玉屏风散制剂的药学实验及临床应用进展研究

玉屏风散方名最早记载于《究原方》(原书已轶,其条文散见于《医方类聚》)或《仁存方》,现存最早玉屏风散方名并详细介绍的是《丹溪心法》,由防风、黄芪、白术三药组成,而其类方则最早在《素问病机气宜保命集》中就有收录 [1] 。玉屏风者,即玉制或以玉为装饰的屏风摆件。据《说文解字》载:“玉,石之美,有五德。”也可从玉的五德论述其功效:用药平和,祛邪而不伤正,仁也;御邪于肌表,增益正气抗争,义也;建中扶正,益气固表,表里兼顾,智也;实腠理,驱外邪,勇也;药味虽少,配伍精妙,不枉加它药,洁也。玉屏风散临床应用历史悠久,处方具有“廉、简、便、效”诸多优点,是实现中医药现代化、科学化发展的先行者,现就玉屏风散制剂从药学实验、临床应用等方面进行综述。     

车前子对腹泻大鼠小肠组织AQP3基因及蛋白表达的影响

目的:观察车前子对腹泻大鼠小肠组织水通道蛋白3 (AQP3)基因和蛋白表达的影响,探讨其治疗腹泻的作用机制。方法:采用番泻叶灌胃法复制大鼠腹泻模型。将60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、氢氯噻嗪组和车前子低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组均于每天上午灌胃番泻叶药液,正常组灌胃等量蒸馏水;每天下午各治疗组灌服相应药物,正常组和模型组灌服等量蒸馏水,给药期间观察大鼠的排便情况,连续14 d。实验结束后,根据粪便性状和大便次数,统计对比各组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数。麻醉状态下,剖取2份小肠组织,1份置于冻存管,液氮冻存,用于qRT-PCR法和免疫组化法检测小肠组织AQP3基因和蛋白的表达,1份置于4%多聚甲醛液中固定,苏木精-伊红(HE)染色法观察小肠黏膜病理形态学变化。结果:模型组稀便率、平均稀便级和腹泻指数明显增加(P0.01);小肠绒毛表皮细胞明显凋亡坏死,固有层毛细血管扩张充血明显,间质有少量中性粒细胞浸润;小肠组织中AQP3基因蛋白的表达水平均下降(P0.01)。与模型组比较,车前子各剂量组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数均降低(P0.01);小肠绒毛表皮细胞凋亡、坏死和毛细血管扩张充血现象均减轻,间质有少量中性粒细胞浸润,中、高剂量组可见上皮细胞增生;小肠组织中AQP3基因和蛋白的表达水平均显著高于模型组(P0.01)。结论:车前子具有止泻作用,其机制与减轻小肠黏膜炎性损伤,上调AQP3基因蛋白的表达水平,增加小肠对水的吸收、调节水液代谢有关。     

泽泻汤加味方对高脂血症大鼠胃黏膜AQP3蛋白表达的影响

目的:研究泽泻汤加味方对高脂血症大鼠胃黏膜水通道蛋白3(AQP3)蛋白表达的影响,探讨其防治高脂血症的作用机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为空白组、模型组、辛伐他汀对照组(简称对照组)和泽泻汤加味方高、中、低剂量组,造模的同时给予相应药物治疗。第5周末,观察大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的含量及肝组织形态学变化,并运用免疫组化及Western Blot法检测大鼠胃黏膜中AQP3蛋白的表达变化。结果:模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C含量升高、胃黏膜AQP3表达增强(P0.01),HDL-C含量降低(P0.01或P0.05),各用药组大鼠TG、TC、LDL-C含量降低、胃黏膜AQP3的表达减弱,HDL-C含量升高(P0.01或P0.05)。结论:泽泻汤加味方具有调节血脂作用,通过下调胃黏膜AQP3的表达,调节水液代谢,祛除痰浊病理因素,可能是其防治高脂血症的作用机制之一。     

车前子对腹泻大鼠炎性因子和结肠组织AQP4 mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察车前子对腹泻大鼠血清中炎性因子和结肠组织水通道蛋白4(AQP4)mRNA和蛋白表达的影响,探讨其治疗腹泻的作用机制。方法:采用番泻叶药液灌胃法复制大鼠腹泻模型。将60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、氢氯噻嗪组(9 mg·kg-1)和车前子低、中、高剂量组(0.95,1.9,3.8 g·kg-1)。除正常组外,其余各组均于每日上午灌胃番泻叶药液(20 mL·kg-1),正常组灌胃等量的蒸馏水;每日下午各治疗组灌服相应药物,正常组和模型组灌服等量蒸馏水,连续14 d。实验结束后,根据粪便性状和大便次数,统计对比各组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数,采集血清和结肠组织标本,检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)和C反应蛋白(CRP)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察结肠黏膜病理形态学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中AQP4 mRNA和蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,模型组稀便率、平均稀便级和腹泻指数显著升高(P0.01),结肠黏膜表皮细胞出现凋亡坏死,固有层毛细血管扩张充血明显,少量中性粒细胞浸润,血清中TNF-α,IL-6和CRP的含量明显升高(P0.05,P0.01),AQP4 mRNA和蛋白的表达均明显下降(P0.01);与模型组比较,车前子各剂量组大鼠的稀便率、平均稀便级和腹泻指数均显著降低(P0.01),结肠黏膜表皮细胞凋亡坏死、毛细血管扩张充血和中性粒细胞浸润现象明显改善,血清中TNF-α和CRP的含量降低(P0.05,P0.01),AQP4 mRNA和蛋白的表达水平明显升高(P0.05,P0.01)。结论:车前子具有较好的止泻作用,其机制可能是抑制炎症反应、修复结肠黏膜病理损伤,上调AQP4的表达,调节水液代谢。     

葶苈生脉方对慢性充血性心力衰竭大鼠肠功能障碍的调节作用

目的:研究葶苈生脉方对慢性充血性心力衰竭(CHF)大鼠肠功能障碍的调节作用,探讨其作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、对照组、葶苈生脉方低剂量组、高剂量组,每组10只。除假手术组外,其余4组手术造成腹主动脉狭窄,假手术组只分离腹主动脉,不结扎。5组均于手术4周后开始给药(水),每日1次定量灌胃,连续灌胃8周。最后1次给药后,收集各组尿液及血液标本,检测血清炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)],血浆D-乳酸、二胺氧化酶(DAO),尿乳果糖/甘露醇(L/M)。结果:与假手术组比较,模型组血清炎性因子TNF-ɑ、IL-4、IL-8,血浆D-乳酸、DAO,L/M均显著升高(P0.01);与模型组比较,葶苈生脉方低、高剂量组血清炎性因子TNF-ɑ、IL-4、IL-8,血浆D-乳酸、DAO,L/M均明显降低(P0.01)。结论:葶苈生脉方可有效改善CHF大鼠肠功能障碍,其作用机制可能与抑制炎性细胞因子释放,降低肠黏膜通透性损伤有关。     

葶苈生脉方对充血性心力衰竭大鼠ET-1、NO/NOS的影响

目的:研究分析葶苈生脉方防治慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌重构的可能作用机制。方法:采用健康雄性SD大鼠,腹主动脉缩窄手术法复制大鼠心力衰竭模型。手术4周后开始给予药物干预治疗,第8周末股动脉取血并开胸摘取心脏,检测血浆内皮素(ET-1)、血清一氧化氮(NO)及心肌组织NO含量,Western Blot技术测定心肌组织ET-1、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血浆ET-1、血清及心肌组织NO含量显著升高,心肌组织ET-1、iNOS蛋白表达升高,e NOS蛋白表达降低(P 0. 01);与模型组比较,各给药组大鼠血浆ET-1、血清及心肌组织NO含量明显降低,心肌组织ET-1、iNOS蛋白表达降低,e NOS蛋白表达升高(P 0. 01)。结论:葶苈生脉方抑制CHF大鼠心肌重构的机制与其减少ET-1生成,调节NO/NOS表达有关。