人eNOS启动子不同序列驱动的红色荧光蛋白载体的构建与表达

目的:为了研究人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)启动子的功能,构建在哺乳动物细胞中表达的人eNOS启动子不同区段驱动的红色荧光蛋白报告基因载体。方法:从重组pDseNOSRed载体上将eNOS启动子的不同长度DNA序列亚克隆至红色荧光蛋白载体pDsRed1-1上,经PCR、酶切和DNA测序鉴定,将重组载体pDsF1033Red,pDsF494Red和pDsF166Red转染NIH3T3细胞,在倒置荧光显微镜下观察它们在细胞内的表达情况。结果:PCR、酶切和DNA测序结果均表明重组载体pDsF1033Red,pDsF494Red和pDsF166Red的构建正确,这些载体能在NIH3T3细胞中有效表达。由eNOS启动子不同区段驱动表达的95％以上的红色荧光蛋白均匀分布于整个细胞,转染后48-60h开始出现,96-144h为红色荧光蛋白(RFP)的表达高峰,RFP的荧光在144h最强,168h后红色荧光逐渐消退,21d后仍有很少量红色荧光残留。RFP的表达量和荧光强度明显低于强启动子p_CMVIE驱动的RFP。结论:成功构建了eNOS启动子不同区段驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,它们能在哺乳动物细胞中有效表达,静息状态下呈现弱转录活性,为研究人eNOS启动子不同区及其顺式调控元件的作用提供了实用而又方便的工具。     

大鼠多系统器官衰竭模型的制备

本文介绍用红细胞膜碎片封闭网状内皮系统并出血性休克的方法,制成大鼠创伤后多系统器官衰竭(MSOF)模型。在36例渡过休克的大鼠中,MSOF的发生率为75.0％。肺衰的发生率最高,依次为肝、胃肠道和肾。     

浅谈在机能实验室进行病生实验教学的做法和体会

基础医学实验教学的改革随着医学教育的发展势在必行。本文报导了在校属新建的机能实验室开展军医本科病生实验教学。通过更新观念、提高认识 ;周密组织、明确分工 ;能者为师、互相学习 ;取长补短、团结协作等方法进行 ,取得了一定的实践效果     

羊毛防虫蛀剂的急性毒性及刺激实验

为了研究羊毛防虫蛀剂对人的毒性及安全性,作者用小鼠进行了毒性实验。用80％乙醇溶液,在豚鼠完整皮肤及破损皮肤上进行了皮肤刺激性实验。用10％生理盐水混悬液对家兔眼结膜进行了刺激性实验。结果表明：小鼠口服羊毛防虫蛀剂的半敷致死量为9.2g/kg。对豚鼠完整皮肤及破损皮肤均无明显的刺激性,对家兔眼结膜可产生轻度刺激。研究证明：该羊毛防虫蛀剂对人体是安全的。     

p38丝裂原激活蛋白激酶对人胚胎肾293细胞一氧化氮合酶基因转录的调控

目的探讨p38 丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)家族四种亚型对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的转录调控。方法以人胚胎肾293(HEK 293)细胞为靶细胞,采用脂质体(LPS)介导的细胞基因共转染技术、荧光素酶报告基因技术,分别将FLAG-tagged p38 MAPK 4种亚型、含有鼠iNOS基因启动子区的荧光素酶报告基因质粒(piNOS-Luc)、空载体(pcDNA3)、β-半乳糖苷酶表达质粒(pCMV-β)共转染,检测并比较荧光素酶相对活性。结果(1)未加刺激时,在HEK 293细胞中,p38 MAPK中仅有p38α能够诱导iNOS基因启动子的转录活性;(2)在LPS刺激下,p38 MAPK 4种亚型均能够诱导iNOS启动子的转录活性,其中,p38β所诱导的转录活性最高,p38α的诱导作用亦很明显。结论(1)LPS能够在HEK 293细胞中诱导iNOS基因转录活性;(2)在HEK 293细胞中,p38 MAPK参与了静息时及LPS刺激下对iN-OS基因的转录调控。     

苦豆子生物碱的药理作用

 苦豆子广泛分布在我国西北荒漠地区，其生物碱的药理研究近年取得了很大进展。总碱和一些单体生物械对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统和消化系统等都有显著的药理活性。苦豆子生物碱除了已有的抗菌等用途外，其在强心、抗心律失常、抗炎免疫、抗肿瘤等方面也有开发利用的广阔前景。     

辽宁省血红蛋白病调查报告

本文报告了辽宁省血红蛋白病的调查情况,普查人群12,686人,包括汉、满、蒙、回、朝鲜及锡泊族六个民族。对辽宁省血红蛋白病的人群发生率,类型及地理分布进行了探讨。     

终末期肾衰高血压的病因及治疗方案探讨

为探讨终末期肾衰（ＥＳＲＦ）高血压病因及合理治疗方案，对１９９５年６月至１９９６年２月收治的ＥＳＲＦ１５１例进行临床研究，其中高血压１３１例（８７％），超滤达到干体重后，血压降至正常８３例（６３％）。高血压组血浆肾素活性（ＰＲＡ）、血管紧张素Ⅱ和甲状旁腺素（ＰＴＨ）均显著高于血压正常组。透析后高血压４８例，单用血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ），血压降至正常２３例（４８％），先后加用钙通道阻滞剂（ＣＣＢ）和可乐定，血压降至正常分别为１８例和５例。３种抗高血压药联合使用时，仍有高血压２例，改用腹膜透析后血压正常。以上结果提示，ＥＳＲＦ高血压的发生与容量负荷过重、肾素－血管紧张素系统（ＲＡＳ）过度活跃以及继发性甲旁亢有关。合理的治疗方案可能包括：①达到及维持干体重，适当控制透析间期体重；②抗高血压治疗首选ＡＣＥＩ，必要时加用ＣＣＢ和中枢性抗高血压药；③在３种药物联合治疗无效时，改变透析方式。     

枸杞多糖对小鼠胸腺和脾脏保护作用的研究

为探讨枸杞多糖免疫保护作用的机理 ,在小白鼠体内注射环磷酰胺 10 0mg/kg ,形成免疫损伤模型 ,在次模型中注射枸杞多糖 10 0mg/kg ,实验 7天后观察外周血白细胞计数、脾脏和胸腺重量。结果 ,实验组白细胞计数 (6 .85 2± 0 .0 76 )× 10 9/L ,明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;实验组脾脏重量 (0 .136± 0 .0 2 6g)和胸腺重量 (0 .0 31± 0 .0 2 1g)均明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结果提示 ,枸杞多糖能够对抗环磷酰胺对脾脏和胸腺的损伤     

人胎盘组织液细菌内毒素检测方法的研究

为了降低检验成本,提高检测方法的灵敏度,拟用细菌内毒素检测法代替家兔热原检测法,采用细菌内毒素检查法对人胎盘组织液进行方法学研究。结果,3批人胎盘组织液经2－10倍稀释,用不同厂家的鲎试剂进行干扰试验,3批样品对细菌内毒素均无干扰作用。提示,可以用细菌内毒素检查法代替家兔热原检测法。