热毒宁注射液联合沙美特罗替卡松粉吸入剂对支气管哮喘患者临床疗效、肺功能及细胞免疫因子的影响

目的:探讨热毒宁注射液与沙美特罗替卡松粉吸入剂在支气管哮喘患者中的联合应用价值。方法:选取2013年1月至2014年6月我院收治的支气管哮喘患者110例,采用随机数字表法将其分为治疗组和对照组各55例。对照组采用沙美特罗替卡松粉吸入剂,1吸/次,2次/d,14 d/疗程,而治疗组则在对照组基础上加用热毒宁注射液的联合治疗,20 m L/次,1次/d,14 d/疗程,2个疗程后分别对两组的临床治疗、肺功能指标变化、炎症因子表达、细胞免疫因子变化等情况进行比较和分析。结果:与对照组相比,治疗组的显效率47.27%和总有效率92.73%均显著提升,差别均具有统计学意义(P0.05);与本组治疗前相比,两组治疗后的肺功能指标用力肺活量(FVC),第一秒用力呼气量(FEV1),最大用力呼气流量(FEF)均显著提高,差别均具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,治疗组治疗后的肺功能指标FVC(3.01±0.17)L,FEV1(2.86±0.51)L,PEF(4.96±1.10)L·s-1等均明显改善,差别均具有统计学意义(P0.05);与本组治疗前相比,两组治疗后的细胞免疫因子干扰素-γ(IFN-γ)均明显增加,IL-4均明显减少,差别均具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,治疗组治疗后的细胞免疫因子IFN-γ(21.69±3.14)ng·L-1水平显著提高,而白细胞介素-4(IL-4)(8.97±1.67)ng·L-1水平则显著降低,差别均具有统计学意义(P0.05)。结论:热毒宁注射液联合沙美特罗替卡松粉吸入剂对于提高支气管哮喘患者临床疗效,改善患者肺功能和细胞免疫因子表达等方面均具有十分重要的意义。     

整合素介导uPAR信号转导途径的研究进展

目的:总结国内外对尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂(uPAR)信号通路的研究进展。方法:应用PubMed及CHKD期刊全文数据库,以"urokinase plasminogen activatorreceptor、integrins、细胞外基质、黏附作用"等为关键词,检索1999-01-2010-10的相关文献352条。纳入标准:1)uPAR的结构与相关功能的研究;2)细胞外基质与细胞间黏附机制的研究;3)整合素与uPAR相关功能的研究。根据纳入标准符合分析的文献38篇。结果:uPAR信号通路复杂,整合素家族是由α,β亚基经非共价连接形成异二聚体的一类重要的跨膜受体,通过介导uPAR信号传递,激活下游包括Ras-MAPK等在内的多条信号通路,改变肿瘤细胞生物学特性,促使肿瘤浸润和转移。目前,对于两者具体的结合方式尚不清楚。结论:uPAR不仅能与uPA结合,降解细胞外基质,实现远处转移;尚能通过信号通路转导信号,促使肿瘤细胞迁移和增殖。由于整合素家族的存在对于uPAR通路是不可或缺的,若明确两者的结合方式,有望通过干扰两者的结合,达到抑制肿瘤浸润生长与远处转移的目的。     

人sTRAIL基因载体构建及其在真皮干细胞的表达

背景：基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor，TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand, sTRAIL)抗瘤的生物特性，克隆sTRAIL基因，构建其真核表达载体，为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础。 目的：构建真核表达载体pEGFP-N1/sTRAIL，并转染真皮干细胞，以探究sTRAIL基因导入真皮干细胞的表达情况。 方法：采用RT-PCR二步法，以人胎盘组织总RNA为模板，扩增sTRAIL的cDNA序列，将其克隆入pMD18-T载体，随后亚克隆入载体pEGFP-N1中，构建其真核瞬时表达载体pEGFP-N1/sTRAIL，以Fugene 6转染技术，将sTRAIL基因导入真皮干细胞。倒置显微镜下观测转染后真皮干细胞生长变化及sTRAIL在其中的表达等情况。RT-PCR法对目的基因转染的真皮干细胞进行鉴定。 结果与结论：克隆到sTRAIL基因的cDNA序列，成功构建了其真核表达载体，该真核表达载体能携带sTRAIL基因在真皮干细胞中正常表达。倒置显微镜下观测到转染后真皮干细胞生长状态与未转染的真皮干细胞无差异。以经sTRAIL基因转染的真皮干细胞该基因组DNA为模板，用RT-PCR法能扩增到sTRAIL基因cDNA序列。     

人sTRAIL基因载体构建及其在真皮干细胞的表达

背景:基于肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)可溶性相关凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTRAIL)抗瘤的生物特性,克隆sTRAIL基因,构建其真核表达载体,为肿瘤细胞凋亡的实验研究奠定基础.目的:构建真核表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,并转染真皮干细胞,以探究sTRAIL基因导入真皮干细胞的表达情况.方法:采用RT-PCR二步法,以人胎盘组织总RNA为模板,扩增sTRAIL的cDNA序列,将其克隆入pMD18-T载体,随后亚克隆入载体pEGFP-N1中,构建其真核瞬时表达载体pEGFP-N1/sTRAIL,以Fugene 6转染技术,将sTRAIL基因导入真皮干细胞.倒置显微镜下观测转染后真皮干细胞生长变化及sTRAIL在其中的表达等情况.RT-PCR法对目的基因转染的真皮干细胞进行鉴定.结果与结论:克隆到sTRAIL基因的cDNA序列,成功构建了其真核表达载体,该真核表达载体能携带sTRAIL基因在真皮干细胞中正常表达.倒置显微镜下观测到转染后真皮干细胞生长状态与未转染的真皮干细胞无差异.以经sTRAIL基因转染的真皮干细胞该基因组DNA为模板,用RT-PCR法能扩增到sTRAIL基因cDNA序列.     

老年矽肺病合并肺结核患者抑郁的危险因素及针对性治疗分析

目的：分析老年矽肺病合并肺结核患者抑郁的危险因素及其针对性治疗措施。方法分析2012年5月至2015年5月收治的40例老年矽肺病合并肺结核患者作为（研究组），选取同期40例单纯老年矽肺病患者作为对照组，分析2组入院后及就诊后10 d内症状自评量表（ SCL-90）、抑郁自评量表（ SDS ）评分，并收集2组临床资料。结果单因素分析显示，老年矽肺病合并肺结核的危险因素包括结核接触史、吸烟量、矽肺期别（ P ＜0．05），不包括职业、接尘工龄、卡介苗接种史、文化程度、月人均收入（ P ＞0．05）；多因素Logistic回归分析显示，矽肺并发肺结核危险因素包括结核接触史、吸烟量、矽肺期别（ P ＜0．05）；研究组患者的抑郁、躯体化、人际关系、焦虑、强迫、偏执、敌对性、恐怖、精神病性SCL-90评分、SDS评分均显著高于对照组（ P ＜0．05）；单因素分析显示，老年矽肺病合并肺结核抑郁的危险因素包括抑郁加重、对社会不满、轻生念头、拒绝治疗（ P ＜0．05）；多因素Logistic回归分析显示，矽肺并发肺结核抑郁危险因素包括抑郁加重、对社会不满、轻生念头、拒绝治疗（ P ＜0．05）。结论老年矽肺病合并肺结核患者抑郁的危险因素包括抑郁加重、对社会不满、轻生念头、拒绝治疗，临床应采取针对性心理治疗措施有效改善患者的抑郁情绪，从而为有效治疗患者提供良好的前提条件。     

含uPA裂解位点的人sTrail融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化

目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂(urokinase plasminogen activator,uPA)裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体(soluble related apoptosis inducing ligand,sTrail)基因的原核载体,表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA.方法 RT-PCR法克隆sTrail基因后,经引物延伸法构建his-uPA-sTrail融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中,诱导其表达蛋白并将其纯化,肠肽酶(enterokinase,EK)切与再次纯化回收该蛋白,Western blot检测其抗原性.结果表达载体经诱导成功获约38×103含载体表达标签(Trx)的融合蛋白,EK酶切该蛋白获约19.5 ×103的目的蛋白uPA-sTrail.检测表明,该目的蛋白具人Trail抗原性.结论成功克隆uPA-sTrail融合基因并构建至原核表达载体,并获约19.5×103的融合蛋白,且该蛋白具人Trail抗原性.