精子蛋白质组学研究进展

迄今蛋白质组学技术已被广泛应用于生理与病理状态下差异蛋白表达的研究,在人类精子蛋白质组学研究方面,许多研究应用该技术对生理与病理状态下精子差异蛋白表达进行了探索,从蛋白质组水平揭示了精子不同生理与病理条件下的蛋白质表达谱的变化规律,为全面理解精子生理与病理的分子机制提供了可靠的理论依据.     

血液相关蛋白质组学研究最新进展

"蛋白质组"描述的是在某一特定时刻细胞或组织表达的所有蛋白质,分析这些蛋白质,既可以了解蛋白质的生物学变化过程,同时也可以对细胞株或组织的各种生理学和病理学状态进行比较.临床蛋白质组学研究面临的挑战是将蛋白质表达同疾病状态下的各种特殊表型联系在一起,寻求与疾病相关的标志物并发展成作为具有临床诊断作用的手段.蛋白质组学包含有多种相互补充的技术,其中最重要的分析手段是2-DE技术.自从90年代质谱技术的不断改进以来,在蛋白质序列数据库的帮助下,蛋白质的快速识别成为现实.     

采用MS-Fit进行肽质量指纹谱鉴定蛋白质时主要参数的优化

目的:为了优化肽质量指纹谱(Peptide mass fingerprinting,PMF)鉴定蛋白质时采用MS-Fit引擎搜索的分析参数.方法:将2-DE分离后的Carbonic anhydrase-2和BSA进行胶内充分酶解,肽段经过MALDI-TOF-MS分析得到PMF数据.选择Swissprot数据库,以Carbonic anhydrase2为模型优化搜索参数.结果:主要搜索参数的最佳设置为:半胱氨酸修饰为Carbamidomethylation,肽质量容错模型为百分数,在研究中0.1%容错数为最好.结论:本文通过标准蛋白对搜索主要参数的优化,建立了方便、可靠的MS-Fit搜索参数模式.     

6-姜烯酚抗肿瘤机制研究进展

姜来源于姜科姜属植物姜(ZingiberoficinaleRosc.)的新鲜或干燥根茎.传统中医药理论认为,生姜味辛性温,长于发散风寒、化痰止咳、又能温中止呕、解毒;干姜性热,辛烈之性较强,长于温中回阳,兼能温肺化饮.现代药理和临床研究表明姜在肿瘤治疗方面具有很好的疗效.6-姜烯酚(6-shogaol,6S)是生姜和干姜中主要成分6-姜酚脱水形成的烷基酚类化合物(见图1),具有治疗胃溃疡[1]、心血管疾病[2]、老年痴呆[3-4]、恢复骨髓损伤所致的运动功能[5-6]、抗肝病毒[7]等生物学活性.     

血清蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立

目的：建立血清蛋白质组双向凝胶电泳（2-DE）技术。方法：对血清蛋白质2-DE的各种条件进行调整、优化。结果：建立了稳定的2-DE技术。结论：已建立的血清蛋白质2-DE技术，将为进一步开展疾病的血清蛋白质组学研究奠定基础。     

应用RP-HPLC/TOF-MS技术识别肝癌血浆差异蛋白质

目的 应用RP-HPLC/TOF-MS技术筛选肝癌血浆差异蛋白质.方法 9例肝癌和8例正常组血浆采用Agilent高丰度蛋白质分离系统(multiple affinity removal system, MARS)洗脱白蛋白等高丰度蛋白质后,样品首先采用RP-HPLC法分离分析,然后采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定差异蛋白质相对分子质量.结果 肝癌血浆和健康志愿者血浆的RP-HPLC图谱中存在3组差异蛋白质,相对分子质量为(15～50)×103的蛋白质在健康志愿者中有较高表达,而相对分子质量为(50～90)×103的蛋白质在肝癌患者中有较高表达.结论 RP-HPLC/TOF-MS技术可以发现肝癌发生发展过程中血浆蛋白表达谱质或量的变化.     

弱精不育与正常精子蛋白质的双向电泳研究

目的:检测人类正常精子与弱精不育精子的差异表达蛋白质。方法:用2-DE-IPG-DALT技术对36例弱精不育与10例正常精子总蛋白进行分离,银染后,切取2个在患者中不表达的差异蛋白质点进行质谱鉴定。结果:成功建立了弱精不育与正常精子总蛋白的双向电泳图谱,经图像分析显示,弱精不育精子中高丰度表达而正常样本中缺失或表达下调的27个蛋白点,正常精子中存在而在弱精不育精子中缺失或低表达的37个点。并对C35和C37这2个差异蛋白质进行了质谱鉴定。结论:差异蛋白与弱精不育相关。     

弱精不育患者与正常生育能力者精浆蛋白质的双向电泳图谱分析

目的:探讨2-DE技术在人类正常与弱精不育者精浆全蛋白中筛选差异蛋白的应用。方法:先用IPG-DALT技术对12例弱精不育与5例正常精浆蛋白进行分离,银染后,经PDQUest2D比较二者间差异蛋白点。结果:在不育精浆中高丰度存在而正常精浆中低表达的有55个蛋白斑点(3个在正常缺失),在正常精浆中存在而在不育精浆中低表达的有43个(3个在不育缺失)。结论:成功建立了正常与弱精不育精浆蛋白的2-DE图谱并分析表达差异蛋白,为弱精症精浆差异表达蛋白的质谱鉴定奠定了基础。     

基于 LC Chip Q-TOF MS/MS 的非标记比较策略研究丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞的差异蛋白质组(英文)

目的:研究丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖的差异表达蛋白质组。方法:基于 LC Chip Q-TOF 系统建立和优化了一种非标记蛋白质组比较方法-多肽色谱峰面积。方法学研究表明,该方法操作简单、方便,具有较高的重复性和宽动力学范围。然后,将建立的优化方法组合归一化计算应用于新化合物丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖的差异蛋白质组表达研究。结果:分析结果表明,2 倍以上表达差异的蛋白质 15 个,其中 6 个蛋白质的表达差异获得了 Western blotting 确证。此外,通过差异蛋白质的相互作用分析,PARP1、Caspase-3 和-9 的 Western blot 检测及 Caspase 抑制剂实验,我们发现 Caspase激活在丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖效应中起重要作用。结论:通过该优化的非标记蛋白质组比较方法,找到了一些与丙二酰黄芪皂苷 I 抗白血病 U937 细胞增殖密切相关的功能蛋白质,为深入开展其分子机理研究奠定了基础。