心肌细胞裂解液诱导人脂肪基质干细胞分化为心肌样细胞的研究

目的分离培养人脂肪基质干细胞（ASCs），观察心肌细胞裂解液诱导ASCs分化为类心肌细胞的情况。方法人脂肪组织用胶原蛋白酶I消化，贴壁法培养获得ASCs，流式细胞术鉴定其表型，向ASCs培养体系中加入乳鼠心肌细胞裂解液，培养2周后，利用免疫荧光技术和RT—PCR法分析分化后细胞的心肌特异性蛋白和基因的表达情况。结果培养获得ASCs，表型为CD44^＋、CD105^＋、CD31^-、CD45^-。心肌细胞裂解液诱导培养2周后，细胞表达心脏特异性肌钙蛋白T（cTnT）、结蛋白，同时也表达心脏特异性基因cTnT、ANP、aMHC。结论心肌细胞裂解液可在体外诱导ASCs分化为类心肌细胞。     

他汀类药物和促红细胞生成素对人外周血内皮祖细胞数量和功能的影响

目的:观察他汀类药物和促红细胞生成素对外周血内皮祖细胞数量和迁移功能以及增殖功能的影响,并比较其作用效应。方法:实验于2004-06/2005-10在华中科技大学附属协和医院血研所实验室完成。采集来华中科技大学附属协和医院体检的正常人自愿者外周血标本36份,分离培养内皮祖细胞1周后,将贴壁细胞随机分成4组:①对照组:用含体积分数为0.02的胎牛血清M199培养基。②阿托伐他汀组:用1mmol/L阿托伐他汀处理培养基。③人重组促红细胞生成素组:用100IU/L人重组促红细胞生成素处理培养基。④联合组:用1mmol/L阿托伐他汀与100IU/L人重组促红细胞生成素联合处理培养基。培养24h后,检测并比较各组15个随机选择的×200视野的内皮祖细胞的数量,迁移能力以及增殖能力。结果:①内皮祖细胞数量:他汀组,促红细胞生成素组,联合用药组均较对照组有显著提高(P<0.01),他汀组和促红细胞生成素组间并无差异(P>0.05),而联合用药组与前三组相比均有显著性差异(P<0.01)。②内皮祖细胞迁移能力:他汀组,促红细胞生成素组,联合用药组均较对照组有显著提高(P<0.01),他汀组和促红细胞生成素组间并无差异(P>0.05),而联合用药组与前三组相比均有显著性差异(P<0.01)。③内皮祖细胞增殖能力:他汀组,促红细胞生成素组,联合用药组均较对照组有显著提高(P<0.01),他汀组和促红细胞生成素组间并无差异(P>0.05),而联合用药组与前三组相比均有显著性差异(P<0.01)。结论:他汀类药物阿托伐他汀和人重组促红细胞生成素均能在体外提高内皮祖细胞的数量,迁移能力以及增殖能力,且联合用药该效应更加明显。由于内皮祖细胞在心血管疾病的治疗中起着重要的作用,这两类药的联合应用将具有积极的临床意义。     

莫西沙星联合头孢哌酮/舒巴坦对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌防耐药突变浓度的研究

目的在体外探讨莫西沙星(MFX)、头孢哌酮/舒巴坦(CFS)单用及联合使用对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)防耐药突变浓度(MPC)的影响,为防止细菌耐药的产生提供理论依据。方法采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定抗菌药物对20株临床分离CRAB的最低抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌浓度(FIC)指数。用肉汤富集浓度为1013CFU·L-1CRAB,采用琼脂平板稀释法测定MFX和CFS单用及联合使用对20株临床分离CRAB的MPC,并计算相应的选择指数(SI)。结果 MFX联合CFS后,主要表现为协同和相加作用,无拮抗作用。MFX和CFS单用对上述20株CRAB的选择指数分别为:4¹28、8128、8⁶4,两者联合后选择指数下降为:164,两者联合后选择指数下降为:1⁸、48、4¹6,联合用药较单独用药选择指数分别下降216,联合用药较单独用药选择指数分别下降2¹6、216、2⁴倍。结论 MFX与CFS联用后,均可降低其单用对CRAB的MPC,缩小耐药突变选择窗,防止耐药突变菌株的产生。     

缺氧预处理脂肪基质细胞对心肌细胞凋亡的影响

背景：近年来人们发现了一种脂肪来源的基质干细胞，将其移植到发生梗死的动物心肌中可以改善心功能，其机制除分化为心肌、内皮细胞外，对宿主心肌细胞有无直接作用尚需进一步研究。目的：观察缺氧预处理脂肪基质干细胞对心肌细胞凋亡的影响并探讨其机制。设计、时间和地点：完全随机区组设计的细胞分子学实验，于2007—12／2008—06在南昌大学第一附属医院高血压病研究所完成。材料：胶原酶Ⅰ、红细胞裂解液购自Invitrogen公司（美国），Dulbecco改良Eagle培养基、胎牛血清，胰蛋白酶购自GIBCO公司（美国）。方法：选用雌性SD大鼠10只，取大鼠脂肪组织用胶原蛋白酶Ⅰ消化后培养获得脂肪基质干细胞，流式细胞术鉴定其表型。乳鼠5只用于培养乳鼠心肌细胞。根据培养环境分为4组，分别应用DMEM、常规培养脂肪基质干细胞上清、缺氧培养脂肪基质干细胞上清和渥曼青霉素进行培养，应用DMEM组为对照组。4组细胞均在缺氧条件下（O2、CO2、N2体积分数分别为0．02，0．05，0．93）培养3d。主要观察指标：Anexinv／PI双染色法测定心肌细胞的凋亡率，Western blotting法测定心肌细胞蛋白激酶、磷酸化蛋白激酶蛋白表达。结果：培养获得的脂肪基质干细胞，表型为CD44^＋ CD90^＋ CD31^- CD45^-。对照组心肌细胞凋亡率明显高于常规脂肪基质干细胞组和缺氧脂肪基质干细胞组（P〈0．01），缺氧脂肪基质干细胞组心肌细胞凋亡率明显低于常规脂肪基质干细胞组（P〈0．05）。渥曼青霉素组心肌细胞凋亡率与对照组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。缺氧脂肪基质干细胞组磷酸化蛋白激酶／蛋白激酶比值明显高于对照组和常规脂肪基质干细胞组（P〈0．01）。渥曼青霉素组磷酸化蛋白激酶／蛋白激酶比与对照组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：缺氧预处理脂肪基质干细胞能提高对心肌细胞凋亡的保护，其机制可能和脂肪基质干细胞分泌细胞因子激活P13-K／蛋白激酶信号通路有关。     

内镜辅助显微手术切除颅内胆脂瘤

目的：探讨神经内镜辅助显微外科在颅内胆脂瘤手术治疗中的应用价值。方法应用神经内镜辅助显微外科手术治疗桥小脑角区胆脂瘤25例,其中单纯桥脑小脑角区胆脂瘤17例,另8例生长累及幕上鞍区、斜坡、第三脑室或对侧桥脑小脑角区;手术采用乙状窦后入路17例,翼点入路4例,颞下入路3例,对应的半球入路1例;显微镜下尽可能切除肿瘤可见部分,再用神经内镜探查并切除残留肿瘤,对于术后仍遗留有面瘫、麻木、神经痛等患者,则尽早配合康复治疗。结果：25例患者中肿瘤全切23例（92%）。术后患者原有症状明显好转21例（84%）,部分改善4例（16%）。术后遗留有面瘫、麻木、神经痛等患者经配合理疗和针刺后恢复较好。结论：内镜辅助神经外科手术治疗颅内胆脂瘤,能够提高肿瘤切除率,减少创伤和术后并发症,提高安全性,缩短住院时间。     

放线菌性脑脓肿一例

思者女,57岁,务农.主诉:头痛、恶心伴呕吐半个月.患者半个月前头痛伴恶心发作,开始误认为感冒,进行治疗后效果不佳,随后出现喷射状呕吐,在当地农村卫生所给予甘露醇治疗后症状略有减轻.因高颅压症状持续加重到当地县医院就诊,头颅CT示左颞肿瘤.为进一步治疗,患者于2006年11月12日入住我院.入院后进行抽血、心电图、胸片检查,术前诊断:颅内占位性病变,考虑为脑肿瘤.3d后在气管插管全麻下行开颅手术,左颞入路,术中发现左侧颞中回至颞极之间脑组织呈黄绿色质变,有包膜,质地略硬,即考虑脑脓肿可能,先行穿刺,抽出黄绿色脓液约30 mL,初步诊断为铜绿假单胞菌感染、脑脓肿.     

重组激活基因与临床疾病

ragl或rag2基因的错义突变可使其编码的重组酶活性部分受损,导致V(D)J重组发生倾向于产生单克隆的活化Th2的改变,结果引起一类严重的联合免疫缺陷综合征(SCID),称为Omenn syndrome(OS)。OS的准确诊断有赖于RAGs基因的直接测序分析,它也是目前在SCID和OS家族中调查胎儿是否受其遗传影响的最有效方法。RAGs基因编码的重组酶催化V(D)J基因重排时,发生的错误识别可导致抗原受体基因和癌基因染色体易位,是淋巴系统恶性肿瘤发生的重要因素。RAGs还可能与自身免疫性疾病等有关。     

中心静脉导管堵塞原因及对策

随着护理技术水平的发展,中心静脉导管在临床上得到广泛推广和应用,但在应用过程中常由于各种原因发生导管堵塞,现从中心静脉导管堵塞的原因、危险因素的评估及针对性的护理对策3方面进行综述。     

骨髓干细胞动员治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究

目的研究骨髓干细胞动员对大鼠实验性急性心肌梗死(AMI)的治疗作用。方法雌性SD大鼠行冠状动脉结扎后分为AMI对照、辛伐他汀、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和合用药(辛伐他汀+G-CSF)四组,用药后1、2、4周处死大鼠,观察骨髓干细胞动员效果及相应大鼠的血流动力学、心肌病理变化。结果用药后各时间段合用药组骨髓干细胞动员效果均好于其它各组,病理切片中梗死交界处可见CD34+单个核细胞浸润,合用药组较为典型。用药后4周,辛伐他汀、G-CSF和合用药均能缩小心肌梗死面积,增加梗死区血管密度;G-CSF和合用药均能使左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升和下降速率(±dp/dt)升高(P<0 05或0 01),左室舒张末压(LVEDP)显著降低(P<0 05或0 01),合用药更为显著(P<0 01)。结论应用G-CSF、辛伐他汀进行骨髓干细胞动员能有效地治疗急性心肌梗死,合用效果更佳。