基于网络药理学和实验验证研究柴胡疏肝散治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制＊

目的 通过网络药理学的方法进行预测，再深一步进行动物实验验证来研究柴胡疏肝散治疗CAG的作用机制。方法 首先在TCMSP数据库中检索柴胡疏肝散的所有活性成分与药物靶点；通过收集PharmGkb、OMIM、GeneCards和DrugBank数据库中收录的慢性萎缩性胃炎的相关靶点。将药物靶点与疾病靶点进行映射筛选出交集靶点，将得到的交集靶点构建PPI网络与活性成分-共同靶点网络，并对其进行GO和KEGG富集分析。最后利用Vina软件进行分子对接实验验证，并通过免疫印迹法验证柴胡疏肝散对两种受体蛋白EGFR和STAT1的影响。结果 最终筛选得到柴胡疏肝散活性成分104个，潜在靶点238个，与慢性萎缩性胃炎的交集靶点52个；GO与KEGG富集分析分别得到2166条目和148条目，主要涉及到JAK-STAT信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路等；分子对接结果显示EGFR、STAT1两个靶点能够与核心活性成分能够自发结合成较为稳定的构像；免疫印迹法实验证明柴胡疏肝散能够降低大鼠胃黏膜组织EGFR和STAT1蛋白表达。结论 通过网络药理学和实验验证，发现柴胡疏肝散可能通过调节EGFR和STAT1蛋白表达来共同调控胃黏膜细胞增殖与凋亡，进而发挥着治疗慢性萎缩性胃炎的效果，为深入进行柴胡疏肝散治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制研究提供新思路和新方法。     

基于代谢组学探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠的中枢调节作用

目的：基于超高效液相色谱质谱联用法（UPLC-MS）及非靶向代谢组学技术探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠的中枢调节作用，并寻找大脑皮质、下丘脑与胃组织代谢状态的关联性。方法：将28只Wistar大鼠随机分为空白组8只和造模组20只，采用化学诱导+饥饱失常+慢性束缚+夹尾刺激的方法建立肝郁脾虚型CAG大鼠模型，成模大鼠随机分为模型组和柴芍六君汤组，每组8只，柴芍六君汤组大鼠灌胃给予5.1 g·kg-1的柴芍六君汤中药煎液，空白组和模型组大鼠予等体积灭菌饮用水灌胃，持续4周。观察对比各组大鼠宏观表征、行为学指标和胃黏膜组织病理学改变，采用UPLCMS非靶向代谢组学技术探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型CAG大鼠大脑皮质、下丘脑和胃组织代谢物表达的影响，并用Pearson相关系数法分析不同组织代谢物之间的关联。结果：与模型组比较，柴芍六君汤组大鼠毛发色泽、精神状态和大便性状等宏观表征有所改善，旷场实验的跨格和直立次数显著增加，强迫游泳静止时间显著减少（P<0.01），胃黏膜萎缩程度减轻。各组大鼠大脑皮质的代谢数据共鉴定出3个共同的潜在生物标志物，但未富集到通路；在下丘脑中...     

柴芍六君汤对慢性萎缩性胃炎肝郁脾虚证模型大鼠胃黏膜组织代谢物表达的影响＊

目的 从代谢组学角度探讨柴芍六君汤改善慢性萎缩性胃炎（CAG）肝郁脾虚证大鼠代谢紊乱的可能作用机制。方法 32只SD大鼠随机分为空白组10只、造模组22只。造模组采用化学诱导、饥饱失常和夹尾刺激法建立CAG肝郁脾虚证大鼠模型，造模10周后进行模型评价。将成模大鼠随机分为模型组和柴芍六君汤组，每组10只。柴芍六君汤组予浓度为0.51 g·mL^-1柴芍六君汤10 mL·kg^-1·天^-1灌胃，空白组和模型组予等体积灭菌饮用水灌胃，共给药4周。一般行为学观察，苏木素-伊红（HE）染色观察胃黏膜组织病理形态，核磁共振氢谱技术（¹H-NMR）识别胃黏膜组织代谢物表达变化，代谢通路分析。结果 造模组大鼠神态疲惫，行为抑郁，大便溏结不调，胃黏膜固有腺体明显萎缩、炎性细胞浸润，符合CAG肝郁脾虚证表现。经柴芍六君汤给药后，模型大鼠一般行为学和胃黏膜组织病理改善。¹H-NMR代谢组学检测出15个与CAG肝郁脾虚证密切相关的胃黏膜组织代谢物，柴芍六君汤干预后回调泛酸、2-羟基丁酸、甲基丙二酸、甲硫醇、乳酸、N-甲基-α-氨基异丁酸、溶血磷脂酰胆碱、谷氨酸、N-乙酰基天冬氨酸、顺式5-四氢十六烷基肉碱、腺苷、脂质含量（P < 0.05或P < 0.01），共得到D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢，丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，精氨酸生物合成代谢这3条关键代谢调节通路。结论 柴芍六君汤能够保护和修复CAG肝郁脾虚证模型大鼠胃黏膜，回调差异代谢物的紊乱，其主要治疗机制可能与D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、精氨酸生物合成代谢通路调控有关。     

基于Hedgehog信号通路探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型CAG大鼠的影响

目的 探讨柴芍六君汤对肝郁脾虚型慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠刺猬（Hedgehog）信号通路的影响。方法 随机将Wistar大鼠分为正常组和造模组，造模组采用复合造模法进行构建肝郁脾虚型CAG大鼠模型，造模成功后，分为模型组，维酶素组，柴芍六君汤组，GDC-0449（阻滞剂）组，柴芍六君汤+GDC-0449组；正常组和模型组给予生理盐水灌胃，维酶素组和柴芍六君汤组分别给予240 mg·kg^-1·d^-1，5.1 g·kg^-1·d^-1灌胃，GDC-0449组腹腔注射50 mg·kg^-1·d^-1，柴芍六君汤+GDC-0449给予腹腔注射50 mg·kg^-1·d^-1和灌胃柴芍六君汤5.1 g·kg^-1·d^-1，持续4周。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠胃黏膜病理形态，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测胃黏膜组织音猬因子（Shh），12次跨膜蛋白受体Patched1（Ptch1），胶质瘤相关肿瘤基因同源物1（Gli1）mRNA和蛋白表达，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素-1β（IL-1β），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果 与正常组比较，模型组大鼠腺细胞减少，腺体萎缩，腺腔体积增大，可见浆细胞浸润，伴有肠上皮化生，胃黏膜组织Shh，Ptch1，Gli1 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.01），血清中IL-1β，TNF-α含量显著上升（P<0.01）。与模型组比较，维酶素组、柴芍六君汤组细胞排列较为整齐，腺体萎缩改善，未见明显炎性浸润，GDC-0499组和柴芍六君汤+GDC-0449组并无太多改善；维酶素组、柴芍六君汤组胃黏膜组织Shh，Ptch1，Gli1 mRNA和蛋白表达水平显著上升（P<0.01），维酶素组血清中IL-1β含量差异无统计学意义，TNF-α含量显著降低（P<0.01），柴芍六君汤组血清中IL-1β，TNF-α含量明显降低（P<0.05，P<0.01）；GDC-0449组和柴芍六君汤+GDC-0449组，胃黏膜组织Shh，Ptch1，Gli1 mRNA和蛋白表达、血清中IL-1β，TNF-α含量差异无统计学意义。结论 柴芍六君汤能有效改善肝郁脾虚型大鼠胃黏膜病理学状态，其机制可能是通过激活Hedgehog信号通路，从而降低IL-1β，TNF-α含量有关。     

六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎大鼠疗效和机制研究

目的 探讨六君子汤治疗慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠的疗效和作用机制。方法 将22只SPF级Wistar大鼠根据体质量随机分为正常组5只和造模组17只。正常组不予造模,造模组予以0.1%氨水溶液及20 mmol/L脱氧胆酸钠溶液交替饮用联合饥饱失常法造模16周后,光镜下观察随机2只造模组大鼠胃黏膜组织形态改变以判定造模成功。造模组造模成功后根据体质量随机分为模型组、维酶素组、六君子汤组,每组各5只。六君子汤组按体质量10 mL/（kg·d）灌胃0.405 g/mL六君子汤水煎液,维酶素组按体质量10 mL/（kg·d）灌胃24 mg/mL维酶素混悬液,正常组和模型组灌胃等剂量灭菌饮用水,连续干预4周。干预后观察4组大鼠一般情况和测量体质量,光镜下观察4组大鼠胃黏膜组织形态,ELISA法检测4组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,qPCR检测4组大鼠胃黏膜组织增殖细胞核抗原（PCNA）、血管内皮生长因子（VEGF）、嗜银蛋白（Ag-NOR）和促细胞凋亡基因（Bax）mRNA相对表达水平。结果 与正常组比较,模型组活动状况、毛发色泽、大便情况等均无改善,体质量较正常组降低（P<...