipofectamineTM 2000 将 miR-155 inhibitor和阴性对照转染至人骨髓瘤耐药细胞株中;利用MTT 法检测转染后人骨髓瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性和增殖活性;利用Western-blot实验测定转染后人骨髓瘤耐药细胞中E-cadherin 蛋白的表达量。结果:qRT-PCR实验结果显示,人骨髓瘤耐药细胞中miR-155的表达水平较人骨髓瘤细胞显著上调（P＜0.001）;MTT实验结果显示,转染miR-155 inhibitor抑制miR-155的表达,人骨髓瘤耐药细胞对化疗药物的敏感性显著增加（P＜0.05）,细胞增殖活性显著降低（P＜0.05）;Western-blot实验结果显示,人骨髓瘤耐药细胞中E-cadherin蛋白的表达量显著增加（P＜0.01）。结论:通过靶向抑制miR-155的表达可以增加骨髓瘤细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能与上皮间质转化（EMT）生成的逆转有关。     

As2O3影响慢性粒细胞白血病细胞VEGF,MMP-2 mRNA表达的实验研究

目的研究As2O3对慢性粒细胞白血病（CML）骨髓单个核细胞，血管内皮生长因子（VEGF），基质金属蛋白酶2（MMP-2）mRNA及培养上清VEGF蛋白表达的影响作用，从而对白血病的发病机制及As2O3的作用机制进行探讨。方法用RT—PCR技术检测20例CML患者与5例正常人骨髓细胞MMP-2，VEGFmRNA的表达。用ELISA方法检测20例CML患者骨髓单个核细胞经As2O3作用前、后培养上清液VEGF水平的变化，用RT—PCR法检测VEGF，MMP-2mRNA表达阳性患者骨髓单个核细胞mRNA含量的变化。结果CML患者VEGF，MMP-2mRNA水平明显高于正常对照者，5×10^-6mol／L As2O3可明显下调CML患者骨髓单个核细胞培养上清VEGF蛋白的表达（P〈0．05）；As2O3对骨髓单个核细胞VEGF，MMP-2mRNA的表达有下调作用，并为剂量依赖性。结论CML中VEGF与MMP-2mRNA表达异常增高。As2O3下调白血病细胞VEGF，MMP-2的表达可能是其抗白血病作用的机制之一。     

曼宋酮E对白血病K562细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察曼宋酮E对K562细胞增殖的影响,探讨其诱导凋亡作用及可能机制.方法 台盼蓝拒染实验检测曼宋酮E对K562细胞的生长抑制作用;荧光显微镜观察细胞核形态的变化;流式细胞仪测定细胞凋亡率;免疫印迹法测定caspase-3、caspase-8、caspase-9及PARP的活性及Bcl-2、Bax和Bcl-XL的表达.结果 曼宋酮E抑制K562细胞增殖呈时间和浓度相关性;12.5μg/mL的曼宋酮E处理K562细胞0、12、24、48 h细胞凋亡率分别为(2.1±0.8)%、(3.2±1.6)%、(15.3±8.9)%、(25.1±11.4)%;在曼宋酮E诱导K562细胞凋亡过程中,caspase-3和caspase-8以及PARP出现活化断裂,casepase-9表达无明显变化;Bel-2家族蛋白Bcl-2、Bax和Bcl-L表达无显著改变.结论 曼宋酮E可抑制诱导K562细胞增殖,并通过caspase-8途径介导凋亡.     

小剂量沙利度胺治疗多发性骨髓瘤临床观察及对VEGF及MVD的影响

目的:探讨小剂量沙利度胺治疗多发性骨髓瘤的临床疗效及其对血浆血管内皮生长因子(VEGF)、骨髓微血管密度(MVD)水平的影响。方法:多发性骨髓瘤患者42例(初治者30例,复发难治者12例)。初治患者开始单用沙利度胺治疗,据病情变化加用联合化疗。复发难治者均用沙利度胺联合VAD方案治疗。沙利度胺从小剂量50mg/d开始口服,每周增加50mg,直至最大剂量200mg/d并维持治疗。沙利度胺单药治疗者3例,联合化疗者39例。联合化疗方案采用标准MP(美法伦+泼尼松)方案、M2(卡莫司汀+环磷酰胺+长春新碱+美法伦+泼尼松)方案、VAD(长春新碱+多柔比星+地塞米松)方案。治疗6月后进行疗效评价。所有病例均于治疗前及治疗后6月测定骨髓MVD及采用酶联免疫吸附法测定血浆VEGF水平。结果:所有病例中部分缓解27例(初治24例,复发难治3例),进步8例(初治4例,复发难治4例),无效7例,总有效率83.3%。治疗前后比较,血红蛋白明显上升,骨髓浆细胞比例、血β2-MG、免疫球蛋白均明显下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。所有治疗有效者血浆VEGF水平及骨髓MVD均较治疗前明显下降(P<0.05);治疗无效者血浆VEGF水平及骨髓MVD变化不著(P>0.05)。结论:小剂量沙利度胺治疗多发性骨髓瘤临床疗效肯定,副反应小,且治疗有效病例血浆VEGF水平及骨髓MVD下降明显。     

幽门螺旋杆菌感染与绝经前女性缺铁性贫血的相关性

目的 研究幽门螺旋杆菌(HP)感染与绝经前女性缺铁性贫血(IDA)的相关性.方法 收集陕西省人民医院2009年2月～2011年3月门诊及住院绝经前女性IDA患者154例及健康门诊体检绝经前女性87例,采用金标法检测血清HP尿素酶抗体.将HP阳性患者随机分为2组,其中1组(39例)及HP阴性组(76例)给予补铁治疗,2组(39例)给予补铁十清除HP治疗.所有患者治疗前、治疗后2周、4周复查血常规及血清铁蛋白.结果 ①154例女性IDA患者,HP阳性78例,感染率50.65％;对照组87例,HP阳性32例,感染率36.79％,二者相比差异具有统计学意义(P＜0.05);②血清铁蛋白在治疗4周后HP阳性2组明显高于1组(0.005＜P＜0.01)及HP阴性组(P＜0.001).结论 幽门螺旋杆菌感染可能是缺铁性贫血的病因之一,有效地清除HP治疗能提高铁储存,从而可能提高这些IDA患者的疗效.     

幽门螺旋杆菌感染与绝经前女性缺铁性贫血的相关性研究

目的:研究幽门螺旋杆菌(HP)感染与缺铁性贫血(IDA)的相关性。方法:收集本院女性患者161例,采用金标法检测血清HP尿素酶抗体。分析HP阳性患者与阴性患者血红蛋白(Hb)、血清铁蛋白(SF)、平均红细胞体积(MCV)等指标。探讨HP与IDA的相关性以及清除HP在缺铁性贫血治疗中的必要性。结果:①161例女性IDA患者,HP阳性83例,HP感染率51.55%;对照组87例,HP阳性32例,感染率36.78%,两者相比具有统计学意义(P<0.05),女性IDA患者HP感染率明显高于健康女性;②HP表达阳性缺铁性贫血患者Hb及SF低于HP表达阴性患者,但无统计学意义。结论:幽门螺旋杆菌感染可能是缺铁性贫血的病因之一,对于临床上部分缺铁原因不明的患者,应该注意检测HP感染情况。     

氟达拉滨联合丙戊酸对慢性粒细胞白血病细胞凋亡诱导作用

目的 研究氟达拉滨（Fludarabine,FDB）联合丙戊酸（valproic acid,VPA）对慢性粒细胞白血病（chronic myeloidleukemia,CML）细胞株K562增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 慢性粒细胞白血病细胞株K562,单独使用不同浓度的FDB（1,5,10μmol/L）或VPA（1,2.5,5 mmol/L）,或联合使用FDB和VPA处理K562细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况,并观察其有效的作用浓度;流式细胞仪检测K562细胞周期变化;western blot检测凋亡相关蛋白及组织蛋白酶B的表达变化.结果 单独使用FDB或VPA均可明显抑制K562细胞的增殖,呈剂量依赖性,并使K562细胞停滞在G0/G1期,联合使用VPA能增强FDB对K562细胞的凋亡诱导作用.同时检测到FDB和VPA能诱导溶酶体中组织蛋白酶B的表达.结论 联合使用FDB和VPA可诱导K562细胞溶酶体中组织蛋白酶B的表达及活性,从而启动溶酶体介导的细胞凋亡过程,明显抑制K562细胞的增殖,并促进K562细胞的凋亡,提高治疗效果,为临床抗肿瘤治疗提供新的指导方向.     

丝裂素活化蛋白激酶通路在甲异靛诱导U937细胞凋亡中的作用

以往实验研究表明,细胞信号转导过程中丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)家族的活化除与细胞的生长增殖有关外,也参与细胞凋亡的调节.我们观察了甲异靛在诱导U937细胞凋亡过程中MAPK的三种信号分子ERK1/2、JNK及p38活性的变化,并分析其与细胞凋亡的关系,旨在进一步阐明甲异靛诱导白血病细胞凋亡的分子机制.     

沙利度胺对急性白血病患者血管内皮生长因子及成纤维细胞生长因子的影响

目的：观察沙利度胺联合化疗治疗急性白血病的临床疗效及其对血浆血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）水平的影响。方法：将急性白血病患者36例随机分为实验组及对照组,各18例。两组均予以常规化疗方案标准剂量化疗,实验组同时长期口服沙利度胺100 mg/d。治疗前、治疗后8周分别检测血浆VEGF、bFGF含量,并选择健康体检者15例,检测其血浆VEGF、bFGF含量为标准对照数值,与白血病患者比较。结果：实验组与对照组患者治疗的有效率分别为88.9%（16/18）、77.8%（14/18）,两组差异有统计学意义（χ2=4.10,P〈0.05）。实验组与对照组治疗前后血浆VEGF、bFGF水平分别为[（389.78±249.94）ng/L、（211.74±36.72）ng/L]、[（318.54±125.78）ng/L、（288.02±31.77）ng/L]、[（2.43±0.27）μg/L、（2.09±0.17）μg/L]、[（2.41±0.33）μg/L、（2.11±0.31）μg/L],与健康组[（132.91±26.66）ng/L、（1.83±0.44）μg/L]相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;实验组与对照组治疗后VEGF水平相比差异有统计学意义（t=2.79,P〈0.05）,而bFGF水平差异无统计学意义（t=1.28,P〉0.05）。结论：沙利度胺联合化疗可提高急性白血病患者的缓解率,其作用机制可能通过抑制血浆VEGF及其受体水平的表达而发挥其抗血管增殖的抗白血病作用。