基于网络药理学和实验验证研究柴胡疏肝散治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制＊

目的 通过网络药理学的方法进行预测，再深一步进行动物实验验证来研究柴胡疏肝散治疗CAG的作用机制。方法 首先在TCMSP数据库中检索柴胡疏肝散的所有活性成分与药物靶点；通过收集PharmGkb、OMIM、GeneCards和DrugBank数据库中收录的慢性萎缩性胃炎的相关靶点。将药物靶点与疾病靶点进行映射筛选出交集靶点，将得到的交集靶点构建PPI网络与活性成分-共同靶点网络，并对其进行GO和KEGG富集分析。最后利用Vina软件进行分子对接实验验证，并通过免疫印迹法验证柴胡疏肝散对两种受体蛋白EGFR和STAT1的影响。结果 最终筛选得到柴胡疏肝散活性成分104个，潜在靶点238个，与慢性萎缩性胃炎的交集靶点52个；GO与KEGG富集分析分别得到2166条目和148条目，主要涉及到JAK-STAT信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路等；分子对接结果显示EGFR、STAT1两个靶点能够与核心活性成分能够自发结合成较为稳定的构像；免疫印迹法实验证明柴胡疏肝散能够降低大鼠胃黏膜组织EGFR和STAT1蛋白表达。结论 通过网络药理学和实验验证，发现柴胡疏肝散可能通过调节EGFR和STAT1蛋白表达来共同调控胃黏膜细胞增殖与凋亡，进而发挥着治疗慢性萎缩性胃炎的效果，为深入进行柴胡疏肝散治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制研究提供新思路和新方法。     

基于代谢组学探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠的中枢调节作用

目的：基于超高效液相色谱质谱联用法（UPLC-MS）及非靶向代谢组学技术探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠的中枢调节作用，并寻找大脑皮质、下丘脑与胃组织代谢状态的关联性。方法：将28只Wistar大鼠随机分为空白组8只和造模组20只，采用化学诱导+饥饱失常+慢性束缚+夹尾刺激的方法建立肝郁脾虚型CAG大鼠模型，成模大鼠随机分为模型组和柴芍六君汤组，每组8只，柴芍六君汤组大鼠灌胃给予5.1 g·kg-1的柴芍六君汤中药煎液，空白组和模型组大鼠予等体积灭菌饮用水灌胃，持续4周。观察对比各组大鼠宏观表征、行为学指标和胃黏膜组织病理学改变，采用UPLCMS非靶向代谢组学技术探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型CAG大鼠大脑皮质、下丘脑和胃组织代谢物表达的影响，并用Pearson相关系数法分析不同组织代谢物之间的关联。结果：与模型组比较，柴芍六君汤组大鼠毛发色泽、精神状态和大便性状等宏观表征有所改善，旷场实验的跨格和直立次数显著增加，强迫游泳静止时间显著减少（P<0.01），胃黏膜萎缩程度减轻。各组大鼠大脑皮质的代谢数据共鉴定出3个共同的潜在生物标志物，但未富集到通路；在下丘脑中...     

p16/Ki-67双染联合HC2检测在液基细胞学诊断中的应用

目的 探讨p16/Ki-67细胞学双染联合高危型HPV(HR-HPV)检测在宫颈液基细胞学诊断中的应用价值.方法 选择2017年1月至2019年1月在核工业四一六医院行宫颈液基细胞学(TCT)检查,报告结果为无上皮内病变或恶性病变(NILM)的患者226例,将其剩余保存液行p16/Ki-67免疫细胞化学染色,同时行二代杂交捕获技术(HC2)检测HR-HPV.结果 226例TCT诊断为NILM的患者,HC2检测均为阳性;采用p16/Ki-67双染检测并复查TCT,宫颈高级别鳞状上皮内病变的检出率为11.06％(25/226).p16/Ki-67双染检测灵敏度、特异性分别为96.0％和92.0％,诊断价值ROC曲线下面积AUC为0.797,阴道镜检查灵敏度与特异性分别为68.0％和95.0％,诊断价值ROC曲线下面积AUC为0.619,两种检查方式仅灵敏度比较差异存在统计学意义(P＜0.05).结论 采用TCT作为宫颈癌筛查方式中,联合运用p16/Ki-67双染和HC2检测可有效地提高其筛查的灵敏度,减少漏诊率.     

南京“5.7”192Ir源事故患者组织全基因组测序分析

目的 采用全基因组测序对南京"5.7"¹⁹²Ir源事故患者外周血及组织进行照后第2 047天（5年7个月零7天）基因变异分析，探讨其电离辐射引起的体细胞变异情况，为明确电离辐射引起的远后效应提供理论依据。方法 收集南京"5.7"¹⁹²Ir源事故患者王某照后第2 047天的背部正常皮肤组织、受照射范围内的骨及软组织、外周血3种样本，分别提取DNA后采用全基因组测序技术对样本进行高通量测序，并通过生物信息学对原始测序数据进行分析。以背部正常皮肤组织为对照，开展受照射范围内的骨及软组织、外周血的基因变异检测分析。结果 与背部正常皮肤组织相比，受照射范围内的骨及软组织和外周血的基因组出现了多种基因变异，包括碱基置换（碱基转换、碱基颠换）、小片段插入、小片段缺失、拷贝数变异（拷贝数增加、拷贝数减少）以及结构变异（大片段缺失、大片段重复、倒位、染色体内易位以及染色体间易位），受照射范围内的骨及软组织出现10 666个基因变异，外周血出现11 233个基因变异，变异DNA涉及上万个基因。这些基因变异存在于外显子、内含子、3''UTR（3''untranslated region，3''端非编码区）、5''UTR（5''untranslated region，5''端非编码区）、剪切位点附近、转录起始位点上游5 kb区域以内、转录终止位点下游5 kb区域以内、非编码RNA以及基因间隔区域，且所有染色体都存在基因变异。结论 南京"5.7"¹⁹²Ir源放射事故患者照后第2 047天受照射范围内的骨及软组织和外周血中存在大量的基因变异，可能影响机体的功能及电离辐射诱发的远后效应。     

基于Hedgehog信号通路探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型CAG大鼠的影响

目的 探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠刺猬（Hedgehog）信号通路的影响。方法 随机将Wistar大鼠分为正常组和造模组，造模组采用复合造模法进行构建肝郁脾虚型CAG大鼠模型，造模成功后，分为模型组，维酶素组，柴芍六君汤组，GDC-0449（阻滞剂）组，柴芍六君汤+GDC-0449组；正常组和模型组给予生理盐水灌胃，维酶素组和柴芍六君汤组分别给予240 mg·kg^-1·d^-1，5.1 g·kg^-1·d^-1灌胃，GDC-0449组腹腔注射50 mg·kg^-1·d^-1，柴芍六君汤+GDC-0449给予腹腔注射50 mg·kg^-1·d^-1和灌胃柴芍六君汤5.1 g·kg^-1·d^-1，持续4周。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠胃黏膜病理形态，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胃黏膜组织音猬因子（Shh），12次跨膜蛋白受体Patched1（Ptch1），胶质瘤相关肿瘤基因同源物1（Gli1）mRNA和蛋白表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素-1β（IL-1β），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果 与正常组比较，模型组大鼠腺细胞减少，腺体萎缩，腺腔体积增大，可见浆细胞浸润，伴有肠上皮化生，胃黏膜组织Shh，Ptch1，Gli1 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01），血清中IL-1β，TNF-α含量显著上升（P<0.01）。与模型组比较，维酶素组、柴芍六君汤组细胞排列较为整齐，腺体萎缩改善，未见明显炎性浸润，GDC-0499组和柴芍六君汤+GDC-0449组并无太多改善；维酶素组、柴芍六君汤组胃黏膜组织Shh，Ptch1，Gli1 mRNA和蛋白表达水平显著上升（P<0.01），维酶素组血清中IL-1β含量差异无统计学意义，TNF-α含量显著降低（P<0.01），柴芍六君汤组血清中IL-1β，TNF-α含量明显降低（P<0.05，P<0.01）；GDC-0449组和柴芍六君汤+GDC-0449组，胃黏膜组织Shh，Ptch1，Gli1 mRNA和蛋白表达、血清中IL-1β，TNF-α含量差异无统计学意义。结论 柴芍六君汤能有效改善肝郁脾虚型大鼠胃黏膜病理学状态，其机制可能是通过激活Hedgehog信号通路，从而降低IL-1β，TNF-α含量有关。     

基于肝X受体探讨健脾祛痰法对高脂血症大鼠肝内胆固醇代谢通路的影响

目的:基于肝X受体探讨健脾祛痰法对高胆固醇血症的治疗及其代谢通路机制的影响.方法:将40只雄性SD大鼠分成正常组、模型组、中药低、中、高剂量组,正常组正常饮食,模型组给予高脂饲料喂养,各治疗组给予高脂饲料喂养和相应药物[6g/(kg·d)、12g/(kg·d)、25g/(kg· d)],连续进行4周.检测实验相关指标并...     

电离辐射对皮肤细胞铁死亡的影响及其抑制剂Ferrostatin-1的防护作用研究

目的 探讨电离辐射对皮肤细胞铁死亡的影响以及铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（Fer-1）对受照射皮肤细胞的保护作用及机制。方法 为检测Fer-1对人永生化角质形成细胞（HaCaT）辐照后的影响,按照射与给药方式分为对照组、Fer-1组、单纯照射组、照射+Fer-1组。采用CCK-8法和乳酸脱氢酶（LDH）释放检测X射线照射以及Fer-1处理对HaCaT细胞存活和细胞死亡的影响。采用流式细胞术检测X射线照射以及Fer-1处理后对HaCaT细胞脂质过氧化水平的影响。利用结晶紫染色法检测X射线照射以及Fer-1处理对HaCaT细胞克隆形成能力的影响。Western blot检测X射线照射以及Fer-1处理对铁死亡相关蛋白ACSL4和GPX4表达的影响。结果 单纯照射组经不同剂量的X射线照射后细胞存活率明显降低（t=5.63、8.74,P<0.05）,LDH的释放明显增加（t=3.98、5.08、9.27,P<0.05）,Fer-1能够提高受照射皮肤细胞存活率（t=5.79,P<0.05）,降低LDH的释放量（t=12.36、11.96、18.13、9.96,P<0.05）。单纯照射组经10 Gy的X射线照射后细胞的脂质过氧化水平明显升高（t=9.59,P<0.05）,克隆存活能力明显减弱（t=4.26,P<0.05）,而Fer-1能够降低X射线照射引起的脂质过氧化水平的升高（t=6.48、17.04,P<0.05）,增加受照射皮肤细胞的克隆存活能力（t=3.96,P<0.05）。10 Gy的X射线照射会导致ACSL4表达水平的升高和GPX4的表达水平的降低,而Fer-1的治疗能促进ACSL4和GPX4的表达水平恢复正常（t=5.23、7.16、4.78、8.29、6.43,P<0.05）。结论 铁死亡抑制剂Fer-1在细胞水平上能够通过抑制电离辐射后铁死亡的发生而保护皮肤细胞,为放射性皮肤损伤的防护提供了一种新的策略。     

慢性萎缩性胃炎癌前病变中医健康管理模式思考※

慢性萎缩性胃炎癌前病变是胃癌发生的必经始动环节,其病程迁延,病情反复发作,严重者可导致胃癌的发生。中医健康管理本着"治未病"思想,以状态为核心进行全程式、连续性服务,顺应"疾病医学"向"健康医学"模式转变,助力"健康中国2030"战略。因此,本文根据慢性萎缩性胃炎癌前病变患者的发病特点,从管理方式、疗效评价两个方面探讨其中医健康管理模式,以期实现实时评估、有效防控,达到阻断胃癌发展进程的目的。     

六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎大鼠疗效和机制研究

目的 探讨六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠的疗效和作用机制。方法 将22只SPF级Wistar大鼠根据体质量随机分为正常组5只和造模组17只。正常组不予造模,造模组予以0.1%氨水溶液及20 mmol/L脱氧胆酸钠溶液交替饮用联合饥饱失常法造模16周后,光镜下观察随机2只造模组大鼠胃黏膜组织形态改变以判定造模成功。造模组造模成功后根据体质量随机分为模型组、维酶素组、六君子汤组,每组各5只。六君子汤组按体质量10 mL/（kg·d）灌胃0.405 g/mL六君子汤水煎液,维酶素组按体质量10 mL/（kg·d）灌胃24 mg/mL维酶素混悬液,正常组和模型组灌胃等剂量灭菌饮用水,连续干预4周。干预后观察4组大鼠一般情况和测量体质量,光镜下观察4组大鼠胃黏膜组织形态,ELISA法检测4组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,qPCR检测4组大鼠胃黏膜组织增殖细胞核抗原（PCNA）、血管内皮生长因子（VEGF）、嗜银蛋白（Ag-NOR）和促细胞凋亡基因（Bax）mRNA相对表达水平。结果 与正常组比较,模型组活动状况、毛发色泽、大便情况等均无改善,体质量较正常组降低（P<...